近紅外二區(qū)熒光活體成像在細(xì)胞示蹤上的應(yīng)用進(jìn)展

李惠珠 陳 俊

（復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院運(yùn)動醫(yī)學(xué)科 上海 200040）

近紅外（near-infrared，NIR）光因具有組織穿透性高、自發(fā)熒光信號低等特性［1］，被譽(yù)為 “治療光” 、 “可見光” ，廣泛應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域中的診斷和治療。近紅外光即指波長為650~1 700 nm 的光，又分為近紅外一區(qū)光（NIR-Ⅰ，650~9 00 nm）和近紅外二區(qū)光（NIR-Ⅱ，900~1 700 nm）。NIR-Ⅱ相較NIR-Ⅰ具有更良好的組織穿透性，其本底熒光信號極低，分辨率較高，故有更好的應(yīng)用前景［2］。NIR-Ⅱ成像的熒光納米探針包括有機(jī)小分子熒光探針（smallmolecule dye，SMD）、量子點(diǎn)（quantum dots，QDs）探針、稀土納米粒子（rare earth-doped nanoparticles，RENPs）探針、單筆納米碳管（single-walled carbon nanotubes，SWCNTs）探針等［3］。各類探針具有各自的特點(diǎn)及優(yōu)勢，SMD 在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)中攝取較少，有較好的臨床應(yīng)用前景，腫瘤細(xì)胞示蹤多使用此類型探針；量子點(diǎn)相對分子質(zhì)量小且因量子產(chǎn)率高（>10%），熒光信號佳，現(xiàn)為研究熱點(diǎn)［4］。隨著影像學(xué)的發(fā)展，生物成像的分辨率與疾病診斷能力逐漸上升，但傳統(tǒng)的X 線、CT、MRI 等均用于記錄生物體某一時刻的斷層成像，在動態(tài)觀測方面尚有欠缺［5］，而NIR-Ⅱ光因有望彌補(bǔ)上述不足，近年來被用于生物體活體動態(tài)成像技術(shù)，包括血管成像、神經(jīng)成像、細(xì)胞示蹤成像等［6］。

細(xì)胞作為各器官發(fā)揮功能的基本單位，其運(yùn)動在許多生理及病理生理過程中起著關(guān)鍵作用，如免疫監(jiān)督、組織修復(fù)等［7］。探究生物體內(nèi)細(xì)胞運(yùn)動有助于更好地理解疾病的發(fā)生機(jī)制、演變過程、不同治療方法的療效及其機(jī)制。近年來發(fā)展迅速的免疫治療、再生醫(yī)學(xué)治療等均需監(jiān)測治療用細(xì)胞的運(yùn)動軌跡，確認(rèn)是否定位準(zhǔn)確并起到治療作用，確定最優(yōu)給藥濃度及給藥時間［8］。最初的細(xì)胞示蹤主要通過觀察組織學(xué)切片，但生物體內(nèi)存在復(fù)雜的內(nèi)環(huán)境調(diào)節(jié)機(jī)制，而組織切片無法表現(xiàn)動態(tài)過程［9］。改良的細(xì)胞示蹤方法結(jié)合了傳統(tǒng)的成像方法，如CT、正電子發(fā)射斷層成像技術(shù)（positron emission tomography，PET）等，主要利用納米粒子如納米銅、18F-FDG（18F-flurodeoxyglucose）等標(biāo)記細(xì)胞進(jìn)行成像，而這些方法因仍無法動態(tài)成像、對部分細(xì)胞的標(biāo)記困難、放射性污染等原因限制了其應(yīng)用［10］。被廣泛應(yīng)用的綠色熒光蛋白（green fluorescent protein，GFP）標(biāo)記法因組織穿透性低且本底熒光高而限制了其在活體組織成像中的應(yīng)用［11］。NIR-Ⅱ熒光成像彌補(bǔ)了上述不足，無放射性危險且細(xì)胞毒性較小，擁有高組織穿透性及極低本底熒光，故此項技術(shù)以活體動態(tài)成像作為最大的亮點(diǎn)及優(yōu)勢［1］，在細(xì)胞示蹤技術(shù)上有巨大的應(yīng)用潛力。

NIR-Ⅱ熒光成像的應(yīng)用研究正逐步多樣化，但其在活體細(xì)胞示蹤上的應(yīng)用作為醫(yī)學(xué)進(jìn)入 “精準(zhǔn)化” 后的一個新興領(lǐng)域，尚處于初步研究階段。近年來開展了許多細(xì)胞示蹤的研究，但尚缺乏對此類研究的總結(jié)，故本文主要對于近紅外二區(qū)熒光成像在腫瘤細(xì)胞、干細(xì)胞等不同細(xì)胞示蹤中的應(yīng)用進(jìn)行綜述，并對未來研究進(jìn)行展望。

腫瘤細(xì)胞腫瘤常年居于全球死亡病因首位［12］，而腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移為關(guān)鍵性危險因素，包括血行轉(zhuǎn)移、淋巴轉(zhuǎn)移［13］等?，F(xiàn)有影像學(xué)技術(shù)無法發(fā)現(xiàn)的手術(shù)后殘余病灶及各種轉(zhuǎn)移病灶影響腫瘤的治療效果及患者預(yù)后，故在微觀層面監(jiān)測腫瘤細(xì)胞有迫切的需求。利用NIR-Ⅱ光的腫瘤細(xì)胞熒光成像不僅能在微觀層面追蹤腫瘤細(xì)胞，還能通過光熱效應(yīng)殺滅腫瘤細(xì)胞［14］。

肝癌細(xì)胞 肝癌細(xì)胞的示蹤涉及基礎(chǔ)研究與臨床研究?；A(chǔ)研究方面，Yan 等［15］構(gòu)建的牛血清白 蛋 白CuS@BSA-RGD（bovine serum albumin，BSA）納米粒子靜脈注射后可定位至原位肝細(xì)胞癌病灶，其中精氨酸-甘氨酸-天門冬氨酸環(huán)可使粒子定位至肝癌細(xì)胞的整合素受體αvβ3/αvβ5，其在NIR-Ⅱ光下有較強(qiáng)信號并在24 h 時達(dá)到頂峰。有研究將RGD 肽、吲哚菁綠（indocyanine green，ICG）結(jié)合紅細(xì)胞，得到多模式化的紅細(xì)胞探針，通過靜脈注射進(jìn)入體內(nèi)后10 h 可以有效定位至皮下肝癌小鼠模型的腫瘤病灶，并實(shí)現(xiàn)NIR-Ⅱ成像指導(dǎo)的外科腫瘤與轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)切除手術(shù)，病理結(jié)果證實(shí)在注射后10~13 h 內(nèi)的切除效果良好［16］。而Hu 等［17］首次將NIR-Ⅱ成像技術(shù)用于臨床研究中，使用ICG 作為探針靜脈注射入23 例患者體內(nèi)，平均4 天后進(jìn)行開腹肝細(xì)胞癌病灶切除術(shù)。術(shù)中同時使用NIR-Ⅰ與NIR-Ⅱ成像技術(shù)進(jìn)行輔助，通過病理學(xué)驗證。結(jié)果表明二者均可探測超聲與外科醫(yī)師未能發(fā)現(xiàn)的肝細(xì)胞癌原位病灶與轉(zhuǎn)移病灶，其中NIR-Ⅱ成像的敏感性更高，可發(fā)現(xiàn)被NIR-Ⅰ所忽略的病灶，且?guī)缀醪皇苁中g(shù)室內(nèi)其他光源影響，進(jìn)一步肯定了NIR-Ⅱ技術(shù)在臨床應(yīng)用上的可能性與有效性。

乳腺癌細(xì)胞 有研究構(gòu)建了多功能粒子命名為FIP-99mTc［18］，同時支持MRI 成像（含F(xiàn)e3O4）、近紅外二區(qū)成像（含IR-1061 有機(jī)染料）、SPECT/CT 成像（含99 mTc）、光熱療法等多種成像和治療，且對細(xì)胞沒有明顯毒性。將此粒子注射入小鼠乳腺癌腫瘤病灶后，NIR-Ⅱ光照射下轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)病灶中可以發(fā)現(xiàn)熒光信號，并在2 h 時達(dá)到頂峰。不僅如此，此粒子在808 nm 治療激光的照射下可以通過光熱效應(yīng)有效殺滅腫瘤細(xì)胞。但因無法保證所有腫瘤原病灶內(nèi)細(xì)胞被標(biāo)記，故存在一定的漏診率。另一種用于示蹤小鼠乳腺癌（4T1）細(xì)胞的方法為，使用腫瘤細(xì)胞膜（含CD47 抗原）包被Ag2Te 量子點(diǎn)，注射后24 h 腫瘤病灶內(nèi)的信號（1 300 nm）可達(dá)頂峰［19］。 噻吩并［3，4-B］噻吩（Thieno［3，4-b］thiophene，TT）連接復(fù)數(shù)噻吩鏈得出的TT-3T CP也可以用于標(biāo)記該細(xì)胞，在細(xì)胞與探針共培養(yǎng)后12 h 熒光信號達(dá)到最高。研究中通過體外標(biāo)記乳腺癌細(xì)胞后注射入小鼠皮下實(shí)現(xiàn)體內(nèi)示蹤，癌細(xì)胞熒光信號可在皮下持續(xù)存在至注射后10 天［20］。但因探針在體內(nèi)標(biāo)記乳腺癌細(xì)胞的效果未得到實(shí)驗證實(shí)，缺乏臨床意義，此探針更適合用于靜脈注射后的微血管成像及淋巴結(jié)成像。而對于人乳腺癌細(xì)胞展開的研究較少，僅體外細(xì)胞實(shí)驗證明，可以使用修飾后的Ag2S 量子點(diǎn)［21］或人工合成的聚合物pDA［22］連接西妥昔單抗，去結(jié)合細(xì)胞表面的表皮生長 因 子 受 體（epidermal growth factor receptor，EGFR）達(dá)到示蹤目的，但EGFR 的特異性不強(qiáng)等原因限制了其應(yīng)用。

人宮頸癌細(xì)胞（HeLa 細(xì)胞） 靜脈注射的粒子如何定位到腫瘤細(xì)胞是一個難題，而HeLa 細(xì)胞作為擁有強(qiáng)大繁殖能力的腫瘤細(xì)胞株，被廣泛用于研究。Wei 等［23］在HeLa 細(xì)胞模型小鼠中使用透明質(zhì)酸（hyaluronic acid，HA）作為配體，將其連接到噻吩與異靛藍(lán)衍生物結(jié)合的聚合物，形成納米粒子，此粒子可以在靜脈中隨血液循環(huán)，結(jié)合到HeLa 細(xì)胞高表達(dá)的HA 受體CD44，從而定位腫瘤病灶，且1 064 nm 波長NIR-Ⅱ光下可使局部溫度達(dá)到60.3 ℃。HA 受體并非HeLa 細(xì)胞特有，其具有被用到其他腫瘤細(xì)胞追蹤的可能性。同時，有研究通過靶向線粒體，實(shí)現(xiàn)了NIR-Ⅱ光下腫瘤病灶的可視化。被命名為T-IPIC 的納米粒子（nanoparticles，NPs）含有可定位至線粒體的三苯基鏻（triphenylphosphonium，TPP），靜脈注射48 h 后在腫瘤部位高表達(dá)，并維持較高信號至96 h。該粒子在（1 000±10）nm 光照范圍下有良好的成像功能，在808 nm 光下有最佳的光熱效應(yīng)和光動力學(xué)效應(yīng)［24］。葉酸（folic acid，F(xiàn)A）作為HeLa 細(xì)胞靶向配體的有效性也得到了實(shí)驗證明。Jeong 等［25］將 聚 合 物 包 被 的PbS/CdS core/shell 量子點(diǎn)與葉酸進(jìn)行連接，構(gòu)建FA-PQDs（1 280 nm）和普通PQDs（1 080 nm），并比較了腫瘤病灶內(nèi)二者聚集性的差異，結(jié)果提示FA-PQDs 在腫瘤成像方面有更高的信噪比，且FA 可以幫助量子點(diǎn)定位至腫瘤。

結(jié)腸癌細(xì)胞 腫瘤細(xì)胞所表達(dá)的受體常被用于免疫治療靶點(diǎn)，其中PD-L1 表達(dá)于多種腫瘤細(xì)胞，而其單抗的使用也已非常成熟［26］，故高表達(dá)PDL1 的腫瘤細(xì)胞可以使用NIR-Ⅱ成像技術(shù)進(jìn)行示蹤。Wan 等［27］在小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞（MC38）模型中將PD-L1 的抗體連接到IR-BGP6 熒光團(tuán)，形成PD-L1-BGP6，靜脈注射后24 h 在腫瘤病灶達(dá)到信號頂峰（1 200 nm），并在10 天內(nèi)通過腎臟快速排泄。此方法在活體狀態(tài)下比較PD-L1 表達(dá)量的差異，監(jiān)測了PD-L1 單抗治療腫瘤的效果。因PD-L1 在其他腫瘤細(xì)胞中也有較多表達(dá)，有望被用于MC38 結(jié)腸癌細(xì)胞之外的其他腫瘤細(xì)胞的標(biāo)記。有研究使用了新合成肽介導(dǎo)的CP?IRP 納米探針，靶向結(jié)合腫瘤細(xì)胞高表達(dá)分子CD133，能夠活體標(biāo)記并觀察人結(jié)腸癌細(xì)胞。該探針在6 h 內(nèi)腎臟去除率達(dá)80%，具有較高的安全性，也可以對尿道進(jìn)行直觀的顯像。

其他癌細(xì)胞 有研究構(gòu)建了肽類化合物DUPAaFFC 作為可特異性識別前列腺癌細(xì)胞膜抗原（prostate specific membrane antigen，PSMA）的探針，連接到熒光納米粒子后結(jié)合NIR-Ⅱ光和電感耦合等離子體質(zhì)譜，用于監(jiān)測血液中是否含有過量PSMA 及表達(dá)PSMA 的細(xì)胞數(shù)目［28］。結(jié)合GD2 抗體，金納米粒子（gold nanoparticle，GNP）的納米碳管（single-wall carbon nanotube，SWCNT）可作為探針有效標(biāo)記黑色素瘤細(xì)胞，在1 100 nm NIR-Ⅱ光下能夠進(jìn)行雙光子顯像觀察腫瘤病灶，體外實(shí)驗證明在980 nm 光激發(fā)下實(shí)現(xiàn)了100%的黑色素細(xì)胞殺傷率［29］。另外，有些探針可以用于標(biāo)記多種腫瘤細(xì)胞，CD44 在胰腺癌、乳腺癌、腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中均有表達(dá)，利用P-選擇素作為配體構(gòu)建的BLIPO-1048 擁有結(jié)合至CD44 受體的能力，可以標(biāo)記上述細(xì)胞且不會被巨噬細(xì)胞快速清除，1 064 nm 光下通過光聲成像可直觀觀察腫瘤病灶［30］，同時具有光熱效應(yīng)。

干細(xì)胞干細(xì)胞為具有多向分化功能的細(xì)胞，使用干細(xì)胞的細(xì)胞治療法有望成為治療許多疾病的有力手段，包括肝臟疾病、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、腎臟疾病、杜氏肌營養(yǎng)不良等，而移植或注射后干細(xì)胞的運(yùn)動須嚴(yán)密監(jiān)測，以確定其具體療效、最優(yōu)劑量及潛在風(fēng)險等［31］。

內(nèi)皮祖細(xì)胞 內(nèi)皮祖細(xì)胞（endothelial progenitor cells，EPCs）作為能自我更新、增殖分化為內(nèi)皮細(xì)胞的多能干細(xì)胞，被用于治療組織缺血性疾病，其可通過分化為成熟的內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)缺血組織的血管再生［32］。Lim 等［33］使用共軛二苯并環(huán)辛炔（DBCOCy5）對EPCs 進(jìn)行標(biāo)記后局部注射到后肢血管損傷模型小鼠的病灶以觀察細(xì)胞對血管再生的影響。標(biāo)記完成的細(xì)胞具有良好的原始功能，使用熒光分子斷層成像技術(shù)（fluorescence molecular tomography，F(xiàn)MT）與多普勒激光可以直觀地觀察到EPCs 的去向、滯留時間及血管新生，為使用干細(xì)胞治療缺血性疾病提供了有效的監(jiān)測方法。

間充質(zhì)干細(xì)胞 間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）為目前臨床中研究最多的一類干細(xì)胞，被用于各類免疫性疾病、心力衰竭、克羅恩病導(dǎo)致的腸瘺等疾病的治療［34］，而治療用MSCs 的體內(nèi)監(jiān)測對細(xì)胞治療法有重大意義。使用PbS 量子點(diǎn)標(biāo)記MSCs（峰值1 300 nm），局部注射至岡上肌損傷小鼠模型的關(guān)節(jié)腔內(nèi)，在NIR-Ⅱ光下可以動態(tài)觀察到細(xì)胞在損傷部位的聚集、滯留時間、排出時間及排出途徑等［35］，研究表明關(guān)節(jié)腔注射后干細(xì)胞會逐步移動到損傷部位肩袖足印處，這可以為探究MSCs 治療機(jī)制及優(yōu)化細(xì)胞療法提供有力的工具。

有研究提出了使用有機(jī)半導(dǎo)體聚合物納米探針（organic semiconducting polymer-based nanoprobe，OSPNs+）示蹤人MSCs 的方法，將標(biāo)記的細(xì)胞分別注射入小鼠皮下和顱內(nèi)，1 064 nm NIR-Ⅱ下的成像結(jié)果比傳統(tǒng)NIR-Ⅰ光成像具有更好的顯像功能，且通過光聲成像可以更直觀地觀察到細(xì)胞的分布位置［36］，但暫未進(jìn)行細(xì)胞治療作用的研究。MSCs 還被應(yīng)用于皮膚創(chuàng)傷的修復(fù)。Chen 等［37］使用Ag2S 量子點(diǎn)標(biāo)記MSCs，探究其修復(fù)皮膚創(chuàng)面情況，靜脈注射后MSCs 絕大部分聚集于肺及肝臟，12 h 后逐漸聚集到創(chuàng)口邊緣，當(dāng)創(chuàng)面添加基底細(xì)胞衍生因子（stromal cell-derived factor-1a，SDF-1a）后4 h 細(xì)胞即開始聚集到創(chuàng)口邊緣，并發(fā)揮修復(fù)作用。

肌源性干細(xì)胞 鐵酸鉍諧波納米顆粒（bismuth ferrite harmonic nanoparticles，BFO HNPs）可被用于標(biāo)記肌源性干細(xì)胞（muscle-derived stem cells，MDSCs），體外細(xì)胞實(shí)驗表明其未對細(xì)胞的性能及形態(tài)產(chǎn)生影響，且具有較高信噪比，但細(xì)胞的聚集性有所下降。標(biāo)記的細(xì)胞在局部肌肉注射后24 h仍存留在肌肉中［38］，有望用于治療杜氏肌營養(yǎng)不良，但具體治療效果及機(jī)制有待在疾病動物模型中進(jìn)一步探究，盡管使用的激發(fā)光是1 300 nm NIR-Ⅱ光，其肌肉組織穿透深度1 mm 的特性在一定程度上限制了活體成像應(yīng)用。

其他細(xì)胞除上述大類外，還有NIR-Ⅱ熒光成像示蹤若干不同種類細(xì)胞的報道，反映該技術(shù)對多種細(xì)胞均適用，有強(qiáng)大的潛在應(yīng)用價值。

免疫細(xì)胞 免疫細(xì)胞作為人體中承擔(dān)防御，監(jiān)測及殺傷工作的重要細(xì)胞，其功能的正常發(fā)揮對于機(jī)體有重要作用，故對細(xì)胞運(yùn)動有實(shí)時監(jiān)測的必要性。目前NIR-Ⅱ熒光成像在免疫細(xì)胞中的研究主要集中在其對腫瘤性疾病的治療作用。通過使用Ag2Se（λ=1 350 nm）量子點(diǎn)標(biāo)記自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞，可在波長1 050 nm 的NIR-Ⅱ光照下顯示NK 細(xì)胞的分布情況。注射NK 細(xì)胞前通過Ag2S（λ=1 050 nm）標(biāo)記NK 細(xì)胞的趨化因子及化療藥物，提前靜脈輸送至腫瘤病灶可顯著提高NK 細(xì)胞定位腫瘤的效率［39］。除NK 細(xì)胞外，Yu 等［40］通過近乎無創(chuàng)的方法監(jiān)測了體內(nèi)骨髓來源抑制細(xì)胞（myeloid-derived suppressor cells，MDSCs）的分布。通過使用兩種非重合波長的NIR-Ⅱ（NIR-Ⅱa 和NIR-Ⅱb）量子點(diǎn)探針分別包被MDSCs 的兩種標(biāo)志性抗體，尾靜脈注射入體內(nèi)后利用兩種NIR-Ⅱ光影像的重疊精準(zhǔn)描繪了MDSCs 在小鼠體內(nèi)和腫瘤中的分布，同時可比較治療前后MDSCs 的量及分布情況。研究表明腫瘤微環(huán)境內(nèi)MDSCs 越少，免疫檢查點(diǎn)阻斷治療的效果越好［41］，這對提高免疫檢查點(diǎn)阻斷法治療腫瘤的有效性有重大意義。

卵巢顆粒細(xì)胞 卵巢顆粒細(xì)胞等生殖腺內(nèi)細(xì)胞可利用受體與配體結(jié)合的原理來進(jìn)行NIR-Ⅱ光下示蹤。為研究促卵泡激素（follicle-stimulating hormone，F(xiàn)SH）的受體細(xì)胞，F(xiàn)eng 等［42］使用熒光探針CH1055 標(biāo)記FSH，通過尾靜脈注射定位至小鼠卵巢與睪丸中擁有FSH 受體的細(xì)胞，共聚焦熒光顯微鏡下可以獲得精準(zhǔn)的影像。除此之外，也可以通過此項方法無創(chuàng)定位破骨細(xì)胞［43］。

成纖維細(xì)胞 Yang 等［44］提出過較為簡便的、基于Ag2Te的一站式探針合成方法，粒子發(fā)射光波長為995~1 068 nm，有較小表面涂層厚度（1.5~1.9 nm）。Ag2Te 量子點(diǎn)具有較高光穩(wěn)定性、膠體穩(wěn)定性和極低的細(xì)胞毒性，能夠有效標(biāo)記小鼠成纖維細(xì)胞。但此項技術(shù)僅有體外細(xì)胞實(shí)驗的證據(jù)，有待進(jìn)一步體內(nèi)實(shí)驗的確認(rèn)。

結(jié)語NIR-Ⅱ熒光成像以活體動態(tài)成像作為最大的優(yōu)點(diǎn)及特點(diǎn)，在細(xì)胞示蹤技術(shù)上的應(yīng)用目前集中于腫瘤細(xì)胞與干細(xì)胞，使用量子點(diǎn)、有機(jī)納米粒子等對細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記后，通過局部或靜脈注射入體內(nèi)，而靜脈注射途徑通常使用粒子包被細(xì)胞特異性抗體的方法進(jìn)行靶向定位。NIR-Ⅱ熒光成像有巨大的應(yīng)用潛力，同時有一定的不足，實(shí)際應(yīng)用還需進(jìn)一步探究。

首先，NIR-Ⅱ成像技術(shù)本身具有進(jìn)一步提升的需求與可能性，包括熒光探針的優(yōu)化和分辨率的提高。探針的優(yōu)化需要熒光強(qiáng)度和特異性的提升，故進(jìn)一步研究可致力于研發(fā)具有高熒光性能與低生物毒性的新材料，并對目前材料進(jìn)行修飾，從而提高探針的靶向性能。在分辨率方面，目前的NIR-Ⅱ熒光成像技術(shù)雖可以示蹤細(xì)胞，但未達(dá)到真正的微觀成像。通過結(jié)合顯微層面上的成像技術(shù)、改善發(fā)光材料的性能、提高細(xì)胞與材料的結(jié)合方式等方法，可提高成像的分辨率。其次，NIR-Ⅱ熒光成像技術(shù)示蹤細(xì)胞的應(yīng)用領(lǐng)域有待開拓與豐富，將其應(yīng)用于更多種類的細(xì)胞。此技術(shù)有臨床應(yīng)用的先例，可積極向臨床應(yīng)用方向進(jìn)行探索。在目前最受關(guān)注的腫瘤應(yīng)用方面，可進(jìn)一步探究其輔助外科手術(shù)的可行性，而鑒于目前所用為非特異性探針，臨床應(yīng)用中可探究不同探針的靈敏度與特異性，尋找各類疾病中最適合使用的探針。另外，在細(xì)胞治療與組織工程方面也有進(jìn)一步拓展應(yīng)用的必要性。各類細(xì)胞治療的體內(nèi)監(jiān)測相關(guān)研究有助于優(yōu)化治療劑量、治療時間窗。而近年來附有生長因子及MSCs 的生物支架、人工韌帶等組織工程生物材料在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中受到關(guān)注，雖然其有效性通過組織學(xué)得到了認(rèn)證，但是具體治療機(jī)制不詳，影響了實(shí)際臨床應(yīng)用及產(chǎn)品化，故可在NIR-Ⅱ光下探究上述材料所負(fù)載干細(xì)胞的具體移動路徑及其治療作用，幫助優(yōu)化一系列人工器官替代產(chǎn)品的設(shè)計理念和方法。

作者貢獻(xiàn)聲明李惠珠 論文構(gòu)思和撰寫。陳俊 論文構(gòu)思和審校。

利益沖突聲明所有作者均聲明不存在利益沖突。