中醫(yī)藥調(diào)控糖尿病腎病相關(guān)信號(hào)通路研究進(jìn)展※

吳天強(qiáng) 趙 娜 劉春燕 謝春郁 魏 然 馬 建△

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)2020級(jí)碩士研究生，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院內(nèi)分泌科，黑龍江 哈爾濱 150040；3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)2019級(jí)碩士研究生，黑龍江 哈爾濱 150040)

糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病常見(jiàn)的慢性微血管并發(fā)癥，調(diào)查顯示，在我國(guó)大約有11.2%的成年人患有糖尿病，且發(fā)病率逐年上升，其中DN發(fā)生率為20%～40%，是導(dǎo)致終末期腎病的主要原因[1]。DN的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確，一般認(rèn)為主要與糖脂代謝異常、血流動(dòng)力學(xué)改變、基因調(diào)節(jié)、炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激、腎素-血管緊張素系統(tǒng)激活等因素有關(guān)，且各因素之間存在交互或協(xié)同作用，DN一旦形成，病變發(fā)展很難逆轉(zhuǎn)[2]。目前西醫(yī)對(duì)DN主要針對(duì)其原發(fā)病進(jìn)行調(diào)控，積極預(yù)防和控制DN病情進(jìn)展，但臨床療效并不確定，所以積極探尋有效、安全的治療方法正受到越來(lái)越多地關(guān)注。近年來(lái)，從靶點(diǎn)—生物信號(hào)網(wǎng)絡(luò)角度開(kāi)展的中醫(yī)藥防治DN的研究發(fā)現(xiàn)，中藥單體和復(fù)方在DN防治方面效果顯著，在糾正糖脂代謝、減少氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)、降低蛋白尿及保護(hù)腎功能方面優(yōu)勢(shì)突出[3]，能有效改善DN臨床癥狀，延緩病程發(fā)展?，F(xiàn)對(duì)近年來(lái)中醫(yī)藥調(diào)控DN相關(guān)信號(hào)通路的研究進(jìn)行綜述如下。

1 磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信號(hào)通路

1.1 PI3K/Akt信號(hào)通路與DN PI3K/Akt信號(hào)通路是一條經(jīng)典的參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖分化、自噬凋亡的信號(hào)傳導(dǎo)途徑[4]。PI3K是位于真核細(xì)胞胞質(zhì)的脂質(zhì)激酶，作為該通路的起始因子，通過(guò)調(diào)節(jié)亞單位P85和催化亞單位P110將磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP2)磷酸化生成磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸(PIP3)。Akt 是一種絲氨酸/蘇氨酸特異性蛋白激酶，作為PI3K下游的重要靶點(diǎn)，以PIP3為反應(yīng)底物，轉(zhuǎn)位于細(xì)胞膜，在Thr308和Ser473位點(diǎn)被PIP3與磷酸肌醇依賴激酶-1(PDK1)結(jié)合磷酸化而激活[5-6]，進(jìn)一步調(diào)控下游信號(hào)因子。PI3K/Akt信號(hào)通路與DN發(fā)病關(guān)系密切，特別是受胰島素刺激后在葡萄糖攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中起著非常重要的作用[7]，是胰島素調(diào)控血糖水平的關(guān)鍵通路之一。研究表明，采用基因編輯手段使PI3K調(diào)節(jié)亞單位P85和催化亞單位P110的功能缺陷會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的糖脂代謝障礙，包括肥胖、葡萄糖不耐受，以及脂肪、肌肉、肝臟組織中的胰島素信號(hào)減弱，而糖脂代謝障礙正是DN發(fā)病的重要機(jī)制[8-9]。調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號(hào)通路活性能有效阻止DN的進(jìn)一步發(fā)展，包括緩解DN腎臟損傷的病理過(guò)程[10-11]。

1.2 中醫(yī)藥調(diào)節(jié)PI3K/Akt 信號(hào)通路防治DN Tu Q等[12]研究表明，與接受鏈脲霉素(STZ)和高脂高糖飲食誘導(dǎo)的DN模型大鼠相比，給予中藥姜黃提取物姜黃素治療后的DN大鼠腎組織病理改變顯著減輕，腎小球無(wú)明顯萎縮，腎小管擴(kuò)張和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少，進(jìn)一步用DN模型大鼠的血清誘導(dǎo)培養(yǎng)小鼠腎足細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，再將其暴露于姜黃素中發(fā)現(xiàn)，處理后的足細(xì)胞足突部分融合，出現(xiàn)自噬空泡，姜黃素上調(diào)了DN大鼠腎組織和足細(xì)胞中E-鈣黏蛋白(E-cadherin)和微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)蛋白的表達(dá)，下調(diào)了p-Akt、PI3K和磷酸化的哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)水平，表明姜黃素可通過(guò)PI3k/Akt/mTOR途徑在體內(nèi)和體外調(diào)節(jié)自噬，抑制足細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的機(jī)制來(lái)治療DN。Rai U等[13]研究顯示，與STZ-煙酰胺(NCT)誘導(dǎo)的DN模型大鼠相比，服用川芎嗪治療后的大鼠腎小管間質(zhì)損傷明顯減輕，空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)及腎臟中丙二醛(MDA)水平顯著降低，其中HbA1c、VLDL及腎臟中MDA水平呈劑量依賴性下降，研究還發(fā)現(xiàn)，模型組大鼠的Akt信號(hào)傳導(dǎo)減少，表現(xiàn)為p-Akt和抗凋亡因子B淋巴細(xì)胞瘤-2(Bcl-2)水平降低，促凋亡因子磷酸化葡萄糖合成激酶3β(p-GSK-3β)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)和裂解的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表達(dá)增加，但在治療組大鼠中，川芎嗪能夠抵消并劑量依賴性地逆轉(zhuǎn)這些異常，使p-Akt和Bcl-2的表達(dá)恢復(fù)到正常水平，說(shuō)明川芎嗪可通過(guò)調(diào)控PI3k/Akt信號(hào)傳導(dǎo)，改善代謝標(biāo)志物，而保護(hù)DN所致的腎功能和形態(tài)損傷。Zhang L等[14]研究顯示，與DN模型組大鼠相比，固腎解毒膠囊治療組大鼠24 h尿蛋白定量明顯降低，血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、TG及TC水平明顯改善，固腎解毒膠囊部分修復(fù)了腎小球病變，使腎小球系膜細(xì)胞凋亡率從52%降至20%以下，改善了Bcl-2上游信號(hào)通路—Akt通路信號(hào)傳導(dǎo)，并通過(guò)上調(diào)DN大鼠腎臟中Bcl-2的表達(dá)和抑制Bax信號(hào)來(lái)調(diào)控線粒體凋亡，此外固腎解毒膠囊還可恢復(fù)DN大鼠足細(xì)胞足突標(biāo)記蛋白的表達(dá)，保護(hù)腎小球?yàn)V過(guò)屏障功能，表明固腎解毒膠囊可通過(guò)Akt途徑和調(diào)節(jié)線粒體凋亡的潛在機(jī)制，減輕DN大鼠臨床癥狀，阻止病情進(jìn)一步發(fā)展。Meng X L等[15]研究顯示，調(diào)胃承氣湯能顯著降低STZ誘導(dǎo)的DN小鼠的攝食量、飲水量、TG水平及尿白蛋白排泄率，改善DN小鼠腎小球襻體積增大、結(jié)節(jié)性硬化及系膜間質(zhì)增生，并通過(guò)減輕腎臟組織的形態(tài)學(xué)損害，使小鼠肌酐清除率恢復(fù)正常，進(jìn)一步研究表明調(diào)胃承氣湯可促進(jìn)小鼠胰島素受體底物1(IRS-1)、PI3K及Akt的磷酸化，抑制α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、核因子κB(NF-κB)及蛋白激酶C-α(PKC-α)的表達(dá)，說(shuō)明調(diào)胃承氣湯可通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，并與NF-κB/α-SMA信號(hào)通路產(chǎn)生一定交互作用，從而改善STZ誘導(dǎo)DN小鼠的癥狀。

2 NF-κB信號(hào)通路

2.1 NF-κB信號(hào)通路與DN NF-κB是一類廣泛存在于機(jī)體B淋巴細(xì)胞中促進(jìn)κ輕鏈基因表達(dá)的重要核轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子[16]，包括NF-κB1(p50/p105)、NF-κB2(p52/p100)、RelA(p65)、RelB及c-Rel 5個(gè)亞基，其中以p50、p65 2個(gè)亞基組成的異源二聚體為主要活性形式，廣泛參與細(xì)胞的存活、分化、炎癥誘發(fā)、免疫應(yīng)答及凋亡等過(guò)程[17]。NF-κB抑制蛋白(IκB)激酶被激活是調(diào)控NF-κB信號(hào)通路的中心環(huán)節(jié)，當(dāng)機(jī)體受到多種信號(hào)刺激時(shí)，包括細(xì)胞免疫應(yīng)激、炎癥因子、自由基及各種病毒、細(xì)菌感染，IκB激酶被激活，再經(jīng)過(guò)磷酸化、泛素化后最終被降解,失去IκB 抑制作用的NF-κB轉(zhuǎn)入細(xì)胞核，參與多種基因如腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，是炎癥過(guò)程的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子[18-19]。DN發(fā)生、發(fā)展的重要原因之一是高血糖所引發(fā)的免疫炎癥信號(hào)通路激活和相關(guān)炎癥因子的分泌失調(diào)[20]，這些都與NF-κB信號(hào)通路密切相關(guān)。Ka S M等[21]研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)對(duì)腎臟靶向遞送Smad7基因，DN模型小鼠腎小球和腎小管上皮細(xì)胞細(xì)胞核中NF-κB的水平顯著降低,而與NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)關(guān)聯(lián)的促炎癥細(xì)胞因子IL-1、單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS) 的mRNA水平也明顯下降，表明通過(guò)對(duì)NF-κB信號(hào)通路的抑制，可以減輕炎性反應(yīng)帶來(lái)的DN腎臟損傷。

2.2 中醫(yī)藥調(diào)節(jié)NF-κB信號(hào)通路防治DN 白宇等[22]研究顯示，當(dāng)歸多糖能有效降低STZ誘導(dǎo)DN大鼠的血糖、24 h尿蛋白定量，抑制NF-κB(p-p65)蛋白及炎癥因子IL-1、MCP-1、TNF-α mRNA表達(dá)，改善模型大鼠細(xì)胞外基質(zhì)沉積和腎小球基底膜的通透性，減少纖維細(xì)胞增殖，說(shuō)明當(dāng)歸多糖可通過(guò)對(duì)NF-κB信號(hào)通路的下調(diào)，抑制IL-1、MCP-1及TNF-α的釋放，減輕腎臟組織中的炎性反應(yīng)，延緩DN進(jìn)展。郭楊志等[23]建立高脂飲食結(jié)合腹腔注射STZ誘導(dǎo)的DN大鼠模型，并給予全成分提取的黃連配方顆粒進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示黃連能減少大鼠腎小球內(nèi)NF-κB介導(dǎo)的炎性反應(yīng)，抑制炎癥細(xì)胞向腎小球聚集，同時(shí)增加腎臟皮質(zhì)中對(duì)NF-κB具有抑制作用的過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ) mRNA含量，且經(jīng)黃連干預(yù)治療后，DN大鼠腎小球病變明顯改善，毛細(xì)血管球結(jié)構(gòu)無(wú)明顯破壞，毛細(xì)血管腔狹窄緩解，系膜基質(zhì)部分增生減輕，表明中藥黃連單體可通過(guò)增強(qiáng)PPARγ mRNA表達(dá)，抑制DN大鼠腎小球內(nèi)NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)，減輕腎小球損傷。白璐等[24]研究顯示，化瘀通絡(luò)中藥(藥物組成：丹參、川芎、水蛭、地龍及全蝎)干預(yù)DN模型大鼠可一定程度上改善“三多一少”癥狀,減少大鼠24 h 尿蛋白定量，抑制大鼠腎皮質(zhì)中NF-κB p65 mRNA及蛋白的表達(dá)，減輕大鼠腎小球肥大、腎小囊囊腔裂隙狀改變及部分節(jié)段出現(xiàn)的球囊粘連，改善腎臟微炎癥狀態(tài)，說(shuō)明抑制腎皮質(zhì) NF-κB p65的高表達(dá)是化瘀通絡(luò)中藥發(fā)揮對(duì)DN大鼠腎臟保護(hù)作用的重要靶點(diǎn)，并且化瘀通絡(luò)中藥還能改善大鼠腎臟局部微血管血液循環(huán)，減輕腎臟病理?yè)p傷及蛋白尿漏出。陶鵬宇等[25]以六味地黃丸灌胃干預(yù)DN模型大鼠，結(jié)果顯示中藥組大鼠的FPG、BUN、SCr及24 h尿蛋白定量均明顯降低，大鼠腎小球纖維化程度、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和管腔狹窄情況均得到改善，腎組織中NF-κB、MCP-1、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)、α-SMA、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子2(Smad2)及Smad3蛋白表達(dá)均明顯下調(diào)，說(shuō)明抑制NF-κB和TGF-β/Smad信號(hào)通路是六味地黃丸減輕DN大鼠腎臟纖維化及炎癥損傷的可能機(jī)制。

3 TGF-β/Smad信號(hào)通路

3.1 TGF-β/Smad信號(hào)通路與DN TGF-β是一種多功能細(xì)胞因子，在人體中有3種結(jié)構(gòu)亞型，分別為TGF-β1、TGF-β2及TGF-β3，參與了多種組織細(xì)胞的增殖、凋亡、傷口修復(fù)及纖維化的調(diào)控[26],其中TGF-β1是人體內(nèi)含量最多的亞型，在腎小球、腎小管及腎間質(zhì)中都有廣泛分布，是公認(rèn)的慢性腎臟病纖維化的關(guān)鍵介質(zhì)[27]。Smad是TGF-β下游的主要信號(hào)傳導(dǎo)蛋白，至今共發(fā)現(xiàn)8種，分別為Smad1～Smad8，其中Smad1、Smad2、Smad3、Smad5及Smad8是TGF-β受體激酶直接底物，主動(dòng)參與特異性信號(hào)傳導(dǎo)，Smad4是TGF-β家族下游共同蛋白因子，Smad6及Smad7能夠競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合TGF-β受體，發(fā)揮抑制TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)的作用[28-29]。TGF-β1的生物學(xué)效應(yīng)是在細(xì)胞膜上與TGF-βⅡ型受體相結(jié)合，招募Ⅰ型受體，然后磷酸化激活Smad2及Smad3，激活的Smad2、Smad3再與Smad4形成異三聚體復(fù)合物Smad2/3/4，轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核，完成信號(hào)的跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)，最終調(diào)控靶基因的mRNA轉(zhuǎn)錄。研究表明，DN的許多特征，如系膜擴(kuò)張、SCr升高、BUN升高、蛋白尿增加、肌酐清除率降低等，都會(huì)隨著TGF-β1表達(dá)的降低而逐漸改善，也會(huì)隨著TGF-β1表達(dá)的增加而逐漸惡化[30]，通過(guò)抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路，如基因敲除TGF-βⅡ型受體或使用TGF-β1中和抗體和Smad3特異性抑制劑，都可以減少腎小管、腎小球上皮細(xì)胞、系膜細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變，改善DN腎臟血管生成和纖維化反應(yīng)，延緩DN進(jìn)展[31-33]。

3.2 中醫(yī)藥調(diào)節(jié)TGF-β/Smad信號(hào)通路防治DN Mao Q等[34]研究顯示，蒙古豆科黃芪提取物黃芪甲苷Ⅳ(ASI)可以通過(guò)增加STZ誘導(dǎo)DN模型大鼠的Smad7 mRNA和蛋白表達(dá)，降低TGF-β1、Smad3、α-SMA的mRNA和蛋白表達(dá)，抑制DN引起的腎小球系膜細(xì)胞過(guò)度增殖和腎臟纖維化，改善大鼠腎小球萎縮、基底膜變薄及近曲小管損傷，促進(jìn)細(xì)胞修復(fù)，說(shuō)明ASI對(duì)DN的治療作用是通過(guò)抑制TGF-β1/Smad信號(hào)傳導(dǎo)，減輕腎間質(zhì)纖維化而實(shí)現(xiàn)的。Li Z等[35]研究表明，紫草主要成分乙酰紫草素可明顯抑制STZ誘導(dǎo)DN小鼠腎臟中TGF-β1的表達(dá)，降低Smad2/3磷酸化水平，增加Smad7水平，降低腎臟中IL-1、IL-6、MCP-1等促炎因子水平，減少巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，抑制纖溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)、Ⅲ型膠原蛋白及Ⅳ型膠原蛋白表達(dá)，且采用體外培養(yǎng)的人近端腎小管上皮細(xì)胞在經(jīng)過(guò)乙酰紫草素處理后也可出現(xiàn)同樣上述表現(xiàn)，說(shuō)明乙酰紫草素對(duì)TGF-β1/ Smad信號(hào)通路的抑制作用可應(yīng)用于DN腎臟纖維化病變的治療。Yoon J J等[36]研究顯示，經(jīng)五苓散干預(yù)8周后，DN模型小鼠的TG、LDL、BUN、肌酐清除率及胰島素抵抗穩(wěn)態(tài)評(píng)估指數(shù)(HOMA-IR)均明顯降低，系膜和腎小球基底膜增厚、近端腎小管空泡形成增多及上皮細(xì)胞管腔間隙收縮等DN的特征性病理改變減少，進(jìn)一步研究顯示小鼠腎臟中TGF-β1/p-Smad2的蛋白和mRNA表達(dá)減少，p-Smad2的核易位降低，MCP-1和Ⅳ型膠原蛋白的表達(dá)也同樣受到抑制，推測(cè)TGF-β1/Smad信號(hào)通路中相關(guān)基因、蛋白及細(xì)胞因子可能是五苓散治療DN的靶點(diǎn)。沈金峰等[37]臨床觀察加味參芪地黃湯(藥物組成：生黃芪、黨參、生地黃、山茱萸、淮山藥、丹參、澤瀉、茯苓、芡實(shí)、金櫻子、玉米須、薏苡仁、大黃及積雪草)治療DN的結(jié)果顯示，DN患者腎臟損害與TGF-β1、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)水平呈正相關(guān)關(guān)系，加味參芪地黃湯能顯著抑制患者血中TGF-β1、VEGF水平，改善患者尿白蛋白排泄率(UAER)、24 h尿蛋定量、SCr及BUN水平，表明加味參芪地黃湯可能是通過(guò)調(diào)節(jié)TGF-β/Smad信號(hào)通路，降低TGF-β1和VEGF水平，保護(hù)腎功能，進(jìn)而延緩DN進(jìn)展。

4 細(xì)胞外因子(Wnt)/β-連環(huán)蛋白(β-catenin)信號(hào)通路

4.1 Wnt/β-catenin信號(hào)通路與DN Wnt/β-catenin信號(hào)通路是糖蛋白Wnt信號(hào)傳導(dǎo)的一條經(jīng)典路徑，具有進(jìn)化保守性，通過(guò)調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化、黏附、凋亡來(lái)參與人體的生理病理過(guò)程[38]。Wnt作為一種富含半胱氨酸的糖蛋白，在高糖環(huán)境下被激活，與跨膜受體卷曲蛋白(FZD)及低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6(LRP5/6)結(jié)合形成復(fù)合物，將能夠降解β-catenin的復(fù)合物中軸蛋白-糖原合成激酶-3β(Axin-GSK3β)解離，導(dǎo)致β-catenin蛋白在細(xì)胞中穩(wěn)定累積，在達(dá)到一定濃度后，β-catenin易位至細(xì)胞核，與轉(zhuǎn)錄因子T細(xì)胞因子(TCF)/淋巴增強(qiáng)因子(LEF)等結(jié)合，生成纖維化因子和炎癥介質(zhì)誘導(dǎo)疾病的發(fā)生[39]。DN患者腎臟及動(dòng)物模型的研究表明，Wnt/β-catenin信號(hào)通路參與了DN腎間質(zhì)纖維化和腎小球硬化的發(fā)生發(fā)展，尤其是在系膜細(xì)胞、足細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞的損傷中起著關(guān)鍵作用，高糖刺激下Wnt/β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)度激活，纖維粘連蛋白(FN)、α-SMA、PAI-1及VEGF表達(dá)增加，E-cadherin、足突蛋白(Podocin)及腎病蛋白(Nephrin)表達(dá)下降，腎臟固有細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化，進(jìn)而引起腎臟不可逆的病理?yè)p傷，造成尿蛋白進(jìn)行性增多[40]，而內(nèi)源性拮抗劑Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK-1)的使用，可以抑制Wnt信號(hào)，減少足細(xì)胞損傷和蛋白尿產(chǎn)生[41]。因此，調(diào)控DN中Wnt/β-catenin信號(hào)通路可以降低腎臟損害和減輕腎臟纖維化程度，是治療DN一種可行的干預(yù)策略。

4.2 中醫(yī)藥調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號(hào)通路防治DN Xie L等[42]研究證實(shí)，三七顆粒灌胃治療DN大鼠后尿蛋白水平顯著降低，腎小球系膜擴(kuò)張和足細(xì)胞足突脫落情況明顯改善，腎組織中Wnt-1、β-catenin、Snail、結(jié)蛋白(Desmin)及α-SMA表達(dá)下降，Nephrin蛋白表達(dá)上調(diào)，表明中藥三七治療DN的可能機(jī)制與抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路和保護(hù)足細(xì)胞有關(guān)。Xiang X等[43]研究發(fā)現(xiàn)，丹參提取物可呈濃度依賴性抑制體外高糖誘導(dǎo)的腎小球系膜細(xì)胞增殖及腎小球系膜細(xì)胞肥大，同時(shí)Wnt-4、β-catenin和TGF-β信號(hào)在腎小球系膜細(xì)胞中的表達(dá)也同樣受到抑制，進(jìn)一步用DN模型大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，丹參提取物治療后，大鼠腎組織中Wnt-4、β-catenin和TGF-β信號(hào)表達(dá)也同樣下調(diào)，HDL、LDL、TG、TC、糖化血清蛋白(GSP)、胱抑素C(Cys-C)及β2微球蛋白(β2-MG)恢復(fù)到正常水平，說(shuō)明丹參提取物可通過(guò)抑制Wnt/β-catenin和TGF-β信號(hào)通路，改善DN糖脂代謝異常引起的腎臟損傷。Zou X R等[44]研究顯示，腎安顆?？娠@著降低DN模型小鼠腎皮質(zhì)中Wnt-1、β-catenin的信號(hào)表達(dá)和mRNA轉(zhuǎn)錄，減少腎小球?yàn)V過(guò)屏障結(jié)構(gòu)破壞，降低小鼠尿白蛋白排泄量、BUN及SCr水平，治療效果與氯沙坦相當(dāng)，說(shuō)明腎安顆?？赏ㄟ^(guò)抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路的異常激活，減少尿蛋白，改善腎功能，延緩DN進(jìn)展。Zhang Q等[45]研究表明，DN模型大鼠經(jīng)芪參益氣滴丸治療后，腎小球系膜和基底膜膠原纖維沉積明顯減少，腎小球肥大和腎小管間質(zhì)纖維化改變減輕，腎小球、腎小管及腎間質(zhì)中Wnt-1、β-catenin、TGF-β、Smad2表達(dá)明顯降低，說(shuō)明芪參益氣滴丸可通過(guò)抑制Wnt/β-catenin和TGF-β/Smad信號(hào)通路，改善DN大鼠的腎臟纖維化和保護(hù)腎功能。

5 小結(jié)

盡管DN的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確，但中醫(yī)藥多成分、多效應(yīng)的作用優(yōu)勢(shì)使其在DN的臨床治療中獲效顯著，能對(duì)DN發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的多條信號(hào)通路進(jìn)行有效調(diào)控，主要包括PI3K/Akt、NF-κB、TGF-β/Smad及Wnt/β-catenin信號(hào)通路?；谶@些信號(hào)通路展開(kāi)的相關(guān)研究也使我們對(duì)中醫(yī)藥治療DN的作用機(jī)制、治療靶點(diǎn)有了更深了解，在臨床應(yīng)用時(shí)有了更多選擇范圍和理論依據(jù)。同時(shí)我們也要認(rèn)識(shí)到中醫(yī)藥調(diào)控DN相關(guān)信號(hào)通路的研究存在一定局限性：①中醫(yī)藥成分復(fù)雜，缺乏精準(zhǔn)分析，未來(lái)應(yīng)從分子學(xué)、細(xì)胞學(xué)、基因?qū)W等層面探討中醫(yī)藥作用于信號(hào)通路的具體機(jī)制；②有關(guān)中醫(yī)藥的長(zhǎng)期療效和毒理學(xué)研究數(shù)據(jù)不足，迫切需要進(jìn)行更全面、更深入的實(shí)驗(yàn)研究；③目前研究方向大多是近年來(lái)單個(gè)熱點(diǎn)信號(hào)通路的實(shí)驗(yàn)研究，多靶點(diǎn)間相互作用和臨床療效觀察相對(duì)缺乏，現(xiàn)有的臨床證據(jù)也需上升至循證級(jí)別；④中醫(yī)臨床治療更注重辨證論治，如何將中醫(yī)藥治療節(jié)點(diǎn)的信號(hào)通路與中醫(yī)基礎(chǔ)理論相統(tǒng)一，也是日后系統(tǒng)研究的重要課題。綜上所述，中醫(yī)藥調(diào)控DN相關(guān)信號(hào)通路具有多途徑、多靶點(diǎn)、多效應(yīng)的優(yōu)勢(shì)，在糾正糖脂代謝、減少氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)、改善DN所致的腎功能和形態(tài)損傷方面獲效顯著，但仍需進(jìn)一步拓展和深入研究。