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    中藥海藻質量標準及質量控制研究進展

    2022-11-11 06:00:14吳愫青
    中醫(yī)藥導報 2022年10期
    關鍵詞:單糖海藻藥典

    熊 瑛,吳愫青

    (珠海市食品藥品檢驗所,廣東 珠海 519000)

    海藻是常用的清熱化痰藥,其味苦、咸,性寒,歸肝、胃、腎經(jīng),具有消痰、軟堅散結、利水消腫的作用[1]。現(xiàn)代研究表明,海藻具有抗氧化[2-3]、抗腫瘤[4-5]、降血糖[6-7]、免疫調(diào)節(jié)[8-9]等作用,用于治療單純性甲狀腺腫、乳腺增生、淋巴結核等疾病[10]。海藻在我國藥用歷史悠久,最早載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,且歷代本草均有收載?!吨腥A人民共和國藥典》[11]中海藻項下規(guī)定其基源為馬尾藻科植物海蒿子Sargassum pallidum(Turn.)C.Ag.或羊棲菜Sargassum fusiforme(Harv.)Setch.的干燥藻體。前者習稱“大葉海藻”,后者習稱“小葉海藻”。海藻生長在低潮線以下淺海水激蕩處的巖石上。大葉海藻(海蒿子)主產(chǎn)于山東、遼寧等地,小葉海藻(羊棲菜)主產(chǎn)于福建、浙江、廣東等地[1]。海藻的炮制方法為曬干、凈制,近代本草中關于海藻的品質描述也以身干、色黑、霜少、枝嫩、無沙石者為佳。雖然海藻在我國用藥歷史悠久,藥用價值明確,藥用資源豐富,市場需求量大,但是關于海藻的質量控制方法和質量標準研究相對落后,對海蒿子和羊棲菜兩者的功效差異、商品規(guī)格、質量差異等均未有明確的標準。筆者針對海藻的質量標準情況及質量控制技術進行綜述,以期為加強海藻的質量控制、海藻資源的臨床應用及開發(fā)等提供基礎。

    1 海藻質量標準研究現(xiàn)狀

    1963年版《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)開始收載海藻,至2020年版《中國藥典》海藻的基源保持一致,均為海蒿子及羊棲菜的干燥藻體。歷經(jīng)10版藥典,自1977年版《中國藥典》以后,海藻的性狀描述一直未加改動。1963年版《中國藥典》及1977年版《中國藥典》[12-13]均認為海藻“以色黑褐,白霜少者為佳”,之后歷版藥典再無類似描述。1977年版《中國藥典》增加了【鑒別】項,該項目是甘露醇的化學反應,反應原理為甘露醇與三氯化鐵試液反應生成棕色沉淀,再加氫氧化鈉試液后沉淀溶解。1990年版《中國藥典》[14]【鑒別】項刪除了后半部分滴加過量氫氧化鈉試液后沉淀溶解的試驗。2015年版《中國藥典》[15]中海藻在原有基礎上增加了【檢查】項及【含量測定】項,并在【檢查】項下規(guī)定了水分、重金屬及有害元素(鉛、汞、鎘、銅)的限度。此外,【含量測定】項下使用蒽酮-硫酸顯色法采用紫外分光光度法進行測定,以巖藻糖計算海藻多糖的含量,規(guī)定其不得少于1.70%。海藻的質量標準由簡單的性狀描述提升至條目相對完整的質量體系。

    全國有20個省、自治區(qū)、直轄市的中藥材炮制規(guī)范收載了海藻的炮制方法。絕大部分地區(qū)炮制方法基本與《中國藥典》一致,均為凈制后切段,僅甘肅省收載的炮制方法為凈制后切絲。2010年版《湖南省中藥飲片炮制規(guī)范》另收載了海藻超微飲片。就質量標準而言,《上海市中藥飲片炮制規(guī)范》中質量項目最全面,覆蓋【鑒別】、【檢查】、【含量測定】。其他地區(qū)的炮制規(guī)范的標準相對簡單,有的僅有炮制方法,無相應炮制后對藥材性狀的描述,具體詳見表1~2。

    表1 歷版《中國藥典》海藻標準的變化

    表2 各地方炮制規(guī)范收載情況

    由此可知,目前海藻的質量標準相對簡單,無特征性的質量控制項目,存在一定的缺陷。對海藻的質量控制方法進行梳理,建立海藻質量特征性控制方法是迫在眉睫的。

    2 海藻的質量控制方法現(xiàn)狀

    影響中藥材質量的因素有很多,質量控制的方法也多種多樣。《中國藥典》通常分3個方面來進行藥材整體質量的控制。(1)原植物來源的控制,即保證藥材的基源、藥用部位、成熟度等正確;(2)外源性物質的控制,如水分、灰分、農(nóng)藥殘留量、二氧化硫殘留量、重金屬含量等;(3)指標性成分或者功效性成分的控制,如含量測定和浸出物。下面將從這3個方面闡述海藻藥材現(xiàn)有的質量控制方法。

    2.1 基源的控制 傳統(tǒng)的藥材鑒別一般依靠經(jīng)驗鑒別,即從外觀、斷面、色、味、質感等多方面綜合評價藥材的真?zhèn)?。隨著技術的發(fā)展,顯微技術成熟以后,顯微特征成為辨別藥材真?zhèn)蔚闹匾卣?。其利用顯微鏡對中藥材(飲片)、粉末及含粉末的制劑中的組織、細胞或者內(nèi)含物等特征進行鑒別,具有專屬性和易操作性,是中藥材質量控制的常用方法之一?,F(xiàn)行《中國藥典》及各地方標準中海藻項下均無顯微特征相關項目。海藻屬于馬尾藻屬植物,在褐藻門藻類植物中分化較為復雜,生長環(huán)境不同,其藻體的外形差異也大,僅僅依靠藻體的外形來鑒定具體品種,鑒定難度系數(shù)高,通常會導致市場上混偽品多,正品難尋。董焱等[41]通過性狀和顯微特征對海藻及幾種類同品進行鑒別,發(fā)現(xiàn)羊棲菜主干橫切面髓部較大,由類圓形小細胞緊密排列而成,葉狀體橫切面表面波浪狀細胞狹長,外被蠟質薄膜,內(nèi)含大量黏液質,縱向緊密排列。海蒿子主干橫切面的髓部為多角細胞組成,葉狀體橫切面中表皮由橢圓形縱向緊密排列的細胞組成,外壁披蠟質薄膜;中間部隆起,具有類似葉脈狀結構,由此可將其與另外5種馬尾藻屬植物區(qū)分開。因此,開發(fā)顯微鑒別的方法,輔助性狀鑒別,可提升海藻基源鑒定的準確率。

    2.2 外源性物質的控制 隨著海洋資源的開發(fā)與利用,海洋的環(huán)境也受到影響,污染問題也隨之而來。重金屬、有機物、農(nóng)藥等殘留隨著徑流、雨水沖刷等途徑進入海洋,是海洋重要污染物之一。20世紀90年代,接連發(fā)生多起“中藥重金屬超標”事件后,人們開始重視中藥材中外源性污染物的影響,《中國藥典》也開始完善重金屬、二氧化硫、農(nóng)藥殘留量、真菌毒素等污染物的檢驗檢測方法。2020年版《中國藥典》中二氧化硫殘留量及33種禁用農(nóng)藥殘留量是植物類中藥材的必檢項目。關注較多的重金屬殘留量也有很多的文獻報道。

    2.2.1 重金屬污染 海洋植物重金屬的含量與海域分布有關,藻類通過生化反應吸附海水中的重金屬離子,有可能引起重金屬的富集。對人體毒害最大的重金屬有汞、鎘、鉛、砷、鉻等。常用的重金屬檢測方法有原子吸收光譜法(AAS)、氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法(HG-AFS)、電感耦合等離子體質譜法(ICP-MS)等。在《中國藥典》中鉛、鎘、汞、砷、銅5種重金屬的檢測即用到AAS和ICP-MS。AAS檢測成本相對較低,其靈敏度也能滿足重金屬檢測的需求,但分析多種元素需要選擇不同的離子化方式,操作復雜。ICP-MS是利用以電感耦合等離子體為離子源,進入質譜儀進行檢測,具有分析范圍廣、靈敏度高、線性范圍寬的特點,常用于藥材中各種微量元素的含量測定。陳星星等[42]采用ICP-MS測定浙江沿海藻類多種重金屬的含量,發(fā)現(xiàn)羊棲菜中鉛、砷含量較高,需要重點關注。陳發(fā)榮等[43]用毛細管電泳-電感耦合等離子體質譜(CE-ICP-MS)聯(lián)用測定羊棲菜中的總砷及各種形態(tài)砷的含量,結果顯示羊棲菜中主要是未知結構的有機砷。原子熒光光譜(AFS)檢測原理是原子態(tài)的待測物能發(fā)射一定特征波長的熒光,其熒光強度與待測物含量成正比。氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法(HG-AFS)是我國20世紀60年代發(fā)展起來的一種新型檢測技術,儀器具有靈敏度高、操作簡單、檢出限低、抗干擾能力強的特點,該技術常用于汞和砷的檢測。張金玲[44]采用HG-AFS法測定羊棲菜中總砷的含量,其總砷含量為40.208 mg/kg,遠高于其他品種。此外,砷的毒性不僅與砷的總量有關,還與砷的形態(tài)密切相關,液相色譜與氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法的聯(lián)用技術(HPLC-HG-AFS)常用于砷形態(tài)的分析。于卓然[45]利用HPLC-HG-AFS法研究海洋藻類中砷的形態(tài),該方法檢測分析簡便、快速、靈敏度高,可以檢測和確證6種不同形態(tài)的砷,可以更為具體地檢測海藻樣品中主要砷的形態(tài)含量。

    2.2.2 農(nóng)藥的污染 農(nóng)藥的種類繁多,陸地上使用的農(nóng)藥可以通過雨水沖刷進入海洋生態(tài)中。我國水體受到有機氯、有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的廣泛污染[46]。農(nóng)藥本身具有易富集、難降解、殘留量高的特點。目前農(nóng)藥殘留量通常采用氣相色譜法(GC)、液相色譜-質譜聯(lián)用法(HPLC-MS)、氣相色譜-質譜聯(lián)用法(GC-MS)進行檢測。使用聯(lián)用技術可以大幅提高檢測目標物的品種,提高檢測的效率。靳貴英等[47]使用氣相色譜-串聯(lián)質譜法測定海藻羊棲菜中的19種有機氯農(nóng)殘,發(fā)現(xiàn)樣本中的有機氯的農(nóng)藥殘留均低于檢測限。彭全材等[48]對5種海藻中有機氯農(nóng)殘的含量進行分析,研究發(fā)現(xiàn)海藻中有六六六及滴滴涕類農(nóng)藥的殘留。2020年版《中國藥典》則將液相色譜-質譜聯(lián)用法和氣相色譜-質譜聯(lián)用法聯(lián)合使用測定中藥飲片中33種禁用農(nóng)藥殘留量。

    2020年版《中國藥典》及2018年版《上海市中藥飲片炮制規(guī)范》中“海藻”項下規(guī)定鉛不得過5 mg/kg、鎘不得過4 mg/kg、汞不得過0.1 mg/kg、銅不得過20 mg/kg,未有砷殘留量相關規(guī)定。今后的研究可根據(jù)海藻中重金屬殘留量的情況及農(nóng)藥污染的現(xiàn)狀,對海藻中砷的殘留量及砷的形態(tài)進行調(diào)研分析,探索砷殘留量的控制方法。

    2.3 功效性成分或者指標性成分的控制 海藻化學成分豐富,含有人體不能合成的必需氨基酸[49]、植物甾醇[50-51]、脂肪酸[52]、多酚類[53]化合物等。近年來,對海藻化學成分的研究主要集中在海藻多糖。海蒿子多糖和羊棲菜多糖均有抗氧化[2-3]、抗腫瘤[4-5]、降血糖[6-7]、免疫調(diào)節(jié)[8-9]等作用,是海藻重要的功效性成分及質量標志物。海藻的質量標準提高依賴于多糖檢測技術的完善。但多糖結構復雜,單糖的種類、連接方式、連接位置、相對分子量、二級結構、三級結構等均影響多糖的質量?,F(xiàn)行標準僅以蒽酮-硫酸法測定總糖含量,缺乏海藻多糖特征性檢測方法。目前關于海藻多糖的研究主要集中在多糖的提取分離及藥理作用方面,海藻多糖質量控制方法研究的文獻較少。因此,本文根據(jù)多糖結構特征將相對較成熟的多糖質量控制方式進行簡單的闡述,為建立海藻多糖的質量控制方法提供參考依據(jù)。

    2.3.1 多糖總量的測定方法 總糖含量的測定方法有苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法、3,5-二硝基水楊酸比色法和間接碘量法等。其中3,5-二硝基水楊酸比色法不適用于自帶顏色樣品的檢測,間接碘量法受到滴定速度的影響較大,因此蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法是常用的檢測方法。這兩個方法操作簡單,對儀器的要求低,儀器普及率高,接受度高。

    2.3.2 單糖的種類和含量的檢測 海藻多糖主要由巖藻糖、半乳糖、木糖、葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖等[54-55]組成。檢測多糖的單糖種類,需要先將多糖水解,主要的水解方式有酸水解及酶水解等。單糖種類主要的檢測方法如下。

    2.3.2.1 薄層色譜法(TLC)TLC是一種快速的方法,可以對單糖的種類進行鑒別。目前暫無使用TLC法鑒別海藻多糖中單糖組成情況的研究,但是有研究采用TLC法對湖北麥冬多糖[56]、五味子多糖膠囊[57]中的單糖進行定性鑒別,為海藻多糖中單糖的組成研究提供了參考。

    2.3.2.2 高效液相色譜法(HPLC) 由于單糖無紫外和熒光生色基團,采用HPLC法進行檢測時一般采用通用型檢測器,如蒸發(fā)光檢測器(ELSD)、電噴霧檢測器(CAD)或示差檢測器(RID)。使用紫外(UV)或熒光檢測器(FLD)時,需要將其進行柱前衍生化,其中1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)是常用的衍生化試劑。李溢真等[58]使用三氟乙酸降解提取到的海蒿子多糖中單糖的組成為甘露糖、半乳糖和巖藻糖。胡淑曼等[59]采用水提法提取海藻藥材得到海藻粗多糖,經(jīng)過三氯乙酸降解、PMP衍生后,采用紫外檢測器,在254 nm處,利用HPLC測定海藻藥材質量標志物巖藻糖的含量。研究者優(yōu)化了單糖制備、柱前衍生及除去游離衍生試劑的條件。該方法相對蒽酮-硫酸顯色法干擾因素小、精密度高、重復性好,可用于海藻藥材的質量控制。

    2.3.2.3 氣相色譜法(GC)GC法比較適合中性多糖的測定,可搭配FID檢測器測定多糖的組成。測定時需將水解后的單糖進行衍生化,該方法靈敏度高,但是衍生化過程中有副產(chǎn)物,需加以甄別。魏曉蕾等[60]利用該方法測定從海蒿子中分離純化的3種褐藻糖膠,發(fā)現(xiàn)3種多糖均含有巖藻糖。

    2.3.2.4 離子色譜法(IC) 離子色譜搭配電化學檢測器也可以用于單糖的檢測。該方法也無需衍生化。有研究在靈芝孢子粉多糖[61]和葛根多糖[62]的單糖組成檢測中采用了IC法,發(fā)現(xiàn)不管是靈芝孢子粉還是葛根,其來源不同,多糖的單糖組成的亦不相同。

    2.3.2.5 高效毛細管電泳法(HPCE)該方法分離效率高,有機溶劑消耗少,操作簡便,也可以用于單糖組分的檢測。林曉燕等[63]建立了柱前衍生-HPCE法分析太子參多糖中的單糖組成,該方法操作簡便、耗時少、準確度高。

    2.3.3 糖苷鍵的連接方式及連接位置 糖苷鍵是指連接糖分子苷元與糖基或者糖基與糖基之間的化學鍵,是多糖中重要的化學特征之一。其測定方法主要有紅外光譜法(IR)、核磁共振波譜法(NMR)、氣相色譜-質譜聯(lián)用法(GC-MS)等。

    2.3.3.1紅外光譜法(IR) 在紅外輻射下,不同類型糖苷鍵特征吸收不同,可以鑒定多糖的構型。海藻多糖[6,58,60]的特征吸收是3 400 cm-1左右的寬峰,對應羥基的O-H;2 900 cm-1峰對應是C-H鍵的特征吸收峰;α糖苷鍵特征吸收峰約在840 cm-1,而β糖苷鍵的特征吸收峰約在890 cm-1,磷酸基在1 300~1 250 cm-1處有P=O伸縮振動峰;吡喃糖苷因有醚鍵C-O-C在1 100~1 010 cm-1處有3個吸收峰,而呋喃糖苷在相應的區(qū)域只出現(xiàn)2個峰。

    2.3.3.2 氣相-質譜聯(lián)用法(GC-MS)GC-MS是最常用的測定糖苷鍵連接方式的方法:通常先將多糖樣品中單糖的游離羥基全部甲基化,然后水解、還原后得到的羥基即為單糖殘基的連接位點;再將產(chǎn)物乙?;蟮玫骄哂袚]發(fā)性的甲基化的糖醇乙酸酯進入GC-MS進行分析;根據(jù)質譜碎片的信息來判斷結構。測試步驟較為繁瑣,需要一定的解析圖譜的能力。如王瑩等[64]采用GC-MS法判斷黃芪多糖中糖苷鍵主要有1,4、1,6位連接及端基葡萄糖。

    2.3.3.3 核磁共振波譜法(NMR)核磁波譜是強磁場中的原子核吸收射頻輻射形成的圖譜,可以提供豐富的結構信息,是化合物結果鑒定的重要手段。核磁波譜一般分為氫譜和碳譜。氫譜[1H NMR譜、H-H COSY譜和TOCSY(HOHAHA)譜]可推出單糖上各碳上氫的化學位移,碳譜[13C NMR譜和1H-13C COSY譜(HMQC譜和HSQC譜)]可推出碳的連接方式。NMR可以用來判斷單糖殘基的異頭異構形式?;羯绞?H NMR譜顯示多糖的異頭氫信號在4.45~4.89 ppm之間;13C NMR譜顯示異頭碳信號在99.2~102.6 ppm之間,為β構型[65]。

    2.3.4 分子量與分子量分布 凝膠滲透色譜法(GPC)是一種測定相對分子質量的方法,是目前2020年版《中國藥典》四部通則中收載的相對分子量測定方法。該方法可對系列標識分子量的對照品進行測定,通過保留時間的不同來測定待測樣品的相對分子質量及其分布。相對分子質量及其分布對多糖的控制有重要的意義,提取的多糖通常都需要測定此參數(shù)來控制多糖的質量。CAO C L等[6]用HPGPC測定海蒿子多糖的平均分子量為1.036×106Da。此方法在短葶山麥冬多糖[66]、靈芝提取物多糖[67]、黃芪多糖[64]、人參多糖[68]等中均有應用。

    此外,還可采用多角度激光散射技術(MALLS)對多糖的分子量進行測定。多角度激光散射技術通常需要與示差檢測器(RID)聯(lián)用,選擇示差檢測器的一個數(shù)據(jù)作為濃度來源,計算分子量。如CHENG Y[69]等利用高效分子排阻色譜法(HPSEC)對酶切后的多糖進行分離,采用MALLS與RID聯(lián)合檢測太子參非淀粉多糖,發(fā)現(xiàn)其分子量范圍為4.37×104~1.70×105Da。

    2.3.5 多糖的指紋圖譜 多糖的復雜性導致多糖的質量不能由單一的指標體現(xiàn),因此提出了多糖的指紋圖譜的概念。目前多糖的指紋圖譜已由一元的指紋圖譜發(fā)展為多元的指紋圖譜。一元的指紋圖譜是指多糖一個指標的指紋圖譜,如有基于多糖的紅外光譜或基于單糖組成的HPLC或GC的指紋圖譜。一元指紋圖譜可采用化學計量學方法,如主成分分析(PCA)、層級聚類分析(HCA)、偏二乘判別分析(PLS-DA)等分析不同圖譜之間的相似度,進行定性的鑒定。由于多糖結構的復雜性,一元的指紋圖譜并不能代表多糖的性質,因此多元指紋圖譜開始應用于多糖的質量評價。如CHENG J等[70]研究發(fā)現(xiàn)完全水解多糖的HPLC指紋圖譜或者GC指紋圖譜不能完全區(qū)分不同產(chǎn)地的決明子多糖,但若將部分水解多糖的FI-IR指紋圖譜與HPLC指紋圖譜結合PCA分析,則可區(qū)分不同產(chǎn)地的決明子。有研究[69,71]使用定位酶切技術將多糖進行水解,結合熒光輔助凝膠電泳(PACE)和高效薄層色譜(HPTLC)分析水解產(chǎn)物,來定性鑒別不同來源的多糖。這些技術不僅僅關注糖的一級結構,開始探索多糖水解的方式和特征。多糖常用的水解方式有酸水解與酶水解。酶水解多糖可以產(chǎn)生特異性的水解片段,選擇性高,反應條件溫和,其產(chǎn)物比較穩(wěn)定,在質量控制方面具有一定的優(yōu)勢。

    2.3.6 多糖的高級結構 多糖的空間結構十分復雜,對空間結構的研究有助于解釋多糖生理活性的構效關系,也可以對多糖的質量進行控制。多糖的高級結構的主要研究方法有原子力顯微鏡法(AFM)、X-射線衍射法(X-Ray)和圓二色譜法(CD)等。如JI X L等[72]采用AFM發(fā)現(xiàn)木棗中分離的酸性多糖是球形的結構。REN Y P等[73]發(fā)現(xiàn)藜麥多糖是無定形形式存在的,分離純化后可以形成穩(wěn)定的晶體結構。ZHANG W等[74]發(fā)現(xiàn)超聲纖維酶提取的肉蓯蓉多糖局部形成螺旋結構。這3種方法為研究大分子(包括蛋白質、多糖)空間結構的常用方法,可以為多糖提供豐富的空間結構信息。

    2.4 其他質量控制方法 海藻的成分除多糖外,還有甾醇、巖藻糖、多酚類、植物激素類、氨基酸等多種物質。這些物質是否可以作為海藻含量控制的標志物,還需要進一步探索。將這些組分的圖譜特征進行數(shù)學推導或采用統(tǒng)計學方法進行分析,同樣可以鑒別海藻的真?zhèn)巍?/p>

    王琰等[75]采用紅外光譜三級鑒定法對海藻藥材及其混偽品的紅外圖譜進行分析,發(fā)現(xiàn)不同品種海藻一維譜圖相似,具9個共有吸收峰,主要含糖類、蛋白質、不飽和脂肪酸、甾體等成分;然而二階導數(shù)譜圖和二維相關譜圖差異較大,根據(jù)峰數(shù)、峰位、峰強的差異進行區(qū)分,可以快速鑒別海藻藥材。張曉萍等[76]采用氨基酸全自動分析儀測定海藻及其混偽品中17種氨基酸的含量,經(jīng)過聚類分析發(fā)現(xiàn):海藻真品海蒿子、羊棲菜為一類,銅藻為一類,亨氏馬尾藻、海黍子為一類,瓦氏馬尾藻為一類。該方法聚類的結果與種質鑒定的結果一致,同時也證明《中國藥典》收載的品種與其混偽品差異較大,不能代替使用。該法可以用于海藻及其混偽品氨基酸含量的定量分析及真?zhèn)螀^(qū)分。CHEN Z等[52]采用GC-MS繪制海藻中脂肪酸的特征圖譜,發(fā)現(xiàn)4種馬尾藻屬海的脂肪酸特征圖譜差異性較大,經(jīng)過主成分分析(PCA)可以鑒別4種不同的海藻;使用正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)可以鑒別《中國藥典》品種與地方習用品種。ZHANG X L等[77]建立了一種H-NMR的方法來測定海藻中的總植物甾醇,研究利用植物甾醇中特征質子信號H-3α進行定量,結果發(fā)現(xiàn)羊棲菜中植物甾醇的含量明顯高于海蒿子。該方法不需要衍生化,也不需要被測物的標準品。

    3 總 結

    海藻在中國分布廣泛,使用歷史悠久,具有很好的藥理活性。海藻主要的活性物質為海藻多糖,目前對海藻多糖的研究主要集中在與中醫(yī)理論相符合的抗腫瘤、抗血管生成、抗炎等作用上。歷版《中國藥典》及各地方標準均有收錄海藻,然而海藻的質量標準卻十分簡單,因此對海藻質量標準的研究是十分必要的。建議在目前標準的基礎上增加顯微特征、灰分及重金屬限度等質量控制項目,從基源和污染控制兩個方面提升《中國藥典》中海藻的質量標準。

    對于海藻標準進一步的完善,需要重點關注海藻多糖的研究,包括其單糖組成、分子量分布情況、糖苷鍵的類型及連接位置、空間結構等。海藻多糖與其活性功能的關系有待進一步明確,建立活性多糖的檢測方法在質量控制上更具意義。筆者對海藻中多糖的檢測方法進行了闡述,可以發(fā)現(xiàn)目前多糖的質量控制方法主要還是對于其初級結構(總糖含量、單糖組成、水解后的寡糖組成、糖苷鍵類型等)的控制。這些方法的準確性依賴于多糖的提取、分離、純化等步驟的標準化。多糖的高級結構復雜,高級結構特征與生物活性之間研究尚不夠深入,同時研究高級結構的儀器也相對比較昂貴,企業(yè)和檢驗檢測機構的普及相對困難。多糖指紋圖譜的研究相對活躍,可以在整體上反映多糖的真實質量,是多糖質量提高的方向之一。

    綜上所述,海藻的質量標準需多方面完善。海藻多糖的質量控制方法需要提高,可采用多種方法結合,如單糖組成、分子量和分子量分布、多糖總量、指紋圖譜技術等,從而達到初步控制海藻質量的目的。同時加快標準化進程是海藻多糖控制的重要一步,包括標準化的提取、分離、水解步驟,標準品及對照品的制備等,以保證分析方法的穩(wěn)定、可靠、準確。

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