極早產(chǎn)兒臍血IL-6、IL-8、TNF-α與胎兒炎癥反應(yīng)綜合征的相關(guān)性分析*

徐 麗，招 倩，羅海蓮，陳 藺，唐文燕

江西省婦幼保健院新生兒科，江西南昌 330006

早產(chǎn)兒多與感染有關(guān)，孕婦在感染的刺激下可致組織中炎癥因子的釋放和前列腺素的產(chǎn)生，會(huì)引起胎兒炎癥反應(yīng)綜合征(FIRS)[1]。FIRS是胎兒固有免疫系統(tǒng)被激活的一種亞臨床狀態(tài),是全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)在胎兒時(shí)期的一種特殊表現(xiàn)。有研究者在SIRS的基礎(chǔ)上首先提出了FIRS，即胎兒臍血中白細(xì)胞介素(IL)-6≥11 pg/mL可診斷為FIRS，臍帶炎和絨毛膜羊膜炎是FIRS的組織病理學(xué)診斷指標(biāo)[2-3]。引起FIRS的因素主要有感染及缺氧等，而上述因素在致病過(guò)程中均有炎癥細(xì)胞因子參與。在臨床上，判斷早產(chǎn)兒是否存在宮內(nèi)感染的檢測(cè)指標(biāo)如白細(xì)胞計(jì)數(shù)及其分類(lèi)、C反應(yīng)蛋白、血培養(yǎng)、痰培養(yǎng)等靈敏度和特異度不足且易造成醫(yī)源性失血，也易造成抗菌藥物濫用。另外，胎盤(pán)、臍帶等組織的病理學(xué)檢查，雖然能直接診斷宮內(nèi)炎性反應(yīng)情況，但是不方便留取標(biāo)本，操作復(fù)雜，且耗時(shí)長(zhǎng)，不能及時(shí)指導(dǎo)臨床用藥，所以不能作為臨床早期判斷的客觀指標(biāo)。臍帶血可避免標(biāo)本采集困難、早產(chǎn)兒出生后采血困難、出生后治療影響炎癥細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果等弊端[4]。目前，雖然有研究對(duì)早產(chǎn)兒的IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平展開(kāi)分析，并探索這3項(xiàng)指標(biāo)和FIRS之間的關(guān)系，但在極早產(chǎn)兒領(lǐng)域內(nèi)，這一研究還相對(duì)少見(jiàn)。鑒于此，本研究旨在分析極早產(chǎn)兒臍血IL-6、IL-8、TNF-α是否能很好地反映極早產(chǎn)兒在宮內(nèi)臨產(chǎn)前的感染情況，以及FIRS與極早產(chǎn)兒結(jié)局的相關(guān)性，從而幫助極早產(chǎn)兒科臨床醫(yī)生對(duì)極早產(chǎn)兒出生后的診斷及治療做出準(zhǔn)確的判斷，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性選取2019年12月至2021年12月在江西省婦幼保健院分娩的120例胎齡<32周的極早產(chǎn)兒為研究對(duì)象，本次研究的樣本量根據(jù)橫斷面調(diào)查計(jì)算所得。研究對(duì)象根據(jù)有無(wú)發(fā)生FIRS分為發(fā)生FIRS組32例和未發(fā)生FIRS組88例。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)在江西省婦幼保健院出生且出生后即入住極早產(chǎn)兒重癥監(jiān)護(hù)病房(NICU)救治;(2)胎齡<32周極早產(chǎn)兒且均為活胎；(3)極早產(chǎn)兒產(chǎn)婦資料完整;(4)研究前已告知研究對(duì)象家屬本次研究?jī)?nèi)容、方法等，且極早產(chǎn)兒產(chǎn)婦自愿將其臨床資料用于本次研究，積極參與配合。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)產(chǎn)婦及極早產(chǎn)兒臨床資料不完整；(2)產(chǎn)婦及極早產(chǎn)兒存在血液疾病。

1.2資料收集 (1) 極早產(chǎn)兒圍生期基本信息：性別、胎齡、出生體重、出生方式、1 min 和 5 min阿普加量表評(píng)分、是否有創(chuàng)機(jī)械通氣、產(chǎn)婦產(chǎn)前糖皮質(zhì)激素使用情況和產(chǎn)婦妊娠高血壓、妊娠糖尿病、分娩時(shí)胎膜早破情況和其時(shí)間、羊水、產(chǎn)婦發(fā)熱情況及B族鏈球菌篩查結(jié)果(GBS)和其分泌物培養(yǎng)情況；(2)收集極早產(chǎn)兒并發(fā)癥等相關(guān)信息：早期并發(fā)癥如肺炎、呼吸窘迫綜合征、呼吸衰竭、早發(fā)型敗血癥；遠(yuǎn)期并發(fā)癥如肺炎、支氣管肺發(fā)育不良、壞死性小腸結(jié)腸炎、腦室內(nèi)出血/腦室周?chē)X白質(zhì)軟化(IVH/PVL)、早產(chǎn)嬰兒視網(wǎng)膜病變。

1.3診斷標(biāo)準(zhǔn) 產(chǎn)科疾病是依據(jù)文獻(xiàn)[5]進(jìn)行的疾病診斷。極早產(chǎn)兒疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)均參照文獻(xiàn)[6]。FIRS診斷標(biāo)準(zhǔn)：母體發(fā)熱，體溫≥38 ℃，兼有下列1種或以上情況：母體心動(dòng)過(guò)速(>100次/分)；胎心心動(dòng)過(guò)速(>160次/分)，子宮緊張有壓痛、羊水有臭味、末梢血白細(xì)胞計(jì)數(shù)>15.0×109/L、臍帶組織病理學(xué)檢查高倍鏡下中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)≥5～10個(gè)。

1.4方法

1.4.1實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)方法 (1)臍血細(xì)胞因子檢測(cè)方法：在極早產(chǎn)兒出生后為其斷臍，取臍帶血3 mL，靠近胎盤(pán)端，將采集標(biāo)本置于干凈試管內(nèi)，于室溫下靜置約30 min，待其凝固，以3 000 r/min進(jìn)行離心處理，時(shí)長(zhǎng)15 min，分離上清液，將其置入低溫冰箱內(nèi)保存待檢，選擇試劑盒，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)IL-6、IL-8及TNF-α水平。(2)臍帶組織病理學(xué)檢查方法：觀察臍帶一般情況(長(zhǎng)度、直徑、顏色、臍帶與胎盤(pán)位置等)、臍帶組織切片取材(在距離臍帶胎盤(pán)段5 cm處切斷，取2～4 cm，將其置于4%中性甲醛中固定過(guò)夜，待檢)。(3)所有研究對(duì)象在出生后24 h內(nèi)均完善血清非特異性炎性指標(biāo)檢測(cè)，包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)、C反應(yīng)蛋白及降鈣素原(PCT)水平。

1.4.2治療方法 兩組極早產(chǎn)兒送至NICU后實(shí)施經(jīng)鼻持續(xù)氣道正壓通氣治療，通氣壓力是6～8 mm Hg。出生5 h內(nèi)，實(shí)施心臟彩超檢查及胸透，密切觀察兩組極早產(chǎn)兒心跳、呼吸、體溫、血氧飽和度，結(jié)合其情況決定無(wú)創(chuàng)呼吸支持使用時(shí)間，停用之后改為低流量吸氧，結(jié)合觀察指標(biāo)將氧療逐漸停止。

1.5觀察指標(biāo) (1)統(tǒng)計(jì)極早產(chǎn)兒FIRS發(fā)生率并比較兩組臍血IL-6、IL-8、TNF-α水平。(2)兩組極早產(chǎn)兒出生后24 h非特異炎性指標(biāo)增高率比較，增高標(biāo)準(zhǔn)：白細(xì)胞計(jì)數(shù)在24 h后持續(xù)性20×109/L，CRP>8 mg/dL，PCT在分娩后3 d超過(guò)5 ng/mL。(3)對(duì)比兩組極早產(chǎn)兒的性別、胎兒宮內(nèi)窘迫情況，對(duì)比產(chǎn)婦年齡、發(fā)熱、妊娠期高血壓分娩情況，比較分娩時(shí)胎膜早破、羊水異常、GBS感染、胎盤(pán)早剝發(fā)生情況，并以組間有差異性因素作為自變量，對(duì)FIRS發(fā)生多因素進(jìn)行分析。(4)對(duì)兩組近期并發(fā)癥和遠(yuǎn)期并發(fā)癥情況進(jìn)行分析。

2 結(jié) 果

2.1極早產(chǎn)兒FIRS發(fā)生率及兩組臍血IL-6、IL-8、TNF-α水平情況 120例極早產(chǎn)兒中32例發(fā)生FIRS，發(fā)生率為26.67%。未發(fā)生FIRS組臍血IL-6、IL-8、TNF-α明顯低于發(fā)生FIRS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組臍血IL-6、IL-8、TNF-α水平比較

2.2兩組出生后24 h內(nèi)非特異炎性指標(biāo)增高率比較 發(fā)生FIRS組出生后24 h內(nèi)WBC、CRP及PCT水平增高率明顯高于未發(fā)生FIRS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組出生后24 h非特異炎性指標(biāo)增高率比較[n(%)]

2.3FIRS發(fā)生單因素分析 發(fā)生FIRS組產(chǎn)婦分娩時(shí)胎膜早破、羊水異常、胎盤(pán)早剝、發(fā)熱、妊娠高血壓發(fā)生率及極早產(chǎn)兒胎兒宮內(nèi)窘迫發(fā)生率均明顯高于未發(fā)生FIRS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

2.4FIRS發(fā)生多因素分析 以FIRS是否發(fā)生作為因變量，對(duì)下述自變量進(jìn)行賦值：IL-6高賦值為1，低賦值為0；IL-8高賦值為1，低賦值為0；TNF-α高賦值為1，低賦值為0；胎膜早破“有”賦值為1，“無(wú)”賦值為0；產(chǎn)婦發(fā)熱“有”賦值為1，“無(wú)”賦值為0；羊水異?！坝小辟x值為1，“無(wú)”賦值為0；妊娠高血壓“有”賦值為1，“無(wú)”賦值為0；胎兒宮內(nèi)窘迫“有”賦值為1，“無(wú)”賦值為0；胎盤(pán)早剝“有”賦值為1，“無(wú)”賦值為0。多因素分析可見(jiàn)：IL-6、IL-8及TNF-α水平及胎膜早破、胎兒宮內(nèi)窘迫、胎盤(pán)早剝、產(chǎn)婦發(fā)熱、羊水異常、妊娠高血壓均是極早產(chǎn)兒發(fā)生FIRS的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表3 FIRS發(fā)生單因素分析

2.5FIRS與極早產(chǎn)兒近期并發(fā)癥的關(guān)系 發(fā)生FIRS組極早產(chǎn)兒出生后肺炎、呼吸衰竭、早發(fā)型敗血癥發(fā)生率高于未發(fā)生FIRS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表5。

2.6FIRS與極早產(chǎn)兒遠(yuǎn)期并發(fā)癥的關(guān)系 發(fā)生FIRS組極早產(chǎn)兒遠(yuǎn)期并發(fā)癥總發(fā)生率明顯高于未發(fā)生FIRS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表6。

表4 FIRS發(fā)生多因素分析

表5 FIRS與極早產(chǎn)兒近期并發(fā)癥的關(guān)系[n(%)]

表6 FIRS與極早產(chǎn)兒遠(yuǎn)期并發(fā)癥的關(guān)系

3 討 論

盡管在過(guò)去的幾十年，NICU取得了持續(xù)的發(fā)展，但早產(chǎn)兒的存活率依然是極早產(chǎn)兒科醫(yī)生和早產(chǎn)兒家庭極其關(guān)注的問(wèn)題，其中特別是極早產(chǎn)兒的存活率得到了較大的提升[7-9]。極早產(chǎn)兒是指妊娠達(dá)到28周但不足32周分娩者，出生孕周越小，極早產(chǎn)兒體重越輕，預(yù)后越差，同時(shí)會(huì)增加胎兒死亡風(fēng)險(xiǎn)[10-11]。而研究發(fā)現(xiàn)很多早產(chǎn)的原因是孕婦受到感染，使機(jī)體產(chǎn)生宿主反應(yīng)，導(dǎo)致胎兒發(fā)生炎性反應(yīng)，進(jìn)而引起早產(chǎn)[12]。本次研究回顧性選取2019年12月至2021年12月在江西省婦幼保健院分娩的120例胎齡<32周的極早產(chǎn)兒作為研究對(duì)象。經(jīng)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，IL-6、IL-8及TNF-α均與FIRS有關(guān)，且這些指標(biāo)的異常升高，是FIRS發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。提示臍血細(xì)胞因子與FIRS具有緊密聯(lián)系。分析原因，這可能與各細(xì)胞因子的作用機(jī)制等因素有關(guān)。

鐘樹(shù)林等[13]報(bào)道IL-6、IL-8、TNF-α與早產(chǎn)兒FIRS及預(yù)后密切相關(guān)，本研究結(jié)果和此結(jié)果一致。值得注意的是，鐘樹(shù)林等[13]研究選取的是早產(chǎn)兒，本研究選取的是極早產(chǎn)兒，極早產(chǎn)兒的危險(xiǎn)程度更高，死亡風(fēng)險(xiǎn)更高，預(yù)后更差，對(duì)此類(lèi)患兒的預(yù)后相關(guān)情況及炎癥指標(biāo)展開(kāi)研究，可以填補(bǔ)極早產(chǎn)兒相關(guān)領(lǐng)域的研究空白，而且之所以能夠取得這一結(jié)果，主要是由于以下原因：IL-6 是由單核型巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞等產(chǎn)生，也可導(dǎo)致機(jī)體發(fā)熱，并且其對(duì)T、B兩種類(lèi)型的淋巴細(xì)胞的自身增殖、分化活動(dòng)起到促進(jìn)作用。因此，IL-6可產(chǎn)生抗體，并且有利于急性期蛋白的大量生成。IL-8又被稱(chēng)之為中性粒細(xì)胞激活蛋白，具有較強(qiáng)的趨化作用，能夠誘導(dǎo)中心粒細(xì)胞改變形態(tài)，促使其釋放胞內(nèi)顆粒，能夠促進(jìn)中性粒細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞快速達(dá)到感染部位，促使FIRS生成。此炎癥細(xì)胞因子水平的升高，可證實(shí)FIRS的存在；而且IL-8水平越高，宮內(nèi)感染的早產(chǎn)兒發(fā)生FIRS程度越嚴(yán)重[14]。TNF-α是由活化狀態(tài)的單核巨噬細(xì)胞生成，對(duì)血管通透性具有促進(jìn)作用，同時(shí)對(duì)補(bǔ)體等物質(zhì)進(jìn)入感染部位有促進(jìn)作用，利于淋巴液引流[15]。當(dāng)發(fā)生胎膜早破或者早產(chǎn)等情況時(shí)，羊水內(nèi)TNF-α水平會(huì)明顯上升，因此上述炎癥細(xì)胞因子均可起到促進(jìn)FIRS的功能，當(dāng)發(fā)生炎癥時(shí)，上述炎癥細(xì)胞因子水平會(huì)進(jìn)一步升高[16-17]。研究可見(jiàn)，臍血IL-6、IL-8及TNF-α水平變化，可反映出極早產(chǎn)兒在子宮內(nèi)有無(wú)FIRS，上述相關(guān)炎癥因子水平的高低可反映炎癥感染程度，當(dāng)母體血清中炎癥細(xì)胞因子水平升高時(shí)，往往預(yù)示著胎兒在宮內(nèi)發(fā)生母體炎性反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)增加[18]。

本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)生FIRS組極早產(chǎn)兒出生后肺炎、呼吸衰竭、早發(fā)型敗血癥發(fā)生率高于未發(fā)生FIRS組，發(fā)生FIRS組極早產(chǎn)兒遠(yuǎn)期并發(fā)癥總發(fā)生率明顯高于未發(fā)生FIRS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。當(dāng)極早產(chǎn)兒發(fā)生FIRS時(shí)，機(jī)體中的炎癥細(xì)胞因子水平明顯升高，能夠促進(jìn)極早產(chǎn)兒細(xì)菌感染及敗血癥的發(fā)生，免疫功能降低，從而更易引起極早產(chǎn)兒近期、遠(yuǎn)期并發(fā)癥[19-20]。當(dāng)極早產(chǎn)兒在宮內(nèi)遭受炎癥細(xì)胞因子的刺激后，可從多方面對(duì)機(jī)體造成損害，包括直接損傷神經(jīng)元、產(chǎn)生氧自由基、破壞血腦屏障、影響灌注、干擾凝血等，是極早產(chǎn)兒生后早期患病和死亡的重要影響因素，同時(shí)也對(duì)遠(yuǎn)期預(yù)后產(chǎn)生影響。

本研究還存在一定不足，主要體現(xiàn)在研究中選取的樣本量較小。另外，本研究未根據(jù)研究對(duì)象的孕周細(xì)致化分組，在后續(xù)的研究中，可以進(jìn)一步對(duì)其展開(kāi)細(xì)致分組，并對(duì)IL-6、IL-8、TNF-α在FIRS中的作用機(jī)制展開(kāi)深入分析，從而為極早產(chǎn)兒出生后因炎癥引發(fā)相關(guān)疾病的治療提供參考。

綜上所述，極早產(chǎn)兒臍血IL-6、IL-8、TNF-α與FIRS發(fā)生密切相關(guān)，且極早產(chǎn)兒一旦出現(xiàn)FIRS，很可能會(huì)出現(xiàn)一些近期或遠(yuǎn)期并發(fā)癥，進(jìn)而對(duì)其生命安全造成威脅。因此，對(duì)極早產(chǎn)兒應(yīng)盡早檢測(cè)IL-6、IL-8、TNF-α等指標(biāo)，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)FIRS，及時(shí)展開(kāi)針對(duì)性的治療，從而為其預(yù)后的改善提供支持。