血清白細(xì)胞介素-27水平與慢性乙型肝炎患者肝纖維化的關(guān)系

李 健, 李連文, 王麗華, 況 宇, 蘭 林

(1.重慶市江津區(qū)中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科, 重慶, 402260;2.中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院 感染病科, 重慶, 400038)

慢性乙型肝炎由乙型肝炎病毒持續(xù)感染所致，可引起肝細(xì)胞損傷，而肝細(xì)胞損傷在機(jī)體免疫系統(tǒng)的作用下反復(fù)修復(fù)會逐漸導(dǎo)致肝纖維化，肝纖維化過程長期伴炎癥損傷，隨病情進(jìn)展可發(fā)展為肝硬化，預(yù)后較差。研究[1]報(bào)道，若早期積極治療，慢性乙型肝炎患者肝纖維化可被逆轉(zhuǎn)。因此，盡早明確慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期并采取針對性治療措施，對于控制患者疾病進(jìn)展和改善患者預(yù)后較為必要。白細(xì)胞介素-27(IL-27)是由p28亞基和EB病毒誘導(dǎo)基因3亞基組成的異二聚體，可啟動輔助性T細(xì)胞(Th)1分化發(fā)揮其促炎作用，也可抑制Th2、Th17發(fā)揮抑炎作用，在機(jī)體炎癥免疫中起著重要的調(diào)節(jié)作用[2]。另有研究[3]指出, IL-27參與了自身免疫性肝炎的發(fā)生與進(jìn)展。由此推測，血清IL-27表達(dá)水平可能與慢性乙型肝炎肝患者纖維化分期存在一定關(guān)聯(lián)。本研究對不同纖維化分期慢性乙型肝炎患者血清IL-27水平進(jìn)行檢測，旨在探討血清IL-27水平與慢性乙型肝炎患者肝纖維化的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)，選取2018年9月—2021年8月重慶市江津區(qū)中心醫(yī)院收治的100例慢性乙型肝炎患者作為研究對象，患者及其家屬對本研究知情并已簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn): ① 符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015年版)》[4]中慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)腹部B超檢查確診者; ② 未接受抗病毒、抗纖維化治療者; ③ 認(rèn)知功能正常，可配合研究者。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 合并肝癌、肺癌等惡性腫瘤疾病者; ② 既往有肝移植手術(shù)史者; ③ 失代償期肝硬化患者; ④ 合并自身免疫性肝病、炎癥性腸病者。100例慢性乙型肝炎患者中，男68例，女32例; 年齡35～69歲，平均(47.08±5.28)歲; 體質(zhì)量指數(shù)16.84～26.53 kg/m2, 平均(22.04±1.37)kg/m2; 病程2～8年，平均(4.22±0.78)年。

1.2 方法

1.2.1 肝纖維化分期評估及分組方法: 所有患者入院后完成相關(guān)檢查，排除禁忌證后于超聲引導(dǎo)下行肝穿刺，取肝活組織，用甲醛溶液浸泡后送病理檢查。病理讀片采用中心閱片方式，由2名肝臟病理專家進(jìn)行雙盲讀片。肝纖維化的病理分期包括S0期(無肝纖維化)、S1期(匯管區(qū)纖維化擴(kuò)大，局限于竇周、小葉內(nèi)纖維化)、S2期(匯管區(qū)周圍纖維化，形成纖維間隔，大部分小葉結(jié)構(gòu)保留)和S3期(大量纖維間隔，致小葉結(jié)構(gòu)紊亂，尚無肝硬化)和S4期(肝硬化)。依據(jù)病理分期結(jié)果，將不同分期肝纖維化患者分別納入S1期組、S2期組、S3期組和S4期組。

1.2.2 基線資料收集方法: 研究者設(shè)計(jì)基線資料調(diào)查表，并詳細(xì)統(tǒng)計(jì)患者的基線資料。一般資料包括年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、病程、是否合并糖尿病(參照《中國2型糖尿病防治指南(2013年版)》[5]判定); 實(shí)驗(yàn)室檢查資料包括血小板(PLT)、紅細(xì)胞(RBC)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)和IL-27水平。采集患者入院時(shí)空腹靜脈血10 mL，分為2份，其中一份予抗凝處理，采用邁瑞CAL8000血液細(xì)胞分析流水線(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)檢測PLT、RBC水平，另一份以3 000 轉(zhuǎn)/min速度離心處理10 min(離心半徑為10 cm), 分離上層血清，采用德國羅氏cobas8000分析系統(tǒng)(德國羅氏診斷有限公司)檢測ALT、AST水平，并采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測IL-27水平[嚴(yán)格按照IL-27檢測試劑盒(上?？道噬锟萍加邢薰?說明書操作]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 肝纖維化分期情況

100例慢性乙型肝炎患者的肝纖維化病理分期評估結(jié)果顯示, S1期患者47例, S2期患者29例, S3期患者15例, S4期患者9例。

2.2 一般資料和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

S1期組、S2期組、S3期組、S4期組患者PLT水平依次下降，ALT、AST、IL-27水平依次升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 4組慢性乙型肝炎患者其他資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同肝纖維化分期慢性乙型肝炎患者一般資料和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.3 血清IL-27水平與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期的相關(guān)性分析

Kendall′s tau-b相關(guān)性分析顯示，慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期與血清IL-27水平呈正相關(guān)(r=0.577,P<0.001)。

2.4 血清IL-27水平與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期的關(guān)系的多項(xiàng)Logistic回歸分析

將慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期作為因變量(S1期=1, S2期=2, S3期=3, S4期=4)，將入院時(shí)血清IL-27水平作為自變量，建立多項(xiàng)Logistic回歸模型，以S1期作為參照，檢驗(yàn)血清IL-27水平與慢性乙型肝炎患者肝纖維化S2期、S3期、S4期的關(guān)系。分析結(jié)果顯示，血清IL-27水平過高表達(dá)分別是慢性乙型肝炎患者肝纖維化S2期、S3期、S4期的危險(xiǎn)因素(OR>1,P<0.05), 見表2。

表2 血清IL-27水平與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期關(guān)系的多項(xiàng)Logistic回歸分析

3 討 論

隨著病情進(jìn)展，慢性乙型肝炎患者膠原、蛋白多糖等細(xì)胞外基質(zhì)在肝臟內(nèi)大量生成并沉積，逐步形成肝纖維化，破壞正常的肝臟結(jié)構(gòu)，且隨著肝纖維化程度的加重，可進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化、肝癌等嚴(yán)重疾病，嚴(yán)重危及患者生命安全。本研究中, 100例慢性乙型肝炎患者的肝纖維化病理分期結(jié)果為S1期47例、S2期29例、S3期15例和S4期9例，提示患者均存在不同程度肝纖維化。相關(guān)研究[6]指出，不同肝纖維化分期的慢性乙型肝炎患者采取的治療方案不盡相同，預(yù)后也存在較大差異。因此，探尋與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期相關(guān)的指標(biāo)，對疾病治療方案的制訂和患者預(yù)后的改善具有積極意義。

本研究初步比較不同肝纖維化分期慢性乙型肝炎患者的基線資料后發(fā)現(xiàn)，不同肝纖維化分期慢性乙型肝炎患者的PLT、ALT、AST、IL-27水平存在顯著差異，且肝纖維化分期越高的患者PLT、ALT、IL-27水平越高，而PLT水平越低。分析可能原因，慢性乙型肝炎患者早期肝纖維化不明顯，隨著肝纖維化程度加重至S3、S4期，肝內(nèi)出現(xiàn)再生結(jié)節(jié)，正常肝小葉結(jié)構(gòu)遭到破壞，導(dǎo)致肝內(nèi)血管系統(tǒng)紊亂，出現(xiàn)門靜脈高壓，引起脾功能亢進(jìn)，使得PLT生成逐漸減少[7]。ALT、AST為臨床常用的肝功能評估指標(biāo)，機(jī)體肝臟組織發(fā)生病變會引起ALT、AST水平異常升高。慢性乙型肝炎患者肝纖維化過程可引起肝細(xì)胞損傷，升高ALT、AST水平[8]。但慢性乙型肝炎患者PLT、ALT、AST水平變化易受營養(yǎng)不良、藥物、心血管疾病等因素影響，特異性不高[9], 故臨床亟需探尋其他與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期相關(guān)的特異性指標(biāo)。

研究[10]指出，慢性炎癥的長期刺激是造成慢性乙型肝炎患者肝纖維化甚至肝硬化的重要因素之一。IL-27是一種具有促炎和抑炎雙重作用的細(xì)胞因子，可通過參與c-Jun氨基末端激酶信號通路的活化，促進(jìn)炎癥狀態(tài)下的巨噬細(xì)胞表達(dá)，增加促炎因子的釋放，發(fā)揮促炎作用，也可通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子通路，促進(jìn)T細(xì)胞分泌重要的免疫調(diào)節(jié)因子、抗炎因子，從而發(fā)揮炎癥抑制作用[11-12]。相關(guān)研究[13]指出, IL-27在病毒感染引起的肝損傷中主要發(fā)揮促炎作用，可加重肝細(xì)胞炎癥反應(yīng)，促進(jìn)病情發(fā)展?；谘錓L-27的作用機(jī)制，本研究猜測慢性乙型肝炎患者血清IL-27水平可能與肝纖維化分期有關(guān)。本研究Kendall′s tau-b相關(guān)性分析結(jié)果顯示，慢性乙型肝炎患者血清IL-27水平越高，則肝纖維化分期越晚，初步證實(shí)了上述推測。相關(guān)研究[14]報(bào)道，慢性乙型肝炎患者血清IL-27水平隨著病情加重而呈現(xiàn)遞增趨勢，與本研究結(jié)果一致。分析原因, IL-27可通過促進(jìn)Th1型細(xì)胞免疫應(yīng)答而引起肝細(xì)胞炎癥反應(yīng)，在發(fā)揮清除病毒作用的同時(shí)對機(jī)體肝細(xì)胞造成間接損傷，進(jìn)而促進(jìn)慢性乙型肝炎患者病情進(jìn)展，加重肝纖維化[15]。同時(shí), IL-27在機(jī)體炎癥反應(yīng)過程中參與CD4+T細(xì)胞的免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)，促進(jìn)γ干擾素的大量分泌，而γ干擾素可作為自身免疫中的關(guān)鍵炎癥介質(zhì)，加重匯管區(qū)的炎癥反應(yīng)，進(jìn)而使慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期進(jìn)一步增加[16]。由此可見，血清IL-27平升高的慢性乙型肝炎患者機(jī)體炎癥反應(yīng)較為嚴(yán)重，可加重肝纖維化程度，增加患者死亡風(fēng)險(xiǎn)。

本研究結(jié)果還顯示，血清IL-27水平過高表達(dá)可加重慢性乙型肝炎患者肝纖維化。因此，臨床醫(yī)務(wù)工作者在慢性乙型肝炎患者入院時(shí)可通過測定血清IL-27水平反映其肝纖維化進(jìn)展情況，若患者血清IL-27水平呈現(xiàn)異常高表達(dá)，可積極給予抗炎治療，以減輕患者炎癥反應(yīng)，改善患者預(yù)后。本研究初步探討了血清IL-27與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期的關(guān)系，但未具體分析血清IL-27水平對慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期的影響，故未來還需進(jìn)一步深入探討。

綜上所述，慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期與血清IL-27水平異常表達(dá)有關(guān)，臨床醫(yī)務(wù)工作者對血清IL-27水平異常表達(dá)的慢性乙型肝炎患者應(yīng)積極采取抗炎治療措施，以改善患者預(yù)后。