短穩(wěn)桿菌對田間楊梅果蠅的防治效果

應俊杰， 應錚崢， 沈穎， 吳曉燕， 吳世軍， 張建斌*

(1.仙居縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，浙江 仙居 317300； 2.浙江省植保檢疫與農(nóng)藥管理總站，浙江 杭州 310020；3.上海盛谷光電科技有限公司，上海 松江 201607)

楊梅[Myricarubra(Lour.)S. et Zucc.]是楊梅目楊梅科常綠果樹，原產(chǎn)于中國東南部，是浙江省最主要的特色經(jīng)濟作物之一，其果實可食用部分為高度肉質(zhì)化的外果皮，呈乳頭狀密集排列，天然裸露，富含糖分和汁水，風味獨特，深受消費者喜愛。仙居縣位于浙江省東南山區(qū)，屬亞熱帶季風氣候，日照充足，土壤有機質(zhì)含量高，酸堿度適中，楊梅生產(chǎn)環(huán)境得天獨厚，全縣楊梅種植面積9 200 hm2，年產(chǎn)量7.5萬 t[1]，為中國楊梅種植第一大縣，有“中國楊梅之鄉(xiāng)”之稱。仙居楊梅一二三產(chǎn)融合聯(lián)動發(fā)展，年度總產(chǎn)值超過10億元[1]，對促進鄉(xiāng)村振興和實現(xiàn)共同富裕有著重要意義，先后榮獲國家地理標志產(chǎn)品、原產(chǎn)地保護標記注冊證書及中國馳名商標，并成功創(chuàng)建全國綠色食品原料(楊梅)標準化生產(chǎn)基地[2]，仙居楊梅觀光帶被評為中國美麗田園。

果蠅是雙翅目果蠅科約1 000余種昆蟲的統(tǒng)稱，其成蟲體型較小，身長3～4 mm，分布廣泛。危害浙江省楊梅的主要有黑腹果蠅(D.melanogaster)、斑翅果蠅(D.suzukii)、擬果蠅(D.simulans)、高橋氏果蠅(D.takahashii)、伊米果蠅(D.immigrans)和黑果蠅(D.virile)等6種[3]。果蠅世代歷期短、繁殖能力強，對成熟水果的酸香味趨性明顯，雌成蟲可將卵產(chǎn)在即將成熟的楊梅果實表面，幼蟲孵化后再鉆蛀取食果肉，造成果汁外溢，引起果肉軟化以至變褐腐爛，誘發(fā)落果，還能傳播灰腐病和褐腐病等病菌，嚴重影響楊梅的產(chǎn)量、品質(zhì)以及保質(zhì)期，對晚熟品種和高山楊梅的影響更加嚴重，有些楊梅主產(chǎn)區(qū)的被害果率高達60%以上[4]，是楊梅成熟采摘期最主要的害蟲，也是楊梅產(chǎn)業(yè)發(fā)展中的一個重要制約因素。為提高楊梅品質(zhì)，科學防控楊梅果蠅，仙居縣自2015年開始實施全縣整建制楊梅統(tǒng)防統(tǒng)治工作，從源頭保障楊梅質(zhì)量安全。截至2021年8月已登記用于防治楊梅果蠅的農(nóng)藥只有乙基多殺菌素和伊維菌素2種制劑，長期連續(xù)使用容易使果蠅產(chǎn)生抗藥性。為尋求更多防治楊梅果蠅的高效、低毒、低殘留安全農(nóng)藥，探索以菌治蟲的生物防治技術(shù)，促進統(tǒng)防統(tǒng)治與綠色防控融合，2021年5—6月進行了鎮(zhèn)江市潤宇生物科技開發(fā)有限公司生產(chǎn)的短穩(wěn)桿菌懸浮劑防治楊梅果蠅田間藥效小區(qū)試驗，以明確該藥劑對楊梅果蠅的防治效果、適宜濃度以及對楊梅的安全性等[5]。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗地點A選擇在仙居縣福音果業(yè)專業(yè)合作社(浙江省仙居縣福應街道中橋頭村)楊梅基地，土壤為洪積砂性壤土，地力等級為4，有機質(zhì)含量27.4 g·kg-1，全氮含量1.10 g·kg-1，有效磷含量0.24 g·kg-1，速效鉀含量0.29 g·kg-1，pH 5.2，供試品種為15～16 a生東魁楊梅盛結(jié)果樹。試驗地點B選擇在仙居縣果悅種植專業(yè)合作社(浙江省仙居縣皤灘鄉(xiāng)板橋村)楊梅基地，土壤為紅粉泥砂壤土，地力等級為5，有機質(zhì)含量16.8 g·kg-1，全氮含量0.78 g·kg-1，有效磷含量0.02 g·kg-1，速效鉀含量0.10 g·kg-1，pH 5.2，供試品種為7～8 a生東魁楊梅初結(jié)果樹。

兩處試驗地點分別位于仙居縣東部和西部楊梅主產(chǎn)區(qū)，具有一定的區(qū)域代表性，同一基地內(nèi)楊梅植株大小、長勢以及肥水管理等農(nóng)事操作措施基本一致，具有較好的可重復性。2個基地歷年都有楊梅果蠅發(fā)生為害，具備楊梅果蠅防治試驗的基礎(chǔ)。

供試藥劑為100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑，由鎮(zhèn)江市潤宇生物科技開發(fā)有限公司生產(chǎn)；對照藥劑為60 g·L-1乙基多殺菌素懸浮劑，由科迪華農(nóng)業(yè)科技有限責任公司生產(chǎn)。

1.2 處理設計

試驗設5個處理：處理1，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑1 000倍液(1.00×107·mL-1)；處理2，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑800倍液(1.25×107·mL-1)；處理3，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑600倍液(1.67×107·mL-1)；處理4，60 g·L-1乙基多殺菌素懸浮劑2 000倍液(30 mg·kg-1)；處理5，清水對照。每個處理4次重復，共20個小區(qū)。每個小區(qū)為4株楊梅樹，面積約133.3 m2(以300株·hm-2計)。各小區(qū)采用隨機區(qū)組排列，小區(qū)間設保護行。

1.3 試驗方法

試驗采用葉面噴施的方法，間隔7 d連續(xù)2次施藥。由于100億·mL-1短穩(wěn)桿菌為活體細菌農(nóng)藥，為避免殺菌劑干擾，試驗期間不同時使用任何殺菌劑。首次施藥時間為5月29日(楊梅采前半個月左右，果實開始進入轉(zhuǎn)色期)，晴，西南風1～2級，19～27 ℃，藥后48 h無雨；第二次施藥時間為6月5日，晴轉(zhuǎn)多云，東南風3～4級，17～29 ℃，藥后48 h無雨。施藥器械采用臺州富士特 FST-769背負式動力噴霧機(工作壓力1.5～2.5 MPa、容量25 L)，對樹冠和果實均勻常量噴霧，以葉片正反面、果實和枝條表面潤濕為標準。

1.4 調(diào)查項目

分別在第二次施藥后7 d(6月12日，小雨，24～31 ℃，楊梅采摘初期)和14 d(6月19日，小到中雨轉(zhuǎn)小雨，23～32 ℃，楊梅采摘末期)各調(diào)查1次存活的果蠅幼蟲數(shù)。在每棵調(diào)查樹的樹冠四周及內(nèi)膛的中上部隨機摘取果實10個，共計40個，當天用75%乙醇浸泡20 min后調(diào)查各果實存活的幼蟲數(shù)，計算蟲果率和防治效果。同時，觀察記錄施藥后供試藥劑對楊梅葉片、枝梢、果實及樹勢等是否有安全性影響。

藥效計算方法：蟲果率=蟲果數(shù)/調(diào)查總果數(shù)×100%；防效=(對照區(qū)蟲果率-處理區(qū)蟲果率)/對照區(qū)蟲果率×100%。

1.5 數(shù)據(jù)分析與處理

采用Excel 2003記錄、整理試驗數(shù)據(jù)，并繪制蟲口數(shù)和蟲果率圖表。數(shù)據(jù)不作轉(zhuǎn)換，采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的Duncan′s新復極差法對不同處理的果蠅防效進行統(tǒng)計分析和比較[6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 安全性

在本次試驗條件下，整個試驗期間供試藥劑處理后對楊梅葉片、枝梢、果實及樹勢等均無不良影響，安全性較高。

2.2 防治效果

從圖1來看，A、B 2個試驗地點的試驗結(jié)果基本吻合，其中試驗地點A的蟲口基數(shù)較小，與綜合使用了黏蟲色板和食源引誘劑有關(guān)。試驗結(jié)果表明，各處理施藥后7和14 d楊梅果蠅蟲口數(shù)量和蟲果率均極顯著區(qū)別于清水對照，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑對楊梅果蠅具有較好的預防控制效果，其效果隨藥劑濃度增加而上升。

圖1 不同處理對楊梅果蠅蟲口數(shù)和蟲果率的影響

從表1可知，施藥后7 d，處理B1防效僅80.0%，顯著低于處理A1，極顯著低于其他各處理，說明100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑 1 000倍液對楊梅果蠅的短期防效已趨向不穩(wěn)定，在實際生產(chǎn)中應當加大劑量使用；施藥后14 d，處理A3和B3防效與處理A4和B4無顯著性差異，說明100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑600倍液與60 g·L-1乙基多殺菌素懸浮劑2 000倍液防效相當，可以在楊梅生產(chǎn)中作為替代、輪換藥劑使用；處理B2防效顯著低于處理B4，但與處理A4無顯著性差異，處理A2顯著低于處理A4，極顯著低于處理B3和B4，說明100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑800倍液對楊梅果蠅的長期防效趨向不穩(wěn)定，為保證長期防效應適當加大劑量。

表1 不同處理對楊梅果蠅防效的影響

3 小結(jié)與討論

100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑是一種從解剖罹病死亡的害蟲尸體中分離提取的Empedobacterbrevis菌株經(jīng)過三級發(fā)酵法制造而成的新型細菌型微生物殺蟲劑[7]，由鎮(zhèn)江市潤宇生物科技開發(fā)有限公司創(chuàng)制。短穩(wěn)桿菌經(jīng)害蟲取食進入消化道，損傷中腸組織細胞，并轉(zhuǎn)移到體腔和血淋巴而感染殺死害蟲，與其他微生物殺蟲劑具有相似的毒殺機理[8]。目前短穩(wěn)桿菌懸浮劑已在茶樹、棉花、十字花科蔬菜、水稻、煙草、芋頭6種作物上登記，用于防治茶尺蠖、棉鈴蟲、小菜蛾、斜紋夜蛾、稻縱卷葉螟、煙青蟲等鱗翅目害蟲，對草地貪夜蛾也有一定防效[9-10]。近年來，有研究表明，短穩(wěn)桿菌對美洲斑潛蠅[11]、水稻潛葉蠅[12]等雙翅目害蟲也有較為理想的防治效果。武海斌等[13]試驗結(jié)果表明，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑對櫻桃果蠅防治效果達87.4%～92.3%，與本試驗結(jié)果基本相符，在實際生產(chǎn)中建議使用600倍液樹冠噴施來替代、輪換乙基多殺菌素等藥劑使用，延緩果蠅抗藥性的產(chǎn)生。同時，短穩(wěn)桿菌在一定范圍內(nèi)與茚蟲威[14]、綠僵菌[15]等其他殺蟲劑復配具有很高的增效活性，可以擴大防治譜、提升速效性和持效性，值得進一步研究討論。此外，短穩(wěn)桿菌被列入食品中農(nóng)藥最大殘留限量豁免名單[16]，具有較高的安全性，值得進一步研究其適當推遲使用對楊梅果蠅是否有更好的預防控制效果；其生產(chǎn)原料以奶粉和食用糖為主，產(chǎn)品施用無化學殘留，不會對環(huán)境造成污染。綜上所述，短穩(wěn)桿菌具有高效、安全、環(huán)境友好等特點，適用于楊梅果園防治果蠅，并能兼治楊梅卷葉蛾、蓑蛾、尺蠖等鱗翅目害蟲，可以在實際生產(chǎn)上應用，再結(jié)合果園生草栽培、懸掛色板和食誘劑誘殺、撿拾落果等綠色防控措施[17]，能夠有效減少化學農(nóng)藥的使用量，延緩害蟲抗藥性的產(chǎn)生，提升農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。

但是短穩(wěn)桿菌等活菌型生物農(nóng)藥相對于傳統(tǒng)化學農(nóng)藥在使用方法上有更高的要求，在推廣應用的過程中必須更加注重操作規(guī)范，否則容易造成農(nóng)業(yè)生產(chǎn)事故。一方面應注意施藥時的天氣，楊梅成熟前的高溫高濕天氣雖然有助于提高短穩(wěn)桿菌的藥效[18]，但是施藥后如遭遇暴曬、強降雨等天氣則會對藥效產(chǎn)生負面影響，施藥應選擇在清晨、傍晚或陰天白天進行；另一方面不可與防治細菌性病害的藥劑和強酸堿性物質(zhì)混用，而楊梅成熟前必須同時防治白腐病等掛果期病害[19-20]，如果混配吡唑醚菌酯等在實際生產(chǎn)上廣泛應用的廣譜型殺菌劑則容易導致藥效降低甚至失效；另外應慎用植保無人機，雖然機器換人的輕簡化模式是未來植保的發(fā)展趨勢[21]，但目前低空低量施藥技術(shù)對活菌型生物農(nóng)藥的影響缺乏研究，需要謹慎對待；此外，還需進一步關(guān)注生物農(nóng)藥對人體健康、害蟲天敵等方面的影響，有研究表明，短穩(wěn)桿菌會對鱗翅目害蟲的寄生型天敵斑痣懸繭蜂(Meteoruspulchricornis)造成一定影響[22-25]。