慢性牙周炎患者齦溝液中IL-35、IL-1β及IFN-γ的表達與臨床意義

劉莉 戈春城 黃婧

牙周炎是以牙周組織的進行性破壞為特點的一種疾病，據(jù)統(tǒng)計95%的牙周炎患者為慢性牙周炎［1］。慢性牙周炎在臨床上主要表現(xiàn)為附著喪失、牙周支持組織喪失等癥狀，嚴重影響著患者的日常生活。臨床試驗證實牙菌斑微生物感染是引發(fā)牙周炎的主要原因［2］。相關臨床實驗發(fā)現(xiàn)，慢性牙周炎患者的牙袋中存在約108個細菌，是導致患者機體出現(xiàn)免疫反應、產生炎性細胞因子的重要原因［3-4］。目前對慢性牙周炎的治療以消除菌斑微生物為基礎，雖取得一定的臨床效果，但有部分患者在牙周袋過深等多因素的影響下，菌斑沒有辦法清除完全，容易引起疾病復發(fā)［5］。隨著對牙周病的不斷深入認知，臨床發(fā)現(xiàn)患者齦溝液中一些細胞因子能夠反映牙周組織的炎癥狀況，可作為慢性牙周炎早期診斷的重要分子標志物［6］。對此，本文就慢性牙周炎患者齦溝液中白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、干擾素γ（Interferon γ，IFN-γ）及白介素-35（Interleukin-35，IL-35）的表達與臨床意義進行研究，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

分析2018年4月至2021年4月于恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院就診的126 例慢性牙周炎患者的病歷資料，并歸為研究組。其中男66 例，女60 例；平均年齡（37.02±4.48）歲。

納入標準：①均確診為慢性牙周炎［7］；②在本院治療，且病歷資料及隨訪資料完整無缺損；③1年內未接受任何牙周治療；④近一個月內未接受抗生素治療者。排除標準：①有血液系統(tǒng)或傳染性疾病者；②存在惡性腫瘤疾??；③心、肺、肝、腎等功能異常者；④合并精神疾病或認知障礙者；⑤明顯錯頜畸形者；⑥處于特殊時期的女性，如：妊娠期、哺乳期或生理期。

另納入同期于本院體檢的101 名健康人群，歸為對照組，其中男56 名，女45 名；平均年齡（38.12±5.18）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。本研究已通過院倫理委員批準同意，受試者已簽署知情同意書。

1.2 方法

收集患者臨床資料，包括性別、年齡、BMI、糖尿病病史及牙齦出血等。

IL-35、IL-1β 及IFN-γ 檢測方法：首先，選取受檢者4 個象限的牙齒（以第一磨牙為主）的頰側近中或遠中位點作為受試點，注意牙齒頸部需要無缺損及充填體；使用無菌棉球將受試牙的牙面及牙齦擦拭干燥，氣槍吹干，棉卷隔濕。于受試牙的齦溝或牙周袋內插入30 號吸潮紙尖，遇到輕阻力時停止，靜置30 s 后拿出，立即存入200 mL PBS 緩沖液的試管中密封，于-80℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫法檢測所有受檢者齦溝液中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 水平，試劑盒購自欣博盛生物科技有限公司，嚴格遵循說明書操作。參考值：IL-35＞8.59 pg/mL，IL-1β＞12.50 ng/mL，IFN-γ＞3.22 pg/mL，為異常升高［8］。

1.3 隨訪

研究組患者出院后隨訪6 個月（隨訪截止日期：2021年10月），按照預后判斷標準將患者分為預后良好組（無附著喪失等癥狀）與預后不良組（附著喪失1～2 mm，牙周袋深度＞4 mm）［9］。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以（±s）描述，行t檢驗；采用Logistic 回歸模型分析影響慢性牙周炎患者預后的相關危險因素；采用ROC 曲線分析檢測IL-35、IL-1β 及IFN-γ水平對慢性牙周炎的預測價值；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達水平比較

研究組患者的IL-35、IL-1β及IFN-γ表達水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達水平比較（±s）Table 1 Comparison of the expression levels of IL-35，IL-1β and IFN-γ between the 2 groups（±s）

表1 兩組IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達水平比較（±s）Table 1 Comparison of the expression levels of IL-35，IL-1β and IFN-γ between the 2 groups（±s）

組別研究組對照組t 值P 值n 126 101 IL-35（pg/mL）11.76±5.37 5.16±2.16 11.617＜0.001 IL-1β（ng/mL）23.10±5.86 6.78±2.54 26.085＜0.001 IFN-γ（pg/mL）3.34±0.86 2.33±0.78 9.162＜0.001

2.2 不同預后患者中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達水平比較

隨訪結束，預后良好患者88 例。預后良好組患者的IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達水平均低于預后不良組（P＜0.05）。見表2。

表2 不同預后患者中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達水平比較（±s）Table 2 Comparison of the expression levels of IL-35，IL-1β and IFN-γ in patients with different prognosis（±s）

表2 不同預后患者中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達水平比較（±s）Table 2 Comparison of the expression levels of IL-35，IL-1β and IFN-γ in patients with different prognosis（±s）

組別預后良好組預后不良組t 值P 值n 88 38 IL-35（pg/mL）10.26±3.22 15.23±4.85 6.772＜0.001 IL-1β（ng/mL）16.26±5.48 38.95±6.48 20.166＜0.001 IFN-γ（pg/mL）2.98±0.88 4.16±0.77 7.163＜0.001

2.3 影響慢性牙周炎患者預后的相關因素分析

吸煙史、牙齦出血、糖尿病、齦下菌斑、IL-35、IL-1β 及IFN-γ 水平升高為影慢性牙周炎患者預后的獨立危險因素（P＜0.05）。見表3。

表3 影響慢性牙周炎患者預后的相關因素分析Table 3 Analysis of related factors affecting the prognosis of patients with chronic periodontitis

2.4 IL-35、IL-1β 及IFN-γ 檢測對慢性牙周炎不良預后的預測價值

IL-35、IL-1β 及IFN-γ 三者聯(lián)合曲線下面積為0.979，大于三者單獨檢測（P＜0.05）。見表4、圖1。

表4 IL-35、IL-1β 及IFN-γ 檢測對慢性牙周炎不良預后的預測價值Table 4 The predictive value of IL-35，IL-1β and IFN-γ levels in chronic periodontitis

圖1 預測價值曲線圖Figure 1 The predictive value

3 討論

慢性牙周炎是臨床上常見的慢性口腔感染性疾病，作為一個持續(xù)性的炎性反應，容易在患者緩解期及急性發(fā)作期間反復交替，最終導致牙槽骨吸收、牙齦出血等并發(fā)癥，對患者的身心健康造成嚴重影響［10］。既往研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α、IL-6 作為炎癥介導的活性細胞因子，在慢性牙周炎患者齦溝液中水平高于健康口腔志愿者，說明兩者與牙周病的發(fā)生具有密切關系［11］。除TNF-α、IL-6 與牙周炎發(fā)生關系緊密外，牙周炎炎性反應發(fā)作時，牙周袋中的微生物或脂多糖等分泌物會通過受損上皮進入患者的血液系統(tǒng)，從而引起單核巨噬細胞活化，釋放出IL-35、IL-1β、IFN-γ 等炎性因子［12］。越來越多相關研究證實，在牙周組織的破壞機制中，細胞因子具有重要的免疫調節(jié)作用及直接介導作用［13］。

IL-35 作為一種具有免疫調節(jié)作用的抗炎因子，由調節(jié)性T 細胞分泌，能夠促進抑制性T 細胞的分泌，調節(jié)全身免疫狀態(tài)，當機體處于炎癥狀態(tài)時，IL-35 呈現(xiàn)高水平表達［14］。相關研究發(fā)現(xiàn)，慢性牙周炎及侵襲性牙周炎患者的牙齦組織中IL-35濃度明顯高于健康人群［15］。IL-1β 是一種特異性急性期炎性指標，具有促進黏附分子和趨化性細胞因子產生的作用，不但能促進造血細胞和淋巴細胞增殖活化，還會導致其他炎性因子表達和釋放［16-17］。相關文獻顯示，慢性牙周炎患者齦溝液中IL-1β 水平顯著高于正常健康人群，且以濃度依賴方式抑制牙周膜細胞的增殖，參與了牙周炎的發(fā)展［18］。IFN-γ 為Th1 細胞的中心細胞因子，臨床試驗發(fā)現(xiàn)，IFN-γ 具有抑制骨吸收的特性，能夠減少破骨細胞的分化及骨吸收量［19］。在牙周炎中，IFN-γ具有刺激巨噬細胞并減弱其活性的作用，以抑制根尖免疫炎癥反應，IFN-γ 也可誘導根尖周組織產生其他炎性因子等加速根尖的組織破壞［20］。本文研究結果顯示，慢性牙周炎患者齦溝液中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達水平均高于健康人群，該變化在預后不良患者中更為顯著，提示三者的高水平變化與慢性牙周炎的發(fā)病具有一定聯(lián)系。

進一步研究結果顯示，吸煙史、牙齦出血、糖尿病、齦下菌斑、IL-35、IL-1β 及IFN-γ 水平升高是影響慢性牙周炎預后的獨立危險因素。由此可見，影響慢性牙周炎患者預后的因素多種多樣，針對影響患者預后的因素采取針對性處理手段，對疾病后續(xù)的治療具有積極意義。ROC 曲線結果顯示，IL-35、IL-1β 及IFN-γ 三者聯(lián)合曲線下面積為0.979，大于三者單獨檢測。由此可見，IL-35、IL-1β、IFN-γ 三者聯(lián)合檢測對慢性牙周炎患者預后情況的評價具有較高準確性，可作為預測慢性牙周炎患者預后評估的標志物。

綜上所述，慢性牙周炎患者齦溝液中IL-35、IL-1β、IFN-γ 水平異常升高，聯(lián)合檢測對慢性牙周炎的診斷具有意義。