北京市豐臺區(qū)冠心病患者CYP2C19基因多態(tài)性分析

劉功文，李 敏，李世紅，邢國征，馬 莉

(北京航天總醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100076)

冠心病是指冠狀動脈因動脈粥樣硬化或伴隨痙攣所致、以心肌缺血為主要特征的心臟病[1]。冠心病發(fā)病率逐年增長[2]，而臨床上由于抗血小板藥物氯吡格雷的廣泛使用，導(dǎo)致氯吡格雷抵抗的現(xiàn)象出現(xiàn)?；颊咴谑褂寐冗粮窭字委煏r，自身對藥物吸收和代謝存在差異，而造成這種差異的一個關(guān)鍵決定性因素就是CYP2C19基因多態(tài)性[3]。臨床藥物遺傳學(xué)實(shí)施指南提出，根據(jù)個體對氯吡格雷的代謝不同，將CYP2C19基因代謝表型分為超快代謝型(*1/*17、*17/*17)、快代謝型(*1/*1)、中間代謝型(*1/*2、*1/*3、*2/*17、3/*17)和慢代謝型(*2/*2、*2/*3、*3/*3)[4]。作者對北京市豐臺區(qū)冠心病患者CYP2C19基因多態(tài)性分布特點(diǎn)及情況進(jìn)行研究，以為本地區(qū)冠心病患者的抗血小板治療個體化用藥提供更充分的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年1—12月因診斷冠心病到本院心內(nèi)科住院同時要服用藥物氯吡格雷治療的患者731例作為研究對象。其中，男400例，女331例，患者年齡為30～96歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：已明確診斷為冠心病且醫(yī)囑中需要服用藥物氯吡格雷的本地區(qū)患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：處于妊娠期或者哺乳期；患有嚴(yán)重的肝功能或腎功能障礙；患有惡性腫瘤；患有嚴(yán)重凝血功能障礙；有藥物氯吡格雷服用禁忌證。本研究通過了醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)?；颊邔Υ搜芯恐椴⑼?。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑 上海宏石熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增儀(SLAN-96P型)；西安天隆自動核酸提取儀(NP968-C型)；武漢海吉力CYP2C19基因檢測試劑盒(熒光PCR法)；西安天隆自動核酸提取純化試劑盒。

1.2.2檢測方法 抽取患者2 mL全血，以乙二胺四乙酸二鉀抗凝，利用自動核酸提取儀及配套的自動核酸提取試劑提取患者全血基因組DNA。在已配好的擴(kuò)增試劑中分別加入患者的DNA及陰、陽性對照物并進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增完成后按照基因多態(tài)性檢測結(jié)果判定表判定基因分型結(jié)果。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1患者CYP2C19基因型分布情況 731例檢測標(biāo)本中，CYP2C19的基因型*1/*1、*1/*2、*2/*2、*1/*3、*2/*3、*1/*17、*2/*17、*3/*17、*3/*3、*17/*17的頻率分別為43.78%、35.16%、9.71%、5.34%、2.87%、2.05%、0.68%、0.27%、0.14%、0。見表1。

表1 基因型分布頻率(n=731)

2.2冠心病患者CYP2C19等位基因分布情況 731例檢測標(biāo)本中CYP2C19的等位基因*1、*2、*3、*17的頻率分別為64.98%、29.14%、4.38%、1.50%，見表2。

表2 等位基因分布頻率

2.3冠心病患者CYP2C19代謝型分布情況 731例檢測標(biāo)本中CYP2C19的代謝型快代謝型(*1/*1)、中間代謝型(*1/*2、*1/*3、*2/*17、3/*17)、慢代謝型(*2/*2、*2/*3、*3/*3)、超快代謝型(*1/*17、*17/*17)的頻率分別為43.78%、41.45%、12.72%、2.05%，見表3。其中所占比例最多的是快代謝型和中間代謝型。結(jié)合表1與表3，快代謝型只包含*1/*1；中間代謝型中以*1/*2為主，其次為*1/*3，*2/*17與3/*17所占比例較少；慢代謝型中以*2/*2與*2/*3為主，*3/*3所占比例較少；超快代謝型以*1/*17為主，*17/*17極少，頻率為0。

表3 代謝表型分布頻率

2.4不同性別冠心病患者CYP2C19代謝型頻率分布 731例冠心病患者按性別分為男、女2個組。結(jié)果顯示，男、女冠心病患者CYP2C19代謝型分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.264,P=0.353)，見表4。

表4 不同性別代謝型頻率[n(%)]

2.5不同年齡段冠心病患者CYP2C19代謝型頻率分布 將731例冠心病患者按年齡分為2個組，分別是30～65歲和大于65～100歲。結(jié)果顯示，不同年齡的冠心病患者CYP2C19代謝型分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.028,P=0.567)，見表5。

表5 不同年齡段代謝型頻率分布[n(%)]

3 討 論

氯吡格雷是無活性的藥物，其在小腸吸收后需要經(jīng)肝CYP450酶系兩步代謝才能轉(zhuǎn)化為活性狀態(tài)，進(jìn)而發(fā)揮作用[3]。由于CYP2C19基因在此過程中起到重要作用，所以CYP2C19基因多態(tài)性會造成氯吡格雷在不同患者體內(nèi)吸收和代謝出現(xiàn)差異，呈現(xiàn)出不同的治療效果。CYP2C19基因位于人類染色體中的第10號染色體，其含9個外顯子和8個內(nèi)顯子，可以編碼氨基酸490個，其編碼的蛋白酶位于肝微粒體內(nèi)[5]?；蛐?1/*1為CYP2C19基因的野生型，其所編碼的酶有完整活性，使氯吡格雷在患者體內(nèi)能正常吸收和代謝，從而達(dá)到治療效果。等位基因*2和*3普遍存在于我國人群中，其編碼的酶活性降低，使氯吡格雷在患者體內(nèi)的吸收和代謝減弱，影響治療效果[6]。等位基因*17可增加酶的活性，加快氯吡格雷在患者體內(nèi)吸收和代謝速度，增強(qiáng)抗血小板功能，但容易發(fā)生出血或出血不止等現(xiàn)象。因此，應(yīng)該根據(jù)不同的CYP2C19基因個體給予合適劑量的氯吡格雷，實(shí)現(xiàn)真正的個體化治療。

對本地區(qū)731例冠心病患者進(jìn)行CYP2C19基因檢測，結(jié)果顯示，發(fā)生突變的等位基因*2、*3、*17的頻率分別為29.14%、4.38%、1.50%。其中等位基因*2和*3的頻率分別為29.14%和4.38%，與文獻(xiàn)中報(bào)道的亞洲人CYP2C19*2和CYP2C19*3頻率分布(29%～35%[7]和2%～9%)相符[1]。CYP2C19基因型檢測結(jié)果顯示*1/*1和*1/*2的頻率所占比例較多，分別為43.78%(320/731)和35.16%(257/731)，與相關(guān)文獻(xiàn)得出的結(jié)論相符[8]。CYP2C19代謝型檢測結(jié)果顯示，快代謝型、中間代謝型、慢代謝型和超快代謝型的頻率分別為43.78%、41.45%、12.72%、2.05%。快代謝型患者的藥物代謝較快，不良反應(yīng)發(fā)生情況相對較少，但是藥物在慢代謝型患者體內(nèi)代謝相對較慢，使得藥物在體內(nèi)蓄積，從而導(dǎo)致不良反應(yīng)發(fā)生[9]。因此，對于快代謝及特快代謝型患者，可給予標(biāo)準(zhǔn)劑量的氯吡格雷治療；對于超快代謝型患者，必要時可考慮降低氯吡格雷的劑量；對于中間型患者，大部分情況可以按照標(biāo)準(zhǔn)劑量治療，但是需要密切關(guān)注；對于慢代謝型患者，則可通過增加劑量或者改用其他二磷酸腺苷(ADP)受體拮抗劑(如替格瑞洛)來代替[10]。本研究通過對本地區(qū)不同性別和不同年齡段冠心病患者CYP2C19代謝型分布頻率進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)CYP2C19代謝型分布頻率與性別、年齡無關(guān)，這與其他文獻(xiàn)結(jié)果相似[11]。其他文獻(xiàn)中還發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)和民族的患者CYP2C19代謝型分布頻率有較大差異[12]，但是在本次研究中未對其進(jìn)行分析研究。本研究中標(biāo)本數(shù)量只有731例，不能代表整個豐臺區(qū)的分布趨勢，可能會造成一定的偏差，后續(xù)研究中有待繼續(xù)補(bǔ)充更多數(shù)據(jù)和內(nèi)容。

本研究通過對北京市豐臺區(qū)部分冠心病患者CYP2C19基因的檢測結(jié)果進(jìn)行了研究分析，可為該地區(qū)冠心病患者抗血小板治療的個體化用藥提供更可靠的依據(jù)。