基于整合藥理學(xué)策略及藥效驗(yàn)證探討交泰丸抗心律失常分子機(jī)制＊

陳金紅，劉志超，樊博雅，梁嘉鈺，鄧芳雋，李曉鳳，叢紫東，杜武勛＊＊

（1. 濰坊醫(yī)學(xué)院康復(fù)醫(yī)學(xué)院 山東 261053；2. 天津中醫(yī)藥大學(xué)研究生院 天津 301617；3. 天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院 天津 300150）

1 引言

心律失常是一種由心臟電傳導(dǎo)系統(tǒng)引起的心臟電生理活動(dòng)異常，從而導(dǎo)致心臟興奮頻率或節(jié)律異常的疾病，主要表現(xiàn)有心悸、心慌、胸悶、頭暈等[1-2]。心律失常的出現(xiàn)常提示潛在的心臟疾病，或是非心臟病變。當(dāng)今社會(huì)隨著生活和工作壓力增大，心律失常發(fā)病率呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)，病死率也日漸攀升[3]。流行病學(xué)調(diào)查顯示，通過(guò)24 h 或48 h 動(dòng)態(tài)心電圖檢測(cè)，室早的檢出率高達(dá)40%-75%[4]。此外，2016 年、2017 年和2018 年心房顫動(dòng)導(dǎo)管消融占總消融手術(shù)的比例分別為23.1%、27.3%和31.9%[5]。近幾十年來(lái)，雖然射頻消融術(shù)等非化學(xué)藥物治療方法不斷涌現(xiàn)，但藥物治療仍然是最常用的治療方法。然而，抗心律失常藥物的致心律失常作用亦不容忽視[3]，其間，中醫(yī)藥因其療效顯著，且不良反應(yīng)少而在抗心律失常方面發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用[6]。

心律失常屬于中醫(yī)“心悸”“怔忡”“驚悸”范疇，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)將心悸分為心虛膽怯證、心脾兩虛證、陰虛火旺證、心陽(yáng)不振證、水飲凌心證、瘀阻心脈證、痰火擾心證等證型[7]。交泰丸為心腎不交證的代表方劑，其中黃連苦寒，入心經(jīng)，降心火；肉桂辛熱，入腎經(jīng)，暖腎水，如此交通心腎，治療心火燔盛、腎陽(yáng)不足導(dǎo)致的怔忡、心悸、失眠等疾病?！端貑?wèn)·六微旨大論》言：“出入廢則神機(jī)化滅，升降息則氣立孤危。故非出入，則無(wú)以生長(zhǎng)壯老已；非升降，則無(wú)以生長(zhǎng)化收藏?！薄吧党鋈?，無(wú)器不有?！笨梢?jiàn)氣機(jī)的升降出入是生命活動(dòng)的基本形式，如肺主肅降，腎主納氣，脾主升清，胃主降濁，心火下潛，腎水上騰，肝氣升發(fā)，膽汁降泄等等。由于升降有序，出入衡常，故能動(dòng)靜相召，上下相臨，陰陽(yáng)交泰，氣血和暢，生生化化，品物咸章?！耙粴庵芰鳌崩碚撌屈S元御學(xué)術(shù)思想的高度概括，《四圣心源》是其在精熟《黃帝內(nèi)經(jīng)》、《難經(jīng)》、《傷寒論》、《金匱要略》等經(jīng)典基礎(chǔ)上，結(jié)合自身臨證經(jīng)驗(yàn)著成的代表著作?！端氖バ脑础ど耋@》[8]有：“神發(fā)于心而交于腎，則神清而不搖，神不交精，是生驚悸，其原由于膽胃之不降?！逼庾笊?，膽火右降，則上下水火相濟(jì)，陰陽(yáng)和合，神清而心寧。若脾陷胃逆，相火浮動(dòng)，灼傷心陰，致心火外泄，腎水不溫，使上下分崩，一氣不能循環(huán)周流，終致心神被擾，發(fā)為心悸。由此看來(lái)，心腎不交是導(dǎo)致心律失常的重要機(jī)制，以黃連-肉桂為代表的藥對(duì)組合，其意在“心”與“腎”水火陰陽(yáng)的相互交通，清上溫下，使心火下潛，腎陽(yáng)固藏，從而使心神有根而得以養(yǎng)。

2 研究思路與方法

整合藥理學(xué)是揭示多組分藥物的多靶標(biāo)作用特征背后的復(fù)雜藥理機(jī)制的方法之一[9]。眾所周知，中藥復(fù)方因其具有多種成分，可通過(guò)多種靶向作用發(fā)揮其臨床功效，因此具有多種藥理作用[10]。導(dǎo)師杜武勛教授多年來(lái)致力于氣化理論及該理論指導(dǎo)下的對(duì)心律失常治療作用的機(jī)制研究，在中藥臨床有效性的基礎(chǔ)上，深入開(kāi)展中藥復(fù)方對(duì)心律失常作用機(jī)制的挖掘和評(píng)價(jià)。為了系統(tǒng)的從分子水平揭示交泰丸治療心腎不交型心律失常的作用機(jī)制，建立藥物-靶標(biāo)-疾病之間的模塊關(guān)聯(lián)，本文通過(guò)中醫(yī)藥整合藥理學(xué)研究平臺(tái)，從微觀生物層面篩選交泰丸抗心律失常的關(guān)鍵活性成分和靶標(biāo)，對(duì)交泰丸治療心律失常的分子機(jī)制進(jìn)行探討及分析，并結(jié)合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分析其在關(guān)鍵藥效機(jī)制上相關(guān)分子水平，以闡釋其新的研究方向（圖1）。

3 研究與分析

3.1 基于TCMIP的交泰丸抗心律失常分子機(jī)制研究

3.1.1 數(shù)據(jù)庫(kù)的建立

利用整合藥理學(xué)平臺(tái)[11]（http://www.tcmip.cn/）的中藥活性成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)，結(jié)合2015年版《中國(guó)藥典》規(guī)范藥材命名及成分名稱，進(jìn)行虛擬數(shù)據(jù)資料建庫(kù)。檢索“黃連”“肉桂”，保留活性成分與靶點(diǎn)，自主命名數(shù)據(jù)，作為備用。

3.1.2 中藥化學(xué)成分來(lái)源及靶標(biāo)預(yù)測(cè)

通過(guò)TCMIP 中“中藥靶標(biāo)預(yù)測(cè)及功能分析”模塊及手工檢索目標(biāo)藥物活性成分，收集交泰丸中黃連、肉桂的化學(xué)成分，并將其二維結(jié)構(gòu)（mol）與DrugBank（https://www. drugbank. ca/）數(shù)據(jù)庫(kù)中認(rèn)證藥物（approved）進(jìn)行化學(xué)指紋比對(duì)，利用Tanimoto 系數(shù)對(duì)結(jié)果進(jìn)行評(píng)分，選定評(píng)分＞0.8 的作為交泰丸的潛在機(jī)制靶標(biāo)[12]。

3.1.3 疾病、證候靶標(biāo)預(yù)測(cè)

以“Arrhythmia”為疾病關(guān)鍵詞，在GeneCard（https://www.genecards.org/）數(shù)據(jù)庫(kù)、DisGENET 數(shù)據(jù)（https://www. disgenet. org/）、DrugBank 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（https://www.drugbank.ca/）、OMIM 數(shù)據(jù)庫(kù)（https://omim.org/）檢索疾病相關(guān)靶標(biāo)，利用Uniprot 數(shù)據(jù)庫(kù)（https://www.uniprot.org/uniprot/）轉(zhuǎn)換蛋白名稱，獲取基因名稱。最后利用Microsoft Office Excel 進(jìn)行合并去重，建立疾病數(shù)據(jù)庫(kù)。

再以“Arrhythmia”作為疾病關(guān)鍵詞錄入整合藥理學(xué)平臺(tái)疾病/證候靶標(biāo)數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行檢索，證素輸入：“心悸”“心煩”“頭暈”“耳鳴”“不寐”“舌紅少苔”“脈細(xì)數(shù)”等關(guān)鍵詞，提取相應(yīng)證候靶標(biāo)信息。

3.1.4 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建、關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)可視化及分析

通過(guò)整合藥理學(xué)平臺(tái)的網(wǎng)絡(luò)分析模塊蛋白互相作用網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?，選取中藥靶點(diǎn)-疾病基因的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)（hubs），作為交泰丸活性成分的潛在靶點(diǎn)。通過(guò)TCMIP 分析平臺(tái)對(duì)關(guān)鍵靶基因進(jìn)行GO 功能富集分析和KEGG 富集分析，選取統(tǒng)計(jì)值P 值排名前20 的通路，構(gòu)建完整的“中藥-證素-疾病-靶標(biāo)-通路”多維網(wǎng)絡(luò)。利用Jvenn（http://www.bioinformatics.com.cn/static/others/jvenn/example.html）在線繪圖[13]，獲取韋恩圖。

3.1.5 結(jié)果

（1） 交泰丸化學(xué)成分、靶標(biāo)預(yù)測(cè)結(jié)果及分析

TCMIPV2.0 平臺(tái)對(duì)黃連、肉桂化學(xué)成分的分析結(jié)果：黃連共收集了14個(gè)化學(xué)成分,包括小檗堿（Berberine）、木蘭花堿（Magnoflorine）、黃連堿（Jatrorrhizine）等，其中潛在靶標(biāo)212 個(gè)。肉桂共收集了9 個(gè)化學(xué)成分，為肉桂醛（Cinnamaldehyde）、丁香酚（Eugenol）、棕櫚油酸（Zoomaric acid）等，其中潛在靶標(biāo)61個(gè)。

對(duì)黃連、肉桂候選靶標(biāo)進(jìn)行基因功能分析和通路富集分析，發(fā)現(xiàn)其具有的功能信息主要有調(diào)節(jié)胺的運(yùn)輸、對(duì)含氧化合物的反應(yīng)、腺苷酸環(huán)化酶調(diào)節(jié)性G 蛋白耦聯(lián)受體信號(hào)通路、兒茶酚胺分泌的調(diào)節(jié)、血清素受體信號(hào)通路、血液循環(huán)等。富集到的通路主要有神經(jīng)活性配體-受體相互作用、鈣信號(hào)通路、cAMP 信號(hào)通路、花生四烯酸代謝、葉酸生物合成等。

（2） 心律失常疾病靶標(biāo)及相關(guān)基因

研究者將心律失常疾病靶標(biāo)合并去重后共收集到靶標(biāo)850個(gè)。其中與交泰丸密切相關(guān)的共同靶向基因共計(jì)9個(gè)，如韋恩圖（圖2）。這些靶點(diǎn)的作用機(jī)制主要從調(diào)控氧化應(yīng)激[14]、電壓門(mén)控K+通道[15]、電壓門(mén)控Na+通道[16]、內(nèi)側(cè)前額葉皮層（mPFC）的激活[17]、蛋白激酶A（PKA）[18]、維持結(jié)締組織合成與降解之間的平衡[19]、調(diào)節(jié)鈣離子水平[20]等共同調(diào)節(jié)作用下發(fā)揮作用。

圖2 心律失常疾病靶標(biāo)及相關(guān)基因韋恩圖

（3） 心律失常心腎不交證證素靶標(biāo)

根據(jù)中醫(yī)學(xué)對(duì)心腎不交證的描述，劃分證素包括心悸、心煩、頭暈、耳鳴、不寐、舌紅少苔、脈細(xì)數(shù)等。其中心悸、心煩包含56 個(gè)相關(guān)靶標(biāo)，頭暈、耳鳴、不寐包含111 個(gè)相關(guān)靶標(biāo)，舌紅少苔、脈細(xì)數(shù)包含21 個(gè)相關(guān)靶標(biāo)。

（4） 交泰丸治療心律失常的GO富集分析

對(duì)交泰丸治療心律失常的候選靶標(biāo)進(jìn)行基因功能分析，羅列出P值前20位的條目（表1），其基因功能主要包括基因表達(dá)的正調(diào)控、MAPK 級(jí)聯(lián)激活、SRP 依賴的共翻譯蛋白靶向膜、細(xì)胞因子介導(dǎo)的信號(hào)通路、調(diào)節(jié)心室心肌細(xì)胞動(dòng)作電位、通過(guò)心臟傳導(dǎo)調(diào)節(jié)心率等方面。

表1 交泰丸治療心律失常的候選靶標(biāo)的GO富集分析

（5） 交泰丸治療心律失常的KEGG富集分析

對(duì)交泰丸治療心律失常的候選靶標(biāo)進(jìn)行KEGG富集通路分析，羅列出P值前20位的條目（表2），可見(jiàn)其主要與促紅細(xì)胞生成素激活RAS、下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、RAF激活、酪氨酸激酶受體2（tyrosine kinase receptor 2，Tie2）信號(hào)通路、樹(shù)突狀細(xì)胞膜表面的一種新型凝集素受體（dendritic-cell specific ICAM-3 grabbing no nintegrin，CD209（DC-SIGN））信號(hào)、通過(guò)干細(xì)胞因子-酪氨酸激酶受體（stem cell factor，SCF- tyrosine kinase receptor，KIT）發(fā)出信號(hào)等通絡(luò)相關(guān)。

表2 交泰丸治療心律失常候選靶標(biāo)的KEGG富集分析

（6） 交泰丸治療心律失常的“中藥-證素-疾病-靶標(biāo)-通路”可視化多維關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)

應(yīng)用整合藥理學(xué)平臺(tái)V2.0“中醫(yī)藥關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)挖掘”功能，選擇“疾病-證候-方劑”模塊，構(gòu)建可視化多維關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)（圖3），不同顏色的節(jié)點(diǎn)是按照基因間相互作用的緊密度進(jìn)行聚類。由圖3 可以看出，交泰丸中黃連-肉桂藥對(duì)作用于59 個(gè)潛在靶標(biāo)，其通過(guò)HRAS、TP53、VHL、PIK3CA、CASR、CREBBP、RAF1、JAK2等核心靶標(biāo)參與了促紅細(xì)胞生成素激活RAS、下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、RAF 激活、Tie2 信號(hào)通路、CD209（DCSIGN）信號(hào)、通過(guò)SCF-KIT 發(fā)出信號(hào)等27 個(gè)信號(hào)通路。

圖3 交泰丸治療心律失常的“中藥-證素-疾病-靶標(biāo)-通路”可視化多維網(wǎng)絡(luò)關(guān)聯(lián)

3.2 交泰丸通過(guò)調(diào)控RAS 系統(tǒng)及交感神經(jīng)活性干預(yù)心律失常的藥效研究

3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與動(dòng)物模型建立

SPF 級(jí)健康雄性SD 大鼠32 只（200-240 g），由中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)SCXK（京）2019-0010，在天津市放射研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心飼養(yǎng)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（N）、模型組（M）、交泰丸組（J）、陽(yáng)性藥組（Meto）4組，每組8只。大鼠給藥劑量按照成人口服劑量進(jìn)行等效劑量換算[20]：N 組及M 組按10 mL/kg/天灌胃0.9%生理鹽水；J 組按1.7 g/kg/天灌胃黃連（15 g）肉桂（1.5 g）水煎液；Meto 組按2.57 mg/kg/天灌胃酒石酸美托洛爾片（倍他樂(lè)克）水溶液。各組于造模前14 天開(kāi)始按10 mL/kg/天灌胃給藥。最后1 次給藥后30 min，除N 組外，其余各組大鼠稱重，用20%烏拉坦5 mL·kg-1（1 g·kg-1）腹腔注射麻醉，對(duì)大鼠進(jìn)行心電圖監(jiān)測(cè)。記錄基線心電圖10 min 后，以32 μg·kg-1體重尾靜脈推注腎上腺素（Epi）[22]，制造心律失常模型，繼續(xù)監(jiān)測(cè)心電圖10min。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）、兒茶酚抑素（CST）、神經(jīng)肽Y（NPY），試劑盒均購(gòu)買于天津津科生物科技有限公司。

3.2.2 樣本采集

心電圖監(jiān)測(cè)結(jié)束后，各組大鼠經(jīng)眼球后靜脈叢取靜脈血0.5 mL，置于肝素化EP 管中，4℃，3000 rpm 下離心10 min，分離血漿，ELISA 法測(cè)定AngⅡ、CST、NPY。

3.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS26.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.2.4 結(jié)果

（1） 交泰丸抑制Epi誘導(dǎo)心律失常的AngⅡ高表達(dá)

與對(duì)照組相比，模型組大鼠AngⅡ明顯升高（P＜0.01）。交泰丸預(yù)處理后，AngⅡ表現(xiàn)出明顯回調(diào)趨勢(shì)（P＜0.01）。倍他樂(lè)克預(yù)處理后，AngⅡ水平下降（P＜0.05）。交泰丸組、陽(yáng)性藥組與對(duì)照組相比已無(wú)明顯差異（P＞0.05），表明兩組治療后AngⅡ趨于正常范圍，且交泰丸組療效最明顯。

（2） 交泰丸抑制Epi誘導(dǎo)心律失常的CST高表達(dá)

與對(duì)照組相比，模型組大鼠CST 明顯升高（P＜0.01）。交泰丸預(yù)處理后，CST 水平呈下降趨勢(shì)（P＜0.05）。倍他樂(lè)克預(yù)處理后，CST 水平回調(diào)（P＜0.05）。交泰丸組與對(duì)照組相比已無(wú)明顯差異（P＞0.05），表明交泰丸治療后CST趨于正常范圍，療效最明顯。

（3） 交泰丸抑制Epi誘導(dǎo)心律失常的NPY高表達(dá)

與對(duì)照組相比，模型組大鼠NPY 明顯升高（P＜0.01）。交泰丸預(yù)處理后，NPY 水平呈下降趨勢(shì)（P＜0.05）。但陽(yáng)性藥組并未表現(xiàn)出明顯回調(diào)（P＞0.05）。交泰丸組與對(duì)照組相比已無(wú)明顯差異（P＞0.05），表明交泰丸治療后NPY趨于正常范圍（表3、圖4）。

圖4 交泰丸抑制Epi誘導(dǎo)心律失常的AngⅡ、CST、NPY高表達(dá)

表3 交泰丸抑制Epi誘導(dǎo)心律失常的AngⅡ、CST、NPY高表達(dá)

4 討論

黃連已被廣泛應(yīng)用于各種心腦血管系統(tǒng)疾病中[23]，其成分小檗堿的抗心律失常作用在1989 年被首次報(bào)道[24]。研究發(fā)現(xiàn)，黃連中的小檗堿是有效的抗氧化劑和消炎劑，它可以抑制NOX 2,4的過(guò)表達(dá)，并在炎性刺激下降低巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中ROS 的產(chǎn)生[25-26]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，肉桂可以通過(guò)增加冠脈流量改善冠脈循環(huán)及心肌營(yíng)養(yǎng)狀況，對(duì)冠心病、心律失常等心血管疾病有防治作用[27]。Hwa 等[28]從肉桂中鑒定并提取化合物2-甲氧基肉桂醛（2-MCA），通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)該化合物能改善成年大鼠缺血再灌注模型的局部缺血/再灌注（I/R）損傷，其機(jī)制可能是通過(guò)降低TNF-α 活化的內(nèi)皮細(xì)胞中血管細(xì)胞黏附分子1（VCAM-1）的表達(dá)以及誘導(dǎo)血紅素氧合酶1（HO-1）的生成來(lái)實(shí)現(xiàn)的。同時(shí)，交泰丸可以調(diào)控大鼠血液和組織中神經(jīng)遞質(zhì)的含量，如促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）、腎上腺分泌的皮質(zhì)酮（CORT）、5-羥色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲腎上腺素（NE）和腎上腺素（E）[29-30]，這可能是其實(shí)現(xiàn)交通心腎的作用機(jī)制之一。此外，本次整合藥理學(xué)結(jié)果表明，交泰丸不僅可以調(diào)節(jié)兒茶酚胺的分泌，且與腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）關(guān)聯(lián)密切，RAS是體內(nèi)重要的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)系統(tǒng)之一，對(duì)心血管系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定有重要影響[31]。血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）是RAS 的主要活性成分，局部增多的血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）直接或間接刺激交感神經(jīng)，增強(qiáng)對(duì)冠脈和心肌的收縮作用，增加心肌耗氧量，以致能量耗竭，細(xì)胞內(nèi)鈣超載，造成心律失常[32]。不少研究證據(jù)表明，抑制RAS 系統(tǒng)可以降低心律失常的風(fēng)險(xiǎn)[33-35]。

基于上述結(jié)果，本研究以RAS 系統(tǒng)關(guān)鍵活性成分AngⅡ，以及交感神經(jīng)活性抑制因子CST、神經(jīng)遞質(zhì)NPY 為觀察指標(biāo)，初步驗(yàn)證交泰丸干預(yù)心律失常的藥效途徑。AngⅡ可誘發(fā)室性心律失常，參與房顫的發(fā)生與維持[36]。多項(xiàng)研究表明，心律失?；颊哐獫{和心臟AngⅡ濃度均較高，阻斷體內(nèi)AngⅡ生成是緩解心律失常重要環(huán)節(jié)之一[37-39]。AngⅡ作用于AT1 受體，通過(guò)激活重要靶點(diǎn)PKC抑制心肌細(xì)胞Ikr/HERG，對(duì)心臟電活動(dòng)和心肌肥厚心衰的發(fā)展產(chǎn)生作用[40]。還有研究發(fā)現(xiàn)AngII 可以減小Ito電流密度，使心肌復(fù)極化變緩，最終導(dǎo)致心律失常[41]，多項(xiàng)研究都證實(shí)了AngII是心律失常病理生理改變的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠推注腎上腺素后血漿AngⅡ明顯升高，交泰丸相比陽(yáng)性藥可以更好的抑制這一現(xiàn)象。CST是一種可有效抑制兒茶酚胺釋放與分泌的內(nèi)分泌神經(jīng)肽類物質(zhì)，隨著交感神經(jīng)系統(tǒng)激活而釋放增加，通過(guò)調(diào)節(jié)心臟副交感和交感神經(jīng)活性，起到調(diào)整心臟功能的作用[42-44]。人類心室肌的神經(jīng)纖維主要以交感神經(jīng)為主，交感神經(jīng)系統(tǒng)活性的升高是室性心律失常發(fā)生的重要環(huán)節(jié)[45-47]。交感神經(jīng)興奮時(shí)，心肌興奮性增加，進(jìn)而提高心率及血液中兒茶酚胺含量，相關(guān)研究表明CST通過(guò)作用于孤束核的突觸發(fā)揮調(diào)節(jié)自主神經(jīng)活性作用，從而改善壓力感受器敏感性和心率變異性[48]。CST的異常改變可通過(guò)調(diào)節(jié)影響心臟功能而加重房顫等心律失常的發(fā)病率[49-50]。本項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠推注腎上腺素后血漿CST 明顯升高，說(shuō)明交感神經(jīng)被顯著激活，而交泰丸組CST 更接近正常組水平，證明其在病理情況下對(duì)交感神經(jīng)有抑制作用。NPY 是交感神經(jīng)末梢分泌的神經(jīng)遞質(zhì)之一，廣泛分布于神經(jīng)系統(tǒng)中，與精神類相關(guān)疾病密切相關(guān)，其作用于突觸前膜Y1、Y2 受體，進(jìn)而影響心肌自律性，其中主要表現(xiàn)為抑制迷走神經(jīng)興奮時(shí)減慢心率的作用[51-52]。有研究提示血漿NPY 水平是影響心衰患者死亡率的獨(dú)立因素[53]。本項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠推注腎上腺素后血漿NPY 明顯升高，提示腎上腺素導(dǎo)致交感神經(jīng)系統(tǒng)過(guò)度興奮，經(jīng)交泰丸治療后，NPY 水平明顯回調(diào)，說(shuō)明其對(duì)自主神經(jīng)系統(tǒng)有自穩(wěn)調(diào)節(jié)功能。

上述幾種物質(zhì)不是單一作用，而是相互聯(lián)系。如AngII 與受體結(jié)合后可通過(guò)交感神經(jīng)末梢的正反饋使NPY 分泌增加，交感神經(jīng)興奮釋放NPY 后，又可誘導(dǎo)CST 的生成[54]。RAS 與交感神經(jīng)系統(tǒng)是心血管疾病中的重要調(diào)節(jié)機(jī)制和維持動(dòng)態(tài)自穩(wěn)的核心調(diào)控系統(tǒng)，通過(guò)調(diào)節(jié)RAS 系統(tǒng)又可以對(duì)交感神經(jīng)的激活產(chǎn)生影響[55]。近年來(lái)越來(lái)越多的證據(jù)表明兩者在心律失常等心血管疾病診斷治療中的作用[56-57]，為心血管疾病的監(jiān)測(cè)與調(diào)控提供了新思路。

5 結(jié)論

近年來(lái)，心律失常成為心源性猝死發(fā)生的主要因素之一[58]。導(dǎo)師杜武勛教授在臨證診療中以氣化理論為基礎(chǔ)，以交泰丸為底方，對(duì)心律失常具有較好的臨床療效。本研究借助中醫(yī)藥整合藥理學(xué)研究平臺(tái)V2.0 和國(guó)際通用靶標(biāo)、基因數(shù)據(jù)庫(kù)，結(jié)合了中藥成分、證候要素、疾病靶標(biāo)的多層次研究，較為完善的完成了中藥-證素-疾病-靶標(biāo)-通路的銜接性研究，從分子角度闡釋中藥復(fù)方療效內(nèi)涵。同時(shí)，通過(guò)腎上腺素誘導(dǎo)大鼠制造心律失常模型，進(jìn)一步證實(shí)交泰丸通過(guò)調(diào)控RAS 系統(tǒng)與交感神經(jīng)系統(tǒng)干預(yù)心律失常的分子機(jī)制，為臨床診療提供思考方向和依據(jù)。