慢性心功能不全病人PRA、CyP-A、sST2的表達(dá)及其相關(guān)性

楊 婷，趙茜茜，王 珅，崔曉博，李金嶺

慢性心功能不全是心血管疾病終末期病人的一種狀態(tài)，且病人5年內(nèi)的病死率達(dá)50%，優(yōu)化治療可促進(jìn)病人臨床癥狀改善，減少病人死亡[1]。可溶性生長(zhǎng)刺激表達(dá)因子-2(sST2)作為一種白細(xì)胞介素-1家族中重要成員，一旦心肌細(xì)胞發(fā)生機(jī)械性刺激，成纖維負(fù)荷發(fā)生變化，會(huì)促進(jìn)大量的結(jié)合性生長(zhǎng)刺激表達(dá)因子-2(ST2L)分泌，ST2L與白細(xì)胞介素-33(IL-33)特異性結(jié)合后，下游通路被激活，參與心肌重塑過(guò)程，對(duì)心肌起到一定的保護(hù)作用[2-3]。親環(huán)素(CyP)能抑制細(xì)胞免疫，在蛋白質(zhì)運(yùn)輸中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，對(duì)炎性細(xì)胞聚集有一定的誘導(dǎo)作用，在血管損傷中具有一定的作用，在動(dòng)脈粥樣硬化中起到至關(guān)重要的作用，CyP-A屬于親環(huán)素中關(guān)鍵蛋白[4]。腎素活性(PRA)能有效反映機(jī)體腎交感神經(jīng)活性狀況，研究指出，腎素-血管緊張素系統(tǒng)在心力衰竭發(fā)病中至關(guān)重要[5]。本研究探討血清PRA、CyP-A、sST2水平與慢性心功能不全發(fā)病的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年1月—2020年12月在我院就診的慢性心功能不全病人61例作為研究組，其中男31例，女30例；年齡50～84歲；體質(zhì)指數(shù)(BMI)21～26 kg/m2。選取同時(shí)期我院年齡相匹配健康體檢者40名為正常組，其中男18名，女22名；年齡52～85歲；BMI 20～27 kg/m2。兩組研究對(duì)象一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

研究組納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《ACC/AHA成人慢性心功能不全診療指南》[6]中的診斷標(biāo)準(zhǔn)；初次在我院就診病人；經(jīng)過(guò)心臟超聲、冠狀動(dòng)脈造影、心電圖等確診；病人及其家屬均知情并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：心律失常、感染等病人；合并惡性腫瘤、自身免疫系統(tǒng)疾病、肝損傷病人；精神異常病人。本研究獲得我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 血脂指標(biāo)檢測(cè) 采集兩組研究對(duì)象空腹肘部靜脈血3 mL，2 000 r/min離心處理5 min，獲取血清后-20 ℃保存。通過(guò)全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)兩組總膽固醇(total cholesterol，TC)、載脂蛋白A(Apo A)、載脂蛋白B(Apo B)、高密度脂蛋白膽固醇(high desity cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low desity cholesterol，LDL-C)、三酰甘油(total triglyceride，TG)水平。

1.2.2 心功能指標(biāo)檢測(cè) 通過(guò)彩色多普勒超聲(ViViD3 型，GE公司提供)檢測(cè)兩組左室舒張末期內(nèi)徑(left ventricular end diastolic diameter，LVEDD)、左室收縮末期內(nèi)徑(left ventricular end systolic diameter，LVESD)、左房?jī)?nèi)徑(left atrial inner diameter，LAD)、室間隔厚度(interventricular septal thickness，IVST)及左室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction，LVEF)。

1.2.3 PRA、CyP-A、sST2水平檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)PRA、CyP-A、sST2水平將提前稀釋好的血液標(biāo)本100 μL加入相應(yīng)的微孔板反應(yīng)孔中，第1孔只加樣品稀釋液為零孔，混合均勻，在37 ℃下處理90 min，甩去孔內(nèi)液體，吸干水分；將準(zhǔn)備好的抗體加入到每孔中0.1 mL，在37 ℃下處理60 min，空白孔不加底物四甲基聯(lián)苯胺(TMS)；孔內(nèi)液體甩出后，每孔中滴加0.01 mol/L磷酸緩沖鹽溶液(PBS)，浸泡2 min后，孔內(nèi)液體甩出，水分吸干；每孔滴加90 μL 四甲基硅烷(TMS)，避光20 min；每孔中加入90 μL TMS終止液，即藍(lán)色變?yōu)辄S色。

1.3 心功能分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 參考美國(guó)紐約心臟病協(xié)會(huì)(NYHA)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[7]，將心功能分為Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)、Ⅳ級(jí)。

2 結(jié) 果

2.1 兩組臨床資料比較 兩組性別、年齡、BMI、血脂、血壓等指標(biāo)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。研究組LVEDD、LVESD、LAD、IVST水平高于正常組(P<0.05)，LVEF水平低于正常組(P<0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 兩組臨床資料比較

2.2 兩組PRA、CyP-A、sST2水平比較 研究組PRA、CyP-A、sST2水平高于正常組(P<0.05)。詳見(jiàn)表2。

表2 兩組PRA、CyP-A、sST2水平比較(±s)

2.3 不同心功能分級(jí)慢性心功能不全病人PRA、CyP-A、sST2水平比較 Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)、Ⅳ級(jí)病人PRA、CyP-A、sST2水平均高于Ⅰ級(jí)病人(P<0.05)；Ⅲ級(jí)、Ⅳ級(jí)病人PRA、CyP-A、sST2水平高于Ⅱ級(jí)病人(P<0.05)；Ⅳ級(jí)病人PRA、CyP-A、sST2水平高于Ⅲ級(jí)病人(P<0.05)。詳見(jiàn)表3。

表3 不同心功能分級(jí)慢性心功能不全病人PRA、CyP-A、sST2水平比較(±s)

2.4 PRA、CyP-A、sST2對(duì)慢性心功能不全的診斷價(jià)值 ROC分析顯示，CyP-A、sST2、PRA預(yù)測(cè)慢性心功能不全的曲線下面積(AUC)分別為0.790[95%CI(0.678，0.902)]、0.788[95%CI(0.675，0.902)]、0.768[95%CI(0.648，0.888)]。CyP-A、sST2、PRA預(yù)測(cè)慢性心功能不全的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值詳見(jiàn)表4、圖1。

表4 PRA、CyP-A、sST2對(duì)慢性心功能不全的診斷效能分析 單位：%

圖1 PRA、CyP-A、sST2診斷慢性心功能不全的ROC曲線

2.5 PRA、CyP-A、sST2的相關(guān)性分析 PRA與CyP-A呈正相關(guān)(r=0.493，P<0.001)，Cy-A與sST2呈正相關(guān)(r=0.373，P=0.003)，PRA與sST2呈正相關(guān)(r=0.498，P<0.001)。詳見(jiàn)圖2～圖4。

圖2 PRA與CyP-A的相關(guān)性分析

圖3 CyP-A與sST2的相關(guān)性分析

圖4 PRA與sST2的相關(guān)性分析

3 討 論

本研究通過(guò)多因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，血清PRA、CyP-A、sST2水平增高均為慢性心功能不全的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示血清PRA、CyP-A、sST2水平可以作為臨床預(yù)測(cè)慢性心功能不全的指標(biāo)。

CyP-A是親環(huán)素家族中主要成員，其表達(dá)水平的高低與機(jī)體中細(xì)胞炎性因子、血管細(xì)胞因子濃度有緊密的聯(lián)系[8-9]。一旦機(jī)體發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，或者是血管發(fā)生損傷，會(huì)有大量的CyP-A產(chǎn)生，血液中CyP-A濃度增加，促進(jìn)大量的促炎因子在病人發(fā)病部位聚集，引發(fā)機(jī)體抗氧化能力下降，大量的內(nèi)皮細(xì)胞增殖，腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)水平異常表達(dá)[10-11]。本研究表明，慢性心功能不全病人血清CyP-A水平升高，且CyP-A水平與慢性心功能不全存在密切關(guān)系，提示血清CyP-A水平升高是導(dǎo)致慢性心功能不全發(fā)病的危險(xiǎn)因素。王群立等[12]研究也顯示，心功能不全病人CyP-A水平高于正常水平，提示CyP-A水平與心力衰竭病人機(jī)體異常炎癥反應(yīng)有關(guān)，CyP-A可能作為心功能不全的獨(dú)立高危因素，與本研究結(jié)果一致。本研究中ROC分析顯示，CyP-A預(yù)測(cè)慢性心功能不全的AUC達(dá)0.790，提示CyP-A是慢性心功能不全的有效預(yù)測(cè)指標(biāo)。

交感神經(jīng)興奮導(dǎo)致大量的去甲腎上腺素被釋放，進(jìn)入到血液，尤其是針對(duì)心力衰竭病人，去甲腎上腺素濃度受心功能不全病人病情嚴(yán)重程度、心功能分級(jí)的影響，從而對(duì)心力衰竭病人預(yù)后具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值[13-14]。PRA大量釋放會(huì)導(dǎo)致病人交感神經(jīng)興奮。本研究顯示，慢性心功能不全病人血清PRA水平較高，血清PRA水平升高與慢性心功能不全密切相關(guān)，說(shuō)明PRA參與慢性心功能不全的發(fā)病過(guò)程。PRA參與慢性心功能不全發(fā)病機(jī)制：PRA會(huì)促進(jìn)病人心肌肥大，心間質(zhì)纖維發(fā)生纖維化，引發(fā)信使重構(gòu)，造成大量的心肌細(xì)胞凋亡，引起腎上腺皮質(zhì)球帶發(fā)生水鈉潴留，心肌細(xì)胞肥大，增加心臟負(fù)荷，加快心肌纖維化發(fā)展的速度。本研究同樣顯示血清PRA是慢性心功能不全發(fā)病的高能預(yù)警指標(biāo)[15-16]。

有研究認(rèn)為，心功能不全容易引起機(jī)體中成纖維細(xì)胞、心肌細(xì)胞產(chǎn)生大量的白細(xì)胞介素-33(IL-33)和ST2，進(jìn)入血液，一旦ST2與IL-33競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，阻斷信號(hào)通路，導(dǎo)致心臟保護(hù)能力降低，誘導(dǎo)心肌纖維化發(fā)生，心肌細(xì)胞出現(xiàn)凋亡，心室重構(gòu)[17-18]。Pascual-Figal等[19]研究指出，sST2、IL-33在心力衰竭臨床診斷中具有較高的診斷價(jià)值，本研究中慢性心功能不全病人血清sST2水平均高于正常人，提示sST2是慢性心功能不全發(fā)病的危險(xiǎn)因素。ROC分析顯示，sST2預(yù)測(cè)慢性心功能不全發(fā)病的AUC達(dá)0.788，靈敏度和特異度分別為79.95%、76.60%，提示血清sST2可用于評(píng)估慢性心功能不全發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。湯豐寧等[20]研究也指出，sST2能有效反映病人心肌損傷、炎癥反應(yīng)狀況，受腎功能等影響較小。本研究表明，PRA、CyP-A、sST2三者之間呈正相關(guān)，隨著慢性心功能不全病人病情不斷發(fā)展，PRA、CyP-A、sST2水平不斷升高，參與病人病情發(fā)展過(guò)程。

綜上所述，慢性心功能不全病人血清PRA、CyP-A、sST2水平升高，高水平的PRA、CyP-A、sST2可能是慢性心功能不全的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可為慢性心功能不全早期診斷提供參考。