Hcy、NSE及IL-2與缺血性腦卒中急性期患者認(rèn)知功能的相關(guān)性研究

陳華 錢(qián)文軍 張曉剛

1濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院煙臺(tái)業(yè)達(dá)醫(yī)院臨床心理科，煙臺(tái) 264003；2濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院煙臺(tái)業(yè)達(dá)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，煙臺(tái) 264003

缺血性腦卒中是指腦循環(huán)障礙導(dǎo)致的局限性或全面性腦功能損傷，腦功能損傷可引發(fā)吞咽障礙、大小便障礙、肢體功能障礙、認(rèn)知功能障礙等［1］。認(rèn)知功能障礙是指在學(xué)習(xí)、記憶、思維判斷等有關(guān)大腦高級(jí)智能加工中出現(xiàn)的異常狀況，認(rèn)知功能障礙是缺血性腦卒中后常見(jiàn)的并發(fā)癥，報(bào)道顯示發(fā)病率約為20.0%～80.0%，發(fā)病率與地區(qū)、種族、診斷標(biāo)準(zhǔn)及腦卒中病情、救治水平等因素有關(guān)［2］。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）是含硫氨基酸的代謝產(chǎn)物，研究發(fā)現(xiàn)Hcy可作為血管性癡呆患者神經(jīng)功能缺損程度及日常生活功能水平的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子［3］。神經(jīng)元特異烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的特異性標(biāo)志物，腦卒中后由于中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損，神經(jīng)細(xì)胞膜被破壞，NSE可從細(xì)胞外溢進(jìn)入血腦屏障，是反應(yīng)神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要指標(biāo)。白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）是炎癥指標(biāo)之一，IL-2水平的大幅上升預(yù)示了炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，IL-2還可與IL-6相互作用，在腦血管疾病中經(jīng)氧化應(yīng)激損傷，引起腦缺血灌注不足，加重腦神經(jīng)病功能損傷［4］。本研究旨在明確Hcy、NSE及IL-2與缺血性腦卒中急性期（發(fā)病后1～2周）認(rèn)知功能的關(guān)聯(lián)，為臨床上預(yù)防或減輕缺血性腦卒中認(rèn)知功能損傷提供參考。

資料與方法

1、一般資料

本研究經(jīng)煙臺(tái)業(yè)達(dá)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)，患者或家屬知情并同意。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《中國(guó)各類(lèi)主要腦血管病診斷要點(diǎn)2019》［5］中關(guān)于缺血性腦卒中的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②均為急性期患者，發(fā)病后1～2周；③發(fā)病前認(rèn)知功能正常。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①?lài)?yán)重臟器官病變、惡性腫瘤、惡性血液系統(tǒng)疾病、嚴(yán)重心力衰竭、心房纖顫、呼吸衰竭等；②昏迷、休克、失聰?shù)葻o(wú)法行認(rèn)知功能評(píng)測(cè)者；③缺血性腦卒中發(fā)作前已存在影響認(rèn)知功能疾病，如阿爾茨海默病、精神分裂、雙相情感障礙、強(qiáng)迫癥等；④伴腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血等中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病者；⑤精神類(lèi)藥物、鎮(zhèn)痛類(lèi)藥物濫用、酗酒、吸毒者；⑥嚴(yán)重凝血功能障礙、營(yíng)養(yǎng)不良、感染者；⑦既往有腦卒中史、顱腦損傷史、腦手術(shù)史者；⑧患者或家屬拒絕研究?jī)?nèi)容者。選取經(jīng)煙臺(tái)業(yè)達(dá)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2019年4月至2021年5月接收的缺血性腦卒中急性期患者122例作為研究對(duì)象，其中男70例，女52例；年齡52～84（66.67±9.16）歲；文化程度：小學(xué)及以下65例，初中33例，高中16例，大專(zhuān)及以上8例。

2、方法

2.1、認(rèn)知功能檢測(cè)認(rèn)知功能評(píng)測(cè)采用簡(jiǎn)易智力狀態(tài)檢查量表（Mini-mental State Examination，MMSE）評(píng)測(cè)，該量表包含時(shí)間定向力、地點(diǎn)定向力、即刻記憶力、注意及計(jì)算力、延遲記憶、結(jié)構(gòu)模仿、視覺(jué)空間共7個(gè)方面，包含30個(gè)條目，采用李克特（Likert）2級(jí)評(píng)分法評(píng)測(cè)，回答正確得1分，回答錯(cuò)誤得0分，計(jì)分越高提示認(rèn)知功能越好，認(rèn)知功能正常：27～30分；輕度認(rèn)知功能障礙：21～26分；中度認(rèn)知功能障礙：10～20分，重度認(rèn)知功能障礙：＜10分［6］。評(píng)測(cè)方法：由經(jīng)訓(xùn)練的心理咨詢師采用該量表逐項(xiàng)對(duì)患者開(kāi)展評(píng)測(cè)，量表評(píng)測(cè)總體耗時(shí)20～30 min。

2.2、血清Hcy、NSE及IL-2檢測(cè)于發(fā)病后7～11 d抽取患者空腹靜脈血9 ml，3 000 r/min，離心10 min，離心半徑15 cm；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)患者血清中Hcy、IL-2、NSE水平，儀器為雅培C8000全自動(dòng)生化儀，試劑盒購(gòu)于美國(guó)R&D Systems公司。

2.3、基線資料調(diào)查采用自制調(diào)查表調(diào)查，社會(huì)學(xué)資料包含年齡、性別、文化程度，文化程度分為小學(xué)及以下、初中、高中、大專(zhuān)及以上4個(gè)水平。病史包含高血壓、高脂血癥、糖尿病，高血壓標(biāo)準(zhǔn)為收縮壓≥140 mmHg或舒張壓≥90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）和/或2周內(nèi)服用降壓藥［7］；高脂血癥：總膽固醇≥5.2 mmol/L或三酰甘油≥2.3 mmol/L［8］；糖尿病：典型糖尿病癥狀，伴隨機(jī)血糖≥11.1 mmol/L或空腹血糖≥7.0 mmol/L或糖化血紅蛋白（HbA1c）≥6.5%［9］；發(fā)病至認(rèn)知功能評(píng)測(cè)時(shí)間：記錄患者有起病癥狀（頭痛、眩暈、乏力、黑矇、卷舌等）至認(rèn)知功能評(píng)測(cè)時(shí)間。

3、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

散點(diǎn)分布圖繪制采用GraphPad Prism 8軟件，數(shù)據(jù)處理采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料采用例（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD法，Hcy、NSE、IL-2與MMSE評(píng)分采用Pearson相關(guān)性分析；采用線性回歸模型分析MMSE評(píng)分的影響因子，剔除標(biāo)準(zhǔn)P≥0.10；以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1、不同認(rèn)知功能組患者的基線資料比較

122例缺血性腦卒中急性期患者于發(fā)病后7～11 d進(jìn)行了認(rèn)知功能評(píng)測(cè)，并分為認(rèn)知功能正常組（65例）、輕度認(rèn)知功能障礙組（33例）、中度認(rèn)知功能障礙組（15例）、重度認(rèn)知功能障礙組（9例）。4組患者的年齡、高脂血癥、糖尿病比例方面比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。詳見(jiàn)表1。

表1 不同認(rèn)知功能組缺血性腦卒中急性期患者的基線資料比較

2、不同認(rèn)知功能組患者的Hcy、NSE及IL-2水平比較

輕度認(rèn)知功能障礙組、中度認(rèn)知功能障礙組及重度認(rèn)知功能障礙組的Hcy、NSE及IL-2水平均高于認(rèn)知功能正常組（均P＜0.05）；重度認(rèn)知功能障礙組的Hcy、NSE水平均高于輕度認(rèn)知功能障礙組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。詳見(jiàn)表2。

表2 不同認(rèn)知功能組缺血性腦卒中急性期患者血清指標(biāo)水平比較（±s）

表2 不同認(rèn)知功能組缺血性腦卒中急性期患者血清指標(biāo)水平比較（±s）

注：認(rèn)知功能正常為簡(jiǎn)易智力狀態(tài)檢查量表（MMSE）評(píng)分27～30分，輕度認(rèn)知功能障礙為MMSE評(píng)分21～26分，中度認(rèn)知功能障礙為MMSE評(píng)分10～20分，重度認(rèn)知功能障礙為MMSE評(píng)分＜10分；與其他3組比較，aP＜0.05，與中度認(rèn)知功能障礙組比較，bP＜0.05；與重度認(rèn)知功能障礙組比較，cP＜0.05

組別認(rèn)知功能正常組輕度認(rèn)知功能障礙組中度認(rèn)知功能障礙組重度認(rèn)知功能障礙組F值P值例數(shù)65 33 15 9同型半胱氨酸（μmol/L）18.42±4.84a 23.33±5.17c 24.88±6.15c 29.49±8.64 19.678＜0.001神經(jīng)元特異烯醇化酶（ng/L）21.79±5.76a 24.28±6.12a 28.97±7.83c 33.25±8.32 13.116＜0.001白細(xì)胞介素-2（ng/L）126.64±11.89a 140.96±16.10b 150.26±8.97 145.10±15.72 20.160＜0.001

3、Hcy、NSE及IL-2與認(rèn)知功能的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析顯示，Hcy、NSE、IL-2與MMSE評(píng)分均呈顯著負(fù)相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為-0.577、-0.549、-0.498，均P＜0.001。詳見(jiàn)圖1。

圖1 122例缺血性腦卒中急性期患者Hcy（A）、NSE（B）、IL-2（C）水平與MMSE評(píng)分的散點(diǎn)分布圖

4、缺血性腦卒中急性期患者M(jìn)MSE評(píng)分影響因素的線性回歸分析

以MMSE評(píng)分為因變量，年齡、Hcy、NSE、IL-2、高脂血癥、糖尿病為自變量，行線性回歸分析。年齡、Hcy、NSE、IL-2均是缺血性腦卒中急性期患者M(jìn)MSE評(píng)分的影響因子（均P＜0.05）。詳見(jiàn)表3。

表3 122例缺血性腦卒中急性期患者M(jìn)MSE評(píng)分影響因素的線性回歸分析

討 論

Hcy、NSE高表達(dá)與腦血管疾病發(fā)生后的神經(jīng)功能缺損有密切關(guān)聯(lián)。Hcy是蛋氨酸與半胱氨酸的重要代謝中間產(chǎn)物，Hcy上升被證明與動(dòng)脈粥樣硬化、腦血管疾病發(fā)生密切相關(guān)。Anniwaer等［10］的研究發(fā)現(xiàn)，隨Hcy水平的上升，原發(fā)性缺血性腦卒中患者的美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）評(píng)分明顯下降。NSE是參與糖酵解途徑的烯醇化酶中的一種，在神經(jīng)組織與神經(jīng)內(nèi)分泌組織中含量較高，NSE在腦細(xì)胞活性最高，且由于分子量低的特點(diǎn)，腦卒中后NSE可經(jīng)被破壞的神經(jīng)細(xì)胞膜流動(dòng)至血腦屏障，誘發(fā)腦細(xì)胞凋亡；有研究發(fā)現(xiàn)，腦卒中患者的NSE水平顯著高于健康人群，NSE水平與患者的蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估表（MoCA）評(píng)分呈負(fù)相關(guān)性［11］。IL-2是炎性反應(yīng)的調(diào)節(jié)介質(zhì)，其參與了缺血性腦卒中患者的炎癥反應(yīng)與免疫應(yīng)答進(jìn)程，IL-2可部分性的介導(dǎo)腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、IL-6的分泌，而TNF-α、IL-6水平的上升，可誘發(fā)或加重腦卒中患者的認(rèn)知功能下降［12］。

張穎等［13］對(duì)血管性癡呆患者的Hcy檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，與健康體檢人群比較，血管性癡呆患者的Hcy水平顯著升高，Hcy與患者的MMSE評(píng)分呈負(fù)相關(guān)性，與NIHSS評(píng)分呈正相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn)，NSE與腦卒中抑郁障礙、神經(jīng)功能缺損有關(guān)，而抑郁障礙、神經(jīng)功能缺損被認(rèn)為是認(rèn)知功能降低的原因［14］。有研究發(fā)現(xiàn)，IL-1β、IL-6、IL-8分別與腦小血管病、帕金森、腦卒中患者的認(rèn)知功能有關(guān)，IL-1β、IL-6、IL-8水平越高，患者的認(rèn)知功能越差［15-17］。李國(guó)勝等［18］研究發(fā)現(xiàn)，腦小血管病患者血清Hcy、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）及IL-1與患者的MoCA量表各維度評(píng)分呈現(xiàn)顯著的負(fù)相關(guān)性，高Hcy、炎癥狀態(tài)與腦血管病患者認(rèn)知功能損傷有關(guān)。缺血性腦卒中急性期患者認(rèn)知功能下降的確切機(jī)制尚未完全明確，本研究顯示，輕度認(rèn)知功能障礙組、中度認(rèn)知功能障礙組及重度認(rèn)知功能障礙組的Hcy、NSE及IL-2水平均顯著高于認(rèn)知功能正常組；重度認(rèn)知功能障礙組的Hcy、NSE水平均顯著高于輕度認(rèn)知功能障礙組；Pearson相關(guān)性分析顯示，Hcy、NSE、IL-2與MMSE評(píng)分均呈現(xiàn)顯著的負(fù)相關(guān)性。說(shuō)明缺血性腦卒中患者的認(rèn)知功能與Hcy、NSE及IL-2密切相關(guān)，高水平的Hcy、NSE及IL-2預(yù)示了缺血性腦卒中急性期的低認(rèn)知功能，這提示在缺血性腦卒中急性期管理中，調(diào)節(jié)患者的Hcy、NSE及IL-2水平，可能有助于改善其認(rèn)知功能。

報(bào)道顯示，腦卒中認(rèn)知功能障礙除了已知的腦卒中后帶來(lái)的神經(jīng)功能缺損有關(guān)外，還與患者的基礎(chǔ)疾病、腦梗死部位、不良飲食習(xí)慣等因素有關(guān)［19］。趙鳳華等［20］對(duì)88例急性缺血性腦卒中后認(rèn)知功能障礙的相關(guān)因素行l(wèi)ogistic回歸分析顯示，高脂血癥、高NIHSS評(píng)分、額顳葉梗死、Nod樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NLRP3）炎癥小體活化水平是腦卒中后認(rèn)知功能障礙的危險(xiǎn)性因子。一項(xiàng)大樣本研究發(fā)現(xiàn)，受教育年限、高血壓、高脂血癥、房顫與Hcy是卒中后認(rèn)知功能障礙的危險(xiǎn)性因素［21］。本研究發(fā)現(xiàn)，年齡、Hcy、NSE、IL-2是缺血性腦卒中急性期患者M(jìn)MSE評(píng)分的影響因子，年齡、Hcy、NSE、IL-2每上升1個(gè)單位，對(duì)應(yīng)的MMSE評(píng)分將下降0.343、0.345、0.280、0.049分，進(jìn)一步證實(shí)了Hcy、NSE、IL-2與缺血性腦卒中急性期認(rèn)知功能損傷的關(guān)聯(lián)。年齡作為缺血性腦卒中急性期認(rèn)知功能損傷的危險(xiǎn)性因子已被有關(guān)研究證實(shí)，與高齡帶來(lái)的臟器官功能衰退，卒中后神經(jīng)細(xì)胞大面積損傷、腦組織微灌注不足，引起的神經(jīng)功能缺損加重有關(guān)［22］。高Hcy可經(jīng)細(xì)胞毒性損害、血管內(nèi)皮損傷、鈣離子超載與活性氧釋放帶來(lái)的氧化應(yīng)激損傷、炎性反應(yīng)、動(dòng)脈粥樣硬化等途徑導(dǎo)致認(rèn)知功能下降；高NSE可直接引起神經(jīng)細(xì)胞損傷、自由基損傷，引起認(rèn)知功能降低；高IL-2可引起氧化應(yīng)激損傷、血管內(nèi)皮功能障礙、關(guān)鍵酶合成障礙、T淋巴細(xì)胞亞群異常等途徑加重血管損傷，最終導(dǎo)致認(rèn)知功能損傷［23］。

綜上，缺血性腦卒中急性期患者認(rèn)知功能損傷與Hcy、NSE、IL-2有密切關(guān)聯(lián)，Hcy、NSE、IL-2與缺血性腦卒中急性期MMSE評(píng)分呈現(xiàn)顯著的負(fù)相關(guān)；年齡、Hcy、NSE、IL-2是缺血性腦卒中MMSE評(píng)分的影響因子。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突