子癇前期患者血清miR-17 miR-25表達(dá)的臨床意義及對妊娠結(jié)局的影響

陳志萍， 黃麗珊， 吳明秀， 陳文婷

(南方醫(yī)科大學(xué)附屬東莞醫(yī)院/東莞市人民醫(yī)院產(chǎn)科, 廣東 東莞 523000)

子癇前期(Preeclampsia，PE)屬妊娠期高血壓疾病范疇，是母嬰死亡的重要因素，其預(yù)防及治療一直是產(chǎn)科難題[1]。近年來，研究表明，微小RNA(miRNA)參與調(diào)控PE發(fā)病進(jìn)程[2]。研究表明，胎盤發(fā)育異常，尤其滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖、侵襲能力不足是PE發(fā)病的重要誘因，而胎盤氧化應(yīng)激可引起滋養(yǎng)細(xì)胞損傷，使其增殖、侵襲能力降低及凋亡增加[3]。miR-17、miR-25作用機(jī)制及功能尚不明確，據(jù)報道，miR-17對腫瘤細(xì)胞增殖、浸潤、凋亡等功能都均有重要影響；miR-25作為內(nèi)源性調(diào)節(jié)劑，在心血管疾病、腫瘤等疾病的氧化應(yīng)激過程、促炎細(xì)胞因子調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用[4]。因此，miR-17、miR-25可能在PE發(fā)病過程中也有一定作用，但目前此類研究甚少?；诖?，本研究探討PE患者血清miR-17、miR-25表達(dá)的臨床意義及對妊娠結(jié)局的影響，旨在為PE防治提供參考。報道如下

1 資料與方法

1.1一般資料:選取我院PE患者74例為PE組(2018年2月至2020年8月)，同期選取正常孕產(chǎn)婦74例為健康組。納入標(biāo)準(zhǔn)：孕前體?。籔E組均符合PE診斷標(biāo)準(zhǔn)；均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：心臟、肝腎疾??；胎兒染色體異常；多胎；甲狀腺功能異常、糖尿病等內(nèi)分泌系統(tǒng)疾?。患甭匝装Y。

1.2方法:①資料收集：包括年齡、孕次、孕前體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、產(chǎn)次、血壓、分娩孕周、新生兒出生體重。②血清miR-17、miR-25檢測：采集空腹靜脈血3mL，離心(時間15min，半徑8cm，轉(zhuǎn)速3500r/min)，取血清，提取總RNA，將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，以cDNA為模板，U6為內(nèi)參，檢測miR-17、miR-25相對表達(dá)量。

1.3觀察指標(biāo):①兩組一般資料及血清miR-17、miR-25水平。②血清miR-17、miR-25水平與PE發(fā)生的關(guān)系。③血清miR-17、miR-25對PE發(fā)生的診斷價值。④不同血清miR-17、miR-25水平患者臨床特征和妊娠結(jié)局。⑤血清miR-17、miR-25水平與PE患者臨床特征和妊娠結(jié)局的相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.1兩組一般資料及血清miR-17、miR-25水平:兩組年齡、孕前BMI、孕次、產(chǎn)次比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；PE組舒張壓、收縮壓、血清miR-17水平高于健康組，分娩孕周、新生兒出生體重血清miR-25水平低于健康組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料及血清miR-17 miR-25水平比較

2.2血清miR-17、miR-25水平與PE發(fā)生的關(guān)系:以PE發(fā)生為因變量(否=0，是=1)，以血清miR-17、miR-25水平作為自變量(<均值賦值為0，≥均值賦值為1)，納入Logistic回歸分析模型，結(jié)果顯示，血清miR-17、miR-25水平均與PE相關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 血清miR-17 miR-25水平與PE發(fā)生的關(guān)系

2.3血清miR-17、miR-25對PE發(fā)生的診斷價值:以PE組血清miR-17、miR-25水平作為陽性樣本，以健康組血清miR-17、miR-25作為陰性樣本，繪制各指標(biāo)診斷PE的ROC曲線，結(jié)果顯示，miR-17、miR-25診斷PE的AUC分別為0.871、0.885；應(yīng)用SPSS軟件的聯(lián)合應(yīng)用ROC理論模式，構(gòu)建各指標(biāo)聯(lián)合診斷PE的ROC模型，結(jié)果顯示，聯(lián)合診斷AUC最大，為0.918。見圖1、表3。

圖1 ROC曲線

表3 血清miR-17 miR-25對PE發(fā)生的診斷價值

2.4不同血清miR-17、miR-25水平患者臨床特征和妊娠結(jié)局:以miR-17、miR-25均值為界，<均值為低表達(dá)，≥均值為高表達(dá)。不同血清miR-17、miR-25水平PE患者舒張壓、收縮壓、分娩孕周、新生兒出生體重存在明顯差異(P<0.05)。見表4。

表4 不同血清miR-17 miR-25水平患者臨床特征和妊娠結(jié)局

2.5血清miR-17、miR-25水平與PE患者臨床特征和妊娠結(jié)局的相關(guān)性:血清miR-17水平與PE患者舒張壓、收縮壓呈正相關(guān)，與分娩孕周、新生兒出生體重呈負(fù)相關(guān)，血清miR-25水平與PE患者舒張壓、收縮壓呈負(fù)相關(guān)，與分娩孕周、新生兒出生體重呈正相關(guān)(P<0.05)。見表5。

表5 血清miR-17 miR-25水平與PE患者臨床特征和妊娠結(jié)局的相關(guān)性

3 討 論

我國每100位孕婦中有3～4位患有PE，且近年來呈上升趨勢，已引起社會廣泛關(guān)注。長期以來對PE進(jìn)行了大量研究，發(fā)現(xiàn)氧化壓力增加及滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤減少在PE發(fā)展機(jī)制中起重要作用，與不良妊娠結(jié)局有關(guān)[5]。病理情況下，胎盤組織部分miRNA可調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激及滋養(yǎng)細(xì)胞功能，提示可能參與胎盤發(fā)育及PE發(fā)生、發(fā)展過程。

miR-17-92基因簇定位于第13號染色體上，目前，相關(guān)研究多在腫瘤方面，可調(diào)控腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡和浸潤功能。滋養(yǎng)細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞增殖、浸潤活性相似，因此，miR-17-92基因簇可能通過一定機(jī)制調(diào)控滋養(yǎng)細(xì)胞功能。miR-17是miR-17-92基因簇成員，研究顯示，PE胎盤組織中miR-17呈病理性高表達(dá)[6]。但胎盤組織取材不便，而妊娠婦女血循環(huán)miRNA多源于胎盤。本研究測得PE患者血清miR-17表達(dá)顯著升高，與既往研究一致。分析機(jī)制：①基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制物與滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤有關(guān)。研究顯示，miR-17可通過靶向作用于MMP2，對膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞侵襲起到抑制作用[7]。推測miR-17可能通過調(diào)控其下游靶基因，影響滋養(yǎng)細(xì)胞功能，導(dǎo)致侵襲不足、浸潤過淺，進(jìn)而影響胎盤血流，引發(fā)一系列PE相關(guān)表現(xiàn)。②研究證實，PE與胰島素抵抗、血管炎性反應(yīng)、高脂血癥密切相關(guān)，具有PE病史者日后代謝綜合征發(fā)生風(fēng)險明顯增加[8]。miR-17可抑制小鼠胰島素信號傳導(dǎo)蛋白胰島素受體激酶l(Insulin receptor substrate l，IRSl)表達(dá)，而IRSl表達(dá)降低可引起胰島素信號無法正常傳導(dǎo)，導(dǎo)致胰島素抵抗，可能增加PE發(fā)生風(fēng)險。③PE發(fā)生與自噬功能紊亂有關(guān)，PE患者胎盤組織中自噬激活，胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞自噬增強。研究表明，miR-17可調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬。推測miR-17可能通過調(diào)控自噬、凋亡等過程參與PE發(fā)病及進(jìn)展。

miR-25屬于miR-106b-25家族，定位于7q22.1染色體上，參與多種疾病發(fā)生發(fā)展，如心血管疾病、糖尿病、腫瘤等[9]。目前，miR-25在PE發(fā)病機(jī)制中的作用研究較少。本研究顯示，PE患者血清miR-25呈病理性高表達(dá)。相較于正常妊娠，PE患者氧化應(yīng)激表達(dá)增加，循環(huán)和組織中活性氧增加[10]。結(jié)合現(xiàn)有研究分析可能機(jī)制是NADPH氧化酶4(NOX4)在膽固醇血癥引起的氧化應(yīng)激過程及促炎細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥損傷中發(fā)揮核心作用，NOX4高表達(dá)可抗機(jī)體氧化應(yīng)激，而miR-25表達(dá)能靶向作用于NOX4基因非翻譯區(qū)通過一系列生物學(xué)過程抑制NOX4表達(dá)，因此下調(diào)miR-25表達(dá)可增加NOX4表達(dá)實現(xiàn)抗氧化作用[11]。繼續(xù)ROC曲線分析顯示，血清miR-17、miR-25聯(lián)合可提高對PE的診斷價值，臨床可同時檢測miR-17、miR-25，為診斷提供更全面、可靠的參考信息。另外，miR-17、miR-25表達(dá)水平與臨床特征(舒張壓、收縮壓)和妊娠結(jié)局(分娩孕周、新生兒出生體重)相關(guān)，提示miR-17、miR-25表達(dá)水平在一定程度上還可反映疾病嚴(yán)重程度和臨床預(yù)后，便于臨床針對性完善相關(guān)干預(yù)策略。

綜上可知，PE患者血清miR-17、miR-25均病理性表達(dá)，且與疾病嚴(yán)重程度和妊娠結(jié)局有關(guān)。本研究從轉(zhuǎn)錄水平揭示miR-17、miR-25與PE的關(guān)系，但僅局限在miR-17、miR-25表達(dá)水平方面的研究，未進(jìn)行miR-17、miR-25與PE相關(guān)的功能性研究，仍需進(jìn)一步實驗驗證。