肺癌患者血清堿性磷酸酶、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平及其與骨轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

陳艷，黃鶴

(商丘市第四人民醫(yī)院 檢驗科，河南 商丘 476100)

肺癌為臨床常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病隱匿，多數(shù)患者首次確診時已為中晚期，已經(jīng)存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，錯過手術(shù)根治機(jī)會，導(dǎo)致不良預(yù)后[1]。骨轉(zhuǎn)移是肺癌主要血行轉(zhuǎn)移部位之一，可導(dǎo)致患者骨骼結(jié)構(gòu)病變和骨代謝異常，引發(fā)骨痛、骨折、脊髓或神經(jīng)受壓、高鈣血癥等骨轉(zhuǎn)移相關(guān)事件，嚴(yán)重影響患者生命質(zhì)量及生存期[2]。因此，早期評估肺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)生風(fēng)險尤為重要。堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)是反映骨代謝的有效指標(biāo)，當(dāng)骨內(nèi)磷酸沉積增加時，成骨細(xì)胞大量合成，可引起ALP分泌增加，被廣泛應(yīng)用于骨骼疾病的診斷中[3]。神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase，NSE)是參與糖酵解途徑的一種酶，對神經(jīng)內(nèi)分泌組織相關(guān)腫瘤較為敏感，且與腫瘤分期及預(yù)后密切相關(guān)[4-5]。推測血清ALP、NSE異常表達(dá)可能與肺癌患者發(fā)生骨轉(zhuǎn)移有關(guān)。本研究旨在分析血清ALP、NSE與肺癌患者骨轉(zhuǎn)移的關(guān)系?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年1月至2021年10月商丘市第四人民醫(yī)院收治的105例肺癌患者為研究對象，患者或家屬簽署知情同意書。所有患者中男69例，女36例；年齡45～69(57.96±3.21)歲；美國東部腫瘤協(xié)作組(Eastern Cooperative Oncology Group，ECOG)活動狀態(tài)評分[6]為0分34例，1分50例，2分21例；病理類型為腺癌59例，鱗癌30例，小細(xì)胞肺癌16例。(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合肺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)病理學(xué)檢查確診[7]；②在本院接受規(guī)范化綜合治療；③認(rèn)知功能良好，可正常交流；④依從性良好，可配合完成相關(guān)檢查。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①入組前3個月內(nèi)接受糖皮質(zhì)激素、雙膦酸鹽、鈣劑治療；②合并內(nèi)分泌疾病，如糖尿病、痛風(fēng)、骨質(zhì)疏松及甲狀腺疾病等；③合并其他肺部嚴(yán)重疾病，如哮喘、肺炎、肺結(jié)核等；④存在風(fēng)濕性關(guān)節(jié)病或既往有外傷性骨折病史；⑤合并嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病，如肝、腎及心腦血管等基礎(chǔ)疾病。

1.2 研究方法

1.2.1肺癌骨轉(zhuǎn)移評估及分組方法 依據(jù)《肺癌骨轉(zhuǎn)移診療專家共識(2014版)》[8]中相關(guān)診斷流程及標(biāo)準(zhǔn)：對懷疑有骨轉(zhuǎn)移的肺癌患者(有骨痛/骨折者、脊髓或神經(jīng)受壓癥狀者、高鈣血癥者)先行全身骨骼放射性核素掃描(emission computed tomography，ECT)檢查，ECT檢查陽性部位行計算機(jī)斷層成像(computed tomography，CT)及/或磁共振成像(magnetic resonance imaging，MRI)檢查，明確是否存在典型骨轉(zhuǎn)移影像學(xué)表現(xiàn)。若上述檢查發(fā)現(xiàn)有全身多發(fā)骨破壞(椎體、骨盆、長骨)，即可確診骨轉(zhuǎn)移，若僅出現(xiàn)孤立的骨破壞灶，行骨穿刺活檢病理學(xué)檢查，明確診斷。根據(jù)評估結(jié)果，將發(fā)生骨轉(zhuǎn)移患者納入骨轉(zhuǎn)移組，反之納入非骨轉(zhuǎn)移組。

1.2.2血清ALP、NSE水平檢測方法 于確診肺癌時抽取患者空腹外周肘靜脈血3 mL，以3 000 r·min-1(半徑10 cm)離心分離10 min，取血清，采用酶速率法測定血清ALP水平，采用放射免疫法測定血清NSE水平，儀器為深圳邁瑞生物醫(yī)療的全自動生化分析儀(注冊證編號粵械注準(zhǔn)20172400118，型號BS-240)，試劑盒購自上海酶聯(lián)生物。

1.2.3基線資料收集方法 采用本院自制基線資料調(diào)查表采集患者一般資料情況，內(nèi)容主要包括性別(男/女)、年齡、病理類型(腺癌/鱗癌/小細(xì)胞肺癌)、ECOG評分(0分/1分/2分)等。

2 結(jié)果

2.1 骨轉(zhuǎn)移發(fā)生狀況經(jīng)評估，結(jié)果顯示，納入的105例肺癌患者中有39例發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，發(fā)生率為37.14%。

2.2 骨轉(zhuǎn)移和非骨轉(zhuǎn)移肺癌患者基線資料及血清ALP、NSE水平骨轉(zhuǎn)移組ECOG評分2分占比高于非骨轉(zhuǎn)移組，血清ALP、NSE水平高于非骨轉(zhuǎn)移組(P<0.05)；兩組性別、年齡、病理類型比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 骨轉(zhuǎn)移和非骨轉(zhuǎn)移肺癌患者基線資料及血清ALP、NSE水平比較

2.3 血清ALP、NSE與肺癌患者骨轉(zhuǎn)移發(fā)生的logistic回歸分析將2.2中比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義的變量納入作為自變量(ECOG評分為分類變量，賦值為0分=1，1分=2，2分=3；其余均為連續(xù)變量)，將肺癌患者骨轉(zhuǎn)移發(fā)生狀況作為因變量(骨轉(zhuǎn)移=1，非骨轉(zhuǎn)移=0)，經(jīng)logistic回歸分析，結(jié)果顯示，ECOG評分高、血清ALP、NSE過表達(dá)與肺癌患者發(fā)生骨轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 血清ALP、NSE表達(dá)與肺癌患者骨轉(zhuǎn)移發(fā)生的logistic回歸分析

2.4 血清ALP、NSE評估肺癌患者骨轉(zhuǎn)移的效能分析將肺癌患者治療前血清ALP、NSE水平作為檢驗變量，將骨轉(zhuǎn)移發(fā)生狀況作為狀態(tài)變量(骨轉(zhuǎn)移=1，非骨轉(zhuǎn)移=0)，繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，血清ALP、NSE單獨(dú)及聯(lián)合評估肺癌患者骨轉(zhuǎn)移發(fā)生風(fēng)險的AUC均>0.70，評估價值較理想，且以聯(lián)合評估價值最佳。當(dāng)血清ALP、NSE的截斷值分別為237.790 U·L-1、13.425 μg·L-1時取特異性、敏感度。見表3。

表3 血清ALP、NSE評估肺癌患者骨轉(zhuǎn)移風(fēng)險的效能分析

3 討論

骨轉(zhuǎn)移是中晚期肺癌患者常見轉(zhuǎn)移部位，專家共識指出，有30%～40%的肺癌患者發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，是導(dǎo)致患者生存期縮短、生存質(zhì)量下降的重要因素[8]。本研究結(jié)果顯示，納入的105例肺癌患者中有39例發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，發(fā)生率為37.14%。由此可見，肺癌患者骨轉(zhuǎn)移發(fā)生風(fēng)險較高，早期評估骨轉(zhuǎn)移發(fā)生風(fēng)險至關(guān)重要。目前，臨床評估肺癌骨轉(zhuǎn)移主要為ECT、CT、MRI等影像學(xué)手段，對于僅出現(xiàn)孤立的骨破壞灶行骨穿刺活檢進(jìn)一步明確。但多數(shù)肺癌患者骨轉(zhuǎn)移體征、癥狀在骨轉(zhuǎn)移后期出現(xiàn)，影像學(xué)檢查費(fèi)用高、早期無法有效識別；骨穿刺活檢存在一定創(chuàng)傷，且無法動態(tài)監(jiān)測骨轉(zhuǎn)移病灶變化，應(yīng)用受限。因此，仍需探索與肺癌患者骨轉(zhuǎn)移的相關(guān)指標(biāo)，以早期、動態(tài)評估骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生風(fēng)險。

研究顯示，在正常生理情況下，骨形成和骨吸收是一個平衡過程，分別由成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞介導(dǎo)，當(dāng)惡性腫瘤發(fā)生骨轉(zhuǎn)移時，可加快骨的重塑過程，導(dǎo)致骨代謝率增高，影響正常骨代謝機(jī)制，進(jìn)而造成骨代謝標(biāo)志物生成異常[9]。ALP是反映骨代謝的重要指標(biāo)，主要來源于肝臟、骨骼等組織，當(dāng)血清ALP過表達(dá)提示成骨細(xì)胞活性增加，骨代謝機(jī)制出現(xiàn)異常[10-11]。NSE是烯醇化酶類的一種，參與糖酵解途徑，在具有神經(jīng)內(nèi)分泌功能腫瘤或源于神經(jīng)外胚層組織腫瘤中表達(dá)明顯升高[12]。據(jù)報道，NSE在晚期肺癌患者外周血中水平明顯升高，且在治療后逐漸降低[13]。因此，推測血清ALP、NSE異常表達(dá)可能與肺癌患者骨轉(zhuǎn)移存在一定聯(lián)系。

本研究經(jīng)logistic回歸分析，結(jié)果顯示，血清ALP、NSE過表達(dá)與肺癌患者發(fā)生骨轉(zhuǎn)移有關(guān)，初步證實(shí)血清ALP、NSE異常表達(dá)可能與肺癌患者骨轉(zhuǎn)移有關(guān)。原因可能為，在成骨過程中，ALP可提供必要的磷酸，并在多糖-肌醇磷酸特異性水解酶的作用下進(jìn)入血循環(huán)。當(dāng)肺癌患者血清ALP檢測表達(dá)明顯升高時提示骨形成加快，骨代謝機(jī)制發(fā)生異常，骨轉(zhuǎn)移發(fā)生風(fēng)險較高[14-15]。NSE主要存在部位為神經(jīng)組織及神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，小細(xì)胞肺癌骨轉(zhuǎn)移患者腫瘤細(xì)胞具有神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞特征，可產(chǎn)生NSE。有研究指出，部分非小細(xì)胞肺癌也具有神經(jīng)內(nèi)分泌功能，常伴有NSE分泌[16]。另外，肺癌骨轉(zhuǎn)移過程中，腫瘤細(xì)胞增殖加快，糖酵解作用加強(qiáng)，而NSE參與糖酵解途徑，因此當(dāng)發(fā)生骨轉(zhuǎn)移時，肺癌患者腫瘤細(xì)胞內(nèi)NES增多，釋放入外周血也相繼增多，血清檢測呈過表達(dá)。

為驗證假說，本研究最后繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，血清ALP、NSE單獨(dú)及聯(lián)合評估肺癌患者骨轉(zhuǎn)移發(fā)生風(fēng)險的AUC均>0.70，且當(dāng)血清ALP、NSE的截斷值分別為237.790 U·L-1、13.425 μg·L-1時，評估價值最高，進(jìn)一步證實(shí)血清ALP、NSE異常表達(dá)與肺癌患者骨轉(zhuǎn)移有關(guān)，可作為評估骨轉(zhuǎn)移的有效指標(biāo)。但血清ALP、NES是否可以作為肺癌骨轉(zhuǎn)移的特異性標(biāo)志物，仍需今后進(jìn)一步研究證實(shí)。

綜上所述，血清ALP、NSE過表達(dá)與肺癌患者骨轉(zhuǎn)移有關(guān)，二者過表達(dá)提示肺癌患者骨轉(zhuǎn)移風(fēng)險較高，未來可考慮早期監(jiān)測肺癌患者血清ALP、NSE表達(dá)評估骨轉(zhuǎn)移發(fā)生風(fēng)險。