高達(dá)奶酪及其風(fēng)味的研究進(jìn)展

陳臣，田同輝，于海燕，黃娟，袁海彬，田懷香

（上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué)香料香精技術(shù)與工程學(xué)院，上海 201418）

隨著我國經(jīng)濟(jì)持續(xù)發(fā)展和居民生活水平不斷提高，人們對營養(yǎng)健康的需求日漸趨于剛性，因奶酪具有獨特的風(fēng)味和豐富的營養(yǎng)正越來越多地受到中國消費(fèi)者的關(guān)注。2019年我國奶酪市場規(guī)模（以零售額計）達(dá)65.5億元，同比增長12.3% ，目前仍處于高速發(fā)展期，整體規(guī)模呈現(xiàn)快速上升態(tài)勢。預(yù)期在未來幾年內(nèi)，中國奶酪市場年均增長率將會保持在20% ～25% 之間，奶酪業(yè)務(wù)正迅速發(fā)展，未來或?qū)⒊蔀橹袊橹破沸袠I(yè)發(fā)展的新引擎[1]。

高達(dá)奶酪（Gouda cheese）是一種內(nèi)部成熟型天然半硬質(zhì)酶凝奶酪。它歷史悠久，起源于荷蘭鹿特丹市周邊的高達(dá)鎮(zhèn)，由此得名高達(dá)奶酪。成熟高達(dá)奶酪表面涂有標(biāo)明口味特征的黃色蠟質(zhì)層，故又稱“黃波奶酪”。高達(dá)奶酪一般指由新鮮全脂巴氏殺菌牛乳制成，在自然條件下成熟約6周～60周的大型扁平圓柱形（大多為4 kg～14 kg）奶酪[2]。高達(dá)奶酪因其具有成熟速度快、口味溫和、易于烹飪等特點，除在西方國家被廣泛食用外，如今也越來越受到全球消費(fèi)者的喜愛[3]。目前高達(dá)奶酪在北京、上海的進(jìn)口超市中也有所銷售，且市場反饋良好。

世界奶酪市場規(guī)模不斷擴(kuò)大、國內(nèi)奶酪行業(yè)也迅速崛起，高達(dá)奶酪在我國市場空間廣闊且發(fā)展?jié)摿^大。但目前國內(nèi)對于高達(dá)奶酪的風(fēng)味及其形成機(jī)理的了解尚不夠深入，這制約了高達(dá)奶酪在國內(nèi)的推廣，因此總結(jié)國內(nèi)外現(xiàn)有高達(dá)奶酪的相關(guān)研究進(jìn)展對于后續(xù)研究及產(chǎn)品開發(fā)具有重要參考意義。本文在已有文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上從高達(dá)奶酪風(fēng)味的研究現(xiàn)狀、風(fēng)味特征及其形成機(jī)理、風(fēng)味影響因素等角度對高達(dá)奶酪進(jìn)行綜述，并對未來研究的側(cè)重點做出展望，以期為高達(dá)奶酪日后的研究、開發(fā)及推廣提供參考。

1 高達(dá)奶酪的感官及風(fēng)味特征

高達(dá)奶酪的成熟是一個較為復(fù)雜的生物化學(xué)過程，此過程涉及大量化學(xué)反應(yīng)并包含了大量的酶促反應(yīng)，因此高達(dá)奶酪中蘊(yùn)含了多種風(fēng)味物質(zhì)，且具有十分豐富的感官及風(fēng)味特征，不同成熟時間的高達(dá)奶酪感官和風(fēng)味特征也有所不同。風(fēng)味、質(zhì)地和外觀，是最能影響人們對食物的喜好程度的3個屬性。在Go等[4]對多種奶酪的喜好性評價試驗中，高達(dá)奶酪在所測6種奶酪的總體喜好程度評定中得分最高，在消費(fèi)者品嘗測試中的接受度得分最高，其中外觀、堅果/脂肪風(fēng)味、清淡、質(zhì)地柔軟是消費(fèi)者喜歡該品種奶酪的主要原因。

風(fēng)味方面，新鮮或低成熟度的高達(dá)奶酪風(fēng)味偏清淡，其特點是乳清味、酸味、芳香和雙乙酰的味道比較突出；而陳年高達(dá)奶酪的風(fēng)味則更為濃郁，特點是水果味、焦糖味、麥芽味、堅果味和肉湯味較為明顯[5]。但不論低成熟度還是陳年奶酪，幾乎所有的高達(dá)奶酪都或多或少的具有以下感官特征：蒸煮味、乳脂味、肉湯味、硫磺味、可可味、酸味[5]。高達(dá)奶酪的整體風(fēng)味中除“甜味”和“奶油味、黃油味”屬性隨成熟過程逐漸下降外，其它大多數(shù)風(fēng)味的感官得分均隨著成熟度的增加而提升。與巴氏殺菌乳酪相比，以生牛乳為原料，采用高達(dá)奶酪的制作方法所制成的奶酪，其甜味和苦味以及花香、果味、堅果味、巧克力味和動物味的強(qiáng)度更高，而巴氏殺菌乳制成的高達(dá)奶酪則在“味道強(qiáng)烈”、“酸”和“辛辣”屬性上得分較高[6]。

外觀方面，高達(dá)奶酪一般體積較大，呈扁平圓柱形（大多為4 kg～14 kg）。高達(dá)奶酪表面的涂層有多種不同顏色，紅色代表低成熟度高達(dá)奶酪，黃色代表中等成熟度高達(dá)奶酪，黑色則代表熏制或陳年高達(dá)奶酪。未經(jīng)過成熟過程的新鮮高達(dá)奶酪為乳白色，隨著成熟陳化時間的增加，黃褐色隨之加深，陳化超過3個月的高達(dá)奶酪比低成熟度的奶酪顏色更深更黃[2]，Mcsweeney[7]認(rèn)為低成熟度高達(dá)奶酪和陳年高達(dá)奶酪之間的顏色差異很可能是由于色素沉著造成的。也有研究者認(rèn)為不同成熟時間高達(dá)奶酪的顏色差異是由乳糖水解產(chǎn)生的半乳糖與蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生的氨基酸發(fā)生反應(yīng)時的非酶褐變反應(yīng)產(chǎn)生[8]或是因為蛋白質(zhì)基質(zhì)的收縮以及水分的流失[9]造成。

質(zhì)構(gòu)方面，低成熟度高達(dá)奶酪相較于中等成熟度奶酪和陳年奶酪，其手感彈性、按壓恢復(fù)性、口腔覆蓋性、團(tuán)塊光滑度更高且不易斷裂；中等成熟度高達(dá)奶酪則具有更高的黏性，而陳年高達(dá)奶酪的特點是更易斷裂且口感硬度和手感硬度較高，這可能是由于陳年奶酪水分含量較低、蛋白質(zhì)基質(zhì)分解造成[5]。Yates等[10]對高達(dá)奶酪進(jìn)行了感官分析，其結(jié)果表明消費(fèi)者更喜歡質(zhì)地光滑、有黏性的高達(dá)奶酪，而非具有更高斷裂性、硬度或彈性的高達(dá)奶酪。在高達(dá)奶酪及相似奶酪中，孔洞的數(shù)量、大小和形狀是重要的質(zhì)構(gòu)特征。Akkerman等[11]對高達(dá)奶酪中孔洞形成的條件進(jìn)行了較為詳細(xì)的研究，證明高達(dá)奶酪的成熟過程有利于孔洞的形成。

2 高達(dá)奶酪風(fēng)味分析研究現(xiàn)狀

目前，國外對于高達(dá)奶酪的風(fēng)味研究成果較多，也較為系統(tǒng)。采用的較為主流的風(fēng)味分析方法有氣相色譜-質(zhì)譜（gas chromatography-mass spectrometry，GCMS）法[5]、氣相色譜-嗅覺測量（gas chromatography-olfactometry，GC-O）法[5]、液相色譜-飛行時間質(zhì)譜（liquid chromatography-time-of-flight mass spectrometry，LCTOF-MS）法[12]、高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）法[13]、高分辨核磁共振波譜（high-resolution nuclear magnetic resonance spectroscopy，HR NMR）法[14]。Jo等[5]利用GC-O從36種不同高達(dá)奶酪樣品共中檢測出90種香氣活性物質(zhì)，其中游離脂肪酸6種，硫化物及其衍生物7種，醛類20種，酯類10種，含氮化合物9種，內(nèi)酯3種，烷烴3種，醇11種，酮13種，呋喃酮3種，未知物5種。并首次得到在所測的36種高達(dá)奶酪中至少有30種存在以下氣味活性化合物：丁二酮、乙酸、2-甲基丁醛和甲硫基丙醛。Toelstede等[12]通過LC-MS-TOF和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（liquid chromatography tandem mass spectrometry，LC-MS/MS），獨立合成和感官分析等風(fēng)味組學(xué)方法，在高達(dá)奶酪水溶性提取物中共鑒定出16種酪蛋白水解形成的苦味肽；Inagaki等[15]利用溶劑輔助蒸發(fā)萃取與氣質(zhì)聯(lián)用（solvent-assisted flavor evaporation-gas chromatography-mass spectrometry，SAFE-GC-MS），對高達(dá)奶酪的揮發(fā)性組分進(jìn)行香氣提取物稀釋分析，從38個氣味活性峰中鑒定或初步鑒定出31種氣味物質(zhì)，香氣稀釋因子在43～48。通過比較3個成熟階段奶酪的香氣稀釋因子，發(fā)現(xiàn)有16種香氣成分隨著干酪成熟程度的增加而增加。Califano等[13]用高效液相色譜法測定出高達(dá)奶酪樣品中的9種有機(jī)酸（甲酸、乳清酸、尿酸、乳酸、乙酸、檸檬酸、丙酮酸、丙酸、丁酸）。Ruyssen等[14]對36個高達(dá)奶酪樣品進(jìn)行質(zhì)子高分辨核磁共振波譜和色譜分析，將得到的光譜與參考值數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比較，HR NMR技術(shù)可以快速識別奶酪樣品中的各種已知成分，其精確度可與色譜法相媲美。由此可見，關(guān)于高達(dá)奶酪的風(fēng)味物質(zhì)定性和定量以及成熟過程中的風(fēng)味變化等方面的研究已有一定的基礎(chǔ)。而國內(nèi)關(guān)于高達(dá)奶酪的研究較少，多集中在高達(dá)奶酪的生產(chǎn)工藝和優(yōu)化[16-17]以及礦物鹽[18]、菌種[19]對高達(dá)奶酪品質(zhì)的影響等方面，有關(guān)高達(dá)奶酪特征風(fēng)味成分以及感官特性的相關(guān)研究較少。

3 高達(dá)奶酪中的風(fēng)味物質(zhì)組成及其形成機(jī)理

高達(dá)奶酪中的風(fēng)味物質(zhì)主要有酮類、酸類、醛類、酯類、內(nèi)酯、吡嗪以及含硫化合物等。本文對高達(dá)奶酪風(fēng)味貢獻(xiàn)較大的幾類香氣活性物質(zhì)進(jìn)行了詳細(xì)論述，并在表1中列舉了高達(dá)奶酪中的主要風(fēng)味物質(zhì)及其香氣表征。

表1 高達(dá)奶酪中主要風(fēng)味化合物及其香氣表征Table 1 Main flavor compounds in Gouda cheese and their aroma characterization

高達(dá)奶酪中檢測出的酮類，主要包括2-戊酮、2-庚酮、十一酮、3-丁二酮，其風(fēng)味獨特，感知閾值低，是高達(dá)奶酪風(fēng)味組分中不可或缺的一類。這類物質(zhì)給高達(dá)奶酪?guī)睃S油味、水果味、甜味，同時也略有油漆味、霉味等不良?xì)馕丁ｋS著成熟時間的延長高達(dá)奶酪中酮類的含量顯著增加，Alewijn等[22]所研究的4種高達(dá)奶酪在成熟40周后甲基酮的含量增加了100% ；在Jung等[23]的研究中，高達(dá)奶酪中的酮類物質(zhì)在6個月內(nèi)從6.49 mg/kg增長到了52.43 mg/kg。奶酪中的酮類一般由霉菌產(chǎn)生（如藍(lán)紋奶酪），主要產(chǎn)生于脂肪酸的β氧化過程[24-25]，但由于高達(dá)奶酪等細(xì)菌成熟奶酪缺乏藍(lán)紋奶酪等霉熟奶酪中的脂肪和游離脂肪酸降解酶系統(tǒng)，因此，高達(dá)奶酪中發(fā)生的脂肪降解過程是不同的，Gehrig等[26]研究發(fā)現(xiàn)高達(dá)奶酪中甲基酮的形成可能是由一種尚未被完全認(rèn)知的緩慢酶反應(yīng)或化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生。

高達(dá)奶酪中檢測出的酸類，主要包括乳酸、檸檬酸、乙酸、丁酸、己酸、丙酮酸，這些物質(zhì)主要具有酸味、甜味、汗臭味。Califano等[13]發(fā)現(xiàn)高達(dá)奶酪中乳酸、檸檬酸、乙酸和丙酮酸的產(chǎn)量與時間和溫度直接相關(guān)，這些酸類物質(zhì)主要來源于糖酵解和檸檬酸代謝。其中檸檬酸代謝和由此產(chǎn)生的二氧化碳影響高達(dá)奶酪的質(zhì)地，并使得一些高達(dá)奶酪中出現(xiàn)“眼睛”，即奶酪孔洞的形成[27-28]。雖然原料乳中的大部分檸檬酸流失到了乳清當(dāng)中，但殘留的檸檬酸仍可在D型或L型發(fā)酵劑的作用下進(jìn)一步代謝成各種風(fēng)味成分，主要是乙酸、2，3-丁二酮和乙偶姻[2，29]。乳酸有助于奶酪早期階段的成熟，并通過許多其他途徑轉(zhuǎn)化形成多種風(fēng)味化合物；非發(fā)酵劑乳酸菌將乳酸轉(zhuǎn)化成乙酸和二氧化碳，這對于高達(dá)奶酪而言也是一種重要反應(yīng)。王磊等[30]的研究證明丁酸對高達(dá)奶酪的風(fēng)味有所貢獻(xiàn)，己酸則對高達(dá)奶酪風(fēng)味起修飾作用。Jo等[5]認(rèn)為丁酸可能是陳年高達(dá)奶酪中對香氣影響最大的酸類物質(zhì)。

醛類，主要包括2-甲基丁醛、3-甲基丁醛、2-甲基丙醛、12-甲基十三醛、己醛、庚醛和辛醛，它們通常帶給高達(dá)奶酪堅果味、肉湯味、可可味、干草味及陳腐味。研究人員在陳年和高脂肪含量的高達(dá)奶酪成熟過程中觀察到了己醛、庚醛和辛醛濃度的增加，其中12-甲基十三醛被認(rèn)為是成熟高達(dá)奶酪的特征風(fēng)味物質(zhì)之一[15]。高達(dá)奶酪中的醛類是由脂肪酸代謝生成直鏈醛類；或氨基酸經(jīng)過降解后，再通過脫羧或Strecker反應(yīng)降解而生成[29]，例如異亮氨酸、亮氨酸和纈氨酸通過轉(zhuǎn)氨酶參與的生物合成途徑或Strecker降解途徑分別產(chǎn)生2-甲基丁醛、3-甲基丁醛和2-甲基丙醛，這幾種醛類物質(zhì)主要為高達(dá)奶酪?guī)砹藞怨逗涂煽晌禰31-34]。

酯類，主要包括乙酸乙酯、丁酸乙酯，主要賦予高達(dá)奶酪甜味、水果味及花果香。酯類由于香氣閾值較低，在高達(dá)奶酪的整體風(fēng)味中扮演著重要的角色，但高達(dá)奶酪中的酯類種類及含量在不同奶酪個體之間具有很大的差異[22]。Rehman等[35]和Alewijn等[22]發(fā)現(xiàn)高達(dá)奶酪中存在的大多數(shù)酯是長鏈脂肪酸乙酯。高達(dá)奶酪中乙酯的形成和短鏈脂肪酸是相關(guān)的，負(fù)責(zé)短鏈脂肪酸水解的酯酶也可以將脂肪酸酯化，從而產(chǎn)生酯類。Liu等[36]的研究表明，一些乳制品細(xì)菌產(chǎn)生的酯酶能夠催化奶酪環(huán)境中酯的形成，同時還可通過酯交換反應(yīng)得到，這些酯類能夠很好地掩蓋奶酪中脂肪酸和胺類物質(zhì)所產(chǎn)生的酸敗和苦澀味[37]。

內(nèi)酯主要包括δ-辛內(nèi)酯、δ-癸內(nèi)酯、δ-十二內(nèi)酯等。高達(dá)奶酪中的內(nèi)酯是由羥基脂肪酸的非酶酯交換作用和分子內(nèi)脫水成環(huán)作用形成，而羥基脂肪酸存在于乳脂中，且結(jié)合在乳脂甘油三酯中，不以游離形式存在，研究發(fā)現(xiàn)同一時刻的羥基脂肪酸水解產(chǎn)生量與內(nèi)酯的生成量差距過大，因此奶酪中的內(nèi)酯主要通過甘油三酯中酯化的羥基脂肪酸經(jīng)過酯交換反應(yīng)直接釋放[38]。內(nèi)酯通常賦予高達(dá)奶酪以細(xì)膩、甜味、椰子類的味道[39]，內(nèi)酯在高達(dá)奶酪中的含量往往是微量的，但其閾值相對較低[40]，因此對高達(dá)奶酪的整體風(fēng)味表現(xiàn)有重要貢獻(xiàn)。

在高達(dá)奶酪的風(fēng)味物質(zhì)中，還有一部分物質(zhì)，含量不高，但仍然對風(fēng)味有較為重要的影響，包括醇類、吡嗪類和硫化物。醇類，主要包括乙醇、2-甲基-1-丁醇、2-甲基-1-丙醇，主要為高達(dá)奶酪?guī)砭凭?、甜味及花香味，高達(dá)奶酪中醇類的來源主要有乳糖代謝、甲基酮還原、氨基酸代謝以及亞油酸和亞麻酸的代謝。吡嗪類，主要包括2-異丁基-3-甲氧基吡嗪，此物質(zhì)在奶酪中有一種類似甜椒的香味[41]，在目前的研究中，Jo等[5]所測的36種高達(dá)奶酪中有33種含有此物質(zhì)，甲氧基吡嗪被認(rèn)為是由于微生物代謝產(chǎn)生。Murray等[42]認(rèn)為，由于側(cè)鏈的相似性，纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸是相應(yīng)甲氧基吡嗪的前體。硫化物，主要包括二甲基二硫醚、二甲基三硫醚，甲硫基丙醛、二甲基二硫醚。二甲基三硫醚被認(rèn)為是高達(dá)奶酪中存在的關(guān)鍵含硫化合物，陳化高達(dá)奶酪中的含硫化合物濃度較高，這可能與陳化高達(dá)奶酪肉湯風(fēng)味增加有關(guān)，硫化物主要來源于乳蛋白中甲硫氨酸的降解[31]，主要賦予高達(dá)奶酪以類似肥皂的氣味以及辛辣味。

此外，高達(dá)奶酪中的乳糖、氨基酸和多肽、礦物質(zhì)鹽（如氯化鈉、谷氨酸鈉）等也與其風(fēng)味表現(xiàn)有著密不可分的關(guān)系。其中乳糖的主要轉(zhuǎn)化過程導(dǎo)致乳酸鹽的形成，給人一種溫和的帶有新鮮感的酸味；氨基酸和多肽主要帶給高達(dá)奶酪以苦味和濃厚感，Visser等[43]在高達(dá)奶酪中發(fā)現(xiàn)了多種苦味多肽，而多肽的積累可能導(dǎo)致奶酪中的苦味和其它異味，這些多肽需要迅速降解以防止苦味產(chǎn)生；氯化鈉是奶酪中咸味的主要貢獻(xiàn)者、谷氨酸鈉主要帶來鮮味。

4 影響高達(dá)奶酪風(fēng)味的因素

研究表明，原料乳、添加劑、發(fā)酵劑、涂層和成熟條件等都對高達(dá)奶酪最終風(fēng)味的形成有著重要影響，高達(dá)奶酪制作工藝如圖1所示。

圖1 高達(dá)奶酪工藝流程Fig.1 Manufacture process of Gouda cheese

4.1 原料乳

原料乳的主要成分為水、蛋白質(zhì)、脂肪、乳糖以及礦物質(zhì)等，原料乳的多組分的混合體系對高達(dá)奶酪的風(fēng)味形成有著重要影響[44]。原料乳中的蛋白質(zhì)含量直接影響高達(dá)奶酪的最終產(chǎn)量和呈味多肽的產(chǎn)生，副酪蛋白與水的比例在奶酪生產(chǎn)過程中也一直被重視[2]；乳糖的含量則主要影響成熟高達(dá)奶酪的酸度；高達(dá)奶酪中的苦味及金屬味可通過控制原料乳中的礦物質(zhì)種類及含量而得到改善[24，45]。原料乳中的異味，特別是與脂肪相關(guān)的異味，可能會被帶到奶酪當(dāng)中，所用原料乳中的脂肪和酪蛋白含量也自然影響高達(dá)奶酪產(chǎn)量和風(fēng)味。高達(dá)奶酪所用的原料乳選用新鮮無異味的全脂巴氏殺菌牛奶，脂肪含量需大于3.1%[16]。Jung等[23]對去膽固醇高達(dá)奶酪及普通高達(dá)奶酪進(jìn)行了比較研究，證實了去除膽固醇對高達(dá)奶酪的風(fēng)味及質(zhì)構(gòu)有著較大影響。其中去膽固醇高達(dá)奶酪的水分含量高于普通高達(dá)奶酪，這必然使得去膽固醇高達(dá)奶酪的質(zhì)地偏軟。此外，該研究還發(fā)現(xiàn)，成熟初期去膽固醇高達(dá)奶酪多出了9種風(fēng)味化合物，包括2種酯類化合物、1種醛類化合物、2種醇類化合物和4種雜類化合物，且在成熟初期去膽固醇高達(dá)奶酪的風(fēng)味化合物含量高于普通高達(dá)奶酪，而成熟后期則反之。Leuven等[6]通過對生牛乳高達(dá)奶酪及巴氏殺菌乳高達(dá)奶酪的對比研究發(fā)現(xiàn)，“甜味”和“水果味”與成熟6周的生牛乳高達(dá)奶酪相關(guān)性較大，而含硫化合物與成熟程度較高的巴氏殺菌乳高達(dá)奶酪的風(fēng)味強(qiáng)度有很強(qiáng)的相關(guān)性。

4.2 硝酸鹽和CaCl2

在高達(dá)奶酪的制作工藝中，高達(dá)奶酪生產(chǎn)過程中需加入硝酸鹽，加入硝酸鹽的目的是防止奶酪中酪丁酸桿菌孢子的萌發(fā)以減少厭氧條件下丁酸發(fā)酵分解糖類所產(chǎn)生的丁酸帶來的酸臭及汗臭味，防止奶酪中氣體的膨脹，同時防止早期奶酪中大腸菌群的產(chǎn)生。高達(dá)奶酪中添加的硝酸鹽一般為NaNO3或KNO3，添加量約為0.020% ～0.025%[2]。此外，添加CaCl2的目的是提高牛乳中蛋白質(zhì)的凝結(jié)性，保持牛乳中鈣離子的平衡，使酪蛋白膠束保持穩(wěn)定，避免膠束被破壞使酪蛋白溶解，利于奶酪中的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的增加。但CaCl2的添加量也對高達(dá)奶酪的風(fēng)味有著一定的影響。如適量添加CaCl2會減少人們對奶酪中苦味的感知，而過量添加則會導(dǎo)致高達(dá)奶酪產(chǎn)生更多苦味從而影響奶酪口感及整體風(fēng)味[2]。此外，張文青等[18]的研究發(fā)現(xiàn)隨著CaCl2添加量的增加，試驗中所測高達(dá)奶酪的硬度、彈性、咀嚼性、黏聚性、膠著性5個性質(zhì)均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。

4.3 發(fā)酵劑與輔助發(fā)酵劑

高達(dá)奶酪所使用的發(fā)酵劑通過快速發(fā)酵乳糖產(chǎn)生高濃度的乳酸，抑制了有害微生物的生長，同時代謝產(chǎn)生奶酪的風(fēng)味物質(zhì)。不同發(fā)酵劑菌種以及不同菌種的復(fù)配比例對高達(dá)奶酪的風(fēng)味有著重要影響，黃宜等[46]通過固相微萃取與氣質(zhì)聯(lián)用（solid-phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry，SPMEGC-MS）對由不同乳酸菌組合制作的高達(dá)奶酪模型進(jìn)行揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的測定，與商業(yè)發(fā)酵劑制作的對照組奶酪相比，發(fā)現(xiàn)按照1∶1∶1∶1的質(zhì)量比添加的乳酸乳球菌BD 3170、BD 2263、BD 164和腸膜明串珠菌LM 79組合以及按照1∶1∶1∶1的質(zhì)量比添加的乳酸乳球菌BD 2263、BD 164、BD 401和腸膜明串珠菌LM 79發(fā)酵劑組合制作的高達(dá)奶酪可檢出的風(fēng)味物質(zhì)中各組分平衡結(jié)果最好，其中3-羥基-2-丁酮、2-戊酮、庚酮等具有良好風(fēng)味表征的物質(zhì)含量較高，風(fēng)味表現(xiàn)較差的物質(zhì)（如胺類）的含量比較低。此外，高達(dá)奶酪發(fā)酵劑中的某些菌株可通過自身的代謝影響奶酪整體風(fēng)味。如用于生產(chǎn)高達(dá)奶酪的發(fā)酵劑中檸檬酸發(fā)酵菌株會分解乳糖的中間代謝產(chǎn)物丙酮酸，從而對高達(dá)奶酪中的酸奶風(fēng)味有所貢獻(xiàn)[2]。Ayad等[47-48]集中研究了從各種來自乳制品和非乳制品環(huán)境中分離的天然來源乳球菌菌株的能力，發(fā)現(xiàn)與商業(yè)上可獲得的發(fā)酵劑菌株相比，天然菌株具有獨特的風(fēng)味形成特性，天然菌株的復(fù)配可應(yīng)用于開發(fā)適合高達(dá)奶酪的發(fā)酵劑。

輔助發(fā)酵劑是從非發(fā)酵劑乳酸菌中經(jīng)過精細(xì)篩選的并特意添加至新鮮奶酪中，可提高產(chǎn)品的感官及風(fēng)味品質(zhì)，加快奶酪成熟的一類乳酸菌，在高達(dá)奶酪的制作中對其風(fēng)味的形成也有著重要影響[49-50]。輔助發(fā)酵劑的添加可調(diào)節(jié)高達(dá)奶酪發(fā)酵過程中產(chǎn)生的優(yōu)良香氣和不良?xì)馕?。薩如拉等[51]通過研究瑞士乳桿菌對高達(dá)奶酪品質(zhì)的影響發(fā)現(xiàn)，相較于不含輔助發(fā)酵劑的高達(dá)奶酪，加入瑞士乳桿菌LH-B02的高達(dá)奶酪鮮味更加明顯、回味更加濃郁。趙建[52]發(fā)現(xiàn)添加附屬發(fā)酵劑植物乳桿菌SP-3的奶酪中支鏈氨基酸的濃度以及奶酪的堅果味、水果味和奶油味都得到明顯提高，且含硫化合物減少、硫味降低。此外，輔助發(fā)酵劑的加入可改變奶酪中微生物的比例從而影響風(fēng)味，Oh等[53]在高達(dá)奶酪制作過程中添加植物乳桿菌H4和發(fā)酵乳桿菌H9作為輔助發(fā)酵劑，提高了乳桿菌、明串珠菌和鏈球菌的比例，并且添加H4和H9生產(chǎn)的高達(dá)奶酪相較于未添加輔助發(fā)酵劑的奶酪分別具有最高的甲酸和丙酸產(chǎn)量。

4.4 涂層

高達(dá)奶酪的涂層是其特有的工藝和標(biāo)志，除此之外，對于奶酪的風(fēng)味也有著影響作用。高達(dá)奶酪的涂層多為從原油中提取獲得的石蠟或微晶蠟[54]。涂層對奶酪風(fēng)味的影響主要通過隔絕空氣中的雜菌以及抑制奶酪內(nèi)部有害菌的繁殖來防止異味的產(chǎn)生。Radiati等[55]的研究中所用的高達(dá)奶酪涂層對霉菌和酵母菌有明顯抑制作用，從而避免了陳腐味及較強(qiáng)酒精味的產(chǎn)生，使成品高達(dá)奶酪具有良好的風(fēng)味表征。且不同材質(zhì)涂層對于高達(dá)奶酪風(fēng)味及質(zhì)構(gòu)的影響不同，Berti等[56]和Saravani等[57]對于高達(dá)奶酪涂層的研究表明，由于不同涂層材料所抑制的微生物種類不同，不同微生物所產(chǎn)生的不良?xì)馕兑膊槐M相同，因此不同涂層材料的高達(dá)奶酪一般具有一定的風(fēng)味差別。此外，Kampf等[58]發(fā)現(xiàn)涂層有助于高達(dá)奶酪形成更好的顏色和光澤。

4.5 成熟

成熟對于高達(dá)奶酪風(fēng)味的變化有著至關(guān)重要的影響，成熟期間高達(dá)奶酪中風(fēng)味物質(zhì)的含量及形成速率發(fā)生變化從而導(dǎo)致風(fēng)味變化[59]。El-Abd等[60]發(fā)現(xiàn)隨著成熟時間的延長，所有高達(dá)奶酪樣品的總固體（total solids，TS）、總氮（total nitrogen，TN）和可溶性氮（soluble nitrogen，SN）值和含鹽量均呈上升趨勢。短鏈脂肪酸和長鏈飽和脂肪酸含量也隨之增加。在成熟過程中，飽和羰基化合物和不飽和羰基化合物均呈上升趨勢，其中不飽和羰基化合物的增加最為明顯。Alewijn等[22]對4個不同批次的高達(dá)奶酪在長達(dá)兩年多的成熟過程中產(chǎn)生的脂肪衍生風(fēng)味化合物進(jìn)行了監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)總游離脂肪酸濃度呈線性增長；研究中還發(fā)現(xiàn)δ-內(nèi)酯的產(chǎn)生速率最初很快，但在20周左右達(dá)到一個高峰，內(nèi)酯的產(chǎn)生變慢，同時量也有所下降；成熟過程中乙酯的形成變化很大，酮類含量略有升高。

5 結(jié)語

高達(dá)奶酪具有獨特的風(fēng)味和外觀，在國內(nèi)奶酪市場迅速發(fā)展的背景之下，其在國內(nèi)市場具有良好的發(fā)展前景。但高達(dá)奶酪這類原制奶酪并未被國內(nèi)消費(fèi)者所熟知，基于此原因，本文在綜述高達(dá)奶酪工藝特點的基礎(chǔ)之上，總結(jié)了高達(dá)奶酪的感官及風(fēng)味特征，闡述了高達(dá)奶酪中的特征風(fēng)味物質(zhì)及其形成機(jī)理，梳理了有關(guān)高達(dá)奶酪風(fēng)味形成的影響因素。

高達(dá)奶酪因口感溫和、奶香味相對濃郁而受到消費(fèi)者的喜愛，但與其它原制奶酪一樣，高達(dá)奶酪所具有的肉湯味、咸味及苦味不易被國內(nèi)消費(fèi)者所接受。因此，如何根據(jù)中國消費(fèi)者的口味生產(chǎn)原制或再制高達(dá)奶酪，進(jìn)行高達(dá)奶酪的風(fēng)味改良值得思考和研究。此外，高達(dá)奶酪成熟過程又伴隨著復(fù)雜多變的微生物及生化反應(yīng)，高達(dá)奶酪在一系列原發(fā)或繼發(fā)性的反應(yīng)過程中形成了種類繁多的風(fēng)味物質(zhì)，代表性的圓形孔洞也隨之形成，從而使得高達(dá)奶酪在風(fēng)味及質(zhì)構(gòu)方面具有特征性，然而國內(nèi)對此領(lǐng)域的研究還偏少，仍需進(jìn)一步加強(qiáng)。