淺談犬瘟熱病毒病的防控

葛向平

（山東省膠州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 266300）

1 犬瘟熱病原學(xué)

犬瘟熱病毒（Canine distemper virus,CDV）屬于副黏病毒科、麻疹病毒屬，CDV 病毒粒子大多為長桿形、圓形或橢圓形，少數(shù)呈不規(guī)則、長絲形，為不分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA 病毒，有囊膜，對外部環(huán)境敏感，直徑約為18nm，分子量約6×106Da，可引起核內(nèi)包涵體。目前至少有9 個(gè)已確定了的犬瘟熱病毒基因型，分別為美洲Ⅰ型、美洲Ⅱ型、亞洲Ⅰ型、亞洲Ⅱ型、歐洲Ⅰ型、歐洲Ⅱ型、歐洲Ⅲ型、南非型和南美Ⅰ型、南美洲Ⅱ型。

因CDV 為有囊膜的病毒，對外界環(huán)境比較敏感，抵抗力弱，不耐熱，56℃30min 即可滅活，不耐酸，在pH3.0 條件下即可失去活性，對有機(jī)溶劑、紫外線、甲醛、乙醚均敏感，通常使用的消毒劑都可將CDV 滅活。

2 CDV 流行病學(xué)

犬瘟熱一年四季均可發(fā)生，但在冬季、春季、秋季比較多發(fā)，具有一定的周期性，一般每2～3 年流行1 次，但有的地區(qū)也會(huì)呈現(xiàn)不定時(shí)的發(fā)病流行，犬瘟熱宿主廣泛，包含犬科、鼬科、貓科、浣熊科、靈貓科和熊科等，CDV 的宿主范圍還在不斷擴(kuò)大。CDV 患病動(dòng)物、潛伏期帶毒動(dòng)物、死亡動(dòng)物尸體都是CDV 傳染源，CDV 可通過呼吸道和消化道傳播，長期帶毒的動(dòng)物主要通過排泄物、分泌物排毒，造成其他動(dòng)物感染。

3 CDV 臨床癥狀

2 月齡以內(nèi)的幼犬或未斷奶的幼崽對CDV 均有一定的抵抗力，主要受母源抗體保護(hù)，斷奶后隨著母源抗體水平逐漸降低或消失，對CDV 的易感性增強(qiáng)，導(dǎo)致發(fā)病，死亡率可達(dá)80%以上，對幼犬的危害性非常大。感染CDV 后通常前3～5d 無明顯癥狀，早期出現(xiàn)眼鼻膿性分泌物、精神不振、食欲下降，體溫升高并呈現(xiàn)雙向熱，體溫第1 次升高后逐漸恢復(fù)正常，但并不代表病犬恢復(fù)正常，當(dāng)體溫第2 次升高時(shí)會(huì)呈稽留熱，受高熱影響，病犬鼻鏡干燥、龜裂、腹瀉，便中帶血，同時(shí)伴隨嘔吐，有的病犬會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，CDV 容易侵害神經(jīng)系統(tǒng)，根據(jù)侵犯部位的不同而呈現(xiàn)不同的臨床癥狀。發(fā)病犬通常出現(xiàn)腳墊增厚、腫脹。本病容易導(dǎo)致細(xì)菌病繼發(fā)感染，如大腸桿菌、沙門氏菌等，使死亡率升高。

4 CDV 剖檢變化

CDV 感染死亡犬剖檢可見上呼吸道呈卡他性或化膿性感染，肺充血、出血，有滲出液，通常呈大葉性肺炎，心外膜有出血點(diǎn)，腸黏膜充血，腸系膜淋巴結(jié)充血腫大，胃黏膜膜卡他性炎癥，內(nèi)容物呈咖啡色糊狀，嚴(yán)重者呈“血腸”狀；CDV 侵害神經(jīng)系統(tǒng)后，病犬剖檢可見腦膜充血、出血，腦室出現(xiàn)明顯擴(kuò)張，并可見腦脊髓液增多。

5 CDV 診斷技術(shù)

5.1 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）檢測方法

PCR 診斷方法是具有敏感性高、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)的一種以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)為基礎(chǔ)的診斷技術(shù)，在CDV 流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)揮了非常重要的作用，在分子生物學(xué)診斷中得到廣泛應(yīng)用，通過提取CDV 基因組，使用設(shè)計(jì)好的特異性引物進(jìn)行RTPCR 擴(kuò)增，獲得的PCR 產(chǎn)物進(jìn)行序列測定后使用DNAstar 軟件進(jìn)行序列比對，可以了解CDV 的流行變異情況。

5.2 包涵體檢查

CDV 感染后極有可能在細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)包涵體，主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，但導(dǎo)致包涵體病變的并非只有CDV，因此，這種方法僅可以作為CDV 診斷的一般輔助技術(shù)。采集犬外周血、刮取鼻腔黏膜或刮取眼結(jié)膜，制成涂片，經(jīng)過HE 染色后在光學(xué)顯微鏡下觀察，染色后的包涵體一般為紅色，邊緣性好，呈圓形或橢圓形，一般每個(gè)細(xì)胞2～3 個(gè)。

5.3 病毒分離

病毒分離和培養(yǎng)是常用的、比較可靠的一種診斷CDV 的方法，但由于CDV 對環(huán)境抵抗力比較差，因此，病毒分離時(shí)對病料采集、采集位置都有要求，一般分離CDV 時(shí)，采集死亡病犬的肺臟，因肺臟載毒量比較高，分離率比較高，處理時(shí)注意低溫，以防病毒損失。CDV 適應(yīng)性比較常用的細(xì)胞為Vero 細(xì)胞，CDV 接種細(xì)胞后主要產(chǎn)生細(xì)胞融合樣病變，比較容易觀察和辨別。

5.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

ELISA 檢測是采用抗原抗體結(jié)合的原理，同時(shí)結(jié)合酶催化功能原理建立的一種檢測方法，其特點(diǎn)是快速、靈敏、操作簡單，在生產(chǎn)和實(shí)踐中廣泛應(yīng)用，一次檢測量可達(dá)百份。根據(jù)不同原理建立的ELISA 方法既可檢測CDV 抗體，也可檢測CDV抗原，敏感性、特異性強(qiáng)，對儀器要求低，采樣簡單，檢測速度快。同時(shí)，在CDV 流行病學(xué)調(diào)查中也有廣泛應(yīng)用。

5.5 膠體金試紙檢測

免疫膠體金技術(shù)采用抗原與特異性抗體結(jié)合后產(chǎn)生免疫反應(yīng)為原理，關(guān)鍵在于抗體制備，一般采用單克隆抗體，特異性強(qiáng)，診斷結(jié)果可靠、準(zhǔn)確。該方法在寵物醫(yī)院使用率非常高，對懷疑CDV 感染的病犬可采集病犬的排泄物或眼鼻分泌物進(jìn)行檢測，具有快速、準(zhǔn)確、使用簡單的特點(diǎn)。

6 治療

發(fā)生CDV 感染后一定要盡早治療，一旦出現(xiàn)癥狀，立馬進(jìn)行隔離治療。早期可直接注射犬瘟熱高免血清，注射劑量為1ml/kg，小型犬一般為3～5ml，中大型犬為5～10ml，同時(shí)結(jié)合干擾素或單抗等藥物進(jìn)行治療。如果發(fā)病犬出現(xiàn)高熱、腹瀉、嘔吐等癥狀，可見眼窩凹陷，說明病犬嚴(yán)重脫水，治療時(shí)要注意及時(shí)補(bǔ)充水分，通常使用輸液法幫助患病犬迅速補(bǔ)充水分，一般使用5%的葡萄糖氯化鈉注射液，多數(shù)情況補(bǔ)液量為100～300ml，補(bǔ)液時(shí)最好聯(lián)合使用利巴韋林、抗生素、維生素C、輔酶A、肌苷等抗病毒、能量類藥物。如果發(fā)病犬發(fā)生酸中毒，應(yīng)在補(bǔ)液的時(shí)候添加5%碳酸氫鈉，以糾正酸中毒。如果發(fā)病犬排便帶血，說明犬消化道內(nèi)有出血，此時(shí)應(yīng)注射止血類藥物。出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的發(fā)病犬如果癥狀嚴(yán)重可以考慮注射鎮(zhèn)定藥物。

7 預(yù)防與控制

（1）犬瘟熱主要以預(yù)防為主，一旦發(fā)生犬瘟熱疫情，為防止其他動(dòng)物受感染，應(yīng)做好病犬隔離，如果有死亡犬，一定要把病犬尸體進(jìn)行無害化處理，并將犬舍進(jìn)行徹底消毒。

（2）預(yù)防犬瘟熱最重要的是做好免疫，提高動(dòng)物自身免疫力，目前最常用的犬瘟熱疫苗大多數(shù)為聯(lián)苗（犬用），進(jìn)口苗較多，主要是五聯(lián)苗、六聯(lián)苗等，國內(nèi)常用的有吉林五星犬四聯(lián)苗。首免日齡一般在50 日齡左右，這時(shí)犬免疫后能產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答，也不會(huì)因免疫疫苗產(chǎn)生過大的免疫應(yīng)激反應(yīng)，更有利于抗體的產(chǎn)生，為更有效的預(yù)防犬瘟熱，一般建議進(jìn)行加強(qiáng)免疫，加強(qiáng)免疫的時(shí)間為10 周齡，成年犬一般每年加強(qiáng)1次免疫，免疫方式一般為肌肉免疫，劑量為1 頭份。犬瘟熱宿主較多，除了犬還有水貂等毛皮動(dòng)物，水貂用犬瘟熱疫苗多為犬瘟熱活疫苗單苗或犬瘟熱-水貂病毒性腸炎二聯(lián)活疫苗，首免日齡一般為55 日齡。

（3）做好免疫接種并不代表犬瘟熱一定不會(huì)發(fā)生，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好犬舍衛(wèi)生清掃，并定期消毒，能有效減少犬瘟熱的發(fā)生，同時(shí)，做好定期消毒對其他疾病也有很好的預(yù)防作用。CDV 對消毒劑非常敏感，一般常用的消毒劑有3%的氫氧化鈉、甲醛、5%的碳酸消毒液，對CDV 均有良好的消毒作用。

（4）犬常發(fā)寄生蟲病，寄生蟲病容易誘發(fā)犬瘟熱，定期給犬驅(qū)蟲非常必要，一般常用的驅(qū)蟲藥物有阿維菌素、伊維菌素及丙硫咪唑，使用方法得當(dāng)均有良好的驅(qū)蟲效果。