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    禽霍亂病的診斷和防治措施

    2022-08-15 00:46:46戰(zhàn)武
    中國畜禽種業(yè) 2022年6期
    關(guān)鍵詞:菌苗殺性血清型

    戰(zhàn)武

    (山東省棲霞市蘇家店畜牧獸醫(yī)站 265311)

    禽霍亂病是一種接觸性傳染病,家禽、野禽、鳥均可感染,發(fā)病季節(jié)不明顯,以夏秋季最多,且多發(fā)生于成年雞,傳染來源主要是400 日齡以上雞群中的帶菌雞。健康雞采食被病雞污染的飼料、飲水、蠅等昆蟲而感染;飼料缺乏維生素、蛋白質(zhì)及礦物質(zhì)營養(yǎng),濕度增加等是本病誘因。季節(jié)性發(fā)生的原因是由于外界條件,主要受氣候變化而引起。急性發(fā)病時(shí)有很高的致死率,慢性發(fā)病時(shí)死亡很少,急性病禽有較嚴(yán)重的下痢癥狀,所以稱之為禽霍亂。

    1 臨床癥狀

    禽霍亂臨床以急性型居多,慢性型多不為人注意,潛伏期一般為2~9d。急性病例無任何癥狀就突然發(fā)病而死亡,發(fā)病率、死亡率均較高。較急性的潛伏期為2~3d,主要表現(xiàn)精神委頓、嗜睡、垂翅縮頭、不食、腹瀉、糞便呈灰黃色綠色,肉髯呈紫黑色,體溫升高至43~44℃[1]。慢性病例逐漸消瘦、精神較差、貧血、冠髯蒼白腫大,關(guān)節(jié)腫脹,多見于急性發(fā)病后期,或者是由于毒力較弱的多殺性巴氏桿菌感染所致,死亡率不高。鴨的癥狀與雞相似,病寒戰(zhàn)、怕下水、下腭軟處腫大、舌高度腫脹、眼球下陷(不死,常失明) 流出大量液體。排出綠色、污黃色或清水樣糞便,幾天內(nèi)即死。病程長(zhǎng)的可見局部關(guān)節(jié)炎。

    2 病理變化

    禽霍亂急性與慢性病例在病理變化上有所不同。急性死亡的病雞,腹膜、肌胃、心冠及皮下脂肪出現(xiàn)顯著的出血性變化。肝臟具有特征性變化,呈實(shí)質(zhì)性肝炎,稍腫、質(zhì)稍脆,有灰白色無數(shù)小壞死灶布滿表面。慢性死亡病雞臨床癥狀以呼吸道表現(xiàn)嚴(yán)重時(shí),有許多黏液滲出物充滿鼻腔與氣管,若局限于冠髯、關(guān)節(jié)等病例,最初為水腫性腫脹,而后形成干酪樣滲出物。

    3 實(shí)驗(yàn)室診斷

    3.1 病料采集

    死于禽霍亂病的雞在全身器官中都可分離出多殺性巴氏桿菌。為預(yù)防雜菌污染,對(duì)死亡時(shí)間較長(zhǎng)的病禽可細(xì)菌分離病禽骨髓。慢性禽霍亂病例則采取有病灶的局部材料。

    3.2 培養(yǎng)基

    血液瓊脂、馬丁湯瓊脂和馬丁湯。

    3.3 細(xì)菌分離

    用鉑金鉺采取少許病料,接種于血液斜面上,37℃培養(yǎng)2h,即可分離出多殺性巴氏桿菌。

    4 細(xì)菌鑒定

    4.1 細(xì)菌形態(tài)

    病原一般存在于病禽內(nèi)臟、血液、分泌物和糞便中。它是一種卵圓形或短桿狀細(xì)菌,大小為0.25~0.6×0.6~2.5μm,常單個(gè)存在。

    4.2 菌落形態(tài)

    直徑2~3mm 呈圓形,光滑隆起、半透明、似奶油,靠近的菌落有互相融合現(xiàn)象,分不清彼此的界限,新分離的菌株皆為此種菌落形態(tài)。

    4.3 菌落熒光觀察

    將細(xì)菌37℃培養(yǎng)18~22h 后,放大810 倍,觀察菌落熒光。當(dāng)禽霍亂流行時(shí),菌落呈橘紅色熒光,毒力強(qiáng)的菌株在培養(yǎng)基上經(jīng)長(zhǎng)期傳代后或由慢性病灶中分離出的菌株,菌落熒光可能出現(xiàn)分化。蘭氏菌落較小,為1~2mm,熒光為蘭氏,毒力弱。其次為楔形變化,橘紅熒光的菌落中出現(xiàn)一條或多條糞樣色彩的楔形熒光,這是菌株不穩(wěn)定的表現(xiàn),通過機(jī)體12 代后,此種楔形變化的菌落即會(huì)消失。偶爾可看到粗糙型菌落的熒光,菌落有黃色熒光,表面有黑色、粗糙環(huán)狀紋。此種菌落不穩(wěn)定,仍可變?yōu)楣饣?、橘紅色熒光。

    橘紅色熒光多屬毒力強(qiáng)的菌落,但并不是絕對(duì)的,少數(shù)毒力弱的菌株也出現(xiàn)橘紅色熒光菌落。蘭氏熒光菌落是毒力弱的表現(xiàn),有時(shí)出現(xiàn)黃綠色熒光,也是毒力弱的表現(xiàn)。另一方面,培養(yǎng)基成分、平皿干濕度和培養(yǎng)時(shí)間等也在一定范圍內(nèi)影響熒光的色澤。

    4.4 莢膜染色

    有莢膜的菌體一般具有橘紅色熒光,沒有莢膜的菌體為蘭氏熒光,選橘紅色熒光菌落用鹽水稀釋,在高倍鏡下檢查,菌體周圍的暈圈即為莢膜。

    4.5 莢膜型檢查

    根據(jù)血清學(xué)分類,多殺性巴氏桿菌可分為4 個(gè)莢膜型,能引起雞霍亂病的是莢膜A 型多殺巴氏桿菌,用金色葡萄狀菌在含0.1%血紅素的馬丁瓊脂平皿上劃線,然后將待檢菌株與葡萄球菌線垂直劃線,在37℃保溫箱中培養(yǎng)12~16h 后觀察,觀察要及時(shí),若觀察過遲,則被抑制的菌又可生長(zhǎng)。

    4.6 生化試驗(yàn)

    多殺性巴氏桿菌能利用葡萄糖與蔗糖產(chǎn)酸,但不產(chǎn)氣,不溶血,在培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)。多殺性巴氏桿菌有一特點(diǎn),在15~20℃的環(huán)境中存活時(shí)間比2~4℃時(shí)長(zhǎng),可保存在普通冰箱內(nèi),每?jī)芍軅鞔? 次,若在室溫保存則菌種易發(fā)生變異。

    4.7 血清學(xué)檢查

    血清學(xué)檢查對(duì)急性病雞沒有意義,對(duì)慢性病雞有一定意義,目前較常用的是瓊擴(kuò)試驗(yàn)。

    (1)抗血清制備:可用12~16 周齡的公雞制備,將多殺性巴氏桿菌接種在用含0.1%血紅素的馬丁瓊脂上,37℃恒溫培養(yǎng)24h,用含0.3%福爾馬林的生理鹽水清洗,稀釋成每毫升含20億活菌的濃度,加礦物油乳化制成油乳劑抗原,用此抗原1ml接種于小公雞頸部皮下,3 周后放血,放血前一夜停喂飼料,分離出血清保存?zhèn)溆谩?/p>

    (2)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)抗原的制備:將多殺性巴氏桿菌的濃原菌液接種,37℃培養(yǎng)18~21h,用含0.3%福爾馬林的生理鹽水洗下菌苔,分裝入小試管內(nèi),放100℃水浴鍋內(nèi)加熱1h,然后離心30min,上清液即可用作瓊擴(kuò)試驗(yàn)抗原。

    (3)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn):8.5%氯化鈉溶液中加入0.9%~1.0%瓊脂和0.01%硫柳汞,加熱融化后即為瓊擴(kuò)試驗(yàn)用瓊脂。用時(shí)將瓊脂加熱融化后冷至約46℃時(shí),取6ml 放在25×75mm,玻片上或取1ml 放進(jìn)直徑9nm 平皿內(nèi),瓊脂凝固后挖孔,孔徑為4mm,各孔與中央孔相距6mm,中央孔加抗原外圍孔加血清,玻片與平皿放進(jìn)有濕紗布的盒內(nèi)以防干燥,恒溫培養(yǎng)后有沉淀線者為陽性反應(yīng)。

    5 防治措施

    5.1 衛(wèi)生管理的預(yù)防

    禽霍亂是由病雞或多殺性巴氏桿菌污染物接觸健康雞而引起發(fā)病。只要杜絕多殺性巴氏桿菌進(jìn)入雞舍,雞就不會(huì)發(fā)生禽霍亂病。

    雞感染的主要來源有多個(gè)方面,主要為病雞或仍帶有病原菌的康復(fù)雞。病雞向外排菌,康復(fù)雞可在某些應(yīng)激因素(如飼料變動(dòng)、受寒等)影響下突然發(fā)病而向外大量排菌,健康雞被感染易發(fā)病,因此,不同來源的雞群混養(yǎng)很危險(xiǎn),新引進(jìn)的后備雞應(yīng)放在一個(gè)與老雞完全隔離的環(huán)境中飼養(yǎng),老雞淘汰出售后,雞舍需經(jīng)過徹底清洗和消毒,才可引進(jìn)新雞。飼養(yǎng)員和被污染的用具也有將病菌帶進(jìn)雞舍的機(jī)會(huì),因此,在進(jìn)入雞舍前,飼料、用具和衣服等需進(jìn)行消毒,使病菌沒有進(jìn)入雞舍的機(jī)會(huì)。豬、狗、其他家禽和野生動(dòng)物等均可成為帶菌者而將病菌傳進(jìn)雞舍,因此,應(yīng)盡可能地防止其他動(dòng)物有接近雞群的可能性。

    5.2 藥物治療和預(yù)防

    抗生素對(duì)霍亂病的治療有不同程度的效果,療效成功與否取決于及時(shí)的治療和恰當(dāng)?shù)挠盟帲虼?,治療前?yīng)取用病死雞分離出的多殺性巴氏桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),篩選一種最佳藥物用于治療。

    (1)抗生素:青霉素、鏈霉素等按治療劑量和療程用藥,若病菌無抗藥性時(shí)均可達(dá)到滿意的效果,但捉雞和注射過程麻煩。金霉素和土霉素按0.1~0.2%量混在飼料中,連續(xù)飼喂3~5d,也可達(dá)到較好效果。青霉素和鏈霉素混在飼料中投給則無效。

    (2)磺胺類藥物:磺胺二甲基嘧啶、磷胺喹惡林和磺胺甲氧嗪等混在飼料中,含量為0.1%~0.5%,或混在飲水中,含量為0.04%~0.1%,連喂2~3d,有良好的療效。大劑量的磺胺連續(xù)飼喂會(huì)產(chǎn)生毒性,影響雞的生長(zhǎng)機(jī)能,降低劑量長(zhǎng)期服用。

    任何一種藥物都不能長(zhǎng)期應(yīng)用,長(zhǎng)期應(yīng)用則療效降低需增加藥物用量,這將增加生產(chǎn)成本,同時(shí)可能引起雞中毒而導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降。因此,需經(jīng)常更換治療藥物,更換某種藥物前,需對(duì)候選藥物作敏感性試驗(yàn)。但藥物治療不徹底,往往在停止用藥后雞又發(fā)病。

    治療病雞的同時(shí),要及時(shí)清除死雞與糞便,徹底消毒雞舍、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)和用具,每天1 次。病雞舍鄰近雞群可用減半量的藥物進(jìn)行預(yù)防性投藥,以便控制疫情。若疫情不嚴(yán)重時(shí),藥物治療量的1/10~1/4 可用于禽霍亂較長(zhǎng)期的預(yù)防[3]。

    5.3 接種菌苗進(jìn)行預(yù)防

    許多菌苗或疫苗血清型和免疫型一致,血清型不同,其免疫型也不同,但禽霍亂菌苗的情況則與此不同,當(dāng)用禽霍亂弱毒活菌苗免疫雞時(shí),沒有血清型或免疫型之分,用任何一個(gè)禽霍亂弱毒活菌苗免疫均可抵抗不同血清型禽霍亂強(qiáng)毒菌株的攻擊,表現(xiàn)出血清型可以是多個(gè),但免疫型只是1 個(gè)。如果用禽霍亂滅活菌苗免疫雞時(shí),則出現(xiàn)另外一種情況,免疫雞只可抵抗與菌苗相同血清型強(qiáng)毒的攻擊,對(duì)不同血清型的強(qiáng)毒攻擊時(shí),免疫雞死亡,表明菌苗無效。因此,使用滅活菌苗一定要與流行的禽霍亂強(qiáng)毒菌血清型一致才有效,二者血清型不一致,則菌苗無效。因此,滅活菌苗只能保護(hù)與菌苗相同的血清型強(qiáng)毒菌的攻擊,不能保護(hù)血清型不同強(qiáng)毒菌的攻擊?;罹鐒t可以保護(hù)所有血清型強(qiáng)毒菌的攻擊。

    (1)霍亂弱毒活菌苗:活菌苗有一共同的缺點(diǎn)是免疫期短,只有3 個(gè)月,且有一定毒力,在某些應(yīng)激因素下,有時(shí)會(huì)給雞群造成一定的損失,為避免發(fā)生這種意外損失,在雞群免疫前先用10 倍免疫量的活菌苗注射10~20 只雞,觀察3~5d,若雞無嚴(yán)重反應(yīng),再對(duì)大群雞進(jìn)行免疫注射。

    (2)禽霍亂滅活菌苗:禽霍亂滅活菌苗的優(yōu)點(diǎn)是安全,但其效果因制苗方法不同而有很大差別,存在免疫型問題,菌苗血清型必須與流行的禽霍亂強(qiáng)毒菌的血清型一致時(shí)才有效,否則免疫無效。目前,采用多種血清型的菌株混合制苗,禽霍亂血清多用于禽霍亂的短期預(yù)防,在長(zhǎng)途運(yùn)輸家禽時(shí),皮下或肌肉注射2ml 血清,有效預(yù)防期為10d 左右。

    6 結(jié)論

    禽霍亂病是家畜常見傳染病之一,在實(shí)踐養(yǎng)殖中應(yīng)堅(jiān)持預(yù)防為主的原則,做好衛(wèi)生管理、藥物治療、接種疫苗,有效降低家畜感染禽霍亂病的概率,減少禽霍亂病給養(yǎng)殖戶帶來的經(jīng)濟(jì)損失。

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