心型脂肪酸結(jié)合蛋白、半乳糖凝集素3 水平在急性心肌梗死患者外周血中表達(dá)及其對預(yù)后評估價值研究

宋 揚(yáng)，李世龍，王一，廖宏偉

唐山市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河北 唐山 063000

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）在臨床上普遍采用溶栓、冠脈搭橋、經(jīng)皮冠狀動脈手術(shù)等治療方法，雖然在一定程度上能提高患者的存活率，但少量患者仍會出現(xiàn)主要不良心血管事件（major adverse cardiac event，MACE）［1-2］。因此，有必要早期評估患者預(yù)后。心型脂肪酸的結(jié)合蛋白（heart type fatty acid binding protein，H-FABP）為一種新型的特異性心臟小胞質(zhì)蛋白，心肌受損后可快速釋放入血，因此可作為心肌損傷標(biāo)志物［3］。有研究表明，血管炎癥反應(yīng)在AMI發(fā)生及發(fā)展中發(fā)揮重要作用［4］。半乳糖凝集素3（galactose lectin 3，Gal3）為一種炎癥信號分子，可通過誘導(dǎo)單核細(xì)胞遷移促進(jìn)血管炎癥反應(yīng)［5］。目前，關(guān)于H-FABP、Gal3 水平變化與AMI 患者預(yù)后的相關(guān)報道較少。因此，本研究旨在探討H-FABP、Gal3 水平在AMI患者外周血中的表達(dá)及其對預(yù)后評估價值?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2020 年1 月至2021 年12 月收治的98 例AMI 患者納入AMI 組，另選取同期健康體檢者62 例納入健康組。AMI 組：男性56 例，女性42 例；年齡范圍44～74 歲，中位年齡61 歲；體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）范圍19～31 kg/m2，中位BMI 為24 kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合2001 版《急性心肌梗死相關(guān)診斷及治療指南》［6］中AMI 確診標(biāo)準(zhǔn)；（2）患者為首次發(fā)病，且臨床資料完整；（3）患者從發(fā)病至入院時長不足24 h。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）良、惡性腫瘤者；（2）近期感染史者；（3）精神疾病者；（4）重要器官功能障礙者；（5）合并慢性疾病者；（6）介入診療或栓子脫落導(dǎo)致的AMI；（7）免疫系統(tǒng)異常者。另選取62 例健康體檢者納入健康組，其中，男性39 例，女性23 例；年齡范圍47～72 歲，中位年齡62 歲；BMI 范圍19～29 kg/m2，中位BMI 為 24 kg/m2。兩組患者在性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者或家屬均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 一般資料收集 收集AMI 患者的年齡、性別、BMI、飲酒、吸煙史、三高疾病史、心肌梗死類型、冠脈病變數(shù)目、發(fā)病至入院時間和基線收縮壓（systolic blood pressure，SBP）、舒張壓（diastolic blood pressure，DBP）、甘油三酯（triglycerides，TG）、空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、心肌肌鈣蛋白I（cardiac troponin I，cTnI）、N-末端腦鈉肽前體（N-terminal pro brain natriuretic peptide，NT-proBNP）水平等基礎(chǔ)資料。

1.2.2 冠狀動脈的具體狹窄程度判定 AMI 患者實(shí)施相關(guān)的冠脈造影，常規(guī)Seldinger 法對患者的股或者橈動脈實(shí)施穿刺，多角度及體位對冠脈血管給予照射，采用Gensini積分［7］判定患者冠狀動脈的具體狹窄程度。Gensini 積分為各冠脈狹窄程度的計分乘以病變區(qū)域的系數(shù)之和。冠脈狹窄程度的計分：狹窄<25% 記1 分；狹窄25%～50% 記2 分；狹窄50%～75% 記4 分；狹窄75%～90% 記8 分；狹窄90%～99% 記16 分；狹窄99%～100% 記32 分。病變區(qū)域的系數(shù)：小分支記0.5；左回旋支的中或遠(yuǎn)段、右冠狀動脈、左前降支的遠(yuǎn)段記1.0；左前降支中段記1.5；回旋支近段或左前降支記2.5；左主干記5.0。

1.2.3 外周血H-FABP、Gal3 水平測定 健康組采集受試者空腹外周靜脈血5 ml，AMI 組采集入院后次日清晨和入院當(dāng)日患者空腹外周靜脈血5 ml，3 000 r/min 條件下離心10 min，離心半徑10 cm，取上清，酶聯(lián)免疫吸附法測定H-FABP（購買自上海廣銳生物科技有限公司；貨號：ER1297；規(guī)格：48T）、Gal3（上海博湖生物科技有限公司；貨號：BH-EL1283；規(guī)格：48T），所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.4 隨訪 AMI 患者治療后通過定期門診和電話隨訪（12 個月）記錄MACE 發(fā)生情況，包括心源性休克、充血性心力衰竭、猝死、再發(fā)心肌梗死、室性心動過速等。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 26.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。方差齊且符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)；方差不齊或偏態(tài)分布計量資料以中位數(shù)（四分位數(shù)）［M（P25，P75）］表示，組間比較采用Z 檢驗(yàn)。計數(shù)資料以例（百分率）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher 檢驗(yàn)。相關(guān)性則采用Pearson 分析；Logistics 回歸分析AMI 患者的預(yù)后不良影響因素；受試者工作特性曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）及曲線下面積（area under the curve，AUC）評估外周血H-FABP、Gal3 水平對AMI 患者預(yù)后不良的價值。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者外周血H-FABP、Gal3 水平比較 AMI 組患者外周血H-FABP、Gal3 水平明顯高于健康組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組患者外周血H-FABP、Gal3 水平比較［M（P25，P75）］

2.2 AMI 患者外周血H-FABP、Gal3 水平與Gensini 積分的相關(guān)性 AMI 患者Gensini 積分是（29.77±9.66）分。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，AMI 患者外周血Gal3、H-FABP 水平與Gensini 積分呈正相關(guān)（r=0.551、0.458，P<0.05）。見圖1。

圖1 AMI患者外周血H-FABP、Gal3水平與Gensini積分的線性散點(diǎn)圖

2.3 AMI 患者出院后MACE 發(fā)生情況 隨訪12 個月，98 例AMI 患者中，5 例出現(xiàn)心源性休克、9 例充血性心力衰竭、2 例猝死、6 例再發(fā)心肌梗死、4 例室性心動過速，MACE發(fā)生率為26.5%（26/98）。

2.4 AMI 患者不良預(yù)后影響因素的單因素分析 單因素分析結(jié)果顯示，年齡、冠脈病變數(shù)目、發(fā)病至入院時間、NT-proBNP、cTnI、Gensini積分、H-FABP、Gal3 為AMI 患者不良預(yù)后影響因素（P<0.05）。見表2。

表2 AMI 患者不良預(yù)后影響因素的單因素分析（）

表2 AMI 患者不良預(yù)后影響因素的單因素分析（）

注：1 mmHg=0.133 kPa

2.5 影響AMI 患者預(yù)后不良的多因素分析 以冠脈病變的數(shù)目、年齡、發(fā)病至入院時間、NT-proBNP、cTnI、Gensini積分、H-FABP、Gal3 為自變量，AMI 患者的預(yù)后作為因變量（未發(fā)生MACE=0，發(fā)生MACE=1），Logistic 回歸分析結(jié)果顯示，NT-proBNP、cTnI、三支病變、H-FABP、Gal3 為AMI患者不良預(yù)后獨(dú)立危險因素（P<0.05）。見表3。

表3 影響AMI 患者預(yù)后不良的多因素分析

2.6 外周血H-FABP、Gal3 水平對AMI 患者不良預(yù)后的評估價值 ROC 曲線顯示，H-FABP 聯(lián)合Gal3 評估AMI患者不良預(yù)后的AUC 明顯大于H-FABP、Gal3 單獨(dú)檢測（Z=2.194、2.626，P=0.028、0.009），敏感度和特異度亦高于H-FABP、Gal3 單獨(dú)檢測。見表4、圖2。

圖2 外周血H-FABP、Gal3水平評估AMI患者不良預(yù)后的ROC曲線

表4 外周血H-FABP、Gal3 水平對AMI 患者不良預(yù)后的評估價值

3 討論

AMI 為冠心病較嚴(yán)重類型，盡早恢復(fù)患者阻塞的冠狀動脈血流灌注，縮小其梗死面積是該病治療的主要手段，但成功將冠狀動脈開通后仍有少量患者會發(fā)生MACE［8］。因此，有必要早期評估預(yù)后以改善患者生活質(zhì)量。臨床上常通過心肌損傷標(biāo)志物評估AMI 患者預(yù)后，包括NT-proBNP、cTnI 等，但敏感度和特異度較低，還需尋找其他敏感指標(biāo)。

H-FABP 是心肌細(xì)胞胞漿內(nèi)含量較高的蛋白質(zhì)之一，占心臟全部可溶性蛋白質(zhì)4%～8%［9-10］。有研究顯示，心肌受損后1～3 h，血液和尿液中即可檢測到H-FABP 表達(dá)提升，8 h 后達(dá)到峰值，幾乎不被其他組織影響，而cTnI 等心肌損傷標(biāo)志物在心肌損傷后5～6 h 才可檢測到濃度提升，并于24～48 h 后達(dá)高峰。因此，與其他心肌損傷標(biāo)志物相比較，H-FABP 心臟特異性更高［11-12］。本研究結(jié)果顯示，AMI 組外周血H-FABP 水平明顯高于健康組，且隨著冠狀動脈狹窄程度增加而提升（P<0.05）。進(jìn)一步分析顯示，外周血H-FABP 水平為AMI 患者不良預(yù)后獨(dú)立危險因素（P<0.05）。這說明，外周血H-FABP 水平越高，提示心肌損傷程度越嚴(yán)重，治療后MACE 發(fā)生風(fēng)險越大。Gal3 主要由巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，通過非經(jīng)典途徑分泌至細(xì)胞表面和細(xì)胞外空間［13］。Gal3 主要由羧基端結(jié)構(gòu)域和氨基端結(jié)構(gòu)域組成，其特殊結(jié)構(gòu)使其具備多種功能：（1）具備mRNA 剪切活性，能調(diào)控細(xì)胞生長與死亡；（2）能促進(jìn)炎癥細(xì)胞活化，并刺激其釋放多種炎癥因子，介導(dǎo)細(xì)胞趨化；（3）可經(jīng)過其羧基端和細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的β-半乳糖苷殘基以及細(xì)胞表面糖蛋白互相作用，調(diào)節(jié)細(xì)胞與細(xì)胞外介質(zhì)粘附［14］。有研究顯示，Gal3 在自身免疫性疾?。ㄈ缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡等）中發(fā)揮重要作用，與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)［15］。Gehlken 等［16］的研究顯示，Gal3 可增強(qiáng)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)心肌細(xì)胞纖維化，加重心肌細(xì)胞損傷，與心力衰竭患者不良預(yù)后相關(guān)。動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定、破裂是AMI 發(fā)生的關(guān)鍵因素。有研究發(fā)現(xiàn)，抑制Gal3 活性后，動脈粥樣硬化斑塊明顯減少，且Gal3 能促進(jìn)巨噬細(xì)胞亞型向M1 表型分化，影響斑塊穩(wěn)定性，提示H-FABP 與AMI 發(fā)生密切相關(guān)［17］。本研究結(jié)果顯示，AMI 患者外周血Gal3 水平明顯提升，且隨著冠狀動脈狹窄程度增加而提升（P<0.05）。這說明，外周血Gal3 水平變化可反映AMI 患者病情的嚴(yán)重程度。本研究結(jié)果顯示，外周血H-FABP、Gal3 水平均對AMI 患者的不良預(yù)后存在一定的預(yù)測價值，但聯(lián)合檢測的敏感度、特異度更高，提示聯(lián)合檢測外周血H-FABP、Gal3 水平有助于更好地評估AMI 患者的不良預(yù)后，指導(dǎo)臨床定制個體化方案。

綜上所述，AMI 患者外周血H-FABP、Gal3 水平較高。H-FABP、Gal3 是AMI 患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險因素，兩者聯(lián)合檢測可提升預(yù)后的判定價值。