新型殼聚糖止血材料對大鼠股動脈出血模型止血效果研究

王卓君，王夢軍，孫久惠，陳哲遠，韓曉，劉穎，馬瑞珩，金紅旭

1.錦州醫(yī)科大學北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院研究生培養(yǎng)基地，遼寧 沈陽 110016 ；2.北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院 急診醫(yī)學科，遼寧 沈陽 110016 ；3.中國醫(yī)科大學北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院，遼寧 沈陽 110016

創(chuàng)傷后出血發(fā)生數(shù)小時內(nèi)，可迅速發(fā)展成創(chuàng)傷性休克，無法維持正常生命體征，導致組織臟器灌注不足，多器官功能障礙，增加患者病死率。因此，研究快速有效的止血方法已成為急救治療的關(guān)鍵部分［1］。目前，止血材料包括止血粉、粘合劑、水凝膠等多種天然和合成材料［2］，但均存在一定局限性，如抗菌性差、機械性能差、無法為加速傷口愈合過程提供水分等［3］。

殼聚糖是一種線狀多糖，由甲殼素部分脫乙?；?。甲殼素是自然界中含量僅次于纖維素的一種天然聚合物，由2-乙酰氨基-2-脫氧β-D-葡萄糖組成，其可給聚合物帶來依賴于pH 的正電荷［4］。高正電荷使殼聚糖具有刺激紅細胞粘附、纖維蛋白凝塊形成和促進血小板活化、血液凝固的功能；同時，殼聚糖具有透氧、增強免疫力、生物相容性高、生物降解性強、無抗原性、易得性、低毒、抗菌性、止痛等特點，在組織工程和生物醫(yī)學領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景［5-6］。但殼聚糖與無紡布結(jié)合而成的材料研究較少，無紡布高滲透性和多孔性可增加殼聚糖的止血效能。因此，本研究旨在探討殼聚糖與無紡布結(jié)合而成的新型殼聚糖止血材料對大鼠股動脈出血模型的止血效果?，F(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與試劑 新型殼聚糖止血材料購自中國科學院金屬研究所沈陽材料科學國家研究中心，商品殼聚糖材料購自北京健康廣濟有限公司，醫(yī)用明膠海綿購自江西祥恩醫(yī)療科技發(fā)展有限公司，醫(yī)用紗布購自新鄉(xiāng)市宏達衛(wèi)材有限公司。健康SD大鼠20 只購自北京唯尚立拓科技有限公司［許可證號SCXK（京）2016-0009］，雌雄不限，5～8 周齡，體質(zhì)量約300 g。

1.2 實驗動物分組 取20 只健康SD 大鼠，隨機分為 4 組，包括新型殼聚糖止血材料組（n=5）、商品殼聚糖材料組（n=5）、醫(yī)用明膠海綿組（n=5）、醫(yī)用紗布組（n=5）。

1.3 觀察指標 將大鼠麻醉后（腹腔注射10% 水合氯醛溶液0.03 ml/g），頸內(nèi)動脈置管給予心電監(jiān)護，腹股溝處備皮消毒，剝離出股動脈及股靜脈，在股動脈根部做一小切口，切口長度為動脈直徑的1/3，自由出血30 s 后，分別用同樣大小（2.0 cm×2.0 cm×0.5 cm）的新型殼聚糖止血材料、商品殼聚糖材料、醫(yī)用明膠海綿、醫(yī)用紗布覆蓋傷口表面，用100 g 砝碼壓迫止血，每3 min 揭開材料觀察止血效果。以移去敷料及砝碼后 3 min 無血液滲出為止血成功［7-9］。實驗過程中記錄大鼠基礎(chǔ)體質(zhì)量、基礎(chǔ)心率、自由出血量、止血成功率、止血失血量（即覆蓋止血材料至止血成功期間的出血量）、自由出血后心率、止血完成后心率。

止血成功率=止血成功數(shù)/實驗樣本數(shù)×100%

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 23.0 軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。計量資料以均數(shù)±標準差（）表示，比較采用方差分析；計數(shù)資料以例（百分率）表示，比較采用χ2檢驗。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 止血情況比較 在大鼠股動脈切口出血情況相似情況下，使用相同大小的止血材料，新型殼聚糖止血材料與醫(yī)用明膠海綿的止血成功率均為60.0%（3/5），商品殼聚糖材料的止血成功率為80.0%（4/5），醫(yī)用紗布的止血成功率為40.0%（2/5），4 組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。但新型殼聚糖止血材料可以達到醫(yī)用明膠海綿的止血標準。

2.2 4 組大鼠基礎(chǔ)體質(zhì)量、基礎(chǔ)心率、自由出血量、止血失血量、自由出血后心率及止血完成后心率比較 4 組大鼠的基礎(chǔ)體質(zhì)量、自由出血量、基礎(chǔ)心率、自由出血后心率比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。新型殼聚糖止血材料組、商品殼聚糖材料組、醫(yī)用明膠海綿組和醫(yī)用紗布組的止血失血量分別為（0.93±0.70）g、（1.17±0.54）g、（0.90±0.81）g、（2.67±1.17）g。新型殼聚糖止血材料組、商品殼聚糖材料組及醫(yī)用明膠海綿組的止血失血量均明顯少于醫(yī)用紗布組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；新型殼聚糖止血材料組、商品殼聚糖材料組及醫(yī)用明膠海綿組止血失血量比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。新型殼聚糖止血材料組、商品殼聚糖材料組、醫(yī)用明膠海綿組和醫(yī)用紗布組的止血完成后心率分別為（291.20±71.10）次/min、（332.60±71.01）次/min、（353.00±79.86）次/min、（175.40±42.28）次/min。新型殼聚糖止血材料組、商品殼聚糖材料組、醫(yī)用明膠海綿組的止血完成后心率明顯高于醫(yī)用紗布組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；而新型殼聚糖止血材料組、商品殼聚糖材料、醫(yī)用明膠海綿組的止血完成后心率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

表1 4 組大鼠基礎(chǔ)體質(zhì)量、基礎(chǔ)心率、自由出血量、止血失血量、自由出血后心率及止血完成后心率比較（）

表1 4 組大鼠基礎(chǔ)體質(zhì)量、基礎(chǔ)心率、自由出血量、止血失血量、自由出血后心率及止血完成后心率比較（）

3 討論

殼聚糖材料種類多樣，如薄膜、海綿、水凝膠、顆粒、纖維等。本研究應(yīng)用的新型殼聚糖止血材料，是一種殼聚糖與無紡布結(jié)合而成的纖維類材料。有研究顯示，去乙酰化程度的不同使殼聚糖表現(xiàn)出不同的止血效果［10］。本研究采用去乙?；潭葹?4%的殼聚糖。殼聚糖的止血機制主要通過粘附、激活紅細胞及血小板，通過內(nèi)源性凝血途徑形成堅固的血凝塊來達到止血的效果［11］。本研究結(jié)果顯示，新型殼聚糖止血材料組的止血失血量明顯少于醫(yī)用紗布組（P<0.05），考慮可能由于新型殼聚糖止血材料可以較好地粘附于傷口表面，快速激活纖維蛋白形成，堵塞血管防止再出血。無紡布作為一種常見的化工材料，與殼聚糖結(jié)合后，可增加止血材料的實用性和傷口處的粘附性，同時，其具有高滲透性和高表面積率，亦增加了殼聚糖的的止血效果［12-13］。良好的止血能力對穩(wěn)定機體的生命體征有重要作用。在創(chuàng)傷早期，及時有效止血能減少嚴重創(chuàng)傷對機體有效循環(huán)血量的影響，降低創(chuàng)傷性休克的發(fā)生率和病死率。有研究表明，將殼聚糖海綿/纖維應(yīng)用于豬動脈損傷休克模型，可以通過有效止血，穩(wěn)定平均動脈壓，提高存活率［14］。本研究結(jié)果顯示，新型殼聚糖止血材料的止血后心率明顯高于醫(yī)用紗布組（P<0.05），可能由于新型殼聚糖止血材料能迅速止血，大鼠的有效循環(huán)血量未受明顯影響，止血完成后心率較穩(wěn)定。這說明，新型殼聚糖止血材料可以有效防治大出血的產(chǎn)生，為后續(xù)治療提供基礎(chǔ)。

綜上所述，新型殼聚糖止血材料對大鼠股動脈出血具有明顯止血效果，有望成為日常民用和軍用止血的良好候選材料。