丹參注射液聯(lián)合常規(guī)治療對高血壓患者炎癥水平及心室重構(gòu)的影響Δ

張縣華，李澤鑫，胡雀璇，林龍齊，林智郡

(1.汕頭潮南民生醫(yī)院心血管內(nèi)科，廣東 汕頭 515144； 2.汕頭大學醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院內(nèi)科，廣東 汕頭 515041; 3.汕頭大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院超聲醫(yī)學科，廣東 汕頭 515041； 4.汕頭潮南民生醫(yī)院介入治療科，廣東 汕頭 515144； 5.汕頭潮南民生醫(yī)院眼科，廣東 汕頭 515144)

高血壓是一種以動脈壓升高為特征，并伴有器官功能性或器質(zhì)性改變的全身性疾病；此外，高血壓也是一個慢性炎癥過程，主要特征表現(xiàn)為免疫系統(tǒng)的過度激活[1]。血液中升高的炎癥因子除了會升高機體血壓外，還會進一步促進血管內(nèi)皮細胞損傷，誘導心肌細胞肥大、凋亡和心肌纖維化等，從而導致心臟發(fā)生肥厚、重塑及心力衰竭[2]。丹參注射液是由丹參制成的中藥注射劑，功效為通脈養(yǎng)心、活血化瘀，既往常被用于治療胸悶、冠心病和心絞痛等疾病[3]。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，丹參可以通過抑制炎癥因子的釋放使機體產(chǎn)生抗炎作用[4]?？紤]到這一藥理作用，本課題組分析丹參可能可以通過抗炎作用改善高血壓疾病。Toll樣受體4(TLR4)/髓樣分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)通路可調(diào)節(jié)多種炎癥因子的表達。本研究通過觀察丹參注射液聯(lián)合常規(guī)治療對高血壓患者炎癥水平及心室重構(gòu)的影響，以期為臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 資料來源

選取2019年4月至2020年9月汕頭潮南民生醫(yī)院(以下簡稱“我院”)收治的100例高血壓患者。納入標準：(1)高血壓的診斷標準參考《中國高血壓防治指南(2018年修訂版)》[5]，即收縮壓(SBP)≥140 mm Hg和(或)舒張壓(DBP)≥90 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)；(2)簽署治療同意書者。排除標準：(1)繼發(fā)性高血壓患者；(2)有冠心病、心肌病、先天性心臟病和糖尿病等可引起心臟病變的疾病者；(3)正在參加其他研究，或既往曾參與過相似研究者；(4)合并嚴重肝腎功能不全者；(5)近1個月內(nèi)服用過相關(guān)藥物治療者；(6)合并精神疾病者；(7)存在癡呆、認知功能障礙者；(8)存在免疫缺陷、感染性疾病者；(9)伴有惡性腫瘤者。本研究已通過我院倫理委員會批準進行。采用隨機數(shù)字表法將患者分為對照組(50例)和研究組(50例)，兩組患者的一般資料具有一致性，見表1。

表1 兩組患者一般資料比較Tab 1 Comparison of general data between two groups

1.2 方法

兩組患者入院后均給予常規(guī)治療，包括指導患者培養(yǎng)良好的生活方式、低鹽飲食、將體重控制在適中范圍以及適量運動；并口服苯磺酸氨氯地平片(規(guī)格：按C20H25ClN2O5計5 mg)1次5 mg、1日1次，卡托普利片(規(guī)格：25 mg)1次12.5 mg、1日3次等常規(guī)抗高血壓藥治療。在此基礎(chǔ)上，研究組患者聯(lián)合應(yīng)用丹參注射液(規(guī)格：每支裝10 mL)，1次20 mL，用5%葡萄糖注射液100 mL稀釋后靜脈滴注，1日1次。兩組患者均連續(xù)治療2周。

1.3 觀察指標

(1)觀察兩組患者治療前、治療結(jié)束后的血壓水平，包括DBP、SBP。測量前靜坐休息，采用水銀柱血壓計進行測量，均檢測3次，取平均值。(2)抽取兩組患者治療前、治療結(jié)束后的靜脈血8 mL，分為2管。①一管血液標本于室溫(25 ℃)下靜置0.5 h，經(jīng)3 600 r/min的速率離心12 min(離心半徑10 cm)，取上清液。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清白細胞介素6(IL-6)、C反應(yīng)蛋白(CRP)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平，檢測過程參考試劑盒(武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司)說明書步驟進行。②另一管血液標本進行抗凝處理，分離提取白細胞，采用蛋白質(zhì)印跡法檢測白細胞中TLR4、MyD88和NF-κB的蛋白表達水平。將提取的白細胞采用半干法電泳轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯膜，經(jīng)10%脫脂奶粉封閉2 h；依次加入特異性TLR4、MyD88和NF-κB一抗(1∶1 000)，采用化學發(fā)光法顯色、定影；以β-actin作為內(nèi)參，用UVP軟件掃描測定蛋白條帶灰度值，以目的蛋白與β-actin灰度值比值表示目的蛋白相對表達水平。(3)治療前、治療結(jié)束后采用SSD-710型超聲心動圖診斷儀(日本ALoka公司)評價患者的心室重構(gòu)指標，包括室間隔厚度(IVST)、左心室后壁厚度(LVPWT)和左心室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)。(4)觀察兩組患者的用藥安全性。

1.4 統(tǒng)計學方法

滎經(jīng)黑砂是一種歷史悠久的傳統(tǒng)工藝品，在傳承匠人先輩技藝的基礎(chǔ)上，我們還要結(jié)合當代美學、審美，做到傳承和創(chuàng)新并重，將其打造成中國文化的名片，才能把非物質(zhì)文化遺產(chǎn)發(fā)揚光大，讓其走向國際舞臺。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血壓水平比較

初到西點軍校的時候，我只有22歲，是系里最年輕的講師。當時二戰(zhàn)已經(jīng)結(jié)束，我覺得人生就像一場剛開始的盛宴。

表2 兩組患者治療前后血壓水平比較Tab 2 Comparison of blood pressure between two groups

2.2 兩組患者炎癥因子水平比較

兩組患者治療結(jié)束后的血清IL-6、CRP和TNF-α水平均較治療前降低，且研究組低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表3。

兩組患者治療結(jié)束后的SBP、DBP水平均較治療前降低，且研究組低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

研究組治療結(jié)束后的IVST、LVPWT和LVEDD水平均較治療前降低，且低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；對照組治療前后的IVST、LVPWT和LVEDD水平無明顯變化，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表4。

表3 兩組患者治療前后炎癥因子水平比較Tab 3 Comparison of inflammatory factors between two groups before and after

2.3 兩組患者心室重構(gòu)指標水平比較

此方法訓練出來的模型能用來檢測圖片中的人臉位置與置信度，定位出任意人臉區(qū)域，速度極快，將其運用到ATM機上的遮擋人臉判別上，不僅可以實現(xiàn)ATM機場景中的快速任意人臉定位，而且相比現(xiàn)有的多目標檢測模型人臉定位精度更高，速度更快。利用改進后YOLO模型進行目標人臉區(qū)域定位，輸出預(yù)測出的人臉框的位置信息與置信度；得到每個人臉框的概率信息后，利用NMS排除多余的人臉框，最終得到真實的人臉區(qū)域。

表4 兩組患者治療前后心室重構(gòu)指標水平比較Tab 4 Comparison of ventricular remodeling indicators between two groups before and after

2.4 兩組患者TLR4、MyD88和NF-κB的蛋白表達水平比較

兩組患者在治療期間均為發(fā)生明顯的不良反應(yīng)。

表5 兩組患者治療前后TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表達水平比較Tab 5 Comparison of expression levels of TLR4, MyD88 and NF-κB proteins between two groups before and after

2.5 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較

兩組患者治療結(jié)束后TLR4、MyD88和NF-κB的蛋白表達水平均較治療前降低，且研究組低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表5。

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3 討論

近年來的流行病學調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，我國高血壓的患病率達27.9%，治療率為45.8%，但控制率卻不容樂觀，僅為16.8%，可見高血壓的預(yù)防、控制與治療是目前臨床上亟待解決的一大難題[5]。高血壓的發(fā)病機制復(fù)雜，是多種因素綜合作用的結(jié)果。但普遍的研究均認可，血管內(nèi)皮損傷是重要的始動因子，而血管內(nèi)皮損傷介導炎癥反應(yīng)加強則貫穿著整個高血壓發(fā)病的始終[6-7]。以往的研究結(jié)果證實，高血壓患者體內(nèi)存在多種炎癥因子，這些炎癥因子在多種因素的刺激下，使得細胞因子表達失衡，逐漸產(chǎn)生慢性炎癥反應(yīng)[8-9]。某些炎癥因子存在因果關(guān)系，共同組成一條或多條通路，促進疾病發(fā)生或發(fā)展。MyD88依賴性途徑是Toll樣受體家族信號轉(zhuǎn)導通路的主要途徑；NF-κB具有強大的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能，可誘導特定基因的表達，激活多個炎癥性基因[10]。TLR4是最早發(fā)現(xiàn)的Toll樣受體家族成員，以往的基礎(chǔ)研究結(jié)果顯示，TLR4介導的MyD88胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導導致NF-κB激活，使效應(yīng)細胞分泌單核細胞趨化蛋白-1，致使血管內(nèi)皮損傷，最終導致高血壓的發(fā)生[11]。同時，在高血壓患者體內(nèi)，過度釋放的炎癥因子又會共同參與心室重構(gòu)的發(fā)生和發(fā)展[12]。丹參注射液的有效成分為丹參，有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，丹參可以抑制TNF-α和白細胞介素1β的表達[13]。丹參的有效成分丹參酮還可以使CRP水平降低，從而抑制炎癥反應(yīng)[14]。有關(guān)丹參注射液治療高血壓的相關(guān)報道并不少見，且均有不錯的療效。但有關(guān)丹參注射液作用于高血壓患者的具體機制尚不十分明確，因此，本次研究對TLR4/MyD88/NF-κB信號通路的表達水平進行探索，從分子層面觀察丹參注射液治療方案的有效性。

本研究結(jié)果顯示，在常規(guī)降壓治療的基礎(chǔ)上聯(lián)合丹參注射液治療高血壓患者，可獲得更好的降壓效果。丹參注射液可有效增加機體抗氧化物酶的活性，有效清除體內(nèi)的自由基，同時可有效緩解血管內(nèi)皮損傷，恢復(fù)內(nèi)皮細胞功能，從而控制機體血壓水平[15]。TNF-α是一種具有廣泛生物學活性的細胞因子，參與機體的免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)[16]；CRP是急性時相反應(yīng)蛋白，可直接參與炎癥與動脈粥樣硬化等心血管疾病[17]；IL-6是一種功能廣泛的多效性細胞因子，可調(diào)節(jié)多種細胞的生長與分化，可擴大炎癥反應(yīng)[18]。本研究結(jié)果顯示，聯(lián)合應(yīng)用丹參注射液治療高血壓患者，可控制炎癥因子水平，緩解心室重構(gòu)，且可有效降低TLR4、MyD88和NF-κB的蛋白表達水平。提示丹參注射液治療高血壓的主要作用機制可能與下調(diào)TLR4/MyD88/NF-κB信號通路的相關(guān)蛋白表達水平有關(guān)。TLR4是聯(lián)系天然免疫與獲得性免疫的橋梁，TLR4被激活后信號通路傳遞至下游的途徑主要有MyD88依賴性和非依賴性轉(zhuǎn)導途徑；NF-κB是MyD88非依賴性轉(zhuǎn)導途徑的關(guān)鍵信號，NF-κB激活后可刺激IL-6、CRP和TNF-α等多種炎癥因子基因的轉(zhuǎn)錄與表達，并激活獲得性免疫，最終引起全身或局部炎癥反應(yīng)綜合征，以致血管內(nèi)皮持續(xù)性損傷而發(fā)生心血管事件，造成心室重構(gòu)[19]。動物實驗研究亦發(fā)現(xiàn)，丹參的抗心肌重構(gòu)可能與降低TNF-α、IL-6及轉(zhuǎn)化生長因子-β1等炎癥因子表達水平有關(guān)[20]。丹參注射液的藥理作用包括改善心肌缺血、抗炎和改善微循環(huán)等[3]。侯道榮等[21]經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮可有效阻斷TLR4識別。也有研究結(jié)果證實，丹參所含的丹參酮ⅡA可明顯抑制NF-κB的表達[22]。TLR4、NF-κB的表達降低，可明顯減少對炎癥因子的刺激，從而有效控制炎癥因子水平，緩解心室重構(gòu)。

綜上所述，在常規(guī)治療基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用丹參注射液治療高血壓患者，可有效降低血壓，控制炎癥因子水平，緩解心室重構(gòu)，可能與下調(diào)TLR4/MyD88/NF-κB信號通路的相關(guān)蛋白表達水平有關(guān)。當然，中藥的效應(yīng)往往是多方面、多靶點綜合作用的結(jié)果，有關(guān)丹參注射液在治療高血壓中其他信號通路的變化情況仍有待進一步的研究論證。