整合素β1和層黏連蛋白受體1在小鼠牙發(fā)育不同階段牙胚組織中的表達(dá)及其意義

鄭赫南,周怡君,王爽爽,任飛龍,范心怡,史 冊,劉 紅

（1.吉林大學(xué)口腔醫(yī)院綜合治療科，吉林 長春 130021；2.吉林省牙發(fā)育及頜骨重塑與再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林 長春 130021；3.中國醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院·附屬口腔醫(yī)院口腔病理科，遼寧 沈陽 110002；4.吉林大學(xué)口腔醫(yī)院病理科，吉林 長春 130021）

牙體硬組織包括牙本質(zhì)、牙釉質(zhì)和牙骨質(zhì)。多種原因可引起牙體硬組織的缺損，生理狀況下牙釉質(zhì)和牙本質(zhì)的再生十分困難，而目前通過牙科材料對其進(jìn)行修復(fù)又缺乏天然組織的結(jié)構(gòu)，尤其是缺乏牙本質(zhì)小管的結(jié)構(gòu)，不能傳遞外界刺激［1-2］。所以，研究成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化及其形成硬組織的過程對于牙體組織缺損的修復(fù)和再生具有重要的意義。牙的發(fā)育分為蕾狀期、帽狀期和鐘狀期。在鐘狀期，前成釉細(xì)胞和前成牙本質(zhì)細(xì)胞被一層主要由層黏連蛋白等成分組成的特殊細(xì)胞外基質(zhì)，即基底膜分隔［3-4］。在成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞分化早期基底膜仍存在。隨著上述2種細(xì)胞的分化，細(xì)胞器逐漸移至分泌端胞質(zhì)，靠近基底膜一側(cè)，細(xì)胞核逐漸移至對側(cè)，遠(yuǎn)離基底膜一側(cè)，細(xì)胞形態(tài)逐漸從立方狀轉(zhuǎn)變?yōu)楦咧鶢?，該形態(tài)和功能上的不對稱分布稱為細(xì)胞的極性，特定的空間分布會(huì)促進(jìn)細(xì)胞分化和分子跨膜運(yùn)輸?shù)燃?xì)胞行為［5-8］。在細(xì)胞完全分化成熟前，基底膜逐漸降解消失，因此基底膜可能是成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞分化并建立細(xì)胞極性所必需的［3，9］?；啄さ闹饕煞譃閷羽みB蛋白，由α、β和γ鏈組成異三聚體［10］，層黏連蛋白受體包括整合素和非整合素，其中整合素β1和層黏連蛋白受體1（laminin receptor 1， LAMR1）是其最主要的2種受體［7，11］。層黏連蛋白及其受體介導(dǎo)的信號通路可能在成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化和牙發(fā)育中發(fā)揮重要作用。目前，二者在牙發(fā)育過程中的時(shí)空表達(dá)尚未見報(bào)道。本研究通過HE染色和免疫組織化學(xué)染色的方法，觀察整合素β1和LAMR1在小鼠磨牙發(fā)育不同階段牙胚組織中的表達(dá)，探討二者在成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞分化過程中的可能作用及意義。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 成年C57雄鼠5只，成年C57雌鼠10只，均為12周齡。所有小鼠均來自吉林大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物使用許可證號：SYXK（吉）2018-0006。所有小鼠均無系統(tǒng)性疾病，健康狀況良好。

1.2 主要試劑和儀器 15%乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）脫鈣液、各濃度梯度乙醇和4%多聚甲醛（北京化學(xué)工業(yè)集團(tuán)有限責(zé)任公司），大鼠抗小鼠整合素β1單克隆抗體（MAB1997，美國Millipore公司），兔抗小鼠LAMR1單克隆抗體（0900r，北京博奧森生物技術(shù)有限公司），羊抗大鼠二抗（美國Proteintech公司），免疫組織化學(xué)染色試劑盒（福建邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司），二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidine，DAB）（北京中杉金橋生物科技有限公司）。切片機(jī)和包埋機(jī)（美國Thermo Fisher公司），光學(xué)顯微鏡（日本Olympus公司）。

1.3 標(biāo)本制備 1只雄鼠與2只雌鼠合籠，次日清晨觀察陰栓，以觀察到陰栓計(jì)為第0.5天（embryonic day 0.5，E0.5）。當(dāng)小鼠胚胎分別發(fā)育至E13.5、E14.5、E16.5和E18.5時(shí)，取雌鼠脫頸處死，取出胚胎，分別為E13.5、E14.5、E16.5和E18.5組，每組5只，分離胚胎小鼠頭部于4%多聚甲醛4℃固定24 h后，梯度乙醇脫水，過二甲苯，浸蠟包埋，切片機(jī)切片；分離出生后5 d（postnatal day 5，PN5） 小鼠頭部 （PN5組，5只），4%多聚甲醛4℃固定24 h后，15%EDTA脫鈣液脫鈣7 d，梯度乙醇脫水，過二甲苯后浸蠟包埋，切片機(jī)切片。

1.4 HE染色觀察小鼠牙發(fā)育不同階段牙胚組織形態(tài)表現(xiàn) 烤片40 min后，常溫下脫蠟至水，蘇木精5 min，返藍(lán)，鹽酸乙醇分化30 s，伊紅20 min，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，樹膠封片，鏡下觀察拍照。

1.5 免疫組織化學(xué)染色檢測小鼠牙胚組織中整合素β1和LAMR1蛋白表達(dá)分布情況及表達(dá)水平 烤片40 min后，常溫下脫蠟至水，流水沖洗5 min，檸檬酸鹽95℃抗原修復(fù)15 min，冷卻至室溫后PBS緩沖液沖 洗 5 min×3次， 滴 加 3%H2O2，30 min后PBS緩沖液沖洗5 min×3次，血清封閉1 h，加一抗，4℃過夜，PBS緩沖液沖洗5 min×3次后加二抗，1 h后PBS緩沖液沖洗5 min×3次，加辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉素抗生物素工作液，20 min后PBS緩沖液沖洗5 min×3次，滴加DAB顯色液，中止顯色后蘇木精5 min，返藍(lán)，后鹽酸乙醇分化30 s，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，樹膠封片，空白對照以PBS緩沖液代替一抗，鏡下觀察拍照，采用Image Pro Plus軟件分析目的蛋白陽性信號平均光密度（IOD/Area）值，代表目的蛋白表達(dá)水平。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。小鼠不同部位牙胚組織中整合素β1和LAMR1蛋白表達(dá)水平均符合正態(tài)分布，以±s表示，多組間樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 E13.5組小鼠牙胚組織HE染色及整合素β1和LAMR1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果 E13.5組小鼠牙胚組織發(fā)育處于蕾狀期。HE染色：上皮細(xì)胞突入到外胚間充質(zhì)中，形成上皮芽，形狀如花蕾，上皮下方和周圍的外胚間充質(zhì)細(xì)胞增生，包繞上皮芽，未見細(xì)胞分化。免疫組織化學(xué)染色：整合素β1在上皮芽內(nèi)弱表達(dá)，上皮芽周圍的間充質(zhì)幾乎無表達(dá)；LAMR1在上皮芽弱表達(dá)，在上皮芽周圍間充質(zhì)和二者交界處即基底膜均有表達(dá)。見圖1。

圖1 E13.5組小鼠牙胚組織HE染色（A）及整合素β1（B）和LAMR1（C)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果（×400）Fig.1 Results of HE staining(A)and integrin β1（B）and LAMR1(C)immunohistochemical staining of tooth germ tissue in mice in E13.5 group(×400)

2.2 E14.5組小鼠牙胚組織HE染色及整合素β1和LAMR1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果 E14.5組小鼠牙胚組織發(fā)育處于帽狀期。HE染色：上皮芽繼續(xù)生長，體積逐漸增大，該上皮稱為帽狀期成釉器，分為外釉上皮層、內(nèi)釉上皮層和星網(wǎng)狀層；成釉器周圍外胚間充質(zhì)細(xì)胞密度增加，形成細(xì)胞凝聚區(qū)，稱為牙乳頭。免疫組織化學(xué)染色：整合素β1表達(dá)于星網(wǎng)狀層、內(nèi)釉上皮和基底膜，表達(dá)強(qiáng)度高于蕾狀期上皮，在牙乳頭和外釉上皮呈弱表達(dá)；LAMR1在口腔黏膜上皮和基底膜處表達(dá)較強(qiáng)，在內(nèi)釉上皮、外釉上皮、星網(wǎng)狀層細(xì)胞胞漿和牙乳頭呈弱表達(dá)。見圖2。

圖2 E14.5組小鼠牙胚組織HE染色（A）及整合素β1（B）和LAMR1（C）免疫組織化學(xué)染色結(jié)果（×200）Fig.2 Results of HE staining(A)and integrin β1（B）and LAMR1(C)immunohistochemical staining of tooth germ tissue in mice in E14.5 group(×200)

2.3 E16.5組小鼠牙胚組織HE染色及整合素β1和LAMR1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果 E16.5組小鼠牙胚組織發(fā)育處于鐘狀早期。HE染色：成釉器進(jìn)一步長大，形似吊鐘，稱為鐘狀期，初步具有牙尖形態(tài)，分為外釉上皮層、內(nèi)釉上皮層、星網(wǎng)狀層和中間層。免疫組織化學(xué)染色：整合素β1表達(dá)于內(nèi)釉上皮和基底膜，在外釉上皮、星網(wǎng)狀層細(xì)胞胞漿和牙乳頭呈弱表達(dá)；LAMR1在內(nèi)釉上皮、外釉上皮和基底膜均有表達(dá)，在星網(wǎng)狀層細(xì)胞胞漿和牙乳頭呈弱表達(dá)。見圖3。

圖3 E16.5組小鼠牙胚組織HE染色（A）及整合素β1（B）和LAMR1（C）免疫組織化學(xué)染色結(jié)果（×200）Fig.3 Results of HE staining(A)and integrin β1（B）and LAMR1(C)immunohistochemical staining of tooth germ tissue in mice in E16.5 group(×200)

2.4 E18.5組小鼠牙胚組織HE染色及整合素β1和LAMR1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果 E18.5組小鼠牙胚組織發(fā)育處于鐘狀晚期。HE染色：成釉器進(jìn)一步發(fā)育，內(nèi)釉上皮細(xì)胞向前成釉細(xì)胞分化，形態(tài)由立方狀變?yōu)楦咧鶢睢Ｃ庖呓M織化學(xué)染色：整合素β1表達(dá)于內(nèi)釉上皮、外釉上皮、靠近成釉細(xì)胞的牙乳頭細(xì)胞和基底膜，在星網(wǎng)狀層細(xì)胞胞漿呈弱表達(dá)；LAMR1在內(nèi)釉上皮、外釉上皮、靠近成釉細(xì)胞的牙乳頭細(xì)胞和基底膜均有表達(dá)，在星網(wǎng)狀層細(xì)胞胞漿呈弱表達(dá)。見圖4。

圖4 E18.5組小鼠牙胚組織HE染色（A）及整合素β1（B）和LAMR1（C）免疫組織化學(xué)染色結(jié)果（×200）Fig.4 Results of HE staining(A)and integrin β1（B）and LAMR1(C)immunohistochemical staining of tooth germ tissue in mice in E18.5 group(×200)

2.5 PN5組小鼠牙胚組織HE染色及整合素β1和LAMR1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果 PN5組小鼠牙冠發(fā)育完成。HE染色：內(nèi)釉上皮和外釉上皮相連接處為頸環(huán)，2層上皮在頸環(huán)處向根方增殖，稱為上皮根鞘；上皮根鞘形成向內(nèi)折的45°彎曲，形成上皮隔；在成釉器與牙乳頭交界處的基底膜兩側(cè)，具有呈高柱狀整齊排列的分化成熟的成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞，已有釉質(zhì)和牙本質(zhì)形成，牙冠發(fā)育完成。免疫組織化學(xué)染色：整合素β1和LAMR1蛋白均在成釉細(xì)胞分泌端和成牙本質(zhì)細(xì)胞分泌端廣泛表達(dá)；牙尖處成熟的成牙本質(zhì)細(xì)胞中整合素β1和LAMR1蛋白表達(dá)水平（0.203±0.010和0.174±0.018）高于牙尖之間和牙頸部不成熟成牙本質(zhì)細(xì)胞 （0.152±0.011和 0.158±0.025）（P＜0.05）；牙乳頭細(xì)胞中整合素β1和LAMR1蛋白均有表達(dá)，但其表達(dá)水平均低于成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞（P＜0.05）。見圖5和表1、2。

圖5 PN5組小鼠牙胚組織HE染色及整合素β1和LAMR1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果Fig.5 Results of HE staining and integrin β1 and LAMR1 immunohistochemical staining of tooth germ tissue in mice in PN5 group

2.6 各組小鼠牙發(fā)育不同階段牙胚組織中整合素β1和LAMR1蛋白表達(dá)水平 E13.5組小鼠牙胚組織上皮芽中有整合素β1蛋白表達(dá)；E18.5組小鼠牙胚組織外釉上皮細(xì)胞中整合素β1蛋白表達(dá)水平高 于 E14.5和 E16.5組 （P＜0.05）； E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織星網(wǎng)狀層細(xì)胞中整合素β1蛋白表達(dá)水平高于E14.5組（P＜0.05）；PN5組小鼠牙胚組織成釉細(xì)胞中整合素β1蛋白表達(dá)水平高于E14.5、E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織內(nèi)釉上皮細(xì)胞/前成釉細(xì)胞（P＜0.05）；PN5組小鼠牙胚組織成牙本質(zhì)細(xì)胞中整合素β1蛋白表達(dá)水平高于E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織前成牙本質(zhì)細(xì)胞（P＜0.05）；E13.5、E14.5、E16.5和 E18.5組小鼠牙胚組織牙乳頭中無整合素β1蛋白表達(dá)，PN5組小鼠牙胚組織牙乳頭中有整合素β1蛋白表達(dá)。見表1。

表1 各組小鼠牙發(fā)育不同階段牙胚組織中整合素β1蛋白表達(dá)水平Tab. 1 Expression levels of integrin β1 in tooth germ tissue at different stages of tooth development of mice in various groups(n=5，±s）

表1 各組小鼠牙發(fā)育不同階段牙胚組織中整合素β1蛋白表達(dá)水平Tab. 1 Expression levels of integrin β1 in tooth germ tissue at different stages of tooth development of mice in various groups(n=5，±s）

*P＜0.05 vs E14.5 group；△P＜0.05 vs E16.5 group；＃P＜0.05 vs E18.5 group；○P＜0.05 vs odontoblast；□P＜0.05 vs ameloblast.The blank space indicated that the tissue structure had not formed or disappeared；“－”：Negative expression.

Group E14.5 E16.5 E18.5 PN5 Integrin β1 E13.5 0.123±0.009 0.106±0.031 0.147±0.016 0.107±0.007 0.105±0.024*Epithelial bud Outer enamel epithelium Stellate reticulum Inner enamel epithelium/Preameloblast/Ameloblast Preodontoblast/Odontoblast Dental papilla 0.145±0.008*△0.114±0.007*0.159±0.0110.149±0.0160.148±0.0170.193±0.002*△＃0.203±0.009△＃0.141±0.007○□－－0.112±0.011－0.122±0.008－

E13.5組小鼠牙胚組織上皮芽中有LAMR1蛋白表達(dá)；E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織外釉上皮細(xì)胞中LAMR1蛋白表達(dá)水平高于E14.5組（P＜0.05）；E14.5、E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織星網(wǎng)狀層細(xì)胞中有LAMR1蛋白表達(dá)；E16.5、E18.5和PN5組小鼠牙胚組織內(nèi)釉上皮細(xì)胞/前成釉細(xì)胞/成釉細(xì)胞中LAMR1蛋白表達(dá)水平高于E14.5組小鼠牙胚組織內(nèi)釉上皮細(xì)胞（P＜0.05）；PN5組小鼠牙胚組織成釉細(xì)胞中LAMR1蛋白表達(dá)水平高于E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織內(nèi)釉上皮細(xì)胞/前成釉細(xì)胞（P＜0.05）；E18.5和PN5組小鼠牙胚組織（前）成牙本質(zhì)細(xì)胞中LAMR1蛋白表達(dá)水平高于E16.5小鼠牙胚組織前成牙本質(zhì)細(xì)胞（P＜0.05）；PN5組小鼠牙胚組織成牙本質(zhì)細(xì)胞中LAMR1蛋白表達(dá)水平高于E18.5組小鼠牙胚組織前成牙本質(zhì)細(xì)胞（P＜0.05）；PN5組小鼠牙胚組織牙乳頭中LAMR1蛋白表達(dá)水平高于E13.5組（P＜0.05）；E14.5、E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織牙乳頭中無LAMR1蛋白表達(dá)。見表2。

表2 各組小鼠牙發(fā)育不同階段牙胚組織中LAMR1蛋白表達(dá)水平Tab. 2 Expression levels of LAMR1 in tooth germ tissue at different stages of tooth development of mice in various groups(n=5，±s）

表2 各組小鼠牙發(fā)育不同階段牙胚組織中LAMR1蛋白表達(dá)水平Tab. 2 Expression levels of LAMR1 in tooth germ tissue at different stages of tooth development of mice in various groups(n=5，±s）

*P＜0.05 vs E13.5 group；△P＜0.05 vs E14.5 group；＃P＜0.05 vs E16.5 group；○P＜0.05 vs E18.5 group；□P＜0.05 vs odontoblast；▲ P＜0.05 vs ameloblast.The blank space indicated that the tissue structure had not formed or disappeared；“－”：Negative expression.

Group E14.5 E16.5 LAMR1 E13.5 0.118±0.007 E18.5 PN5 Epithelial bud Outer enamel epithelium Stellate reticulum Inner enamel epithelium/Preameloblast/Ameloblast Preodontoblast/Odontoblast Dental papilla 0.120±0.018 0.123±0.016 0.126±0.013 0.150±0.010△0.120±0.010 0.156±0.009△0.149±0.015△0.132±0.012 0.164±0.012△0.196±0.014△?！?.180±0.012?！?.110±0.032*□▲0.157±0.018－0.118±0.010－0.148±0.010＃－

3 討 論

整合素家族是與層黏連蛋白相結(jié)合的主要受體家族［12］。整合素存在于多種組織中，是一種由α亞基和β亞基通過非共價(jià)結(jié)合成的跨膜受體［13］。在上皮細(xì)胞中，整合素β1與胞外基質(zhì)結(jié)合后復(fù)雜的胞內(nèi)信號通路就會(huì)啟動(dòng)，通過Ras相關(guān)C3肉毒素底物 1（Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1，Rac1）-胰島素受體酪氨酸激酶底物p53蛋白（insulin receptor substrate protein of53 kDa，IRSP53）途徑刺激肌動(dòng)蛋白骨架的重排，同時(shí)也通過Rac1介導(dǎo)的“由內(nèi)向外”的信號將層黏連蛋白等基質(zhì)分泌組裝至基底膜中，基底膜中的基質(zhì)又同整合素受體結(jié)合，產(chǎn)生“由外向內(nèi)”的信號，通過整合素連接激酶（integrin-linked kinase， ILK）支架因子建立正確的細(xì)胞極性，2個(gè)方向的信號形成正反饋系統(tǒng)介導(dǎo)著上皮細(xì)胞的增殖、分化和極性形成［14-16］。在上皮細(xì)胞中特異性敲除整合素β1后，小鼠牙胚的基底膜斷裂破碎，失去正常結(jié)構(gòu)，頸環(huán)處最為嚴(yán)重，成釉細(xì)胞呈圓形，失去極性，鐘狀期的牙尖不明顯，頸環(huán)發(fā)育不足，且出生后有釉質(zhì)發(fā)育不良和磨牙遲萌的現(xiàn)象［17-18］。在本研究中，E13.5～PN5，整合素β1在小鼠牙源性上皮中的表達(dá)逐漸增強(qiáng)，尤其在PN5成釉細(xì)胞的分泌端呈強(qiáng)表達(dá)，提示其可能參與成釉細(xì)胞的分化和極性的建立。整合素β1在E14.5組小鼠牙胚組織的星網(wǎng)狀層細(xì)胞中有表達(dá)，在E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織星網(wǎng)狀層細(xì)胞中表達(dá)降低，提示其可能對于星網(wǎng)狀層細(xì)胞的分化起到負(fù)反饋調(diào)節(jié)的作用。在E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織前成牙本質(zhì)細(xì)胞中，整合素β1弱表達(dá)，在PN5組小鼠成牙本質(zhì)細(xì)胞的分泌端表達(dá)增強(qiáng)，且在牙尖處較為成熟的成牙本質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)強(qiáng)于牙尖之間和牙頸部的尚未完全成熟的成牙本質(zhì)細(xì)胞，提示其可能參與成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化和極性的建立。整合素β1在E13.5組小鼠牙胚組織基底膜中無表達(dá)，在E14.5、E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織基底膜處均有表達(dá)，提示其可能參與前成釉細(xì)胞和前成牙本質(zhì)細(xì)胞與基底膜的結(jié)合，并通過“由外向內(nèi)”的信號介導(dǎo)細(xì)胞極性的建立。本研究結(jié)果提示：整合素β1可能介導(dǎo)了細(xì)胞外基質(zhì)信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)，并在成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化和極性形成過程中起到重要作用。

層黏連蛋白的非整合素受體主要是LAMR1，又稱67LR，同樣是一種細(xì)胞表面受體，與層黏連蛋白結(jié)合后，可以激活細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase 1/2，ERK1/2）-絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK） 和 c-Jun氨基末端激酶 （c-Jun N-terminal kinase-mitogen，JNK）-MAPK通路，調(diào)控細(xì)胞的黏附、分化、增殖、遷移和軸突生長［19-21］。在本研究中，LAMR1在E13.5～PN5組小鼠牙胚組織的牙源性上皮中表達(dá)逐漸增強(qiáng)，且在PN5組小鼠成釉細(xì)胞的分泌端有強(qiáng)表達(dá)，提示其可能參與成釉細(xì)胞的分化和極性的建立。LAMR1在E13.5組小鼠牙胚組織的牙乳頭中有表達(dá)，在E14.5、E16.5和E18.5組小鼠牙胚組織的牙乳頭中無表達(dá)，在PN5組小鼠牙胚組織牙乳頭中呈弱表達(dá)，提示其可能參與牙胚早期外胚間充質(zhì)細(xì)胞的增殖和聚集以及牙冠發(fā)育完成后牙乳頭細(xì)胞向牙根部牙乳頭細(xì)胞的增殖和分化。LAMR1在E16.5～PN5組小鼠牙胚組織前成牙本質(zhì)細(xì)胞/成牙本質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)逐漸增強(qiáng)，在PN5組小鼠牙胚組織成牙本質(zhì)細(xì)胞的分泌端呈強(qiáng)表達(dá)，且在牙尖處較為成熟的成牙本質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)強(qiáng)于牙尖之間和牙頸部的尚未完全成熟的成牙本質(zhì)細(xì)胞，提示其可能參與成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化和極性的建立。在E13.5～E18.5組小鼠牙胚組織的基底膜處均有LAMR1表達(dá)，提示其可能參與前成釉細(xì)胞和前成牙本質(zhì)細(xì)胞與基底膜的結(jié)合，并通過“由外向內(nèi)”的信號介導(dǎo)細(xì)胞極性的建立。本研究結(jié)果提示：LAMR1可能介導(dǎo)了細(xì)胞外基質(zhì)信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)，并在成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化和極性形成過程中起到重要作用。

綜上所述，整合素β1和LAMR1表達(dá)于小鼠磨牙發(fā)育不同階段牙胚組織中的基底膜、內(nèi)釉上皮/（前）成釉細(xì)胞和（前）成牙本質(zhì)細(xì)胞中，二者可能參與細(xì)胞外基質(zhì)信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)，并在成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化和極性形成的過程中起到重要作用。但在牙胚組織發(fā)育過程中，整合素β1和LAMR1在細(xì)胞分化和極性形成中的作用和具體機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。