白酒原酒中總酯皂化回流時(shí)間對(duì)總酯測(cè)定結(jié)果的影響分析

王 慧，陳 宇，王海英，越祖梅，劉 婷

（內(nèi)蒙古河套酒業(yè)技術(shù)中心，內(nèi)蒙古巴彥淖爾 015400）

白酒中的呈香呈味物質(zhì)種類較多，呈香物質(zhì)主要為酯類物質(zhì)。酯類物質(zhì)主要包括乙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、醋酸戊酯、丁酸戊酯和乳酸乙酯等等，統(tǒng)稱為白酒中的總酯。通常情況下，每個(gè)酒企都要對(duì)原酒進(jìn)行總酯的檢測(cè)，來判定在發(fā)酵過程中呈香物質(zhì)含量是否達(dá)標(biāo)。一般情況下是采用國(guó)標(biāo)GB/T 10345—2007 8.1 指示劑法來檢測(cè)白酒中的總酯，在檢測(cè)步驟中回流皂化30 min，由于酯類皂化不完全，影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性。

本研究對(duì)該項(xiàng)方法進(jìn)行優(yōu)化和改進(jìn)，延長(zhǎng)酯類皂化反應(yīng)回流時(shí)間，同時(shí)設(shè)計(jì)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性與準(zhǔn)確度較好。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

酒樣：本公司車間生產(chǎn)的白酒原酒樣品。

試劑：NaOH標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c（NaOH）=0.1 mol/L；NaOH 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c（NaOH）=3.5 mol/L；HSO標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c（HSO）=0.1 mol/L；乙醇溶液（無酯）40%（v/v）；酚酞指示劑（10g/L）；乙酸乙酯。

儀器設(shè)備：全玻璃蒸餾器；全玻璃回流裝置；堿式滴定管；酸式滴定管。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 檢測(cè)原理

用堿中和樣品中的游離酸，再加入一定量的堿與酯類發(fā)生皂化反應(yīng)，最后用硫酸標(biāo)定剩余的堿。通過堿消耗量計(jì)算總酯的含量。

1.2.2 檢測(cè)方法

取白酒原酒樣品50 mL 于250 mL 圓底燒瓶中，加1 滴酚酞指示劑，以NaOH 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[c（NaOH）=0.1 mol/L]滴定至粉紅色，記錄數(shù)據(jù)。再準(zhǔn)確加入NaOH 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[c（NaOH）=0.1 mol/L]25 mL（若樣品總酯含量高時(shí)，可加入50 mL），放入沸石，裝上冷凝管（冷卻水溫度宜低于15 ℃），沸水浴，冷凝回流30 min，冷卻，用HSO標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[c（HSO）=0.1 mol/L]標(biāo)定多余的NaOH，記錄數(shù)據(jù)。

取乙醇溶液（無酯）[40%（v/v）]50 mL于250 mL圓底燒瓶中，按上述方法同樣操作做空白試驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)。白酒原酒樣品中總酯含量的計(jì)算：

式中：X——樣品中總酯的質(zhì)量濃度，以乙酸乙酯計(jì)，g/L；

在《傲慢與偏見》這部小說的話語分析當(dāng)中，可以找到很多真實(shí)語料進(jìn)行語義學(xué)和語用學(xué)意義分析的對(duì)比研究。筆者從下面三個(gè)原文的語料片段入手進(jìn)行研究。

C——硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的實(shí)際濃度，mol/L；

V——空白實(shí)驗(yàn)樣品消耗硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；

V——樣品消耗硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；

88——乙酸乙酯的摩爾質(zhì)量的數(shù)值，g/mol；

50.0——吸取樣品的體積，mL。

1.2.3 試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)

1.2.3.1 酯類皂化時(shí)間設(shè)計(jì)

按照檢測(cè)方法進(jìn)行樣品處理，在檢測(cè)步驟中準(zhǔn)確加入25 mL 的0.1 mol/L 氫氧化鈉溶液后這一環(huán)節(jié)，設(shè)計(jì)皂化回流時(shí)間梯度，考察酯類皂化是否完全。在實(shí)驗(yàn)的過程中每個(gè)樣品至少做1 個(gè)平行樣。具體設(shè)計(jì)方案見表1。

表1 皂化時(shí)間實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.3.2 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)

按照檢測(cè)方法進(jìn)行樣品處理，在檢測(cè)步驟中酯類皂化這一環(huán)節(jié)中加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，設(shè)計(jì)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，考量酯類皂化時(shí)間的不同是否對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有損失，通過回收率來驗(yàn)證最佳的皂化時(shí)間，具體設(shè)計(jì)見表2。

表2 加標(biāo)回收設(shè)計(jì)

1.2.3.3 精密度和準(zhǔn)確度

采用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD 值來表示精密度，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差值越低表明檢測(cè)值精密度越好，檢測(cè)結(jié)果的重現(xiàn)性越好。在重復(fù)條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值，不應(yīng)超過平均值的2%。采用相對(duì)誤差來表示準(zhǔn)確度，相對(duì)誤差越低表示檢測(cè)結(jié)果越準(zhǔn)確。

2 結(jié)果與分析

2.1 皂化時(shí)間對(duì)總酯含量測(cè)定結(jié)果的影響

取多個(gè)樣品按照本文標(biāo)注檢測(cè)方法檢測(cè)，在酯類皂化回流階段根據(jù)設(shè)定的實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行回流皂化，在14 ℃溫度下，不同皂化時(shí)間下總酯含量測(cè)定結(jié)果見表3和表4。

由表3、表4 可知：皂化時(shí)間對(duì)原酒總酯含量測(cè)量結(jié)果有一定的影響，在皂化30 min時(shí)相對(duì)誤差和RSD 值均偏大，隨著皂化時(shí)間的延長(zhǎng)相對(duì)誤差和RSD值逐漸降低，當(dāng)皂化時(shí)間達(dá)到45 min時(shí)相對(duì)誤差和RSD 值處于最低狀態(tài)，RSD 值幾乎為零，說明樣品多次測(cè)定重復(fù)性較好；相對(duì)誤差在0 %～2 %范圍之內(nèi)，說明檢測(cè)準(zhǔn)確度更高。之后隨著皂化時(shí)間的增加趨于穩(wěn)定狀態(tài)。通過皂化時(shí)間對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響的分析實(shí)驗(yàn)，得出45 min 可以達(dá)到皂化完全，相對(duì)誤差和RSD 值最低，測(cè)定結(jié)果幾乎不再隨皂化時(shí)間延長(zhǎng)而改變。

表3 不同皂化時(shí)間原酒中的總酯含量

表4 不同皂化時(shí)間測(cè)定原酒總酯結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度

2.2 回收率對(duì)皂化時(shí)間確定的驗(yàn)證試驗(yàn)

在探索皂化時(shí)間時(shí)檢測(cè)的樣品中任意選擇2份原酒樣繼續(xù)設(shè)計(jì)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證已經(jīng)確定的皂化時(shí)間是否可行、準(zhǔn)確。在加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)中，每個(gè)樣品做2個(gè)平行樣，具體見表5。

表5 回收率對(duì)皂化時(shí)間驗(yàn)證

根據(jù)表5 可知，本文設(shè)定的皂化時(shí)間，在做加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)中回收率均較高，在93%～103%范圍內(nèi)，在皂化時(shí)間為45 min 時(shí)回收率達(dá)到最高，接近100%，說明在皂化45 min時(shí)，被測(cè)物質(zhì)幾乎沒有損失，驗(yàn)證了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度。

3 結(jié)論

原酒總酯的檢測(cè)中冷凝回流皂化過程按照國(guó)標(biāo)GB/T 10345—2007 8.1 指示劑法中所規(guī)定的皂化時(shí)間30 min是不能完全皂化的，影響到了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確程度和精密度。本文通過多種實(shí)驗(yàn)，探尋到檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確和精密度更高的最佳皂化時(shí)間為45 min，即可皂化完全，RSD 值幾乎為零，相對(duì)誤差在0 %～2 %，回收率可達(dá)100 %，準(zhǔn)確程度更高。

原酒酒樣中含有許多微量成分，包括酸、酯、醛、醇、酮、酚等，基質(zhì)較為復(fù)雜，檢測(cè)時(shí)影響因素較多。本研究對(duì)國(guó)標(biāo)方法進(jìn)行改進(jìn)，提出在原酒實(shí)驗(yàn)中，延長(zhǎng)皂化時(shí)間。改進(jìn)后的方法用于白酒原酒中總酯的測(cè)定，檢驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定性好，更加方便于企業(yè)的生產(chǎn)。