高毒力幽門螺桿菌感染對結直腸腺瘤患者血清胃泌素、胃動素表達及預后的影響*

莊肇朦，陳 怡，余炳取，張益光

(浙江中醫(yī)藥大學附屬溫州中西醫(yī)結合醫(yī)院消化內科，浙江溫州 325000)

結直腸腺瘤是結直腸癌患者最重要的癌前病變，結直腸腺瘤相關危險因子的研究、早期診斷和早期治療對降低結直腸癌患者死亡風險具有重要意義[1]。幽門螺桿菌(helicobacter pylori，Hp)主要存在于胃黏膜，與胃潰瘍、慢性胃炎、胃癌均密切相關[2]。Hp分為Ⅰ型高毒力株和Ⅱ型低毒力株，高毒力株表達空泡毒素A(vacuolating cytotoxin A，VacA)和細胞毒素相關蛋白A(cytotoxin associated gene，CagA)，高毒力Hp對各種胃部疾病的危害尤其嚴重[3]。近年來，有研究表明，Hp感染有可能通過胃泌素血癥及其他作用機制對結直腸腺瘤患者產生誘發(fā)效果[4]。胃泌素主要由胃竇及十二指腸近端黏膜中的細胞分泌，可促進胃竇收縮、消化道黏膜再生、胃酸分泌等[5]。胃動素由小腸中的細胞分泌，可刺激上消化道生理性肌電活動和機械運動[6]。有研究表明，胃泌素、胃動素均與結直腸癌的發(fā)生、發(fā)展及預后密切相關，且Hp感染可能影響二者水平變化[7-8]；但目前并未見關于高毒力Hp感染對結直腸腺瘤患者血清胃泌素、胃動素表達及預后影響的研究。因此，本研究探討高毒力Hp感染對結直腸腺瘤患者預后及血清胃泌素、胃動素表達水平的影響，以期為降低患者不良預后發(fā)生率，進而有效預防結直腸癌的發(fā)生提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年10月至2020年5月本院收治的結直腸腺瘤患者209例作為研究對象。納入標準：(1)符合結直腸腺瘤診斷及分類標準，其要點為結腸鏡檢查中有鏡下肉眼增生性病灶均取病理活檢，根據(jù)病理檢查和結腸鏡檢查結果綜合診斷及分類，進展期腺瘤診斷依據(jù)為結腸鏡檢查有結直腸息肉增生且息肉或病變直徑大于10 mm或病理診斷中含有絨毛成分或有重度異型增生、高級別上皮內瘤變[9]；(2)臨床資料完整；(3)無胃鏡、結腸鏡檢查禁忌證；(4)年齡大于18歲；(5)自愿參加本研究。排除標準：(1)有炎癥性腸病、胃部手術史、家族性腺瘤史者；(2)胃鏡檢查發(fā)現(xiàn)消化性潰瘍、萎縮性胃炎、胃癌等疾病者；(3)2周內口服抑酸劑治療或Hp根除治療者；(4)妊娠或哺乳期婦女。本研究經本院臨床研究倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1試劑與儀器

胃泌素酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)試劑盒(貨號：CEB224Gu)購自上海恒斐生物科技有限公司，胃動素放射免疫試劑盒(貨號：xY-098)購自上海信裕生物科技有限公司，Hp檢測試劑盒(貨號：bzsw-006)購自三明市貝真生物科技有限公司，電子結腸鏡(型號：CF-XQ290)購自日本奧林巴斯公司，酶標儀(型號：AMR-100)購自杭州奧盛儀器有限公司。

1.2.2樣品采集及保存

檢測前1 d晚上禁煙、酒，清淡飲食，采集兩組患者第2天早上空腹靜脈血樣，室溫下靜置30 min，3 000 r/min離心15 min后收集上層血清，置于-80 ℃保存待測。

1.2.3高毒力Hp感染檢測[10]及分組

胃鏡檢查時對胃竇組織進行快速尿素酶試驗。由內鏡操作醫(yī)師在內鏡直視下采用滅菌活檢鉗取距幽門前2～3 cm大彎或小彎處約0.5 cm×0.5 cm胃黏膜組織置入試劑盒，15 min后觀察結果。若試劑酚紅由黃色變?yōu)榧t色說明pH升高，試驗結果為陽性，提示活檢組織存在Hp陽性。將Hp陽性患者血清標本經蛋白芯片反應后通過閱讀儀對標本中的VacA、CagA進行定性檢測。VacA、CagA陽性者為高毒力Hp陽性組(96例)，VacA、CagA陰性為高毒力Hp陰性組(113例)。兩組患者年齡、性別等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2.4血清胃泌素、胃動素水平檢測

采用ELISA法檢測兩組患者血清胃泌素水平，采用放射免疫法檢測兩組患者血清胃動素水平。操作步驟均嚴格按儀器及試劑盒使用說明書進行。

1.2.5隨訪

兩組患者出院1年內以電話、門診、微信等方式進行隨訪，隨訪期間出現(xiàn)復發(fā)、轉移者判定為預后不良。

1.3 統(tǒng)計學處理

2 結 果

2.1 高毒力Hp感染與臨床特征的關系

高毒力Hp陽性組患者腫瘤多發(fā)、腫瘤最大徑大于或等于0.5 cm、進展期腺瘤者比例均大于高毒力Hp陰性組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 高毒力Hp感染與臨床特征的關系[n(%)]

2.2 兩組患者血清胃泌素、胃動素水平比較

高毒力Hp陽性組患者血清胃泌素水平高于高毒力Hp陰性組，胃動素水平低于高毒力Hp陰性組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見圖1。

a：P<0.05，與高毒力Hp陰性組比較。圖1 兩組患者血清胃泌素、胃動素水平比較

2.3 高毒力Hp陽性患者血清胃泌素與胃動素水平的相關性

高毒力Hp陽性患者血清胃泌素與胃動素水平呈負相關(r=-0.513，P<0.05)。見圖2。

圖2 高毒力Hp陽性患者血清胃泌素與胃動素水平相關性分析

2.4 高毒力Hp感染與患者預后的相關性

高毒力Hp陽性組患者中預后不良者比例大于高毒力Hp陰性組，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=16.463，P=0.001)。見表3。

表3 高毒力Hp感染與患者預后的相關性[n(%)]

2.5 影響結直腸腺瘤患者預后的單因素和多因素Cox回歸模型分析

單因素Cox回歸模型分析結果顯示，高毒力Hp陽性、胃泌素水平高、胃動素水平低、腫瘤病理類型為進展期腺瘤是影響結直腸腺瘤患者發(fā)生不良預后的危險因素(P<0.05)；多因素Cox回歸模型分析結果顯示，高毒力Hp陽性、胃泌素水平高是影響結直腸腺瘤患者發(fā)生不良預后的獨立危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 影響結直腸腺瘤患者預后的單因素和多因素Cox回歸模型分析

3 討 論

結直腸腺瘤是結直腸癌的癌前病變，其經歷腺瘤、腺癌發(fā)展序列后進展為結直腸癌[11]。尋找其相關危險因子有利于及時、有效地制訂針對性治療決策，阻止病情發(fā)展為結直腸癌，改善患者預后。Hp是一種一端有鞭毛的微需氧革蘭陰性螺旋狀細菌，與胃炎相關疾病、胃癌、結腸癌、結腸息肉等疾病均有關[12]。有研究表明，Hp感染可能會增加發(fā)生結直腸癌的風險，但其具體機制目前尚不清楚[13]。本研究159例結直腸腺瘤患者中高毒力Hp陽性患者96例，提示高毒力Hp陽性可能與結直腸腺瘤的發(fā)生密切相關。

胃泌素是人體十分重要的胃腸激素，主要由胃竇、十二指腸中的G細胞和人胰島的D細胞分泌，可參與腸道組織的正常生長和惡性生長，胃泌素對結腸黏膜具有營養(yǎng)作用，同時可刺激腫瘤生長[14]。本研究結果顯示，高毒力Hp陽性組患者血清胃泌素水平明顯高于高毒力Hp陰性組，且高毒力Hp陽性、胃泌素水平高均是影響結直腸腺瘤患者發(fā)生不良預后的獨立危險因素，與潘偉[15]和陳志濤等[16]研究結果基本一致。推測其可能機制為高毒力Hp感染后高毒力Hp酶水解尿素產生氨，造成胃內pH升高，刺激G細胞大量分泌胃泌素，胃泌素水平升高后促進消化道黏膜上皮細胞增生，刺激腫瘤生長，同時造成胃內炎癥增加，胃黏膜屏障損害，進而影響結直腸腺瘤患者病情發(fā)展，出現(xiàn)不良預后。

胃動素是一種胃腸激素，可促進胃腸動力，通過作用于平滑肌細胞的特異性受體，使平滑肌細胞收縮，進而促進胃部排空，增強胃腸道動力[17]。本研究結果顯示，高毒力Hp陽性組患者血清胃動素水平明顯低于高毒力Hp陰性組，與王文光等[18]研究中胃動素的變化趨勢一致?；诩韧芯拷Y果，推測其機制為高毒力Hp感染可能與結直腸腺瘤患者血清胃動素表達水平降低有關，其可能機制是高毒力Hp感染后通過某些途徑間接作用于小腸，使其收縮作用減弱，進一步造成M細胞分泌胃動素較少。且本研究相關性分析結果顯示，高毒力Hp感染可能通過影響結直腸腺瘤患者血清胃泌素、胃動素表達水平，進而共同影響患者病情的發(fā)展。推測高毒力Hp感染后通過同時刺激G細胞及M細胞，造成胃泌素表達升高，胃動素表達降低，而胃泌素、胃動素通過調控消化道炎癥及黏膜上皮細胞增生，影響腫瘤細胞生長，加速病情進展。此外，本研究結果顯示，高毒力Hp陽性組患者腫瘤多發(fā)、腫瘤最大徑大于或等于0.5 cm、進展期腺瘤、預后不良者比例均較高，進一步提示高毒力Hp感染可能是結直腸腺瘤患者病情發(fā)生、發(fā)展及預后不良的危險因素，高毒力Hp感染后腫瘤數(shù)目和直徑增加，同時增加非進展期腺瘤向進展期腺瘤發(fā)展的可能性，導致結直腸腺瘤患者發(fā)生復發(fā)、死亡等不良預后。

綜上所述，高毒力Hp感染可能通過影響結直腸腺瘤患者血清胃泌素、胃動素表達水平，造成患者預后不良。因此，對有結直腸腺瘤甚至腫瘤高危因素及高毒力Hp感染根除困難者建議定期進行結腸鏡檢查。同時對已有高毒力Hp感染的結直腸腺瘤患者建議及時行腺瘤摘除術，預防腺瘤進一步發(fā)展為多發(fā)、大直徑及病理類型風險較高的腺瘤。