電針對(duì)慢性阻塞性肺疾病大鼠肺組織形態(tài)學(xué)及肺功能的影響

許金森 黃培煒 林靜瑜 鄭淑霞 朱小香 薩喆燕

[摘要]目的探究電針尺澤穴對(duì)慢性阻塞性肺疾?。–OPD）模型大鼠的肺組織形態(tài)學(xué)、肺功能的影響。方法將24只 SD 大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和模型組，正常對(duì)照組8只，模型組16只。適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，開(kāi)始對(duì)模型組進(jìn)行造模，采用煙熏+脂多糖（LPS）氣道滴注，共11周。模型復(fù)制成功后，將模型組分為模型對(duì)照組和尺澤干預(yù)組各8只。電針干預(yù)尺澤穴30 min，強(qiáng)度1mA，1次/d，連續(xù)干預(yù)4周。模型對(duì)照組每日同等造模，同時(shí)固定抓取，不干預(yù)。觀察三組大鼠的肺組織形態(tài)學(xué)、肺功能的變化。結(jié)果與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠肺每分通氣量下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P <0.01），肺彈性阻力下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P <0.01）;電針尺澤穴干預(yù)后，肺每分通氣量、肺彈性阻力明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P <0.01）;與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組肺組織外觀、氣管呈肺氣腫改變及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，尺澤干預(yù)組的肺、氣管組織外觀、病理形態(tài)明顯改善。結(jié)論電針刺激尺澤穴能夠改善 COPD 大鼠肺組織形態(tài)學(xué)和肺功能。

[關(guān)鍵詞]慢性阻塞性肺疾病;尺澤穴;電針;肺功能;肺組織形態(tài)學(xué)

[中圖分類(lèi)號(hào)] R245.97? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A?? [文章編號(hào)]2095-0616（2022）09-0019-05

Effects of electroacupuncture on the morphology of lung tissues and lung function in rats with chronic obstructive pulmonary disease

XU? Jinsen ??HUANG? Peiwei（2）?? LIN 3Jingyu??? ZHENG? Shuxia（1）?? ZHU 1Xiaoxiang??? SA 1Zheyan

1. Fujian Academy of Chinese Medical Sciences， Fujian Key Laboratory of Propagated Sensation Along Meridian， Fujian， Fuzhou 350003， China;2. Fuzhou Dermatosis Prevention Hospital， Fujian， Fuzhou 350025， China;3. Institute of Materia Medica， Fujian Academy of Chinese Medical Sciences， Fujian， Fuzhou 350003， China

[Abstract] Objective To investigate the effects of electroacupuncture at Chize （LU5） on the morphology of lung tissues and lung function in a rat model of chronic obstructive pulmonary disease （COPD）. Methods A total of 24 Sprague-Dawley rats were randomly divided into the normal control group （n=8） and the model group （n=16）. With one-week adaptive feeding， rats in the model group were started to be modeled through the airway instillation of sootiness and lipopolysaccharide for a total of 11 weeks. After the successful model establishment， the rats in the model group were further divided into the model control group and the Chize intervention group， with 8 cases in each group. The electroacupuncture at Chize （LU5） was lasted for 30 minutes， with an intensity of 1 mA once a day for continuous 4 weeks. Rats in the model control group received the same modeling and grasping approach every day without intervention. Changes in the morphology of lung tissues and lung function of rats were observed in three groups. Results Compared with the normal control group， the ventilatory capacity of the lung per minute was decreased in the model control group， with statistically significant differences （P <0.01）. The elastic recoil resistance of lung decreased， with statistically significant differences （P <0.01）. After electroacupuncture intervention at Chize （LU5）， the ventilatory capacity of the lung per minute and elastic recoil resistance of the lung significantly increased， with statistically significant differences （P <0.01）. In comparison to the normal control group， lung tissues in the model control group showed emphysema changes and inflammatory cell infiltration， and the appearance of lung and tracheal tissues， and pathology in the Chize intervention group were significantly improved. Conclusion Electroacupuncture at Chize （LU5） can improve the morphology of lung tissues and lung function in COPD rats.

[Key words] Chronic obstructive pulmonary disease; Electroacupuncture; Chize; Morphology of lung tissues; Lung function

慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease， COPD）是一種危害人類(lèi)健康的常見(jiàn)病、多發(fā)病，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，病死率較高。2018年中國(guó)成人肺部健康研究（C P H S ）曾對(duì)10個(gè)省市50991名人群調(diào)查顯示，20歲及以上成人的 COPD 患病率為8.6%，40歲以上則高達(dá)13.7%，首次明確我國(guó) COPD 患者人數(shù)近1億， COPD 將位居世界疾病經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)的第5位[1]。目前西醫(yī)對(duì)該病主要采用對(duì)癥治療的策略，而針灸穴位是中醫(yī)治療 C O P D 較為有效的手段之一[2]，并以其“簡(jiǎn)、便、廉、驗(yàn)、效”而受到廣大患者的青睞。因此，在中醫(yī)尤其是針灸方面探討對(duì)本病的治療措施和方案，則顯得尤為重要。本研究在前期基礎(chǔ)研究工作的基礎(chǔ)上，觀察電針尺澤穴對(duì) C OP D 模型大鼠的肺組織形態(tài)學(xué)、肺功能的影響，以期為針灸治療該病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選用 SPF 級(jí)雄性 Sprague Dawley 大鼠，體重180～220 g，共24只;來(lái)自杭州醫(yī)學(xué)院[許可證號(hào)： SCXK（浙）2019-0002]。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房適應(yīng)7 d 后造模。按組分籠，在恒溫（20±2）℃和恒濕（50±5）%條件下飼養(yǎng)，自由飲食。實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格遵守科技部《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn)》中相關(guān)規(guī)定。

1.2主要儀器

多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)（型號(hào)： RM 6240 B ，成都儀器廠）;自制的煙熏箱（80 cm×50 cm×100 cm）、氣管滴管以及大鼠柔軟固定器等。

1.3藥物及試劑

脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，中國(guó)生物檢驗(yàn)檢定所）;白色七匹狼牌香煙（福建中煙工業(yè)有限責(zé)任公司，焦油量12 mg，煙堿0.9 mg，一氧化碳13 mg）;二甲苯（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20150409）;甲醇（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20200827）;生理鹽水（福州海王福藥制藥有限公司）。

1.4造模與干預(yù)

所有大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為正常對(duì)照組（8只）和模型組（16只），模型組采用煙熏聯(lián)合 LPS 氣管內(nèi)滴注的方式造模[3]。造模成功后，將模型組大鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組和尺澤干預(yù)組各8只。

1.5干預(yù)方式

尺澤干預(yù)組：取尺澤穴（大鼠前肢肘橫紋外側(cè)凹陷處，在肱二頭肌肌腱外側(cè)）[4]，穴位常規(guī)消毒，以0.25 mm×13 mm 華佗牌無(wú)菌毫針直刺該穴，連接 SDZ-Ⅱ電針儀，強(qiáng)度1 mA，以針體輕微抖動(dòng)為度，疏密波，頻率2/10 Hz，30 min/次，1次/d，共干預(yù)4周（28 d）;正常對(duì)照組和模型對(duì)照組同等抓取固定在自制鼠套里。

1.6觀察指標(biāo)

肺功能：主要觀察兩項(xiàng)內(nèi)容，即肺彈性阻力（cmH2O/ml），肺每分通氣量（ml）。肺組織形態(tài)學(xué)：主要觀察肺組織的色澤、質(zhì)地，肺間質(zhì)是否有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)以及支氣管管壁是否增厚。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)用 SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，進(jìn)行正態(tài)檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x ±s）形式表示，進(jìn)行方差分析、 LSD 檢驗(yàn)， P <0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組大鼠一般狀況比較

造模前各組大鼠毛色亮白、有光澤，體型、進(jìn)食飲水正常，排泄物正常，各項(xiàng)指標(biāo)及體重等比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P >0.05），具有可比性。

2.2電針尺澤穴對(duì)COPD大鼠肺通氣功能的影響

與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠肺彈性阻力下降，每分通氣量明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P <0.01），提示模型大鼠肺通氣功能受損。與模型對(duì)照組比較，尺澤干預(yù)組肺彈性阻力上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P <0.01），每分通氣量明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P <0.01）;與正常對(duì)照組比較，尺澤干預(yù)組肺彈性阻力、每分通氣量無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P >0.05）。見(jiàn)表1。

2.3電針尺澤穴對(duì)COPD大鼠肺臟外觀及肺組織形態(tài)學(xué)的影響

正常對(duì)照組大鼠肺色澤粉嫩，質(zhì)地柔軟，模型對(duì)照組大鼠肺色澤略有蒼白，肺臟邊緣質(zhì)地較僵硬有塑料感，呈現(xiàn)輕微纖維化傾向。見(jiàn)圖1。

正常對(duì)照組大鼠的肺組織肺泡大小均一，肺泡壁結(jié)構(gòu)完整。與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠肺組織內(nèi)出現(xiàn)輕度肺氣腫改變，肺間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。見(jiàn)圖2。

從外觀上看，正常對(duì)照組大鼠肺色澤粉嫩，質(zhì)地柔軟，模型對(duì)照組大鼠肺色澤蒼白，組織質(zhì)地較僵硬有塑料感，呈現(xiàn)纖維化傾向;尺澤干預(yù)組大鼠肺色澤鮮紅，質(zhì)地較模型組柔軟，少部分見(jiàn)纖維化傾向。見(jiàn)圖3。

正常對(duì)照組大鼠的肺組織肺泡大小均一，肺泡壁結(jié)構(gòu)完整。與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)紊亂肺泡高度擴(kuò)張，肺泡間隔變窄甚至斷裂合成肺大皰（肺氣腫改變），肺間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。模型對(duì)照組支氣管管壁增厚，杯狀細(xì)胞數(shù)目增多，腺體增生肥大。

與模型對(duì)照組比較，尺澤干預(yù)組肺泡擴(kuò)張融合程度明顯改善，局部?jī)H有輕度間質(zhì)性炎癥、間質(zhì)增生以及少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);支氣管壁輕微增厚，少量杯狀細(xì)胞增生。見(jiàn)圖4。

3討論

COPD 是一種具有氣流受限特征的肺部疾病，這種氣流受限不完全可逆，且呈進(jìn)行性發(fā)展，它的發(fā)生與肺部對(duì)有害氣體或有害顆粒的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)。隨著病情反復(fù)發(fā)作、急性加重，導(dǎo)致肺功能逐漸下降，出現(xiàn)日?；顒?dòng)甚至休息時(shí)也感到氣短[5-9]。由于 COPD 病因未完全闡明，臨床上主要以預(yù)防、綜合治療和治療措施個(gè)體化等對(duì)癥治療原則，目前仍缺乏有效的病因治療方法。

西醫(yī)多采用 COPD 全球策略（GOLD）分級(jí)治療方法[10]，但不能逆轉(zhuǎn)肺功能進(jìn)行性降低，且?guī)?lái)較大的副作用。近年來(lái)，隨著人們對(duì) COPD 認(rèn)識(shí)的逐步加深，針灸在治療 COPD 方面取得了顯著的療效。手太陰肺經(jīng)，上膈屬肺，盡管肺經(jīng)上的每一個(gè)穴位都可以用以治療肺和肺系的病變，但不同的穴位還具有相對(duì)特異性[11]。尺澤為手太陰肺經(jīng)五俞穴之“合穴”，《素問(wèn)至真要大論》言：“尺澤絕，死不治”，強(qiáng)調(diào)了尺澤穴的重要性;在《經(jīng)穴解》中指出：“穴名尺澤者，在肘而知尺……水之所聚為澤，故曰尺澤”，強(qiáng)調(diào)了尺澤為肺經(jīng)之“合穴”，有“合主逆氣而泄”的作用;而在《針灸甲乙經(jīng)》中則提出了尺澤可治胸肺部“氣逆”諸癥?？梢?jiàn)，尺澤穴歷來(lái)都被醫(yī)家用之于主治與 COPD 臨床表現(xiàn)相關(guān)的“脹滿”“喘”“咳”這三種的典型癥狀。

肺功能是判斷 COPD 病情進(jìn)展的一個(gè)非常重要的指標(biāo)，目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者認(rèn)為 COPD 肺功能下降是一個(gè)漸進(jìn)的過(guò)程，這也為針灸治療該病提供了一個(gè)很好的途徑。本研究的 COPD 模型大鼠肺功能下降表現(xiàn)為每分通氣量降低，肺彈性阻力下降，這與人類(lèi) COPD 的臨床表現(xiàn)的特點(diǎn)基本一致，也進(jìn)一步證實(shí)了本研究的 COPD 模型是成功的。對(duì)模型大鼠進(jìn)行4周的電針尺澤穴干預(yù)后，COPD 大鼠肺彈性阻力上升，每分通氣量也明顯上升;肺彈性阻力，每分通氣量的恢復(fù)程度與正常老鼠無(wú)差異。中醫(yī)經(jīng)絡(luò)學(xué)說(shuō)認(rèn)為，經(jīng)脈內(nèi)屬于腑臟，外絡(luò)于肢節(jié)，行氣血而通陰陽(yáng)。既往的研究發(fā)現(xiàn)，電針刺激穴位不僅能夠引起經(jīng)脈線上相關(guān)的能量代謝發(fā)生改變，而且還可以調(diào)節(jié)其相應(yīng)的臟腑功能[12-20]，經(jīng)絡(luò)在調(diào)控臟腑疾病過(guò)程中起到極其重要的作用。尺澤穴屬于手太陰肺經(jīng)，經(jīng)脈所過(guò)，主治所及，電針刺激尺澤穴能夠改善 COPD 大鼠肺功能也進(jìn)一步說(shuō)明了這一點(diǎn)。

從肺臟外觀圖片看，正常對(duì)照組大鼠肺色澤粉嫩，質(zhì)地柔軟;模型對(duì)照組大鼠肺色澤蒼白，外表皺縮，組織質(zhì)地較僵硬有塑料感，呈現(xiàn)纖維化，有些分布有黑色斑點(diǎn)。根據(jù)模型對(duì)照組肺部組織形態(tài)學(xué)的變化，進(jìn)一步證實(shí)了本實(shí)驗(yàn)采用煙熏+LPS 氣道滴注的造模方式是成功的。眾所周知，經(jīng)絡(luò)是以十二經(jīng)脈為主體，網(wǎng)絡(luò)遍布全身的一個(gè)復(fù)雜體系，是人體機(jī)能的聯(lián)絡(luò)、調(diào)節(jié)和反應(yīng)系統(tǒng)，針灸刺激穴位通過(guò)經(jīng)絡(luò)的傳導(dǎo)途徑到達(dá)其相應(yīng)的臟腑，從而達(dá)到治療疾病的作用[21-22]。本實(shí)驗(yàn)電針尺澤穴可使 COPD 模型大鼠肺保持色澤鮮紅，質(zhì)地較模型對(duì)照組柔軟，少部分見(jiàn)纖維化傾向，無(wú)黑點(diǎn)分布。盡管尚未完全達(dá)到正常對(duì)照組水平，但與模型對(duì)照組比較，尺澤干預(yù)組肺泡融合程度有所改善，局部間質(zhì)僅少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和少量杯狀細(xì)胞增生，支氣管壁略微增厚。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，電針尺澤穴能夠減低 COPD 大鼠的肺部組織炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，從而改善 COPD 大鼠肺組織形態(tài)學(xué)。

綜上所述，針灸對(duì) COPD 仍然是一種綠色、有效的治療方法，它不僅能夠改善 COPD 大鼠的肺功能，而且還能進(jìn)一步改善 COPD 大鼠肺組織形態(tài)學(xué)，從而達(dá)到有效治療 COPD 的作用，值得進(jìn)一步推廣與運(yùn)用。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Borrelli，Bocci.Oxygen ozone therapy in the treatmentof chronic obstructive pulmonary disease： An integrative a ppro a c h[J]. Ameri c a n Jo urna l of C l ini c a l a nd Experimental Medicine，2014，2（2）：9-13.

[2]董志娟.中醫(yī)針灸療法治療穩(wěn)定期慢性阻塞性肺疾病療效分析[J].中國(guó)藥業(yè)，2020，29（Z1）：256.

[3]黃文鋒，陳斯寧，吳嘉冬，等.慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的構(gòu)建[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2019，35（6）：801-803.

[4]林文注，王佩.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1994：68-78.

[5] Brian D Hobbs， Kim de Jong， Maxime Lamontagne， et al.Genetic loci associated with chronic obstructive pulmonary disease overlap with loci for lung function and pulmonary fibrosis[J].Nature Genetics，2017，49（3）：426-432.

[6]李曉俊，李亞，李素云.腸道和肺部微生物群落與慢性阻塞性肺疾病相關(guān)性研究進(jìn)展[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2019，22（35）：4353-4357.

[7]楊莉平，歐陽(yáng)瑤.DCs、Th1及 Th2細(xì)胞在 COPD 免疫機(jī)制中的作用研究[J].醫(yī)學(xué)綜述，2018，24（22）：4427-4432.

[8] Kazuhiro Ito，Peter J.Barnes.COPD as a Disease ofAccelerated Lung Aging[J].Chest，2009，135（1）：173-180.

[9]黃培煒，林靜瑜，許金森，等.針?biāo)幗Y(jié)合治療慢性阻塞性肺疾病的研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)藥科學(xué)，2021，11（1）：59-62.

[10] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)慢性阻塞性肺疾病學(xué)組.慢性阻塞性肺疾病診治指南（2013年修訂版）[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2013，36（4）：255-264.

[11] 姜同菲，郭靜.應(yīng)用腦功能磁共振成像技術(shù)對(duì)經(jīng)穴特異性研究概況[J].中華中醫(yī)藥雜志，2021，36（8）：4820-4823.

[12] 楊廣印，許金森，劉慶城，等.電針近部穴位與遠(yuǎn)部穴位對(duì)腸鳴音影響的比較[J].中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2019，17（5）：89-91.

[13] 董亞琴，萬(wàn)隆，潘曉華，等.艾灸命門(mén)穴對(duì)新西蘭家兔督脈循行線上皮膚溫度的影響[J].云南中醫(yī)中藥雜志，2021，42（1）：77-79.

[14] 陳苑平，陳柯，許金森，等.電針足三里對(duì)腹瀉型腸易激綜合征大鼠內(nèi)臟敏感性及腹瀉情況的影響[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2021，30（5）：13-16.

[15] 許金森，馮曉星，吳國(guó)土，等.灸臍對(duì)原發(fā)性痛經(jīng)志愿者 IRRTM 和 MBPU 的影響[J].山西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2021，22（1）：49-51，54.

[16] 薩喆燕，朱小香，萬(wàn)隆，等.循經(jīng)取穴電針對(duì)心肌缺血大鼠血管緊張素原基因表達(dá)的影響[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2021，27（7）：488—493，499.

[17]徐芳媛，許金森，潘曉華，等.電針神庭、百會(huì)穴對(duì)大腦中動(dòng)脈閉塞型大鼠認(rèn)知功能的影響[J].福建中醫(yī)藥，2021，52（4）：50—51，60.

[18]潘曉華，薩喆燕，黃倩茹，等.基于轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)探討電針對(duì)大腦中動(dòng)脈栓塞大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J]中華中醫(yī)藥雜志，2021，36（5）：2560—2563.

[19]朱小香，許金森，薩喆燕，等.基于致痛物質(zhì)探討胃潰瘍大鼠督脈背段穴位敏化的物質(zhì)基礎(chǔ)[J].中華中醫(yī)藥雜志，2021，36（6）：3613-3616.

[20]黃水花，施嘉健，許金森，等 . 艾灸對(duì)不同人群胃經(jīng)五輸穴微循環(huán)血流灌注量的影響 [J]. 山西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2021，22（2）：119-121.

[21]沈慈敏，黎娜，許金森，等 . 陰虛體質(zhì)任脈線上體表溫度、循經(jīng)紅外輻射軌跡特征及電針對(duì)其的影響 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志，2021，36（1）：502-505.

[22]薩喆燕，萬(wàn)隆，黃倩茹，等 . 電針內(nèi)關(guān)穴對(duì)異丙腎上腺素致心肌缺血大鼠的影響 [J]. 福建中醫(yī)藥，2018，49（1）：21-22，25.

（收稿日期：2021-11-01）