非酒精性脂肪性肝病嚴重程度與氧化應激、SAA、CRP和腦動脈硬化的相關性研究*

脂肪肝分為酒精性脂肪性肝病和非酒精性脂肪性肝病，NAFLD是指脂肪細胞在肝臟處積聚而發(fā)展為脂肪肝、脂肪性肝炎、肝硬化和肝纖維化甚至到癌變的過程

。目前NAFLD患者已經超過乙型肝炎患者，成為了我國第一大肝病。NAFLD與2型糖尿病、血脂異常、高血壓和代謝類疾病的高發(fā)密切相關，且與心腦血管疾病的危險升高具有一定的相關性

。氧化應激是由于刺激而引起的氧化和抗氧化失衡的一系列反應狀態(tài)

。肝細胞氧化應激、線粒體功能障礙、丙二醛(MDA)等過氧化物增多，可以導致肝細胞出現炎癥、壞死甚至是纖維化

。同時氧化應激能夠激活信號通路，介導血管壁發(fā)生一系列變化，影響了血管的正常結構和功能，從而促使動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展

。血清淀粉樣蛋白A(SAA)和C-反應蛋白(CRP)是肝臟合成的急性反應蛋白，大量炎癥因子的分泌能夠啟動肝細胞中的SAA 和CRP分泌，可以反應局部炎癥的程度

。但目前仍未出現過NAFLD病情嚴重程度與氧化應激、SAA、CRP水平、腦動脈硬化相關性的報道。所以本研究觀察不同程度NAFLD患者血清中的氧化應激，并分析氧化應激、SAA、CRP表達與腦動脈硬化的關系，旨在為腦動脈硬化的預防以及治療提供參考。

1 資料和方法

1.1 研究對象 選取2018年1月到2020年1月消化內科診斷為NAFLD的患者227例，其中輕度NAFLD患者116例，中度NAFLD患者74例，重度NAFLD患者37例，并選49例為健康對照組，年齡為(50.88±8.94)歲。

現階段在泰煤家園改造中居民參與有效性不高：主要表現為一是居民參與主體缺乏組織性；二是居民參與領域信息不對稱；三是居民參與方式較為被動。

1.2 納入標準 ①經CT檢測確認為NAFLD患者(即符合規(guī)定CT診斷脂肪肝的依據為肝臟密度普遍降低，肝/脾CT值之比小于1.0)，并依據《2017年美國肝病學會非酒精性脂肪性肝病診療指導》標準

及《非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018更新版)》標準

，符合規(guī)定CT檢測：肝/脾CT比值小于1.0但大于0.7者為輕度，<0.7但大于0.5者為中度，0.5者為重度NAFLD。

1.3 排除標準 ①男性攝入酒精量每周≥140 g，女性攝入酒精量每周≥70 g；②病毒性和酒精性肝炎以及自身免疫性肝病等；③嚴重的心臟、肺部疾病、腎功能不全患者；④惡性腫瘤、代謝類疾病和精神疾病患者。本研究已通過我院倫理委員會倫理審查及批準，患者以及家屬簽字確認同意。

（二）營業(yè)總成本。1—8月，國有企業(yè)營業(yè)總成本355739.5億元，增長9.7%，其中銷售費用、管理費用和財務費用分別增長7.1%、9.6%和14%。中央企業(yè)205109.8億元，增長9.9%，其中銷售費用、管理費用和財務費用分別增長6.5%、9.2%和9.3%。地方國有企業(yè)150629.7億元，增長9.3%，其中銷售費用、管理費用和財務費用分別增長7.9%、10%和18.2%。

1.4.2 血樣采集 所有對象入院1 d后無高脂飲食，空腹10 h以上，清晨抽血靜脈血10 ml，檢測糖化血紅蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FBG)、TG、TC、LDL-C、HDL-C、谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)，采用邁瑞B(yǎng)S-280全自動生化分析儀測定TG、TC、LDL-C、HDL-C、ALT、AST、GGT。

2.4 脂肪肝嚴重程度和腦動脈硬化的相關危險因素分析 見表4。健康對照組、輕度、中度、重度NAFLD組患者腦動脈硬化的發(fā)生率分別為0%、0%、9.46%和24.32%；在多變量logistic回歸分析中發(fā)現，不同程度脂肪肝患者的BMI、脂質代謝指標(TG、TC、HDL-C、ALT、AST)、氧化應激相關指標(MDA、NO、SOD、GPx、GSH)、炎性因子(SAA、CRP、INF-a、IL-6、MCP-1和PAI-1)是腦動脈硬化發(fā)生的危險因素，具有相關性(

<0.05)，不同程度NAFLD患者的氧化應激GGT、CAT、GST與腦動脈硬化無相關性(

>0.05)。

1.4 研究方法

1.4.3 氧化應激標記物檢測 血液樣本經過離心處理，離心率為3 000r/min，離心時間20 min，分離出血漿，化學比色法檢測丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性，采用α-萘氨顯色法檢測血漿中一氧化氮(NO)的含量，采用過氧化氫與乙酸-重鉻酸鉀反應顯色比色法檢測過氧化氫酶(CAT)活性，用改良Hafeman氏比色法檢測谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性，用DTNB顯色法檢測谷胱甘肽(GSH)活性，用谷胱甘肽-氯二硝基苯顯色法谷胱甘肽S轉移酶(GST)活性， 所有試劑盒均有由南京建成生物工程研究所提供。

維修決策的優(yōu)化目標是使全周期期望維修費率最低。本節(jié)計算全周期期望維修費率，并尋求使其最低的最優(yōu)參數m*和N*。

1.4.4 炎癥因子檢測 血液樣本經過離心處理，離心率為2 000 r/min，離心時間30 min，取血清，使用免疫定時散色比濁法測定SAA，采用ELISA法腫瘤壞死因子(INF-a)、白介素-6(IL-6)、纖溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)水平，采用散射比濁法檢測CRP。試劑盒均由北京福瑞生物工程公司提供，按照試劑盒說明書進行嚴格操作。

2 結果

2.2 血清中氧化應激標記物的表達 見表2。輕度、中度、重度NAFLD組患者的MDA、NO的水平較健康對照組顯著升高(

<0.05)，且三組NAFLD患者之間比較具有顯著性差異(

<0.05)，而輕度、中度、重度NAFLD患者的SOD、CAT、GPx、GSH、GST水平較健康對照組明顯降低(

<0.05)，且三組NAFLD患者之間比較具有顯著性差異。

改革開放40年，印刷產業(yè)引進先進的技術、設備、管理，得以跨越式發(fā)展，這正是我們常說的“后發(fā)優(yōu)勢”。當打開國門，看到工業(yè)化國家的自然環(huán)境，要求我們現實發(fā)展中的環(huán)境要對標今天的現代化國家，這就是“后發(fā)劣勢”。

2.1 一般資料 見表1。四組患者年齡、ALT、AST比較無顯著性差異(

>0.05)，輕、中度NAFLD組患者BMI、高血壓、糖尿病、高脂血癥、TG、TC、LDL-C、FBG、HbA1c、GGT、SBP、DBP與健康對照組比較有著性差異(

<0.05)，均高于健康對照組患者，輕、中、重度NAFLD三組患者的年齡、高血壓、糖尿病、高脂血癥、TC、LDL-C、FBG、HbA1c、SBP、DBP比較無顯著性差異(

>0.05)，中度NAFLD患者的BMI、TG、HDL-C、ALT、AST、GGT水平高于輕度NAFLD組患者(

<0.05)，重度NAFLD組患者高于中度NAFLD,三組之間具有顯著性差異(

<0.05)。

肝臟代謝障礙有很多原因，脂質代謝就是其中一種，脂質代謝動態(tài)失衡會促使脂肪在肝內堆積，當肝的質量超過肝內脂肪含量的5%以上時，稱為脂肪肝。NAFLD一般是指沒有過量飲酒史的脂肪肝，它的發(fā)病原因比較復雜，比如糖尿病、肥胖、多囊卵巢病和高血脂癥等

，糖尿病、肥胖、高血脂癥是NAFLD患者疾病發(fā)展的危險因素，同時也是腦動脈硬化形成的誘發(fā)因素，所以脂肪肝和腦動脈硬化存在一定的相關性

。

1.4.1 病史采集 以調查問卷的方式對患者的病史資料進行采集，病史資料包括年齡、高血壓、糖尿病、高脂血癥，體脂數(BMI)、收縮壓(SBP)和舒張壓(DBP)入院時由醫(yī)生計算和測量。

3 討論

2.3 血清中炎癥因子的表達 見表3。輕度、中度、重度NAFLD組患者SAA、CRP、INF-a、IL-6、MCP-1和PAI-1水平較健康對照組顯著升高(

<0.05)，且三組NAFLD患者之間比較水平明顯升高(

<0.05)。

至于佛經、煨桑等等細節(jié)，更是《江格爾》及其他蒙古史詩中習見的情節(jié)，雖屬佛教文化內容，但若只憑這些細節(jié)判定佛教思想為該史詩的貫穿線索，顯然難以成立。

脂質代謝紊亂在NAFLD疾病中比較常見。相關研究表明，脂質代謝出現紊亂的患者大約有將近一半的患者伴有脂肪肝

。本研究對患者的一般資料進行對比分析發(fā)現，三組患者的BMI、TG、HDL-C、ALT、AST、GGT水平中度NAFLD高于輕度NAFLD，重度NAFLD高于中度NAFLD，隨著NAFLD疾病程度的發(fā)展，BMI、TG、HDL-C、ALT、AST、GGT指標就越惡劣。相關文獻報道，嚴重的高TG血癥患者脂肪肝的發(fā)病率是普通人的5～6倍

。飲食和脂肪的不斷增加，肝臟攝取的脂肪酸就不斷的增加，線粒體β中脂肪酸的氧化降低，導致極低密度脂蛋白的分泌降低，致使TG轉運障礙，從而出現高TG血癥

。高TG血癥會觸發(fā)其他脂蛋白代謝異常，比如LDL顆粒改變 ，低HDL-C血癥等。多項研究表明，HDL-C是腦血管疾病的危險因素，HDL-C水平每升高1 mg/dl，心腦血管疾病的風險就會降低2%左右

，且LDL顆粒改變也是腦動脈硬化的必然條件。

肝臟是活性氧(ROS)的主要場所，也是ROS攻擊的主要靶器官，當機體受到損害時，ROS增多產生氧化應激，導致線粒體和內質網損傷

，從而對肝臟造成一定的損害。當脂質代謝混亂時，脂肪堆積過剩，給ROS毒性和脂質氧化提供了基石

。ROS大量生成，脂質過氧作用增強，肝臟脂質過氧化水平升高。血漿中的抗氧化能力降低，從而氧化和抗氧化失衡，導致血管新生與內皮損傷, 動脈斑塊的形成受到了影響。本研究結果表明，輕度、中度、重度NAFLD患者的MDA、NO的水平顯著升高，SOD、GPx、GSH水平明顯降低。SOD、GPx、GSH是抗氧化酶系統(tǒng)抵抗自由自的第一道防線，通過有毒反應物代謝有效清除自由基，一般是把有害的物質轉化為水或者雙原子氧，SOD、GPx、GSH水平表達降低表明機體受損，抵抗自由基，把有害物質轉變?yōu)闊o害物質

。MDA是氧化應激的生物標志物，能夠反映氧化損傷的程度。隨著MDA水平的升高，脂肪肝的氧化損傷能力越強。相關研究報道，NO水平與腦卒中的發(fā)生具有一定的聯系，NO在動脈粥樣硬化中起著一定的作用

。NO是一種新型的細胞信使因子，可以促進血管的擴張，增加血流量。輕度、中度、重度NAFLD患者NO的水平增加會刺激內皮細胞的產生，刺激機體產生大量的內皮素，內皮素具有收縮血管的作用，所以導致血液粘稠度不斷的增加，誘發(fā)腦動脈硬化，加重了大腦的損傷。所以說明NAFLD患者的應激氧化應激標記物可能是腦動脈硬化的誘因。

細胞因子在NAFLD 中越來越受到研究者們的關注，從肝細胞脂肪變到肝炎、再到肝纖維化和肝硬化的發(fā)展，細胞因子起著重要的作用，細胞因子包括的炎性因子有PAI-1、MCP-1、IL-6、INF-α，INF-α屬于前期的炎癥因子，可以拮抗脂聯素，誘導NO合成和氧化應激反應并加劇動脈硬化，CRP形成的主要刺激因子為IL-6，在炎癥反應中起著主要的作用。相關研究報道，隨著IL-6水平的升高，CRP也逐漸升高，CRP能夠促進動脈硬化的形成

。MCP-1可導致NO合成超氧化物歧化酶，加劇動脈硬化的狀態(tài)。PAI-1能夠阻止纖維蛋白溶解，在不穩(wěn)定粥樣斑塊的形成中起著主要作用，本研究結果表明，輕度、中度、重度NAFLD患者SAA、CRP、INF-α、IL-6、MCP-1和PAI-1水平明顯升高，不同程度脂肪肝患者的INF-α、IL-6、MCP-1和PAI-1是腦動脈硬化發(fā)生的危險因素，具有相關性，與上述論證具有一致性。

綜合上述，不同程度脂肪肝患者的炎癥因子INF-α、IL-6、MCP-1和PAI-1是腦動脈硬化發(fā)生的危險因素，具有相關性，不同程度脂肪肝患者的氧化應激MDA、NO、SOD、GPx、GSH活性與腦動脈硬化也具有一定的相關性。所以當患者診斷為NAFLD 時，應當對肝臟疾病進行積極的治療，對其腦動脈硬化的相關危險性進行合理性的評估，降低腦動脈硬化絕對的風險發(fā)生。

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