原料嫩度和加工工藝對刺梨葉茶品質(zhì)的影響

宋勤飛 楊琦宏 牛素貞 范金娟 尹杰

摘 要 為探討原料嫩度和加工方式對刺梨葉茶品質(zhì)的影響，確定刺梨葉茶加工的適宜模式，以刺梨春梢1芽1～2葉（L12）、1芽3～4葉（L34）及單葉（L）為原料，參考白茶（W）、烘青綠茶（B）和蒸青綠茶（S）的工藝進(jìn)行加工，比較刺梨葉茶感官品質(zhì)差異、測定內(nèi)含成分含量、抗氧化活性，通過相關(guān)分析和聚類分析確定刺梨葉茶核心品質(zhì)指標(biāo)，利用隸屬函數(shù)法評價(jià)刺梨葉茶的綜合品質(zhì)。結(jié)果顯示：以白茶工藝加工的刺梨葉茶感官品質(zhì)最好，而蒸青工藝制作的刺梨葉茶感官品質(zhì)最差;以刺梨1芽1～2葉原料，采用白茶工藝制作的刺梨葉茶（WL12）其多酚、黃酮、游離氨基酸及水浸出物含量最高，內(nèi)含物質(zhì)最為豐富;同時(shí)WL12的DPPH自由基清除能力和總抗氧化活性（T-AOC）也顯著高于其他處理。隸屬函數(shù)分析刺梨葉茶綜合品質(zhì)優(yōu)劣為：WL12>WL>BL12>WL34>BL>BL34>SL34>SL12>SL。以刺梨1芽1～2葉為原料，按照白茶工藝加工可作為今后刺梨葉茶生產(chǎn)的優(yōu)選模式。

關(guān)鍵詞 刺梨春梢;加工工藝;品質(zhì);隸屬函數(shù)法;綜合評價(jià)

中圖分類號：S661.9 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2022.09.054

收稿日期：2022-01-21

基金項(xiàng)目：貴州省林業(yè)廳林業(yè)科技平臺項(xiàng)目（黔林科合〔2019〕09號）;貴州省科技廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目（黔科合基礎(chǔ)〔2019〕1404號）;貴州省教育廳重點(diǎn)領(lǐng)域項(xiàng)目（黔教合KY〔2021〕042）。

作者簡介：宋勤飛（1978—），女，四川樂山人，碩士，講師，從事茶葉生化研究及類茶植物的挖掘開發(fā)。E-mail： song96@sina.com。

*為通信作者，E-mail： yj_nxy@126.com。

刺梨（Rosa roxburghii Tratt.）是原產(chǎn)于我國西南地區(qū)的重要園藝植物。因富含多種營養(yǎng)物質(zhì)和活性成分[1-2]，具有抗氧化、提高免疫力、抗癌、抗突變等保健藥用功效[2-3]，是極具開發(fā)潛力的食藥兩用果品。目前，市面上所見的刺梨產(chǎn)品多為以果實(shí)為原料生產(chǎn)的刺梨飲料及果脯、茶類等[4-5]，而以刺梨葉片等為原料的產(chǎn)品并不多見。

刺梨葉（RRL）中含有豐富的游離氨基酸，尤其是未展葉中游離氨基酸高達(dá)29種[6-7]。刺梨葉中提取的黃酮對DPPH自由基、ABTS自由基及羥基的清除率均高于根和莖中黃酮的清除率，可作為天然抗氧化劑進(jìn)行開發(fā)[8]。刺梨葉片中含有的酚類物質(zhì)具有顯著的生物活性[9]，游離鞣花酸和總鞣花酸含量、抗氧化活性均明顯高于刺梨果實(shí)和根[10]。從刺梨葉中提取的多糖RLP-1.2和RLP-2.1也有良好的抗氧化活性[11]。利用刺梨葉片所制的刺梨茶75%乙醇提取液能夠明顯降低糖尿病小鼠空腹血糖，改善其體重減輕和多飲癥狀[12]，表明刺梨葉片具有開發(fā)天然降血糖劑或抗氧化劑的潛力，可用在制藥工業(yè)[9]。

在刺梨主產(chǎn)區(qū)貴州等地，民間有將刺梨葉制成茶葉飲用，以治療消化不良等的記載[13]。有研究者采用不同工藝對對刺梨幼嫩鮮葉進(jìn)行加工，發(fā)現(xiàn)采用紅茶工藝所制刺梨紅茶整體品質(zhì)最佳，內(nèi)含物質(zhì)更豐富，對DPPH自由基清除能力也最強(qiáng)，由此認(rèn)為刺梨幼嫩鮮葉最適制成紅茶[14]。但目前，還未見有關(guān)不同原料嫩度和加工工藝對刺梨葉茶品質(zhì)影響的研究報(bào)告。

本研究以刺梨春梢1芽1～2葉、1芽3～4葉及單葉為材料，參考白茶、烘青綠茶、蒸青綠茶的工藝進(jìn)行加工，探究原料嫩度及加工對刺梨葉茶品質(zhì)形成的影響，并通過主成分分析、聚類分析、隸屬函數(shù)法等方法評價(jià)刺梨葉茶的綜合品質(zhì)，確定刺梨葉茶最適的加工模式，以期為生產(chǎn)上科學(xué)利用刺梨葉片提供參考。

1? 材料與方法

1.1? 材料

10年生“貴龍5號”刺梨樹春梢，分別按1芽1～2葉（L12）、1芽3～4葉（L34）及單葉（L）的采摘標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行采摘。所有材料均于2020年4月下旬采自貴州龍里縣貴州奇昂生物科技有限公司刺梨基地。

1.2? 方法

1.2.1? 刺梨葉茶加工

試驗(yàn)在貴州大學(xué)茶學(xué)院茶葉加工實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。按上述采摘要求分別采摘1芽1～2葉、1芽3～4葉和單葉后置于清潔、透氣的尼龍袋中及時(shí)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。將每種嫩度原料均勻地分為3份，每份約5 kg，作為平行組。3種嫩度原料均采用3種加工工藝進(jìn)行處理。其中處理1為白茶工藝（W），即“自然萎凋-干燥”。將新鮮原料薄攤于室內(nèi)萎凋槽中，厚度以原料不互相遮擋為宜，攤放24 h后適當(dāng)歸攏，厚度不超過1 cm，繼續(xù)攤放44 h，期間輕翻5次;萎凋完成后及時(shí)烘干。處理2為烘青綠茶工藝（B），即“攤放—鍋炒殺青—干燥（烘干）”。將新鮮原料于室內(nèi)萎凋槽中攤放7 h，厚度不超過3 cm，期間輕翻2次;隨后將攤青原料置于200 ℃炒茶鍋中炒制5～10 min至殺青完全后進(jìn)行烘干。處理3為蒸青綠茶工藝（S），即“攤放—蒸汽殺青—干燥”。攤放工序同處理2;蒸汽殺青時(shí)用不銹鋼蒸鍋將水煮沸后，將攤放好的原料均勻鋪在蒸格上，盡量不重疊，蒸3 min后取出攤在萎凋槽中自然冷卻;最后進(jìn)行干燥。3個(gè)處理的“干燥”工序均采用烘干方式，即毛火（100 ℃）5 min-攤涼-足火（65 ℃）烘至足干。由于刺梨葉片小且薄，為防止葉片烘焦，在足火過程適當(dāng)進(jìn)行幾次攤涼。所有刺梨葉茶制備好后按表1進(jìn)行編號，置于避光自封袋中低溫保存，用于感官品質(zhì)審評、內(nèi)含成分和抗氧化活性的測定。

1.2.2? 感官審評

組織5名高級評茶員對所制刺梨葉茶進(jìn)行感官品質(zhì)審評。按照國標(biāo)茶葉感官審評中柱形杯審評法[15]進(jìn)行。

1.2.3? 內(nèi)含成分測定

取所制刺梨葉茶，將樣品粉碎[16]后進(jìn)行內(nèi)含成分測定。其中總酚、總黃酮、三萜的測定參考周廣志[17]的方法;氨基酸采用茚三酮比色法[18];可溶性糖采用蒽酮-硫酸比色法[19];水浸出物含量采用全量法[20]。

1.2.4? 抗氧化活性測定

DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力及總抗氧化能力（T-AOC）均采用可見分光光度法進(jìn)行測定。

1.2.5? 數(shù)據(jù)處理

采用EXCEL對數(shù)據(jù)進(jìn)行描述統(tǒng)計(jì)及顯著性檢驗(yàn)。采用SPSS23.0進(jìn)行相關(guān)性分析及聚類分析，篩選出核心指標(biāo)[21]后利用模糊數(shù)學(xué)隸屬度公式進(jìn)行定量轉(zhuǎn)換，再將各指標(biāo)隸屬函數(shù)值取平均值進(jìn)行比較[22]，以確定不同刺梨葉茶綜合品質(zhì)的高低。隸屬函數(shù)公式具體如下。

U（Xi）=（Xi﹣Xmin）/（Xmax﹣Xmin）

式中，U（Xi）為隸屬函數(shù)值，Xi為第i個(gè)指標(biāo)測定值，Xmax和Xmin為所有處理中某一指標(biāo)的最大值和最小值。

2? 結(jié)果與分析

2.1? 不同原料嫩度及加工工藝對刺梨葉茶感官品質(zhì)的影響

采用不同原料嫩度和加工工藝制作的刺梨葉茶感官品質(zhì)差異明顯（見表2）。所有處理下刺梨葉茶外形上均自然舒展且略有卷曲，色澤上以黃褐色、褐色為主;僅WL處理下刺梨葉干茶呈翠綠色。湯色以橙黃、金黃為多。所制刺梨葉茶中除BL34香氣上有明顯異味，WL34香氣略悶外，其余茶樣香氣上都有刺梨果香或甜香，尤其是WL12、WL其甜香和果香高銳持久。滋味總體偏淡，僅WL12、BL12、BL等3個(gè)處理濃度較高;滋味整體協(xié)調(diào)度上以BL12、B14兩個(gè)處理較好，表現(xiàn)出一定的醇度;而其余幾個(gè)處理下刺梨葉茶滋味上有不同程度的苦、酸、麻等。

2.2? 不同原料嫩度和加工工藝對刺梨葉茶內(nèi)含成分的影響

不同原料嫩度和加工工藝對刺梨葉茶內(nèi)含成分含量的影響較大（見表3）。所有處理中，WL12的總酚、黃酮、游離氨基酸及水浸出物含量均為最高，但其可溶性糖和三萜物質(zhì)的含量卻最低。同一原料嫩度不同加工工藝下，以白茶工藝加工的刺梨葉茶總酚、黃酮、游離氨基酸及水浸出物含量最高;可溶性糖含量和三萜含量在各處理間差異不顯著。采用白茶工藝加工時(shí)，1芽1～2葉為原料的刺梨葉茶總酚和黃酮的含量最高，均顯著高于1芽3～4葉及單葉為原料的刺梨葉茶;但可溶性糖、三萜含量均以單葉為原料時(shí)最高。同為烘青綠茶工藝時(shí)，除單葉刺梨葉茶可溶性糖含量極顯著高于1芽1～2葉和1芽3～4葉原料外，其余指標(biāo)在三種原料嫩度之間的差異不顯著。采用蒸青綠茶工藝時(shí)，以1芽1～2葉原料所制刺梨葉茶中總酚、黃酮及游離氨基酸含量較高，尤其總酚和黃酮的含量與其他兩種原料的差異達(dá)到極顯著水平。

2.3? 不同原料嫩度和加工工藝對刺梨葉茶抗氧化活性的影響

采用不同原料嫩度加工的刺梨葉茶均有超過85%的DPPH自由基清除能力（圖1-A）。尤其是采用1芽1～2葉、1芽3～4葉原料加工的刺梨葉茶其DPPH自由基清除能力均大于90%，顯著高于以單葉制作的刺梨葉茶。3種原料嫩度的刺梨葉茶DPPH自由基清除能力大小為1芽1～2葉>1芽3～4葉>單葉。同一原料嫩度不同加工工藝下刺梨葉茶DPPH自由基清除能力的差異規(guī)律性不強(qiáng)。以1芽1～2葉為原料時(shí)，白茶工藝和烘青綠茶工藝加工的刺梨葉茶DPPH自由基清除能力顯著高于蒸青綠茶工藝下;以1芽3～4葉為原料時(shí)，烘青綠茶工藝下刺梨葉茶DPPH自由基清除能力最高，與白茶工藝和蒸青綠茶工藝的差異達(dá)到顯著水平;而以單葉為原料時(shí)，蒸青綠茶工藝加工的刺梨葉茶DPPH自由基清除能力最強(qiáng)。不同原料嫩度下，刺梨葉茶ABTS自由基清除能力的變化趨勢與DPPH自由基清除能力的變化趨勢一致（圖1-B）。

不同原料嫩度的刺梨葉茶總抗氧化能力（T-AOC）大小依次為1芽1～2葉>1芽3～4葉>單葉（圖1-C）。其中WL12具有最高的總抗氧化能力，其值達(dá)到175.45 μmol·g-1，顯著高于其余處理;SL34總抗氧化能力為129.97 μmol·g-1，顯著高于同一原料嫩度下白茶工藝和烘青綠茶工藝加工的刺梨葉茶;以單葉為原料加工的刺梨葉茶總抗氧化能力較低，其大小為101.20～104.11 μmol·g-1，各種加工工藝之間無顯著性差異。

2.4? 不同原料嫩度和加工工藝下刺梨葉茶各指標(biāo)的相關(guān)性分析

不同原料嫩度和加工工藝下刺梨葉茶的感官品質(zhì)得分與多酚、黃酮、游離氨基酸及水浸出物含量等呈正相關(guān)關(guān)系，尤其與多酚和黃酮含量的相關(guān)性達(dá)到了顯著水平。但與可溶性糖和三萜物質(zhì)的含量卻表現(xiàn)為負(fù)相關(guān)（見圖2）。不同原料嫩度和加工工藝下刺梨葉茶水浸出物含量與多酚、黃酮及游離氨基酸含量呈顯著正相關(guān)，表明這3種成分構(gòu)成刺梨葉茶茶湯的主要成分。在各內(nèi)含成分之間，多酚含量與黃酮、游離氨基酸含量都表現(xiàn)為顯著正相關(guān)，尤其與黃酮含量達(dá)到了極顯著水平。刺梨葉茶中三萜類物質(zhì)與多酚、黃酮、游離氨基酸等都表現(xiàn)為顯著負(fù)相關(guān)。DPPH自由基清除能力與黃酮、游離氨基酸及水浸出物含量呈顯著正相關(guān);但ABTS自由基清除能力除與游離氨基酸含量有正相關(guān)關(guān)系外，與其余內(nèi)含成分均呈負(fù)相關(guān)，尤其與可溶性糖含量表現(xiàn)為極顯著負(fù)相關(guān)。總抗氧化能力（T-AOC）與內(nèi)含成分的相關(guān)性與DPPH自由基清除能力與內(nèi)含成分的關(guān)系相似（見圖3）。

2.5? 不同原料嫩度加工工藝刺梨葉茶各指標(biāo)的聚類分析

對刺梨葉茶的10個(gè)指標(biāo)進(jìn)行聚類分析可將各指標(biāo)聚為兩類（見圖4）。第Ⅰ類主要涵蓋黃酮、游離氨基酸、多酚、三萜、可溶性糖及水浸出物等6個(gè)內(nèi)含成分指標(biāo);第Ⅱ類主要是DPPH、ABTS、T-AOC等3個(gè)抗氧化能力指標(biāo)及感官品質(zhì)指標(biāo)。結(jié)合各指標(biāo)間相關(guān)性分析的結(jié)果，分別在2個(gè)類別中選取與其他指標(biāo)相關(guān)性高的指標(biāo)作為核心指標(biāo)。第Ⅰ類指標(biāo)中選取黃酮和水浸出物含量等2個(gè)指標(biāo);第Ⅱ類指標(biāo)中選取T-AOC和感官審評得分等2個(gè)指標(biāo)作為核心指標(biāo)。

2.6? 不同原料嫩度加工工藝刺梨葉茶品質(zhì)的綜合評價(jià)

主成分分析和聚類分析篩選出的4個(gè)核心指標(biāo)包含了刺梨葉茶的內(nèi)含成分、抗氧化能力、感官品質(zhì)等指標(biāo)，可用于刺梨葉茶綜合品質(zhì)的評價(jià)指標(biāo)。通過各指標(biāo)隸屬度轉(zhuǎn)化及平均隸屬度計(jì)算可知：9個(gè)刺梨葉茶平均隸屬函數(shù)值大小依次為：WL12>WL>BL12>WL34>BL>BL34>SL34>SL12>SL（見表4）。即在所有樣品中，WL12（1芽1～2葉原料，白茶工藝）的綜合品質(zhì)最佳，而采用蒸青綠茶加工工藝（S系列）制作的刺梨葉茶綜合品質(zhì)較差，尤其是SL刺梨葉茶綜合品質(zhì)最差。

3? 討論與結(jié)論

本研究顯示相同工藝下，1芽3～4葉（L34）所制的刺梨葉茶品質(zhì)最差;1芽1～2葉（L12）和單葉（L）所制刺梨葉茶的感官品質(zhì)較好。尤其以單葉為原料時(shí)，刺梨葉茶干茶舒展、葉面卷曲，色澤翠潤，表現(xiàn)出良好的外觀品質(zhì)。其原因在于刺梨的羽狀復(fù)葉結(jié)構(gòu)，小葉小且薄，水分較易散失，而莖稈較粗，水分含量較高且不易散失，因此僅有單葉時(shí)，水分分布較為均衡，在加工過程中散失也更加均勻，從而使其保留了較為完整的外觀和較好的潤度。這也提示若生產(chǎn)上利用帶有莖桿的刺梨嫩梢加工葉茶時(shí)，在干燥等環(huán)節(jié)應(yīng)注意增加“攤涼-回水”的頻率和時(shí)間，盡量使小葉葉面和莖稈中的水分能夠較為均勻地散失，使其能保持較好的外觀。在同樣的原料嫩度下，采用白茶工藝（W）加工的刺梨葉茶感官品質(zhì)尤其是外觀品質(zhì)相比其他工藝表現(xiàn)更好，這與白茶工藝只有“萎凋-干燥”2個(gè)工序，對刺梨葉片的翻動和破壞最少有關(guān)。

刺梨葉茶內(nèi)含成分的高低不僅決定了茶湯的滋味、香氣、湯色等，也決定了刺梨葉茶的抗氧化活性。以白茶工藝加工的刺梨葉茶其多酚、黃酮、游離氨基酸及水浸出物含量明顯高于其他工藝，這與張寶會等人[14]的研究結(jié)果相似。說明白茶工藝中長時(shí)間的萎凋有利促進(jìn)了結(jié)合型多酚、大分子蛋白質(zhì)等的游離和降級，從而增加了多酚、氨基酸等可溶性物質(zhì)的含量。而這些水溶性物質(zhì)的增加提高了茶湯濃度，這在刺梨葉茶內(nèi)含成分與感官審評得分的相關(guān)性分析中也得到了印證。

刺梨葉茶作為一種飲品，其市場接受度不僅取決于良好的感官品質(zhì)，更在于其內(nèi)含成分和保健價(jià)值。本研究利用相關(guān)性分析、聚類分析和隸屬函數(shù)法對不同原料嫩度和加工工藝下刺梨葉茶的綜合品質(zhì)進(jìn)行評價(jià)，結(jié)果顯示以白茶工藝加工的刺梨葉茶綜合品質(zhì)最佳，而以蒸青工藝加工的刺梨葉茶綜合品質(zhì)最差，這與感官品質(zhì)、內(nèi)含成分及抗氧化指標(biāo)的分析結(jié)果基本一致，說明可采用該評價(jià)模式進(jìn)行刺梨葉茶品質(zhì)的評價(jià)。

刺梨葉原料嫩度、加工工藝對刺梨葉茶的感官品質(zhì)、內(nèi)含物質(zhì)含量及抗氧化活性等均有影響。以刺梨1芽1～2葉為原料，采用白茶工藝加工的刺梨葉茶（W12）綜合品質(zhì)最佳，可作為今后刺梨葉茶開發(fā)的優(yōu)選模式。

參考文獻(xiàn)：

[1]? 付陽洋，劉佳敏，盧小鸞，等.刺梨主要活性成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技，2020，41（13）：328-335，342.

[2]? 路朝，徐榮艷，胡永紅，等.繅絲花的營養(yǎng)、保健和藥用價(jià)值研究進(jìn)展[J].植物生理學(xué)報(bào)，2021，57（7）：1393-1400.

[3]? 夏仕青，張愛華.刺梨的營養(yǎng)保健功能及其開發(fā)利用研究進(jìn)展[J].貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，43（10）：1129-1132，1153.

[4]? 王怡，李貴榮，朱毅.刺梨食品研究進(jìn)展[J].食品研究與開發(fā)，2019，40（18）：213-218.

[5]? 陳旭，李學(xué)琴.刺梨營養(yǎng)特性及產(chǎn)品開發(fā)研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代食品，2021（3）：28-33.

[6]? 樊衛(wèi)國，劉進(jìn)平，向靈.刺梨花粉和葉的營養(yǎng)成分分析[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào)，1998（1）：110-113.

[7]? 盧晨，魯敏，安華明.‘貴農(nóng)五號’刺梨葉、花中氨基酸的組成與含量分析[J].山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào)，2019，38（6）：49-53.

[8]? 方玉梅，韓世明.刺梨根、莖、葉中黃酮的抗氧化活性[J].北方園藝，2021（14）：51-54.

[9]? Wang R ， He R ， Li Z ， et al. HPLC-Q-Orbitrap-MS/MS phenolic profiles and biological activities of extracts from roxburgh rose （Rosa roxburghii Tratt.） leaves[J].Arabian Journal of Chemistry， 2021.

[10] 譚登航，王鵬嬌，張碩，等.刺梨不同藥用部位中鞣花酸的含量測定及其醇提物的體外抗氧化活性研究[J].中國藥房，2019，30（9）：1236-1240.

[11] Wu H Y，Li M M，Yang X R，et al. Extraction optimization， physicochemical properties and antioxidant and hypoglycemic activities of polysaccharides from roxburgh rose （Rosa roxburghii Tratt.） leaves[J].International Journal of Biological Macromolecules，2020，165（Pt A）：517-529.

[12] 郭建軍，陸錦銳，羅俊，等.刺梨茶對糖尿病小鼠血糖的影響[J].中國民族民間醫(yī)藥，2017，26（14）：50-53.

[13] Lu M，An H M，Wang D P. Characterization of amino acid composition in fruits of three Rosa roxburghii genotypes[J].Horticultural Plant Journal，2017（6）：232-236.

[14] 張寶會，姚新轉(zhuǎn)，陳湖芳，等.不同加工工藝對刺梨葉茶品質(zhì)和化學(xué)成分的影響[J].特產(chǎn)研究，2021，43（2）：57-62.

[15] GB/T 23776-2018，茶葉感官審評方法[S].

[16] GB/T 8303-2013，茶 磨碎試樣的制備及其干物質(zhì)含量測定[S].

[17] 周廣志，魯敏，安華明.刺梨果實(shí)發(fā)育過程中主要活性物質(zhì)含量及其抗氧化性分析[J].食品科學(xué)，2018，39（22）：20-25.

[18] GB/T 8314-2013，茶 游離氨基酸總量的測定[S].

[19] 張正竹.茶葉生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2009.

[20] GB/T 8305-2013，茶 水浸出物測定[S].

[21] 李彥彪，張菲菲，馬維峰，等.河西走廊張掖產(chǎn)區(qū)釀酒葡萄果實(shí)品質(zhì)評價(jià)與香氣特征分析[J].經(jīng)濟(jì)林研究，2020，38（2）：169-176.

[22] 鄭強(qiáng)卿，陳奇凌，王晶晶，等.隸屬函數(shù)法綜合評價(jià)外源植物生長調(diào)節(jié)劑對駿棗果實(shí)品質(zhì)的影響[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021（1）：99-106.

（責(zé)任編輯：敬廷桃）