不同配比花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿的影響

方文富 郭海坤 胡發(fā)明 林 靜 鄧群芳 王麗蓉 黃文英 賴(lài)福平 丁維凱 郭 俊

（福建農(nóng)林大學(xué)蜂學(xué)學(xué)院，福州金山 350002）

蜂花粉是蜜蜂主要的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)來(lái)源。在科學(xué)養(yǎng)蜂中，當(dāng)外界缺乏花粉時(shí)常常通過(guò)補(bǔ)充飼喂人工花粉代用品來(lái)彌補(bǔ)粉源的不足，促進(jìn)蜂群繁殖和提高蜂王漿產(chǎn)量。目前，人工花粉代用品已成為科學(xué)飼養(yǎng)蜜蜂重要的蛋白質(zhì)補(bǔ)充飼料[1-3]。有關(guān)人工花粉代用品及其添加劑對(duì)蜜蜂的作用前人也作了一些有益的探討[4-15]，即豐富了蜜蜂營(yíng)養(yǎng)相關(guān)生理學(xué)理論，又為養(yǎng)蜂生產(chǎn)采用適合的人工花粉代用品提供了科學(xué)依據(jù)。本文試圖通過(guò)采用不同配比油菜花粉與黃豆粉的人工花粉代用品飼喂蜜蜂，就其對(duì)意大利蜜蜂所產(chǎn)蜂王漿的10-羥基-癸烯酸（10-HDA）、粗蛋白、灰分和水分等含量的影響進(jìn)行探討，以為研制更為科學(xué)的蜜蜂人工花粉代用品提供借鑒。

1 材料與方法

本實(shí)驗(yàn)于2009年3～5月在福州西郊福建農(nóng)林大學(xué)蜂學(xué)學(xué)院教學(xué)蜂場(chǎng)進(jìn)行。

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)蜂群

實(shí)驗(yàn)蜂群為福州本地意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica，簡(jiǎn)稱(chēng)“意蜂”），40群，蜂群遺傳性狀一致，群勢(shì) 1 足框，采用1/2脾蜂箱飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)蜂群分 5 組，每組 8 群。實(shí)驗(yàn)期間，實(shí)驗(yàn)群巢門(mén)均安裝蜂花粉采集器（脫粉板圓孔直徑4.9 mm），防止蜜蜂把天然花粉帶進(jìn)蜂巢，并同時(shí)開(kāi)始飼喂實(shí)驗(yàn)用人工蛋白質(zhì)飼料。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)用蛋白質(zhì)飼料

油菜（Brassica napusL.）花粉2007年產(chǎn)自甘肅省民樂(lè)縣。

黃豆（Glycine max Merrill）粉來(lái)自杭州市蕭山區(qū)靖江鎮(zhèn)；直徑0.3 mm。

實(shí)驗(yàn)用蛋白質(zhì)飼料由油菜花粉與黃豆粉按不同比例混合而成。1號(hào)飼料：100%花粉，2 號(hào)飼料：75%花粉、25%黃豆粉，3 號(hào)飼料：50%花粉、50% 黃豆粉，4 號(hào)飼料：25%花粉、75%黃豆粉，5 號(hào)飼料：100%黃豆粉。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 人工蛋白質(zhì)飼料飼喂方法

實(shí)驗(yàn)時(shí)，在各實(shí)驗(yàn)蜂群分別安裝 1 個(gè)巢門(mén)蜂花粉采集器，截留工蜂從外界攜帶返巢的花粉，當(dāng)日開(kāi)始分別飼喂不同蛋白質(zhì)飼料，飼喂時(shí)將人工蛋白質(zhì)飼料制成花粉餅，置于蜂群內(nèi)巢框上梁供蜜蜂自由采食，飼喂的量以略有剩余為度，每 3 d 飼喂 1次，持續(xù)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束為止。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)樣本的提取

1.2.2.1 意大利蜜蜂蜂王漿樣本的提取

生產(chǎn)供試蜂王漿在不同實(shí)驗(yàn)蜂群同一時(shí)間進(jìn)行。方法是：在生產(chǎn)供試蜂王漿前 1 d 用王籠將實(shí)驗(yàn)群蜂王扣起來(lái)。然后，按常規(guī)方法移蟲(chóng)產(chǎn)漿。所生產(chǎn)王漿分別裝入大號(hào)Eppendorf 管，做好標(biāo)記，并馬上放入有冰塊的保溫杯中，取漿結(jié)束后，統(tǒng)一冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 蜂王漿中10-HDA含量的測(cè)定方法

采用高效液相色譜法測(cè)蜂王漿中10-HDA的含量。方法是：

（1）樣液的制備 樣品解凍至室溫后用玻璃棒攪勻，取約0.5 g，置已稱(chēng)重的50 mL容量瓶中，精密稱(chēng)定，加0.03 mol/L 鹽酸 1 mL 和水 2 mL，加純甲醇30 mL，邊加入邊輕輕搖動(dòng)，再精密加入內(nèi)標(biāo)溶液（每毫升含對(duì)羥基苯甲酸甲酯約0.65 mg）10 mL，并用純甲醇稀釋至刻度，搖勻，置超聲波浴中超聲15 min，放置冰箱過(guò)夜后測(cè)定。

（2）色譜條件 測(cè)定波長(zhǎng)：210 nm；柱溫度：35℃；流動(dòng)相（純甲醇＋0.03 mol/L 鹽酸＋重蒸餾水）流速：1 mL/min。

（3）校正因子的測(cè)定 精密吸取10-HDA標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5、1、2、3、4、5 mL 至10 mL 容量瓶中。精密加入內(nèi)標(biāo)溶液 2 mL，用純甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別吸取此溶液 2 uL。注入色譜儀，用峰面積比值計(jì)算，應(yīng)呈線性，求出校正因子 F 。

（4）試樣測(cè)定 吸取試樣溶液 4 uL，注入色譜儀，按“內(nèi)標(biāo)法”定量。

1.2.4 王漿中粗蛋白含量的測(cè)定方法

采用凱氏定氮法測(cè)定粗蛋白含量。方法是：

（1）配制藥品 用電子天平稱(chēng)取樣品，將待測(cè)樣品與濃硫酸（20 mL）、CuSO4（0.5 g）和K2SO4（4.5 g）放入消化管中。一部份的消化管裝只濃硫酸（20 mL）、CuSO4（0.5 g）和K2SO4（4.5 g）留作空白。

（2）硝化 儀器預(yù)熱 5 min 后，將裝好藥品的硝化管放入消化儀器中消化 2 h。硝化結(jié)束，冷卻30 min。

（3）蒸餾 儀器預(yù)熱后開(kāi)始蒸餾。加入適量蒸餾水，再加入適量33%氫氧化鈉溶液。用裝有20 mL 2%硼酸、3～5 滴甲基紅—溴甲酚綠混合指示劑的錐形瓶作為吸收液接取蒸餾物質(zhì)。

（4）滴定 將吸收液用一定濃度的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至由藍(lán)綠色變?yōu)榉凵珵榻K點(diǎn)。

（5）記錄 計(jì)算出樣品含氮量。每個(gè)樣品做3次重復(fù)測(cè)定，取平均值。

1.2.5 王漿中灰分含量的測(cè)定方法

采用硫酸鹽法測(cè)定。方法是：精密稱(chēng)取蜂王漿試樣約1.5 g置于已灼燒至恒重并知其精確質(zhì)量的瓷坩堝中，在電爐上緩緩灼燒至完全炭化，冷卻至室溫，加入硫酸0.5～l mL，使其濕潤(rùn)，低溫加熱至硫酸蒸汽除后，放入高溫爐，在700～800℃下灼燒至完全炭化，冷至200℃以下后取出放路干燥器內(nèi)冷卻至室溫。精確稱(chēng)量后在放入高溫電爐反復(fù)灼燒至恒重（前后兩次質(zhì)量差＜0.0003）為止。

1.2.5 王漿中水分含量的測(cè)定方法

采用常壓干燥法。方法是：精確稱(chēng)取蜂王漿1～2 g，放入已干燥至恒重并知其精確質(zhì)量的稱(chēng)量瓶中，并置于電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中，溫度控制在100～105℃。烘 2 h，取出放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱(chēng)量，再烘 1 h，取出放入干燥器中，冷卻、稱(chēng)量，重復(fù)此操作至前后兩次質(zhì)量差不超過(guò)0.0002 g，即完成測(cè)定。

1.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法

1.3.1 王漿中10-HDA含量計(jì)算方法

式中：X：王漿中10-HDA含量（%）；F：校正因子；As：試樣中內(nèi)標(biāo)物峰面積；Ai：試樣中被測(cè)組分峰面積；Ms：內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量（g）；M1：試樣質(zhì)量（g）。

1.3.2 王漿中蛋白質(zhì)含量的計(jì)算方法

式中：X：蜂王漿中蛋白質(zhì)含量（%）；0.014：氮的毫摩爾質(zhì)量；c：鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol/L）；m：樣本的質(zhì)量（g）；V：樣本消耗標(biāo)準(zhǔn)鹽酸的體積（mL）；V0：空白樣本消耗標(biāo)準(zhǔn)鹽酸的體積（mL）；n：稀釋倍數(shù)

1.3.3 王漿中灰分含量的計(jì)算方法

式中：X：蜂王漿灰分（%）；M1：坩堝和樣品的重量（g）；M2：恒重后坩堝和灰分的質(zhì)量（g）；M3：灼燒至恒重的坩堝重量（g）。

1.3.4 王漿中水分含量的計(jì)算方法

式中：X：蜂王漿水分（%）；M1：稱(chēng)量瓶和試樣的質(zhì)量（g）；M2：恒重后稱(chēng)量瓶和試樣的質(zhì)量（g）；M3：稱(chēng)量瓶的質(zhì)量（g）。

1.3.5 差異顯著性統(tǒng)計(jì)分析方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行 F 檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)王漿中10-HDA含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

飼喂5 種不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿中 10-HDA 含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：飼喂不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料意蜂所產(chǎn)王漿中的 10-HDA 含量之間差異不顯著（P＞0.05）。說(shuō)明不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)王漿中 10-HDA 含量基本不產(chǎn)生影響（表 1 ）。

表1 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿10-HDA含量影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果（± s ）

表1 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿10-HDA含量影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果（± s ）

注：1）小寫(xiě)字母表示差異達(dá)顯著水平。

處理 n 10-HDA 平均含量（%）3 號(hào)飼料 5 1.6700±0.2453 a1）2 號(hào)飼料 4 1.6250±0.1066 a 1 號(hào)飼料 4 1.6050±0.2342 a 4 號(hào)飼料 5 1.5280±0.1522 a 5 號(hào)飼料 5 1.3540±0.2730 a

2.2 飼喂不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿粗蛋白含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

飼喂5 種不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿中粗蛋白含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：飼喂 5 號(hào)飼料的王漿粗蛋白含量極顯著高于飼喂1、2、3、4 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 4 號(hào)飼料的王漿粗蛋白含量極顯著高于飼喂 1、2、3 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 3 號(hào)飼料的王漿粗蛋白含量極顯著高于飼喂 1 號(hào)飼料的（P＜0.05），顯著高于飼喂 2 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 2 號(hào)飼料的王漿粗蛋白含量顯著高于飼喂 1 號(hào)飼料的（P＜0.05）。說(shuō)明不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿的粗蛋白含量影響顯著，蛋白質(zhì)飼料中黃豆粉的含量越多，生產(chǎn)的王漿中粗蛋白含量越高（表 2）。

2.3 飼喂不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿灰分含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

表2 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿粗蛋白含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果（± s ）

表2 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿粗蛋白含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果（± s ）

注：1）大寫(xiě)字母表示差異達(dá)極顯著水平，小寫(xiě)字母表示差異達(dá)顯著水平。

處理 n 粗蛋白平均含量（%）5號(hào)飼料 5 19.1180±0.7219 aA1）4號(hào)飼料 5 17.3140±0.2185 bB 3號(hào)飼料 5 16.3440±0.3829 cCD 2號(hào)飼料 5 15.4640±0.6717 dDE 1號(hào)飼料 5 14.6620±0.4481 eE

飼喂5 種不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿中灰分含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：飼喂 1 號(hào)飼料的王漿灰分含量極顯著高于飼喂 3、4、5 號(hào)飼料的（P＜0.01），但與飼喂2號(hào)飼料的差異不顯著（P＞0.05）；飼喂 2 號(hào)飼料的王漿灰分含量與飼喂 3、4 號(hào)飼料的王漿灰分含量之間無(wú)顯著差異（P＞0.05），但極顯著高于飼喂 5 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 3 號(hào)飼料的王漿灰分含量與飼喂 4號(hào)飼料的無(wú)顯著差異（P＞0.05），但極顯著高于飼喂 5 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 4、5 號(hào)飼料的王漿灰分含量之間有顯著差異（P＜0.05）（表 3）。說(shuō)明不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿的灰分含量影響較大，而且蛋白質(zhì)飼料中花粉的含量越多，生產(chǎn)的王漿中灰分含量越高。

表3 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿灰分含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果（± s ）

表3 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿灰分含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果（± s ）

注：1）大寫(xiě)字母表示差異達(dá)極顯著水平，小寫(xiě)字母表示達(dá)差異顯著水平。

處理 n 灰分平均含量（%）1 號(hào)飼料 5 1.1220±0.0712 aA1）2 號(hào)飼料 5 0.9860±0.0841 abAB 3 號(hào)飼料 5 0.9280±0.1657 bB 4 號(hào)飼料 5 0.9080±0.1132 bBC 5 號(hào)飼料 5 0.7020±0.1199 cC

2.4 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂蜂王漿水分含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

飼喂5 種不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿水分含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：飼喂5 種不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料，意蜂所生產(chǎn)王漿的水分含量之間差異不顯著（P＞0.05），說(shuō)明不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂蜂王漿的水分含量無(wú)影響。

表4 不同比例油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿水分含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果（± s ）

表4 不同比例油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿水分含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果（± s ）

注：1）小寫(xiě)字母表示達(dá)差異顯著水平。

處理 n 灰分平均含量（%）3 號(hào)飼料 5 64.9720 ± 2.7461 a1）1 號(hào)飼料 5 64.8340 ± 2.2919 a 5 號(hào)飼料 5 63.6760 ± 1.0289 a 2 號(hào)飼料 4 64.5950 ± 2.4246 a 4 號(hào)飼料 5 64.5020 ± 0.3881 a

4 討論

（1）采用 5 種不同配比油菜花粉與黃豆粉蛋白質(zhì)飼料對(duì)意蜂王漿中10-HDA含量影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不同飼料組的王漿中 10-HDA 含量之間差異不顯著（P＞0.05），說(shuō)明不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)王漿中 10-HDA 含量無(wú)影響。

實(shí)驗(yàn)用 1～5 號(hào)飼料的蛋白質(zhì)含量分別為24.508%、28.849%、34.3726%、36.755%和38.808%，不同配比油菜花粉與黃豆粉混合飼料的蛋白質(zhì)含量有較大的差異，但研究結(jié)果這5種不同配比蛋白質(zhì)飼料對(duì)王漿中10-HDA含量無(wú)影響。這主要可能是蜂王漿中的10-HDA為脂肪酸，其含量多少與飼料中的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)水平無(wú)必然關(guān)系所致。

（2）采用 5 種不同配比油菜花粉與黃豆粉蛋白質(zhì)飼料對(duì)意蜂王漿粗蛋白含量影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，飼喂 5 號(hào)飼料的王漿粗蛋白含量極顯著高于飼喂 1、2、3、4 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 4 號(hào)飼料的王漿粗蛋白含量極顯著高于飼喂 1、2、3 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 3 號(hào)飼料的王漿粗蛋白含量極顯著高于飼喂 1 號(hào)飼料的（P＜0.05），顯著高于飼喂 2 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 2 號(hào)飼料的王漿粗蛋白含量顯著高于飼喂 1 號(hào)飼料的（P＜0.05）。說(shuō)明不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿的粗蛋白含量影響顯著，飼料中黃豆粉的含量越多，生產(chǎn)的王漿中粗蛋白含量越高。

由于實(shí)驗(yàn)用 1～5 號(hào)飼料的蛋白質(zhì)含量分別為：1 號(hào)飼料（100%花粉）24.508%，2號(hào)飼料（75%花粉、25%黃豆粉）28.849%，3號(hào)飼料（50%花粉、50%黃豆粉）34.3726%，4號(hào)飼料（25%花粉、75%黃豆粉）36.755%，5號(hào)飼料（100%黃豆粉）38.808%。即黃豆粉含量越多，油菜花粉與黃豆粉混合飼料的蛋白質(zhì)含量越高。所以實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示的混合飼料中黃豆粉的含量越多，生產(chǎn)的王漿中粗蛋白含量越高的情況這主要是由于油菜花粉與黃豆粉混合飼料的蛋白質(zhì)含量所致。

據(jù)此，鑒于蛋白質(zhì)是蜂王漿的主要成分之一，在養(yǎng)蜂生產(chǎn)中，可以通過(guò)適當(dāng)提高混合蛋白質(zhì)飼料中蛋白質(zhì)含量來(lái)提高所生產(chǎn)蜂王漿的粗蛋白含量。

（3）采用5種不同配比油菜花粉與黃豆粉蛋白質(zhì)飼料對(duì)意蜂王漿中灰分含量影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，飼喂1號(hào)飼料的王漿灰分含量極顯著高于飼喂3、4、5號(hào)飼料的（P＜0.01），但與飼喂2號(hào)飼料的差異不顯著（P＞0.05）；飼喂2號(hào)飼料的王漿灰分含量與飼喂 3、4 號(hào)飼料的王漿灰分含量之間無(wú)顯著差異（P＞0.05），但極顯著高于飼喂 5 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 3 號(hào)飼料的王漿灰分含量與飼喂 4 號(hào)飼料的無(wú)顯著差異（P＞0.05），但極顯著高于飼喂 5 號(hào)飼料的（P＜0.01）；飼喂 4、5 號(hào)飼料的王漿灰分含量之間有顯著差異（P＜0.05）（表3）。說(shuō)明不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿的灰分含量影響較大，而且蛋白質(zhì)飼料中花粉的含量越多，生產(chǎn)的王漿中灰分含量越高。

蜂王漿 的灰分含量高低反映蜂王漿中礦物質(zhì)的多寡。不同配比油菜花粉與黃豆粉混合蛋白質(zhì)飼料中油菜花粉含量越多，生產(chǎn)的蜂王漿中灰分含量越高，這主要是飼料中的礦物質(zhì)含量不同造成的。

飼喂1、2號(hào)飼料的王漿灰分含量之間無(wú)顯著差異（P＞0.05），說(shuō)明采用75%花粉與25%黃豆粉構(gòu)成的混合飼料對(duì)蜂王漿中灰分含量不會(huì)造成影響。因此，在生產(chǎn)蜂王漿時(shí)，可以考慮采用這一比例的混合飼料作為人工花粉代用品飼喂蜜蜂。

（4）采用5 種不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂王漿水分含量影響的實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：飼喂5 種不同配比的蛋白質(zhì)飼料，意蜂所生產(chǎn)王漿的水分含量之間差異不顯著（P＞0.05），說(shuō)明不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂蜂王漿的水分含量無(wú)影響。這主要可能是因?yàn)轱暳系牡鞍踪|(zhì)營(yíng)養(yǎng)水平與蜂王漿水分含量沒(méi)有必然關(guān)系的結(jié)果。

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[10] 方文富等. 不同配比花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂工蜂幼蟲(chóng)蟲(chóng)體蛋白含量的影響[J]. 中國(guó)蜂業(yè)，2010，61（9）：17-19.

[11] 方文富等. 不同配比花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂6日齡工蜂幼蟲(chóng)血淋巴中游離氨基酸含量的影響[J]. 中國(guó)蜂業(yè)，2010，（11）：39-41.

[12] 方文富等. 黃豆配合飼料對(duì)6日齡工蜂幼蟲(chóng)血淋巴礦物質(zhì)含量的影響[J]. 中國(guó)蜂業(yè)， 2011，62（02上）：5-6.

[13] 方文富等. 不同配比黃豆粉飼料對(duì)意蜂6日齡工蜂幼蟲(chóng)血淋巴蛋白的影響[J]. 中國(guó)蜂業(yè)，2011，62（10－12）：20-23.

[14] 方文富等. 不同配比黃豆粉飼料對(duì)意蜂成年工蜂血淋巴蛋白的影響[J]. 中國(guó)蜂業(yè)，2012，63（3）：13-16.

[15] 方文富等. 不同配比花粉與黃豆粉飼料對(duì)意蜂6日齡工蜂幼蟲(chóng)血淋巴蛋白中游離氨基酸含量的影響[J]. 中國(guó)蜂業(yè)，2012，63（3）：17-18.