分析解讀歐盟關(guān)于轉(zhuǎn)基因蜂蜜的檢測(cè)要求和手段

王海洋 錢云開 高 飛 吳 曦

（秦皇島出入境檢驗(yàn)檢疫局，河北秦皇島 066004）

1 前言

蜂蜜作為我國(guó)傳統(tǒng)大宗出口農(nóng)副產(chǎn)品，歐盟等國(guó)市場(chǎng)是我國(guó)蜂蜜重要的出口地[1]，然而201 1年下半年歐盟開始檢測(cè)蜂蜜中的轉(zhuǎn)基因成分[2]，同年9月歐洲法院（ECJ）裁決確認(rèn)了對(duì)轉(zhuǎn)基因蜂蜜的限制，所有含有來(lái)源于轉(zhuǎn)基因作物的花粉的蜂蜜或者食物添加成分，不管其中轉(zhuǎn)基因成分的比例多少，都必須獲得《歐盟轉(zhuǎn)基因食品及飼料管理?xiàng)l例》（1829/2003）的事先授權(quán)許可[3]。2011年11月德國(guó)消費(fèi)者保護(hù)和食品安全管理機(jī)構(gòu)（BVL）頒布了蜂蜜中轉(zhuǎn)基因花粉的檢測(cè)方法，相關(guān)政策已經(jīng)實(shí)施一年多，對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的限制，成為繼抗生素殘留、農(nóng)藥殘留問(wèn)題后新的技術(shù)壁壘[4]。

轉(zhuǎn)基因是指利用分子生物學(xué)手段改變生物的基因片段，或?qū)⒁环N生物的片段植入另一種生物使其生物性狀或機(jī)能發(fā)生部分改變。這一技術(shù)稱為轉(zhuǎn)基因技術(shù)或基因工程技術(shù)。經(jīng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)修飾過(guò)的生物體常被稱為“遺傳修飾生物體”（Genetically Modifi ed Organism，簡(jiǎn)稱GMO）。目前，國(guó)際上對(duì)轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品的安全性評(píng)價(jià)主要涉及3個(gè)方面：一是受體植物安全性風(fēng)險(xiǎn)，即導(dǎo)入的外源基因及其產(chǎn)物對(duì)受體植物是否產(chǎn)生不利影響；二是生態(tài)環(huán)境安全性風(fēng)險(xiǎn)，即轉(zhuǎn)基因植物的使用帶來(lái)的直接或間接的生態(tài)影響；三是毒理安全性風(fēng)險(xiǎn)，主要指以轉(zhuǎn)基因植物為原料的產(chǎn)品（食品、飼料）和其他方面的安全性[5]。從各個(gè)方面的評(píng)價(jià)來(lái)看，轉(zhuǎn)基因植物及產(chǎn)品的安全性依然存在很大的爭(zhēng)議。

蜂蜜本身不含植物DNA，蜂蜜除含有多種糖外，還含有有機(jī)酸、酶和來(lái)源于蜜蜂采集的固體顆粒物如植物花粉等。蜂蜜中轉(zhuǎn)基因成分來(lái)源于植物花粉，自然花粉為由蜂群采集并儲(chǔ)存在蜂房的花粉，一些蜂農(nóng)為使蜂蜜具有不同的香型和風(fēng)味，人為添加花粉，如果這些花粉來(lái)自轉(zhuǎn)基因作物，則蜂蜜中可能含有轉(zhuǎn)基因成分[6]。因此，轉(zhuǎn)基因蜂蜜是指蜜蜂采集或部分采集了經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)基因修飾的植物花粉而釀造的蜂蜜，或者人為添加入轉(zhuǎn)基因植物花粉的蜂蜜。

2 轉(zhuǎn)基因種植及管理要求概況

轉(zhuǎn)基因作物在許多國(guó)家都有種植，例如美國(guó)，加拿大，阿根廷，中國(guó)，西班牙，自2000年以后種植面積開始大幅增長(zhǎng)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在2000年全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積為0.442億公頃[7]，而在2009年達(dá)到1.34億公頃[8]。2012年全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積達(dá)到約1.7億公頃，比2011年增長(zhǎng)6%，約占全球總耕地面積的10%。按照種植面積統(tǒng)計(jì)，全球約81%的大豆、35%的玉米、30%的油菜和81%的棉花是轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品。隨著種植面積的擴(kuò)大，人們對(duì)轉(zhuǎn)基因作物所加工食品的安全性日益關(guān)注。世界許多國(guó)家都對(duì)食品中的轉(zhuǎn)基因成分含量做了限量要求。歐盟地區(qū)是在對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品要求最嚴(yán)格的地區(qū)。早在2003年歐盟1829/2003條例規(guī)定，所有轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品成分含量高于限量0.9%的食品以及其衍生產(chǎn)品，包括動(dòng)物食品，必須在標(biāo)簽上注明“GMO”，以供消費(fèi)者購(gòu)買這些產(chǎn)品時(shí)選擇。

2012年2月21日國(guó)務(wù)院法制辦公室在其官方網(wǎng)站上公布了由國(guó)家發(fā)改委、國(guó)家糧食局會(huì)同有關(guān)部門起草的《糧食法（征求意見稿）》，并在3月31日之前面向全社會(huì)征求意見。這是中國(guó)首次通過(guò)立法對(duì)轉(zhuǎn)基因進(jìn)行管理，轉(zhuǎn)基因管理或?qū)⑸仙絿?guó)家法律層次。由此可見，我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的管理也日益嚴(yán)格。

3 我國(guó)存在轉(zhuǎn)基因蜂蜜狀況

我國(guó)轉(zhuǎn)基因作物種植的品種和數(shù)量不斷增加，轉(zhuǎn)基因成分在蜂蜜中存在的風(fēng)險(xiǎn)性也不斷加大。我國(guó)蜂蜜中的轉(zhuǎn)基因成分的風(fēng)險(xiǎn)性主要來(lái)源于：

（1）2012年中國(guó)轉(zhuǎn)基因作物總面積居世界第六位。中國(guó)轉(zhuǎn)基因作物總種植面積為400萬(wàn)公頃，含棉花、木瓜、白楊樹、西紅柿及甜椒。2012年棉花成為中國(guó)的主要轉(zhuǎn)基因作物，400萬(wàn)公頃轉(zhuǎn)基因棉花，種植率高達(dá)80%。我國(guó)已有棉花、牽?；?、番茄、甜椒、白楊、木瓜五個(gè)物種取得了安全生產(chǎn)證書并已進(jìn)行商業(yè)化生產(chǎn)。中國(guó)已為轉(zhuǎn)基因番茄（耐貯藏）、棉花（抗蟲）、矮牽牛（變色）、甜椒（抗?。⒎竟希共。⑺荆瓜x）和玉米（產(chǎn)植酸酶）共7種轉(zhuǎn)基因作物發(fā)放了農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全證書。還有多個(gè)轉(zhuǎn)基因品種被批準(zhǔn)進(jìn)行田間試驗(yàn)。

（2）到目前為止農(nóng)業(yè)部已經(jīng)批準(zhǔn)包括大豆、玉米、棉花、油菜在內(nèi)的79個(gè)轉(zhuǎn)基因作物品種進(jìn)口。中國(guó)進(jìn)口的大豆、玉米、油菜和棉花主要來(lái)自美國(guó)、加拿大、巴西和阿根廷等國(guó)。2010年，中國(guó)總共進(jìn)口大豆及加工產(chǎn)品5633萬(wàn)噸，玉米及加工產(chǎn)品160萬(wàn)噸，油菜子160萬(wàn)噸，棉花初級(jí)產(chǎn)品284萬(wàn)噸。雖然批準(zhǔn)進(jìn)口的轉(zhuǎn)基因品種只用做加工原料，但是由于這些進(jìn)口的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品均為植物種子，轉(zhuǎn)基因擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)很難避免。

（3）非法轉(zhuǎn)基因，由于監(jiān)管缺乏我國(guó)存在許多未經(jīng)批準(zhǔn)而商業(yè)化種植的轉(zhuǎn)基因品種。如在2006年被綠色和平組織曝光的含有BT63成分的轉(zhuǎn)基因水稻。到2009 年11 月27 日，農(nóng)業(yè)部還批準(zhǔn)了“華恢1 號(hào)”、“Bt 汕優(yōu)63” 兩種轉(zhuǎn)基因水稻（由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)研發(fā)），一種BVLA430101 轉(zhuǎn)基因玉米的安全證書，兩種轉(zhuǎn)基因作物分別限在湖北省和山東省生產(chǎn)應(yīng)用。這是中國(guó)首次為轉(zhuǎn)基因水稻頒發(fā)安全證書，也是全球首次為轉(zhuǎn)基因主糧發(fā)放安全證書[9]。此事在國(guó)內(nèi)外引起了很大的爭(zhēng)論。

由于我國(guó)是轉(zhuǎn)基因作物種植與產(chǎn)品進(jìn)口大國(guó)，大面積種植的棉花、玉米、油菜等轉(zhuǎn)基因作物基本上都是重要的蜜源、粉源植物，因此我國(guó)蜂蜜中轉(zhuǎn)基因成分污染的風(fēng)險(xiǎn)性較大。也正因?yàn)榇耍瑲W盟目前對(duì)產(chǎn)地為中國(guó)的蜂蜜實(shí)行嚴(yán)格的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)識(shí)工作。

4 轉(zhuǎn)基因蜂蜜檢測(cè)情況

2011年下半年歐盟開始檢測(cè)蜂蜜中的轉(zhuǎn)基因成分。2011年12月德國(guó)食品部、農(nóng)業(yè)部和消費(fèi)者保護(hù)機(jī)構(gòu)組織了蜂蜜中轉(zhuǎn)基因花粉結(jié)果判定與轉(zhuǎn)基因作物在德國(guó)及歐盟成員國(guó)釋放的國(guó)際研討會(huì)，歐盟及德國(guó)官方推薦在食品中如果使用經(jīng)批準(zhǔn)的轉(zhuǎn)基因花粉含量占總花粉含量超過(guò)0.9%的蜂蜜時(shí)應(yīng)當(dāng)予以標(biāo)識(shí)[10]。

雖然，澳大利亞的研究表明，油菜蜜中油菜花粉的干重在0.2±0.12%，而轉(zhuǎn)基因的在0.2%和0.24%，即使所有的花粉都來(lái)自轉(zhuǎn)基因油菜，也小于需要標(biāo)注的閾值（0.9%）[11]。但在0.9%限量界定方面，歐盟目前傾向采用更極端的鑒定方法是用PCR方法與顯微鏡檢驗(yàn)相結(jié)合的方法。

方法是，首先用PCR方法檢測(cè)到蜜中含有轉(zhuǎn)基因花粉；下一步通過(guò)PCR品種鑒定的方式檢測(cè)出是那種植物花粉含有轉(zhuǎn)基因成分；然后利用鏡檢的方式計(jì)算出該植物花粉在總花粉中的含量；最后計(jì)算出轉(zhuǎn)基因花粉在所有花粉中的含量（歐盟認(rèn)定的方式是如果檢測(cè)到某種花粉含有轉(zhuǎn)基因成分既認(rèn)為該種花粉為100%轉(zhuǎn)基因花粉）。此方法計(jì)算的原理是：

（轉(zhuǎn)基因花粉個(gè)數(shù)/總花粉個(gè)數(shù)）%=蜂蜜轉(zhuǎn)基因含量%

而不是：

（轉(zhuǎn)基因花粉質(zhì)量/蜂蜜質(zhì)量）%=蜂蜜轉(zhuǎn)基因含量%

歐盟的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)流程如下圖：

2011年開始檢測(cè)蜂蜜中轉(zhuǎn)基因花粉成分時(shí)QSI實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的三個(gè)篩選基因?yàn)镻-35S、T-NOS和FMV基因。而intertek實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的三個(gè)篩選基因?yàn)镻-35S、T-NOS和trans-EPSPS目的是篩選轉(zhuǎn)基因玉米品種Mon810和T25以及轉(zhuǎn)基因油菜品種MS8和GT73。上述三種篩選基因就是我們實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的也是我國(guó)行標(biāo)中的CAMV35基因（花椰菜花葉病毒35S啟動(dòng)子（promotor）），NOS基因（胭脂堿合成酶終止子（terminator）），EPSPS（5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因）。

2012年1月intertek實(shí)驗(yàn)室開始對(duì)檢測(cè)的三種篩選基因做了調(diào)整，將EPSPS基因改為FMV基因。這樣intertek檢測(cè)的基因也就與QSI實(shí)驗(yàn)室取得了一致。FMV基因是玄參花葉病毒啟動(dòng)子基因，歐盟實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增的片段為34S亞基啟動(dòng)子基因，而我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)中的FMV基因?yàn)?5S亞基啟動(dòng)子基因。

對(duì)于陽(yáng)性樣品，2011年歐盟的做法為采用4個(gè)品系鑒定基因GT73、MS8、MON810、T25做進(jìn)一步檢測(cè)，其中GT73、MS8是檢測(cè)未經(jīng)歐盟批準(zhǔn)的油菜轉(zhuǎn)基因品種，MON810、T25是檢測(cè)未經(jīng)歐盟批準(zhǔn)的玉米轉(zhuǎn)基因品種。

從2012年開始，歐盟采用了trans-EPSPS、Bar、P35S-pat基因做進(jìn)一步篩選檢測(cè)，這三種基因與P-35、T-NOS、FMV配合檢測(cè)可以覆蓋檢測(cè)到油菜：合法轉(zhuǎn)基因品種4種，非法轉(zhuǎn)基因品種7種。大豆：合法轉(zhuǎn)基因品種3種，非法轉(zhuǎn)基因品種7種。玉米：合法轉(zhuǎn)基因品種11種，非法轉(zhuǎn)基因品種17種。棉花：合法轉(zhuǎn)基因品種2種，非法轉(zhuǎn)基因品種5種。合計(jì)可以檢測(cè)四種作物合法轉(zhuǎn)基因品種20種，非法轉(zhuǎn)基因品種36種。

5 展望

為減少蜂產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分的風(fēng)險(xiǎn)，需要研究相關(guān)對(duì)策。如增強(qiáng)蜂蜜產(chǎn)區(qū)與轉(zhuǎn)基因作物的種植區(qū)的養(yǎng)蜂人、農(nóng)業(yè)管理、出口監(jiān)管部門的信息交流溝通；轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物的適當(dāng)隔離，包括距離隔離以及花期隔離；加強(qiáng)蜜蜂覓食管理，最大程度的保證在特定方向和作物的采蜜行為；保證蜂巢與轉(zhuǎn)基因作物種植區(qū)的空間距離在蜜蜂覓食距離以外；另外重要的一點(diǎn)就是做好蜂產(chǎn)品的花粉轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)監(jiān)管[12]。

就目前發(fā)展?fàn)顩r，轉(zhuǎn)基因植物的種類和種植面積都將會(huì)繼續(xù)增長(zhǎng)，以歐盟為代表的國(guó)家對(duì)轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)品的管理采取謹(jǐn)慎的態(tài)度和嚴(yán)格的管制，強(qiáng)調(diào)轉(zhuǎn)基因制品必須標(biāo)識(shí)和可追溯，采取嚴(yán)格的監(jiān)管措施乃至技術(shù)壁壘，必將對(duì)蜂農(nóng)和蜂產(chǎn)業(yè)帶來(lái)重要影響。我國(guó)對(duì)玉米、水稻等糧食作物發(fā)放安全許可證書后，國(guó)外對(duì)中國(guó)轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)業(yè)發(fā)展動(dòng)態(tài)更為關(guān)注，對(duì)我國(guó)出口農(nóng)產(chǎn)品包括蜂產(chǎn)品的檢測(cè)將會(huì)更為嚴(yán)格。

因此需要盡快做好蜂產(chǎn)品轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)工作，積極應(yīng)對(duì)歐盟等國(guó)對(duì)我國(guó)出口蜂產(chǎn)品轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)的技術(shù)壁壘，科學(xué)合理指導(dǎo)消費(fèi)者對(duì)轉(zhuǎn)基因蜂產(chǎn)品的選擇，保護(hù)我國(guó)蜂產(chǎn)業(yè)和廣大蜂農(nóng)的利益。

[1]龍學(xué)軍.2011-2012國(guó)際蜂蜜出口情況及我國(guó)市場(chǎng)展望[J].中國(guó)蜂業(yè)，2012，15：41-43.

[2]孫宇，陸曉玲，沈山江.我國(guó)出口蜂產(chǎn)品形勢(shì)和對(duì)策分析[J]..蜜蜂雜志，2012，11：37-38.

[3]Court of Justice of the European Union（2011）Honey and Food Supplements Containing Pollen Derived from a GMO are Foodstuffs Produced from GMOs which Cannot be Marketed without Prior Authorisation，Judgment in Case C-442/09，Press Release，No.79/11，Luxembourg.

[4]WA Kerr，JE Hobbs.Busy Bees，Zero Tolerance，F(xiàn)oregone Trade and Inhibited Investment：Can the Global Divide Over GM Foods Be Bridged? [J].2012 Conference，August 18-24，2012.

[5]郭建英，萬(wàn)方浩，韓召軍.轉(zhuǎn)基因植物的生態(tài)安全性風(fēng)險(xiǎn)[J].中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2008，16（2）：515-522.

[6]石巍，張秀琳，呂麗萍.蜂產(chǎn)品與基因改良食物一歐盟有關(guān)的規(guī)章[J].中國(guó)養(yǎng)蜂，2005，4：46-47.

[7]James，C.preview.Global status of commercialized transgenic crops：2000.ISAAA Briefs No.21-2000 Available at http：//www.isaaa.org/publications/briefs/Brief_21.htm.

[8]http：//www.madr.ro/pages/comunicate/pozitiamediului.

[9]鄭火青，曹聯(lián)飛，胡福良.轉(zhuǎn)基因技術(shù)發(fā)展與應(yīng)用對(duì)養(yǎng)蜂業(yè)的影響[J].蜜蜂雜志，2012，2：1-5.

[10]Waltz E.European ruling raises specter of mandatory GM pollen tests on honey.Nat Biotechnol.2011 Nov 8；29（11）：958.doi：10.1038/nbt1111-958b.

[11]張金振，趙靜，吳黎明，李熠.轉(zhuǎn)基因作物對(duì)蜂產(chǎn)品的影響及其檢測(cè)方法[J].中國(guó)蜂業(yè)，2010，61（10）：41-44.

[12]Otilia Bobi?， Liviu Al， M?rghita?， Elena Rakosy-Tican.Incidence of Pollen from Genetically Modified Plants in Bee Products Bulletin USAMV 10/2012.