高危型人乳頭瘤病毒聯(lián)合薄層液基細(xì)胞學(xué)對(duì)宮頸癌及癌前病變患者診斷效能的影響

趙 衛(wèi)，劉萌萌

洛陽(yáng)市疾病預(yù)防控制中心門診部，河南 洛陽(yáng) 471023

宮頸癌是臨床婦科多發(fā)惡性腫瘤疾病，嚴(yán)重威脅女性生命健康，需及時(shí)采取可靠診療措施［1-2］。由于宮頸癌前病變進(jìn)展至宮頸癌需較長(zhǎng)時(shí)間，而早期宮頸癌具有可治愈性，因此及早確診、及時(shí)治療具有重要意義［3-4］。高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）檢測(cè)是臨床診斷宮頸癌常用的診斷方式，具有良好靈敏性，但單獨(dú)應(yīng)用時(shí)極易出現(xiàn)假陽(yáng)性率高現(xiàn)象，導(dǎo)致特異度相對(duì)較低。近年來(lái)，薄層液基細(xì)胞學(xué)（TCT）逐因具有可重復(fù)性、非創(chuàng)傷性特點(diǎn)逐漸受到臨床關(guān)注，但在宮頸早期病變?cè)\斷中漏診可能性較大。為此，研究嘗試探討HR-HPV聯(lián)合TCT對(duì)宮頸癌及癌前病變?cè)\斷效能的影響，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年2 月—2018 年11 月洛陽(yáng)市疾病預(yù)防控制中心166 例疑似宮頸癌患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：均存在宮頸炎癥狀，均未處于月經(jīng)期，均無(wú)子宮頸錐切或子宮切除病史，均無(wú)盆腔放療史，既往無(wú)宮頸癌及癌前病變病史，患者均知情并簽訂知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在其他生殖系統(tǒng)惡性腫瘤疾病，處于月經(jīng)期。研究對(duì)象年齡28～64 歲，平均年齡（41.05±4.73）歲，孕次0～6 次，平均孕次（3.02±0.54）次，產(chǎn)次0～4 次，平均產(chǎn)次（2.14±0.27）次，其中伴有宮頸糜爛118 例。研究經(jīng)洛陽(yáng)市疾病預(yù)防控制中心醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2 方法

正在月經(jīng)期女性應(yīng)該在月經(jīng)結(jié)束后72 h接受檢查，檢查前24 h 禁止性生活，不在月經(jīng)期的女性均需于檢查前72 h 禁止性生活、陰道內(nèi)用藥、陰道沖洗。均經(jīng)由常規(guī)4點(diǎn)取材活檢，行病理組織學(xué)檢查，于陰道鏡下活檢，分別對(duì)0、3、6、9 點(diǎn)等病變處取樣后采用中性福爾馬林（10%）將病理組織標(biāo)本固定后送至病理科進(jìn)行檢查。（1）HR-HPV 檢查方法：采用窺陰器暴露宮頸，將宮頸與宮頸周圍黏液擦拭干凈，于宮頸外口處采用專用采樣刷（由美國(guó)Digene公司提供）采集標(biāo)本，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)（3周），并停留10 s，于存有1 mL保存液的標(biāo)本保存管內(nèi)放置分泌物標(biāo)本，密封，保存于2～8 ℃條件下。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）熒光法、實(shí)時(shí)定量PCR 儀檢測(cè)HR-HPV，共13 種（68、59、58、56、52、51、45、39、35、33、31、18、16）。（2）TCT 檢查方法：于宮頸口、宮頸管內(nèi)采用TCT 專用毛刷（由美國(guó)Digene 公司提供）采集脫落細(xì)胞，完成后立即將脫落細(xì)胞樣本放置于有細(xì)胞保存液的TCT 專用取樣瓶中，進(jìn)行漂洗，并搖晃均勻，確認(rèn)密封好后，送檢。采用全自動(dòng)細(xì)胞制片機(jī)（美國(guó)賽迪公司）進(jìn)行制片，保存完好上皮覆蓋率在10%以上為滿意涂片，之后采取巴氏染色，進(jìn)行鏡檢。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

（1）HR-HPV 診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］：RLU/CO 比值≥1.0 判定為陽(yáng)性。（2）TCT 診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］：采用TBS 分級(jí)系統(tǒng)對(duì)薄層細(xì)胞進(jìn)行分級(jí)。①細(xì)胞學(xué)顯示正常。②細(xì)胞學(xué)顯示良性改變。③細(xì)胞學(xué)顯示異常改變，分為非典型性鱗狀細(xì)胞、低度鱗狀上皮內(nèi)病變［輕度不典型增生病變（CINⅠ）及HPV 感染所致的細(xì)胞改變］、高度鱗狀上皮內(nèi)病變［中度CIN（CINⅡ）、重度CIN（CINⅢ）］、鱗癌（SCC）。非典型性鱗狀細(xì)胞及以上判定為陽(yáng)性。（4）任一結(jié)果呈陽(yáng)性則判定為聯(lián)合診斷陽(yáng)性。（5）CINⅠ及以上判定為病理活檢陽(yáng)性。

1.4 觀察指標(biāo)

（1）病理結(jié)果。（2）HR-HPV、TCT 檢查結(jié)果。（3）HR-HPV、TCT 診斷效能。（4）對(duì)比不同CIN 分級(jí)與宮頸癌患者HR-HPV、TCT陽(yáng)性率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理結(jié)果

病理結(jié)果證實(shí)，在所有166 例疑似宮頸癌及癌前病變患者中，炎癥74 例，宮頸癌及癌前病變患者92 例，包括CINⅠ級(jí)16 例，CINⅡ級(jí)20 例，CINⅢ級(jí)24 例以及宮頸癌32例。

2.2 HR-HPV、TCT檢查結(jié)果

HR-HPV 檢查陽(yáng)性94 例，陰性72 例，其中誤診18例，漏診16 例。TCT 檢查陽(yáng)性86 例，陰性80 例，其中誤診17 例，漏診23 例。兩者聯(lián)合檢查108 例陽(yáng)性，58 例陰性，其中誤診18例，漏診2例，見(jiàn)表1。

表1 HR-HPV、TCT檢查結(jié)果 例

2.3 HR-HPV、TCT診斷效能情況

HR-HPV 聯(lián) 合TCT 診 斷 準(zhǔn) 確 率87.95% （95%CI 為0.758～0.903） 高 于 兩 者 單 項(xiàng) 檢 查79.52% （95%CI 為0.681～0.867）、75.90%（95%CI 為0.662～0.831），敏感度97.83%（95%CI 為0.736～0.890）高于兩者單項(xiàng)檢查，診斷敏感度82.61%（95%CI為0.736～0.890）、75.00%（95%CI 為0.653～0.827），差 異 有 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 意 義（P＜0.05）。HR-HPV 聯(lián)合TCT 診斷特異度75.68%（95%CI 為0.648～0.840） 與 兩 者 單 項(xiàng) 檢 查75.68% （95% CI 為0.648～0.840）、77.03%（95%CI 為0.663～0.851）相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 HR-HPV、TCT診斷效能情況 例（%）

2.4 不同CIN 分級(jí)與宮頸癌患者HR-HPV、TCT 陽(yáng)性率情況

宮頸癌患者HR-HPV、TCT 陽(yáng)性率100.00%、96.97%高于CINⅢ級(jí)（74.07%、66.67%）、CINⅡ級(jí)（72.22%、61.11%）、CINⅠ級(jí)患者（71.43%、57.14%），不同CIN 分級(jí)患者HR-HPV、TCT 陽(yáng)性率，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 不同CIN分級(jí)與宮頸癌患者HR-HPV、TCT陽(yáng)性率情況 例（%）

3 討論

相關(guān)資料表明，宮頸癌發(fā)病率位居發(fā)女性婦科腫瘤疾病的第二位，且近年來(lái)呈現(xiàn)不斷升高趨勢(shì)，發(fā)病人群則呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)，防治形勢(shì)較為嚴(yán)峻［7-8］。臨床實(shí)踐顯示，宮頸病變進(jìn)展至宮頸癌通常需10年左右，若及時(shí)確診宮頸癌及癌前病變，給予科學(xué)性治療，患者5 年生存率高達(dá)90%，且宮頸癌是目前唯一經(jīng)醫(yī)學(xué)干預(yù)可降低發(fā)病與死亡風(fēng)險(xiǎn)的惡性腫瘤疾病［9-10］。因此，及早篩查、確診對(duì)實(shí)現(xiàn)早預(yù)防、早治療具有關(guān)鍵性作用。但宮頸癌及癌前病變無(wú)特異性臨床癥狀，臨床表現(xiàn)與月經(jīng)異常、陰道感染相似，極易出現(xiàn)誤漏診現(xiàn)象。故積極探索較為可靠的診斷方式至關(guān)重要。

宮頸癌前病變及宮頸癌發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)為HPV生殖道持續(xù)感染，因此臨床多采取HR-HPV診斷宮頸癌，主要是通過(guò)第二代雜交捕獲法進(jìn)行檢查，具有較好敏感性［6］。但90%左右HPV 感染者可于2 年內(nèi)自然消退，HR-HPV 檢測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)陽(yáng)性僅可反映存在HPV感染，而長(zhǎng)期持續(xù)感染才可能引發(fā)宮頸癌，從而導(dǎo)致假陽(yáng)性風(fēng)險(xiǎn)增加，降低診斷特異度，影響診斷效能，不適宜單獨(dú)應(yīng)用［7］。TCT 檢測(cè)方法是一種新型宮頸癌病變篩查、診斷方法，主要采用TCT 專用毛刷于宮頸口、宮頸管內(nèi)采集脫落細(xì)胞，取出標(biāo)本后立即裝入細(xì)胞保存液的TCT 專用取樣瓶中，可最大限度保留標(biāo)本，通過(guò)程序化處理保存液中細(xì)胞，可有效分離炎性細(xì)胞、血液與上皮細(xì)胞，成功獲取存在診斷意義的上皮細(xì)胞［8］。同時(shí)，與常規(guī)巴氏染色操作相比，TCT 檢測(cè)可顯著減少重復(fù)操作頻次，還可明顯提高薄片細(xì)胞富集率及清晰度，有助于減少漏診現(xiàn)象［9］。但有文獻(xiàn)指出，TCT 檢測(cè)僅可收集宮頸表層細(xì)胞，難以采集宮頸深層細(xì)胞，可能因取材、制片質(zhì)量因素導(dǎo)致診斷偏差，還極易導(dǎo)致過(guò)度診斷現(xiàn)象發(fā)生，從而影響診斷價(jià)值［10］。本研究結(jié)果顯示，HR-HPV 聯(lián)合TCT 診斷準(zhǔn)確率87.95%、敏感度97.83%高于兩者單項(xiàng)檢查，可見(jiàn)HR-HPV聯(lián)合TCT可顯著提高診斷準(zhǔn)確率、敏感度。本研究還顯示，兩者聯(lián)合診斷特異度與單項(xiàng)檢查無(wú)差異，提示HR-HPV聯(lián)合TCT不影響診斷特異度。

此外，本研究通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者HR-HPV、TCT 陽(yáng)性率高于CINⅢ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅠ級(jí)患者，說(shuō)明HR-HPV 與TCT 能有效鑒別宮頸癌與癌前病變，能進(jìn)一步為臨床診治提供可靠信息。但本研究數(shù)據(jù)還表明，不同CIN 分級(jí)患者HR-HPV、TCT 陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能受本研究樣本量限制干擾，今后需擴(kuò)大樣本量做進(jìn)一步分析與探討，以更加明確HR-HPV 與TCT 在不同CIN 分級(jí)中的檢測(cè)價(jià)值。

綜上可知，HR-HPV 聯(lián)合TCT 應(yīng)用于宮頸癌及癌前病變患者中診斷價(jià)值較高，有助于為臨床提供參考依據(jù)，且能有效鑒別宮頸癌與癌前病變，值得臨床推廣。