葉酸代謝障礙風(fēng)險(xiǎn)人群葉酸干預(yù)效果評估

胡允棟 孟慶紅

(1 山東省鄆城縣婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心 山東 菏澤 274700 2 山東省鄆城縣第二人民醫(yī)院 山東 菏澤 274700)

前言

葉酸又被稱為維生素B9，屬于水溶性維生素之一。1992年中美預(yù)防神經(jīng)管畸形合作項(xiàng)目啟動，在研究中追蹤了25萬例新婚婦女以及妊娠解決之后發(fā)現(xiàn)，準(zhǔn)媽媽在備孕時(shí)期就堅(jiān)持服用0.4毫克的葉酸，對于神經(jīng)管畸形高發(fā)區(qū)具有80%之上的預(yù)防概率，在神經(jīng)管畸形低發(fā)區(qū)當(dāng)中的預(yù)防概率也有41%，該科技成果也被全球各個(gè)國家廣泛應(yīng)用[1]。在孕婦妊娠期間如果葉酸攝入缺少將會導(dǎo)致胎兒出現(xiàn)神經(jīng)管急性等等出生缺陷情況，因此，葉酸被產(chǎn)婦有效利用極為重要。本文正是基于此，主要選擇了2017年1月至2019年7月期間在我院進(jìn)行產(chǎn)檢的209例葉酸代謝障礙風(fēng)險(xiǎn)孕婦為研究對象，對葉酸代謝障礙風(fēng)險(xiǎn)人群葉酸干預(yù)效果進(jìn)行評估和分析，具體的研究情況報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

本研究重點(diǎn)分析了2017年1月至2019年7月期間在我院進(jìn)行產(chǎn)檢的209例葉酸代謝障礙風(fēng)險(xiǎn)孕婦，將不依據(jù)醫(yī)囑補(bǔ)服葉酸的105例孕婦為對照組，將依據(jù)醫(yī)囑補(bǔ)服葉酸的104例孕婦為觀察組。對照組中產(chǎn)婦的年齡范圍在20歲至32歲間，平均年齡值為(26.92± 4.55)歲，觀察組中產(chǎn)婦的年齡范圍在21歲至35歲間，平均年齡值為(27.83± 4.21)歲，對照組和觀察組中的所有產(chǎn)婦一般資料經(jīng)過軟件分析后沒有意義，可以進(jìn)行后續(xù)分析。

1.2方法

(1)在孕婦整個(gè)孕期當(dāng)中均對所有產(chǎn)婦進(jìn)行常規(guī)性的孕期營養(yǎng)知識宣教，在日常的飲食當(dāng)中增加產(chǎn)婦的葉酸攝入量。對照組中產(chǎn)婦未依據(jù)醫(yī)囑補(bǔ)服葉酸，觀察組當(dāng)中產(chǎn)婦依據(jù)醫(yī)囑進(jìn)行葉酸補(bǔ)服，具體的服用方式為：1、葉酸代謝障礙檢測低度風(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)婦：在孕前3個(gè)月至整個(gè)孕期全程每天增加服用葉酸800μg。2、葉酸代謝障礙檢測后呈中度和高度風(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)婦：在產(chǎn)婦孕前3個(gè)月至整個(gè)孕期每天增補(bǔ)800μg 葉酸，每天補(bǔ)充2.4μg 的維生素B12。

(2)兩個(gè)組別產(chǎn)婦均采取血液樣本。使用柱式質(zhì)粒DNA小量抽試劑盒對樣本DNA進(jìn)行提取。使用熒光定量PCR方式對相關(guān)基因多態(tài)性進(jìn)行檢測，詳細(xì)操作如下：1)儀器與試劑：柱式抽提試劑盒(美國ABI公司；)，Taqman Universal Master Mix(美國ABI公司)，同型半胱氨酸監(jiān)測試劑試劑盒(久強(qiáng)公司)，熒光定量RCR儀(美國ABI公司)，低溫離心機(jī)Beckman J-6B(美國貝克曼庫爾特有限公司)，PCR擴(kuò)增儀(美國ABI公司)，TBA-120FR全自動生化分析儀(日本東芝)，2)方法：首先，提取細(xì)胞DNA：取口腔黏膜上皮細(xì)胞，取無菌棉簽實(shí)施反復(fù)刮取，隨后，使用柱式抽提試劑盒，提取樣本DNA。其次，PCR反應(yīng)體系：1uLDNA模板，5uL的Taqman Universal Master Mix，0.5ul的Taqman -MGB探針，3.5uL 去離子水。3)PCR反應(yīng)條件：實(shí)施預(yù)變性，溫度為95℃，持續(xù)10分鐘；實(shí)施變性，溫度92℃，持續(xù)1s。退火延伸，溫度為60℃，持續(xù)1分鐘，共循環(huán)20次。隨后，在89℃下實(shí)施變性，持續(xù)15s，在60℃環(huán)境下，退火延伸，持續(xù)90s，共循環(huán)30次。其三，使用熒光定量PCR反應(yīng)三個(gè)位點(diǎn)，應(yīng)用Taqman_MGB探針，在反應(yīng)結(jié)束后，由ABI7900型熒光定量PCR儀中對樣品孔終點(diǎn)熒光進(jìn)行讀取，使用分析軟件，對樣本中基因分型的結(jié)果進(jìn)行確定。

1.3觀察指標(biāo)

對比兩組別產(chǎn)婦妊娠解決，在臨床當(dāng)觀眾對產(chǎn)婦產(chǎn)房以及產(chǎn)后45天妊娠解決進(jìn)行追蹤。具體主要有新生兒體重、分娩方式以及妊娠合并癥等指標(biāo)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1兩組新生兒情況分析

對照組中新生兒體重、新生兒體重異常概率、胎兒心臟結(jié)構(gòu)異常發(fā)生率高于觀察組，組別之間數(shù)據(jù)對比存在意義(P<0.05)，具體數(shù)據(jù)如下表1。

表1 兩組新生兒情況對比

2.2兩組孕婦分娩方式分析

對照組中剖宮產(chǎn)率顯著高于觀察組，產(chǎn)婦的順產(chǎn)概率則低于觀察組，組別之間數(shù)據(jù)對比存在意義(P<0.05)，具體數(shù)據(jù)如下表2。

表2 兩組別孕婦分娩方式對比[例(%)]

2.3 兩組妊娠合并癥比較分析

對照組妊娠合并癥出現(xiàn)概率顯著高于觀察組，組別之間數(shù)據(jù)對比存在意義(P<0.05)，具體數(shù)據(jù)如下表3。

表3 兩組別妊娠合并癥比較對比[例(%)]

2.4 妊娠合并癥與未發(fā)妊娠合并癥的基因多態(tài)性分析

妊娠合并癥組C/T高于未合并妊娠合并癥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；兩組C/C、C、T、T/C頻率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 亞甲基四氫葉酸還原酶基因C677T頻率比較[n(%)]

妊娠合并癥組A/G高于未合并妊娠合并癥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；兩組A/A、A、G、G/G頻率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

表5 甲硫氨酸合成酶還原酶基因A66G頻率比較[n(%)]

3 討論

3.1 葉酸代謝障礙風(fēng)險(xiǎn)人群的葉酸干預(yù)應(yīng)用效果

眾所周知，新生兒體重是胎兒后續(xù)生長和發(fā)育過程當(dāng)中的一大重要標(biāo)志，其不僅僅胎兒在其胎兒期的生長以及營養(yǎng)狀況進(jìn)行反映，同時(shí)也是能夠?qū)μ撼錾蟮纳L發(fā)育和健康狀況進(jìn)行決定[2]。產(chǎn)婦的妊娠期間營養(yǎng)攝入過多或者過少都會對妊娠解決造成一定的影響，造成低體重以及巨大兒的出生概率[3]。對患者進(jìn)行必要的檢測能夠?qū)υ袐D情況進(jìn)行了解，進(jìn)而對其采取必要的措施進(jìn)行干預(yù)。在本文的研究當(dāng)中發(fā)現(xiàn)，所選擇的209例產(chǎn)婦同樣屬于葉酸代謝障礙風(fēng)險(xiǎn)的孕婦群體，但是因?yàn)楹罄m(xù)葉酸干預(yù)情況的不同，產(chǎn)婦的妊娠結(jié)局也存在一定的差異，在觀察組別當(dāng)中產(chǎn)婦的新生兒體重異常出現(xiàn)概率顯著低于對照組中產(chǎn)婦。依據(jù)以往研究發(fā)現(xiàn)，新生兒體重與產(chǎn)婦體內(nèi)葉酸水平趨勢呈正相關(guān)，產(chǎn)婦孕早期期間葉酸水平過低將會大大增加低體重新生兒的發(fā)生概率。在本次以研究當(dāng)中還發(fā)現(xiàn)，葉酸代謝風(fēng)險(xiǎn)人群當(dāng)中產(chǎn)婦的妊娠結(jié)局母語并發(fā)癥和其葉酸干預(yù)情況也所有關(guān)系，具體主要表現(xiàn)在妊娠合并高血壓、早產(chǎn)、妊娠合并糖尿病、妊娠合并肝內(nèi)膽汁淤積綜合癥等等。

3.2 妊娠合并癥與葉酸代謝相關(guān)酶基因多態(tài)性分析

葉酸在食物中分布很廣，它經(jīng)過腸道吸收后，在腸壁、肝臟及骨髓等組織，經(jīng)葉酸還原酶作用，還原成具有生理活性的四氫葉酸，后者作為細(xì)胞內(nèi)一碳單位的載體，參與嘌呤和嘧啶合成，并為DNA、蛋白質(zhì)的甲基化提供甲基，所示四氫葉酸甲基載體之一的5-甲基四氫葉酸由5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)催化生成，是血液和細(xì)胞中存在的主要葉酸類型。5-甲基四氫葉酸參與的唯一已知反應(yīng)是作為甲基供體，在甲硫氨酸合成酶催化下，以維生素B12為輔酶，促進(jìn)血液中同型半胱氨酸再次甲基化生成甲硫氨酸(蛋氨酸)，以維持正常的血漿同型半胱氨酸水平。隨后，甲硫氨酸被ATP 磷酸化生成S-腺苷甲硫氨酸。S-腺苷甲硫氨酸參與機(jī)體內(nèi)的生物大分子(包括DNA、蛋白質(zhì)、脂類等)的甲基化，生成S-腺苷同型半胱氨酸。S-腺苷同型半胱氨酸再重新生成同型半胱氨酸，完成同型半胱氨酸代謝循環(huán)。因此，MTHFR 催化生成5-甲基四氫葉酸這步酶促反應(yīng)至關(guān)重要，是葉酸代謝通路中的限速步驟。5-甲基四氫葉酸的存在是同型半胱氨酸向甲硫氨酸轉(zhuǎn)變的必要條件，也是甲基傳遞的重要載體。在葉酸攝入量不變的情況下，5-甲基四氫葉酸的量受MTHFR 的控制，即MTHFR 酶活性高時(shí)5-甲基四氫葉酸的產(chǎn)量高，MTHFR 酶活性低時(shí)5-甲基四氫葉酸的產(chǎn)量低。足量的5-甲基四氫葉酸是維持血液中同型半胱氨酸水平的重要因素，也是確保體內(nèi)甲基化程度正常的保證。

研究指出，在妊娠合并癥患者的發(fā)病過程中，伴隨不同程度同型半胱氨酸水平升高現(xiàn)象，在半胱氨酸的代謝中，同型半胱氨酸與蛋白質(zhì)合成不具有明顯關(guān)系，同型半胱氨酸利用誘導(dǎo)細(xì)胞，在細(xì)胞分裂期快速進(jìn)入，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖；與此同時(shí)，在低密度脂蛋白的氧化過程中不斷加速，同型半胱氨酸有助于血小板聚集，對血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生損傷，使得機(jī)體中對于妊娠期高血壓疾病疾病抵抗能力降低。同型半胱氨酸的再甲基化中，5-甲基四氫葉酸能夠合成蛋氨酸、氫葉酸，在此過程中，需要亞甲基四氫葉酸還原酶作用。亞甲基四氫葉酸還原酶基因C677T點(diǎn)突變?yōu)榕R床常見錯(cuò)義突變，可使得丙氨酸被纈氨酸所取代，使得亞甲基四氫葉酸還原酶基氨基酸結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，最終對亞甲基四氫葉酸還原酶活性產(chǎn)生影響。

綜上所述，孕婦進(jìn)行葉酸干預(yù)行為將會對新生兒出生體重造成影響，孕婦的妊娠結(jié)局也會存在一定的差異。