血清胃泌素前體釋放肽在慢性腎臟病中的臨床意義與診斷價(jià)值

趙傳燕, 劉昌華, 畢光宇, 陳 蕊, 高 波, 伍 剛,周 剛, 徐 軍, 牟洪賓

(江蘇省蘇北人民醫(yī)院 腎內(nèi)科, 江蘇 揚(yáng)州, 225001)

胃泌素釋放肽(GRP)是一種含27個(gè)氨基酸的生物活性肽，可促進(jìn)胃泌素的釋放，主要存在于人的神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道和呼吸道中[1]。但GRP在血清中不穩(wěn)定(半衰期約為 2 min)，所以很難檢測(cè)。血清胃泌素前體釋放肽(proGRP)是GRP的前體，相較于GRP更穩(wěn)定，是一種生物活性蛋白，可刺激腫瘤細(xì)胞增殖，目前已被廣泛應(yīng)用于小細(xì)胞肺癌的臨床評(píng)估和檢測(cè)中[2]。相關(guān)研究[3]發(fā)現(xiàn)腎衰竭患者的血清proGRP水平升高，但少有研究指出血清proGRP與腎臟病相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性。本研究探討慢性腎臟病(CKD)患者的血清proGRP表達(dá)水平及其與腎臟病檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性，并分析不同透析方式對(duì)血清proGRP水平的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2019年1—3月在江蘇省蘇北人民醫(yī)院腎內(nèi)科住院的259例CKD患者作為研究對(duì)象。根據(jù)改善全球腎臟病預(yù)后組織(KDIGO)指南，采用慢性腎臟病流行病學(xué)合作研究(CKD-EPI)公式計(jì)算估算腎小球?yàn)V過率(eGFR)。按照eGFR將未接受透析治療的167例CKD患者分為 5組，其中CKD1期組(eGFR≥90 mL/min)17例、CKD2期組(eGFR為60～<90 mL/min)25例、CKD3期組(eGFR為30～<60 mL/min)37例、CKD4期組(eGFR為15～<30 mL/min)21例、CKD5期組(GFR<15 mL/min)67例; 按照透析方式將接受透析治療的92例CKD患者(均為CKD5期)分為血液透析組55例、腹膜透析組37例。另選取31名健康成人體檢者納入對(duì)照組。排除標(biāo)準(zhǔn): 可能影響血清proGRP水平的惡性腫瘤(如卵巢癌、肺癌和胃腸道癌)患者，合并水腫、胸腔積液、腹水或嚴(yán)重心臟功能不全、嚴(yán)重營養(yǎng)不良的患者。本研究經(jīng)江蘇省蘇北人民醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 方法

使用普通真空采血管采集所有受試者清晨空腹靜脈血3 mL, 3 000 轉(zhuǎn)/min離心10 min, 分離血清收集于-20 ℃凍存待測(cè)。記錄并比較各組受試者性別、年齡和血清肌酐(SCr)、proGRP、尿酸、胱抑素C、白蛋白、β2微球蛋白、血紅蛋白指標(biāo)水平。proGRP采用雅培i2000化學(xué)發(fā)光儀檢測(cè), SCr采用貝克曼AU480生化分析儀檢測(cè)，試劑為各儀器配套試劑及質(zhì)控品。依據(jù)CKD-EPI公式計(jì)算eGFR: eGFR=141×min[SCr(mg/dL)/k或1)]α×max[SCr(mg/dL)/k或1]-1.209×0.993年齡× 1.018(女性)，其中k為0.7(女性)或0.9(男性),α為-0.329(女性)或-0.411(男性), min指取SCr/k或1中的最小值, max指取SCr/k或1中的最大值[4]。

一是企業(yè)污染物排放監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)作假。根據(jù)環(huán)境保護(hù)部督查組的反饋，2017年1月以來，很多地方的企業(yè)環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)造假，有的通過監(jiān)測(cè)軟件造假，有的通過檢測(cè)設(shè)備造假，有的采取檢測(cè)方式作假。由于基層環(huán)境保護(hù)部門監(jiān)管的專業(yè)性不強(qiáng)，在現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)不了問題，所以2017年初企業(yè)數(shù)據(jù)作假的現(xiàn)象反彈。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料呈偏態(tài)分布用[M(P25,P75)]表示，組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)(Kruskal-Wallis單因素ANOVA分析)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析, 2組間比較采用兩樣本 Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般資料和血清proGRP、腎臟病標(biāo)志物水平比較

血清proGRP是近年來用于輔助診斷小細(xì)胞肺癌(SCLC)的生物學(xué)標(biāo)志物，也被用于判斷SCLC的療效和預(yù)后[5-6]。相關(guān)報(bào)道[7]稱, 84.56%腎衰竭患者的proGRP水平高于正常參考值。DAI Z等[8]發(fā)現(xiàn)，腎功能不全的SCLC患者的血清proGRP水平高于腎功能正常的SCLC患者或單純CKD患者；進(jìn)一步分析不同腎病組后發(fā)現(xiàn)，CKD組血清proGRP水平顯著升高，而腎實(shí)質(zhì)未受損的其他腎臟疾病組則未升高，說明血清proGRP水平升高與腎功能受損有關(guān)，且隨著Scr的升高和eGFR的下降, proGRP呈升高趨勢(shì)。

表1 各組一般資料和血清proGRP、腎臟病標(biāo)志物水平比較[M(P25, P75)][n(%)]

2.2 血清proGRP與腎臟病標(biāo)志物水平相關(guān)性分析

ROC曲線顯示，血清proGRP預(yù)測(cè)CKD患者eGFR<60 mL/min發(fā)生(進(jìn)展到CKD3期)的曲線下面積(AUC)為0.945, 當(dāng)血清proGRP最佳截?cái)嘀禐?7.20 pg/mL時(shí)，靈敏度為84.1%, 特異度為100.0%, 見圖1。

表2 血清proGRP與腎臟病標(biāo)志物水平的相關(guān)性分析

2.3 血清proGRP預(yù)測(cè)CKD患者eGFR<60 mL/min發(fā)生的ROC曲線

Spearman相關(guān)分析顯示，血清proGRP與SCr(r=0.910)、尿素氮(r=0.881)、尿酸(r=0.641)、胱抑素C(r=0.919)、血β2微球蛋白(r=0.855)均呈顯著正相關(guān)(P<0.01), 與eGFR(r=-0.917)、血清白蛋白(r=-0.297)和血紅蛋白(r=-0.623)均呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)。見表2。

圖1 血清proGRP預(yù)測(cè)CKD患者eGFR<60 mL/min發(fā)生的ROC曲線

2.4 血液透析組與腹膜透析組年齡、Scr、proGRP比較

腹膜透析組患者年齡小于血液透析組, Scr水平高于血液透析組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 2組患者血清proGRP水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.671)。見表3。

水性丙烯酸酯防水涂料具有優(yōu)良的防水、耐久、耐熱和耐腐蝕性。這種涂料產(chǎn)生的涂膜延性、彈性均優(yōu)于其他防水涂料，并且能夠適應(yīng)涂料基層的變形開裂。而且其溫度適應(yīng)性強(qiáng)，并且可以調(diào)制成各種色彩，使其具有隔熱和裝飾效果[4]。這類涂料主要應(yīng)用于各類建筑中的防水工程，如鋼筋混凝土、輕骨料混凝土、瀝青和油氈、金屬表面、外墻、衛(wèi)生間、地下室、冷庫等，也可用作防水層的維修等。

表3 血液透析與腹膜透析患者比較[M(P25, P75)]

3 討 論

CKD3期組、CKD4期組、CKD5期組血清proGRP、SCr、尿素氮、尿酸、胱抑素C和β2微球蛋白水平均高于對(duì)照組, eGFR、白蛋白和血紅蛋白水平均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); CKD4期組、CKD5期組血清proGRP、SCr、尿素氮、胱抑素C和β2微球蛋白水平均高于CKD3期組, eGFR、白蛋白和血紅蛋白水平均低于CKD3期組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); CKD5期組血清proGRP、SCr、尿素氮、胱抑素C和β2微球蛋白水平均高于CKD4期組, eGFR、血紅蛋白水平均低于CKD4期組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

每次飼喂時(shí)以羊自動(dòng)停止采食，槽內(nèi)有少許剩料為原則，水桶每天早晚2次換水，保證充足飲水，連續(xù)每天記錄每日采食行為、采食量及采食時(shí)間。

DUMESNY C等[9]研究表明，健康成人腎中特別是亨利氏環(huán)的升支細(xì)胞中可檢測(cè)出GRP mRNA。與其他激素(如血管加壓素、胰高血糖素和降鈣素)一樣，GRP作為胃腸道肽，可通過從腎小管中的受體重新吸收腎小管中的Na+-K+-2Cl-共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白來介導(dǎo)電解質(zhì)平衡。腎小管重吸收受損并導(dǎo)致體內(nèi)電解質(zhì)失衡時(shí)，會(huì)刺激胃腸道肽，使血液中proGRP水平升高。腎臟是分泌proGRP的主要器官, proGRP可自由通過腎小球基底膜[10]。因此，在腎損傷早期，血清proGRP水平主要受電解質(zhì)失衡和胃腸道分泌物的影響。當(dāng)腎衰竭進(jìn)展至中晚期時(shí)，腎小球基底膜受到嚴(yán)重破壞，proGRP無法穿過內(nèi)皮細(xì)胞和腎臟基底膜，導(dǎo)致腎小球?qū)roGRP通透性下降而使其積累于血液循環(huán)，故血清proGRP濃度上升[11]。隨著腎小球基底膜損傷嚴(yán)重程度的增加，血清proGRP水平逐漸升高。CKD患者血清proGRP水平升高的主要原因可能與排泄障礙及代謝紊亂有關(guān)[12]。腎功能不全時(shí)，腎臟的自主分泌也可能導(dǎo)致proGRP水平升高[3]。

“完成黨的十九大提出的目標(biāo)任務(wù)，必須充分發(fā)揮工人階級(jí)主力軍作用。”10月29日，習(xí)近平總書記在同中華全國總工會(huì)新一屆領(lǐng)導(dǎo)班子成員集體談話并發(fā)表重要講話時(shí)指出，我國廣大職工要牢牢把握為實(shí)現(xiàn)中國夢(mèng)而奮斗的時(shí)代主題，把自身前途命運(yùn)同國家和民族前途命運(yùn)緊緊聯(lián)系在一起，把個(gè)人夢(mèng)同中國夢(mèng)緊密聯(lián)系在一起，把實(shí)現(xiàn)黨和國家確立的發(fā)展目標(biāo)變成自己的自覺行動(dòng)，愛崗敬業(yè)、爭創(chuàng)一流，以不懈奮斗書寫新時(shí)代華章，共同創(chuàng)造幸福生活和美好未來。

相關(guān)研究[13]顯示, CKD患者伴有一些生物學(xué)指標(biāo)的改變。本研究發(fā)現(xiàn)，血清proGRP與尿素氮、尿酸、胱抑素C、血β2微球蛋白呈顯著正相關(guān)，與血清白蛋白、血紅蛋白呈顯著負(fù)相關(guān)，這可能是由于CKD患者出現(xiàn)蛋白質(zhì)丟失，肝臟等代償性合成某些蛋白質(zhì)而影響血清proGRP水平, CKD患者存在腎性貧血，血清proGRP升高伴隨腎功能的減退，與UELAND T等[14]研究結(jié)論相符。本研究還發(fā)現(xiàn)，當(dāng)血清proGRP最佳截?cái)嘀禐?7.20 pg/mL時(shí)，預(yù)測(cè)患者進(jìn)展到CKD3期的靈敏度為84.1%, 特異度為100.0%。相關(guān)研究[15]發(fā)現(xiàn)，當(dāng)proGRP最佳截?cái)嘀禐?90.91 pg/mL時(shí)，其鑒別SCLC與CKD5期的特異度達(dá)98.4%, 臨床上可據(jù)此進(jìn)行鑒別診斷。

CKD5期進(jìn)展至腎臟替代治療階段，血液透析對(duì)小分子尿毒癥毒素的清除作用更強(qiáng)，但對(duì)中大分子毒素的清除作用不及腹膜透析[16], 有研究[17]發(fā)現(xiàn)患者進(jìn)行血液透析后，血清proGRP水平顯著下降，說明血液透析能清除部分proGRP。相關(guān)研究[18-19]指出, proGRP除與SCLC有關(guān)，還在其他腫瘤(如胃癌、甲狀腺癌、骨腫瘤等)患者以及心力衰竭患者中表達(dá)升高，甚至在炎癥狀態(tài)下表達(dá)水平也升高。本研究存在一定局限性: 首先，本研究樣本量較小，且未明確尿量是否影響血清proGRP水平; 其次，本研究為橫斷面研究, proGRP通過腎小管中的受體介導(dǎo)電解質(zhì)平衡的機(jī)制需要進(jìn)一步研究; 最后，本研究未統(tǒng)計(jì)SCLC患者的proGRP水平。

綜上所述, CKD患者的血清proGRP水平相較于健康人群有所升高，且隨著CKD分期的增加而逐漸升高，故血清proGRP水平可用于評(píng)估CKD病情的嚴(yán)重程度。血清proGRP與血清肌酐、尿素氮、尿酸、胱抑素C和血β2微球蛋白呈正相關(guān)，與eGFR、血清白蛋白和血紅蛋白呈負(fù)相關(guān)。若采用血清proGRP輔助診斷SCLC, 臨床應(yīng)同時(shí)檢測(cè)患者腎功能，以分辨是否為CKD引起的血清proGRP水平升高。