大刺鰍人工催產(chǎn)繁育研究

譚冬初，盧宙民，覃掌智，劉慶山，徐華建，張 健，何能鎮(zhèn)，簡(jiǎn) 泳，王 鑫，丁 瑤，何興恒，譚德清

（1.武漢中科瑞華生態(tài)科技股份有限公司，武漢 430061；2.來(lái)賓市興賓區(qū)水產(chǎn)技術(shù)推廣站，廣西來(lái)賓 546119；3.廣西廣投橋鞏能源發(fā)展有限公司，廣西來(lái)賓 546119）

大刺鰍（Mastacembelus armatus）隸屬于鱸形目（Perciformes）刺鰍科（Mastacembelidae）刺鰍屬（Mas?tacembelusScopoli），俗稱納錐、辣錐、石錐、豬姆鋸等，主要分布于珠江水系中下游各小支流的上游，此外還在云南、貴州等地有分布［1］。其喜好在有水草的深潭石縫處，或有石塊的江河底層棲息［2］。大刺鰍肉鮮味美，無(wú)肌間刺，且營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，深受消費(fèi)者喜愛(ài)［3］。在廣西、廣東等地市場(chǎng)價(jià)140～160 元/kg。由于河道非法采砂、開挖，電站的修建，漁民的濫捕以及河道環(huán)境污染等因素的影響，大刺鰍野生種群資源日益枯竭。于2020 年在橋鞏水電站對(duì)大刺鰍人工催產(chǎn)，研究人工繁殖大刺鰍。

1 材料與方法

1.1 親魚來(lái)源

試驗(yàn)用親魚全部來(lái)自于珠江水系的紅水河及其支流，主要在廣西來(lái)賓橋鞏河段采集，親本捕撈方式為地籠和鉤釣。親本體質(zhì)健壯，生命力強(qiáng)，體肥無(wú)傷，雄魚體重0.2～0.3 kg，雌魚體重0.1～0.2 kg。

1.2 親魚運(yùn)輸

從漁民魚販處購(gòu)買的大刺鰍親魚采用氧氣袋打包形式運(yùn)輸至遷江鎮(zhèn)橋鞏魚類增殖站，打包前，若有條件可在運(yùn)輸水體中加入冰塊以降低水溫，減弱大刺鰍活動(dòng)，減緩大刺鰍應(yīng)激反應(yīng)。

1.3 親魚馴化

在橋鞏魚類增殖站，野生親魚進(jìn)場(chǎng)時(shí)，用10%聚維酮碘0.2 mg/L 溶液浸泡1 min 消毒后，放到室內(nèi)池暫養(yǎng)2 d，親魚基本穩(wěn)定再轉(zhuǎn)入室外池培育。參考文獻(xiàn)［4］，實(shí)際放養(yǎng)密度為每公頃4 500 尾左右，搭配適量鰱、鳙調(diào)節(jié)水質(zhì)。參考張建銘等［5］研究，在親魚池四周或者四角種植水葫蘆等水生植物，以利于大刺鰍親魚隱匿遮蔽，攝食和調(diào)節(jié)水質(zhì)。每天上午8：00 和下午18：00 適當(dāng)投喂海水冰凍魚（切成小段）或甲魚料加誘食劑調(diào)成團(tuán)狀，擰成小條投喂，投喂量為魚體體重的10%左右［4］；同時(shí)每次投喂時(shí)加以聲音刺激，鍛煉親魚條件反射，經(jīng)過(guò)1 個(gè)月的馴化，野生大刺鰍親魚已全部馴化完成。

1.4 親魚選擇

參考曾慶祥等［6］對(duì)大刺鰍生物學(xué)特性的研究，大刺鰍雌雄分辨方法為：雄魚個(gè)頭大、生殖孔平且微呈粉紅色，輕壓腹部有白色液體流出；雌魚個(gè)頭小，腹部膨大，卵巢輪廓明顯，泄殖孔紅腫并凸起。雌魚選擇腹部膨大、卵巢輪廓明顯、手摸腹部有彈性、泄殖孔紅腫的個(gè)體。走訪魚販、漁民處，通過(guò)觀察及請(qǐng)教有經(jīng)驗(yàn)漁民，大刺鰍雄魚頭部較雌魚尖銳，體型也較大，雄魚生殖孔微凹且大多不呈粉紅色，生殖孔邊緣有一白圈。

1.5 催產(chǎn)藥物、注射及地點(diǎn)

本試驗(yàn)在橋鞏水電站魚類增殖放流站進(jìn)行，水溫24～29 ℃，2 針注射。第一針LRH-A2的用量為1~3 μg/kg，生理鹽水1～2 mL/kg，雄魚不注射；第二針采用混合催產(chǎn)劑，其中LRH-A2的用量為10～15 μg/kg，DOM 的用量為5～10 mg/kg，HCG 的用量為600～1 200 IU/kg，生理鹽水1～2 mL/kg，雄魚劑量是雌魚的一半，兩針間隔10～12 h。

1.6 人工催產(chǎn)

注射催產(chǎn)藥劑后，將親魚放入催產(chǎn)池中，開啟閥門進(jìn)行沖水，刺激親魚性腺進(jìn)一步發(fā)育。水溫24～29 ℃時(shí)，效應(yīng)時(shí)間為37～42 h。在第二針注射34 h后，每隔1 h 檢查1 次，當(dāng)用手輕按雌魚腹部，有卵粒順利從泄殖孔排出時(shí)，方可進(jìn)行人工授精。

1.7 人工授精

采用干法授精，先把準(zhǔn)備好的雄魚、雌魚分開，分別放在裝有水的收納箱里（水深20 cm），先把雄魚取出用干毛巾抹干體表水分，輕按腹部，精液流出時(shí)用2 mL 吸管吸入精液，然后擠入小量杯中，加入0.9%生理鹽水和10%葡萄糖溶液各10 mL，輕輕搖晃均勻，備用。再用干毛巾抹干雌魚體表的水分，用手按住雌魚腹部從上而下擠卵，使魚卵順利排出、排空，魚卵用搪瓷盆或白瓷碗接住，同時(shí)倒入精液，并輕輕晃動(dòng)搪瓷盆或用羽毛輕輕攪動(dòng)魚卵，加入適量清水激活精子，用羽毛攪拌均勻，靜置2～3 min，使魚卵充分授精；再用清水漂洗受精卵3～4 次，放入孵化框中采用淋水孵化（孵化密度為8 000~10 000粒/㎡），大刺鰍受精卵為黃色，是沉性卵，并且具有黏性。

1.8 胚胎發(fā)育觀察

每天上午、下午使用3%～5%食鹽水將受精卵浸泡10 min消毒，并清除死卵。原腸中期以前，每1 h隨機(jī)撈取10～20 粒受精卵，觀察其中受精卵胚胎發(fā)育情況；到達(dá)原腸中期后每0.5 h 隨機(jī)撈取10～20 粒授精卵，觀察其中受精卵胚胎發(fā)育情況。

1.9 魚苗培育

1.9.1 魚苗培育操作技術(shù) 受精卵在水溫24～29 ℃時(shí)孵化，一般經(jīng)過(guò)72～78 h 孵化后仔魚才出膜，仔魚通體黃色，卵黃囊大，體質(zhì)較弱，活動(dòng)能力差，常側(cè)臥池底，5～7 d 后卵黃囊才消失。當(dāng)仔魚平游80%后開始投喂開口餌料，開口餌料為人工孵化的豐年蟲和微粒子魚苗開口專用飼料。根據(jù)仔魚的攝食情況來(lái)增加投喂量，投喂次數(shù)為4～6 次/d，每天投喂前清理殘餌和糞便。

仔魚平游1 周后，體長(zhǎng)10～12 mm，體色由黃色逐步變?yōu)楹谏?，從孵化框中轉(zhuǎn)到室外水泥池（7 m×3 m×1 m 的長(zhǎng)方形魚池）中喂養(yǎng)，提前1 周用30 mg/L高錳酸鉀全池潑灑消毒，毒性消失后開始肥水，進(jìn)行浮游生物培育。仔魚下塘?xí)r選擇晴天上午，并調(diào)節(jié)水溫，溫差不超過(guò)2 ℃為佳。采用微流水養(yǎng)殖，魚池長(zhǎng)方形，一頭為進(jìn)水口，另外一頭為排水口，并用60目篩網(wǎng)在排水口處做好防逃，水深0.8 m 左右。放養(yǎng)密度為500～700 尾/m2，池底放置少量的鵝卵石和長(zhǎng)度40 cm、直徑75 mm 的PVC 管若干根，方便仔魚白天游進(jìn)去避光。水泥池的溶氧6~8 mg/L，pH 6.7~7.9。

隨著魚苗的長(zhǎng)大，魚苗除了攝食輪蟲、枝角類等小型浮游生物外，還投喂紅蟲（水蚯蚓）、蠅蛆和蛋白質(zhì)較高的人工配合飼料如微粒子配合飼料（蛋白質(zhì)含量大于50%）。投喂半個(gè)月后可搭建食臺(tái)，食臺(tái)沉入池里，離水面30 cm 為宜?？梢酝段辜佐~料（蛋白質(zhì)含量大于40%），甲魚料中加入誘食劑，加少量水將甲魚料調(diào)成團(tuán)狀，然后搓成細(xì)條狀投喂。日投餌量為仔魚體重的4%～6%，投喂次數(shù)為3～5 次/d，每天投喂前清理食臺(tái)上的殘餌和糞便。

1.9.2 魚病防治 大刺鰍苗種培育期間主要病蟲害有以下幾種，橋鞏增殖放流站技術(shù)人員通過(guò)多年養(yǎng)殖經(jīng)驗(yàn)總結(jié)出大刺鰍苗種疾病防治技術(shù)。

1）車輪蟲用車輪蟲必克0.3～0.5 mg/L 或用40%甲醇溶液30～35 mg/m3全池潑灑。

2）細(xì)菌性爛尾病主要病原為柱狀黃桿菌或嗜水氣單胞菌，初期用10%聚維酮碘0.8～1.5 mg/m3全池潑灑，隔天1 次，連用2～3 次；嚴(yán)重時(shí)用高錳酸鉀0.5~0.8 mg/L+鹽酸土霉素5～6/mg/L+乙酰甲喹3 mg/L 連續(xù)藥浴2～3 d；病癥消失后使用含氯劑消毒2～3 d，并在飼料中加10%氟苯尼考2～3 mg/L 投喂治療，連續(xù)2～4 d，病癥慢慢好轉(zhuǎn)。

3）腸炎病先用二氧化氯或聚維酮碘消毒2～3次后，在餌料中添加氟苯尼考、土霉素或大蒜素等，連續(xù)投喂5～7 d［7］，病情逐漸好轉(zhuǎn)，實(shí)際使用中大蒜素較為常用，效果較好。

2 結(jié)果與分析

2020 年廣西橋鞏水電站魚類增殖放流站先后共進(jìn)行4 批次大刺鰍催產(chǎn)試驗(yàn)，人工催產(chǎn)繁殖結(jié)果如表1、表2、表3 所示。

2.1 人工催產(chǎn)情況

2020 年4—7 月，廣西橋鞏魚類增殖放流站工作人員采用LRH-A2、DOM 和HCG 3 種催產(chǎn)劑混合配伍方式進(jìn)行4 批次大刺鰍人工催產(chǎn)試驗(yàn)。全部采用2 針注射法，均獲得成功。從表1 和表3 可以看出，水溫在24～29 ℃時(shí)，大刺鰍催產(chǎn)效應(yīng)時(shí)間為37～42 h，水溫每升高1 ℃，效應(yīng)時(shí)間縮短1～2 h。結(jié)合表2 和表3 的 催產(chǎn) 孵 化情 況，20 μg/kg LRH-A2+5 mg/kg DOM+1 000 IU/kg 的HCG 催產(chǎn)劑配伍方式效果最好，適用于大刺鰍的人工催產(chǎn)。

表1 大刺鰍催產(chǎn)記錄

表2 大刺鰍催產(chǎn)試驗(yàn)催產(chǎn)劑配伍情況

2.2 人工孵化情況

大刺鰍受精卵直徑約2 mm。從表3 可以看出，水溫在24～29 ℃時(shí)，大刺鰍受精卵的出膜時(shí)間為72~78 h，4 批次試驗(yàn)平均催產(chǎn)率78.1%，平均受精率67.1%，平均孵化率63.7%。第3 批試驗(yàn)孵化效果最好，即大刺鰍孵化水溫在26～28 ℃孵化效果最好。結(jié)合大刺鰍親魚成熟度觀察情況以及成熟親魚數(shù)量，認(rèn)為在紅水河來(lái)賓江段大刺鰍繁殖的高峰期應(yīng)該在6 月。

表3 大刺鰍人工催產(chǎn)孵化情況

2.3 魚苗培育

大刺鰍出膜的仔魚體長(zhǎng)3～4 mm，身體黃色，經(jīng)過(guò)約1 周內(nèi)源營(yíng)養(yǎng)期和混合源營(yíng)養(yǎng)期后才開始平游進(jìn)入外源營(yíng)養(yǎng)期，這時(shí)卵黃囊完全吸收，身體顏色由黃色逐步變成灰黑色，體長(zhǎng)10～15 mm。平游后7 d，可從孵化池或孵化網(wǎng)箱中轉(zhuǎn)移到室外池培育。平游18 d 后體長(zhǎng)平均達(dá)到30 mm。

3 討論

3.1 人工繁殖

通過(guò)4—7 月走訪收集大刺鰍成熟親魚，大刺鰍為分批產(chǎn)卵類型，這與曾慶祥等［6］研究結(jié)果一致，而陳忠［4］則認(rèn)為大刺鰍為一次產(chǎn)卵類型。在紅水河來(lái)賓地區(qū)，水溫達(dá)到22 ℃，即在4 月，野生大刺鰍群體開始出現(xiàn)成熟個(gè)體。其中，雌性成熟個(gè)體較多，雄性成熟個(gè)體較少。此時(shí)可嘗試性開展人工催產(chǎn)繁殖的試驗(yàn)，催產(chǎn)效果不一定很好，但可以摸索出后續(xù)大刺鰍催產(chǎn)繁殖的最佳條件以及催產(chǎn)繁殖的最好時(shí)間。

大刺鰍親魚選擇上，張建銘等［5］和李曉雙［8］認(rèn)為雌、雄親魚容易辨別。但在研究人員實(shí)際采集大刺鰍親本過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)大刺鰍雌、雄親本并不容易區(qū)分。這與周惠強(qiáng)等［3］對(duì)大刺鰍雌雄個(gè)體形態(tài)差異研究情況一致。另外，參考多數(shù)大刺鰍研究文獻(xiàn)，筆者認(rèn)為對(duì)大刺鰍雄魚的描述存在問(wèn)題。通過(guò)實(shí)際比對(duì)以及咨詢漁民，修正了對(duì)大刺鰍雄魚的描述，以利于大刺鰍雌、雄鑒別。筆者觀察大刺鰍雄魚頭部較雌魚更尖，體型也較大，雄魚生殖孔微凹且大多不呈粉紅色，生殖孔邊緣有一白圈。

在催產(chǎn)劑配伍上，參考張建銘等［5］的研究結(jié)果，采用LRH-A2+DOM+HCG 3 種催產(chǎn)劑配伍的方式，取得較好的催產(chǎn)效果。這與林偉強(qiáng)等［9］和陳忠［4］使用2 種或1 種催產(chǎn)劑不同。比較不同催產(chǎn)劑配伍方式，在水溫接近情況下，3 種催產(chǎn)劑配伍，效應(yīng)時(shí)間明顯減少，但同樣的孵化時(shí)間相應(yīng)增加。這與陳方平等［10］對(duì)大刺鰍的催產(chǎn)效率和積溫的關(guān)系研究一致，只有當(dāng)積溫介于一定范圍內(nèi)時(shí)，大刺鰍的受精率和孵化率才比較高。

孵化過(guò)程中，通過(guò)比較4 批次孵化水溫，水溫26~28 ℃孵化效果最佳。這與薛凌展［11］的研究結(jié)果一致。

比較4 批次催產(chǎn)繁殖試驗(yàn)結(jié)果，認(rèn)為大刺鰍的繁殖盛期在6 月。同時(shí)通過(guò)匯總采集大刺鰍成熟親魚性腺成熟度情況，6 月大刺鰍成熟親本也最多，性腺成熟度也最好。這與陳忠［4］的研究結(jié)果基本一致，認(rèn)為大刺鰍的繁殖季節(jié)為每年的4—8 月，繁殖高峰期在5—6 月。曾慶祥等［6］在江西開展大刺鰍人工繁殖研究，認(rèn)為大刺鰍產(chǎn)卵期在5 月底到10 月初，產(chǎn)卵高峰期在7 月到9 月間。筆者認(rèn)為這與地域因素以及氣候差異因素有關(guān)。開展大刺鰍人工繁殖相關(guān)研究應(yīng)結(jié)合當(dāng)?shù)厮疁亍夂蛞蛩?，探索出大刺鰍在當(dāng)?shù)氐臏?zhǔn)確繁殖時(shí)間。

大刺鰍卵在受精前后卵徑變化不大，平均值在2 mm 左右；胚胎的發(fā)育隨著水溫的升高而加快；受精卵黏性強(qiáng)，這與薛凌展［12］對(duì)大刺鰍胚胎發(fā)育觀察結(jié)果一致。

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)4 月、7 月大刺鰍的受精率、孵化率都較低，主要原因可能是4 月大刺鰍親魚成熟度不夠，7 月大刺鰍雌魚魚卵過(guò)熟，出現(xiàn)性腺退化吸收情況；大刺鰍雄魚精液偏少，收集大刺鰍成熟雄魚困難；大刺鰍的受精卵在孵化48 h 后容易滋生大量水霉，使孵化率降低。所以在進(jìn)行人工催產(chǎn)繁殖時(shí)要把握好大刺鰍繁殖高峰期，同時(shí)在選擇雄性大刺鰍雄魚親本時(shí)，一定要挑選發(fā)育較好的親魚作為取精對(duì)象；而且在孵化過(guò)程中要使用一些效果較好的藥物對(duì)魚卵進(jìn)行浸泡、消毒，防止水霉滋生，并及時(shí)剔除死卵保證孵化效果。

3.2 苗種培育

大刺鰍魚苗剛出膜后較為脆弱，活動(dòng)能力較差，一般靜臥或側(cè)臥孵化池底部或壁上，偶爾做向上沖游后落下，此時(shí)卵黃囊清晰可見，一般需在孵化池暫養(yǎng)1 周，仍采用淋水方式暫養(yǎng)苗種。約1 周時(shí)間卵黃囊吸收完全，大刺鰍魚苗開始平游。開口餌料選擇豐年蟲和微粒子魚苗開口專用飼料，開口效果均較好，每天投喂4～6 次。注意及時(shí)清理孵化池池底殘餌及水體細(xì)沙殘?jiān)?。在孵化池繼續(xù)投喂約3 d 后可考慮轉(zhuǎn)移苗種到室外魚苗池或者室內(nèi)育苗池繼續(xù)培育。

本研究主要采用室外苗種池培育，魚苗下塘前就做好消毒肥水工作?？紤]到省時(shí)省力因素，可以從附近肥水池調(diào)一半老水，另加一半新水加快肥水速度。保證大刺鰍魚苗下塘前處于輪蟲高峰期。餌料投喂選擇甲魚料和誘食劑配合方式，前期投喂，采用沿著魚苗池四周撒粉料的方式。此后誘食劑逐漸減量，增加食臺(tái)，改為飼料捏團(tuán)方式，定點(diǎn)投喂。定期清理食臺(tái)、臺(tái)階處殘餌和糞便。10 d 左右換30%水，不定期使用底改劑和EM 菌、芽孢桿菌改良腐臭底泥以及調(diào)節(jié)水質(zhì)。