腎復(fù)康Ⅱ號膠囊對IgA腎病大鼠血清醛固酮及腎內(nèi)小動脈病變的影響

王睿琪，張曉東，田 耘

(1.陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西 咸陽712046；2.寶雞市第三人民醫(yī)院腎內(nèi)科，陜西 寶雞 721000；3.陜西省中醫(yī)醫(yī)院腎病一科,陜西 西安710003)

IgA腎病(IgA nephropathy,IgAN)是以IgA為主的免疫復(fù)合物沉積在腎小球系膜區(qū)的疾病[1]。是我國常見的腎臟疾病，是引起腎衰竭的重要原因之一，從而給患病人群健康及經(jīng)濟(jì)帶來極大負(fù)擔(dān)[2]。因此，闡述其發(fā)病機(jī)制是防治病情進(jìn)展的關(guān)鍵。近年來有多個研究提示腎內(nèi)小動脈病變與IgAN病情進(jìn)展相關(guān)，血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞增殖是動脈損傷的關(guān)鍵病理改變[3]，而醛固酮的增多可能是IgAN腎小動脈病變的始動因素，醛固酮可誘導(dǎo)ERK/NF-κB 信號通路，使血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞增殖[4]。由此假設(shè)，醛固酮可誘導(dǎo)ERK/NF-κB 信號通路磷酸化，促使血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞增殖，使血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、人基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達(dá)增強(qiáng)，加快IgAN腎內(nèi)小動脈病變病情進(jìn)展。

腎復(fù)康Ⅱ號膠囊為陜西省中醫(yī)醫(yī)院自制制劑，其主要功效是益腎散結(jié)化瘀[5]。在臨床治療中應(yīng)用廣泛，對于降尿蛋白及潛血有良好的療效，起到了延緩IgAN病情進(jìn)展的作用。近年對腎復(fù)康Ⅱ號膠囊進(jìn)行的藥理研究提示，腎復(fù)康Ⅱ號膠囊可緩解免疫復(fù)合型腎炎大鼠的高凝狀態(tài)[5-7]。但腎復(fù)康Ⅱ號膠囊對IgAN腎內(nèi)小動脈病變研究文獻(xiàn)報道較少。故本研究采用基礎(chǔ)實驗方法，通過研究腎復(fù)康Ⅱ號膠囊對醛固酮的干預(yù)，探討對IgAN大鼠醛固酮及腎內(nèi)小動脈的影響，為臨床治療提供有效性研究證據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物:購自于西安交通大學(xué)實驗動物中心70只6～8周齡、體重180～200 g SD 健康雄性大鼠[動物合格證號：SCXK(陜)2020-001]，并在動物中心動物飼養(yǎng)室，嚴(yán)格按照校內(nèi)動物實驗的要求，科學(xué)喂養(yǎng)。本研究所有實驗方案及實驗手段均已獲得陜西省中醫(yī)醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.1.2 實驗藥物：腎復(fù)康Ⅱ號膠囊為陜西省中醫(yī)醫(yī)院自制制劑，由山萸肉、黃芪、炒杜仲、金櫻子、菟絲子、醋鱉甲、淫羊藿、王不留行、赤芍、姜黃、僵蠶、莪術(shù)組成[批準(zhǔn)文號：陜藥管字(2001)第1168號,陜西省中醫(yī)醫(yī)院制劑中心提供]，黃葵膠囊(天津同仁堂制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字Z19990040)，螺內(nèi)酯片(杭州民生藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H33020070)。

1.1.3 實驗試劑：CCl4(天津富宇精細(xì)化工有限公司)，牛血清白蛋白(北京索萊寶公司)，10%鹽酸(國藥集團(tuán))，蓖麻油(天津富宇精細(xì)化工有限公司)，脂多糖(北京索萊寶公司)，10%水合氯醛溶液(上海山浦化工有限公司)，濃縮型正常山羊血清(封閉)(武漢博士德生物工程有限公司)，熒光(FITC)標(biāo)記羊抗小鼠IgG(武漢博士德生物工程有限公司)，DAPI(碧云天)，抗熒光淬滅封片劑(Southernbiotech)，IgA(Abcam)。

1.1.4 實驗儀器：熒光顯微鏡OlympusCX 41(日本奧林巴斯公司)，光學(xué)顯微鏡OlympusBX 41(日本奧林巴斯公司)，圖像采集分析系統(tǒng)HMIAS-2000(北京中科公司)，平推式切片機(jī)LeiCASM2000R、冰凍切片機(jī)LeiCA(德國)，自動包埋機(jī)YABO(江蘇常州)，酶標(biāo)儀(美國伯樂公司)。

1.2 實驗方法

1.2.1 大鼠分組及造模:本基礎(chǔ)實驗將70只6～8周齡的健康雄性大鼠用苦味酸作標(biāo)記以區(qū)分，分籠飼養(yǎng)，予適量飼料，自由飲水，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。保持室內(nèi)溫度，保持室內(nèi)干凈通風(fēng)。1周后稱重，檢測大鼠尿蛋白均為陰性。隨機(jī)分為五組，空白組、IgA腎病模型組(模型組)、腎復(fù)康Ⅱ號膠囊組(腎復(fù)康組)、黃葵膠囊治療組(黃葵組)，螺內(nèi)酯片治療組(螺內(nèi)酯組)。其中空白組大鼠10只，模型組、腎復(fù)康組、黃葵組、螺內(nèi)酯組大鼠各15只。本實驗造模方法采用牛血清白蛋白灌胃+皮下注射CCl4+靜脈注射脂多糖LPS的方法[8]，空白組第2～12周每日予2 ml 0.9%氯化鈉水溶液給大鼠灌胃。在第6、8、10周予0.9%氯化鈉水溶液0.2 ml注射大鼠尾靜脈，共注射3次。模型組和藥物組持續(xù)12周隔日每只大鼠灌服2 ml牛血清白蛋白鹽酸酸化水；同時1周皮下注射1次CCl4；并聯(lián)合應(yīng)用第6、8、10周尾靜脈注射0.5 mg脂多糖，共 3 次；造模1周后每只大鼠灌服2 ml 0.9%氯化鈉水溶液，持續(xù)灌服11周。黃葵組第2周起每只大鼠灌服2 ml黃葵膠囊水溶液，持續(xù)11周。腎復(fù)康Ⅱ號第2周起每只灌服2 ml腎復(fù)康Ⅱ號水溶液，持續(xù)11周。螺內(nèi)酯組第3周起每只灌服螺內(nèi)酯水溶液2 ml，持續(xù)11周[9]。

1.2.2 藥物方案：空白組大鼠正常飼養(yǎng)1周后，以等量蒸餾水灌胃；模型組用0.9%氯化鈉水溶液灌胃10 ml/(kg·d)；腎復(fù)康組、黃葵組、螺內(nèi)酯組：把腎復(fù)康Ⅱ號膠囊、黃葵膠囊、螺內(nèi)酯片分別碾成沫倒入雙蒸水中，分別制成濃度為1.12、2.25、25 mg/kg的混懸液，以成人用量的15倍即10 ml/(kg·d)灌胃；腎復(fù)康組、黃葵組于實驗第2周開始灌藥，螺內(nèi)酯組于第3周開始灌藥。

1.2.3 樣本采集：實驗開始后在第4、8、12周記錄大鼠24 h尿量。實驗12周末處死大鼠采集血液、腎臟標(biāo)本，用10%水合氯醛腹腔注射麻醉，用一次性真空負(fù)壓促凝管取血2 ml，后迅速轉(zhuǎn)換為抗凝管取血5 ml，放入4 ℃冰箱冷藏。取血完成，剝離大鼠雙腎，取腎皮質(zhì)與腎髓質(zhì)切成若干小塊，分別裝入3個離心管：①光鏡：裝有FFA固定液(配方為10%甲醛10 ml+冰醋酸5 ml+90%乙醇溶液85 ml)的5 ml清潔小管[19]。②熒光：以無菌紗布包裹，裝有0.9%氯化鈉水溶液的5 ml清潔小管。先放于冰桶，后將光鏡小管置于4 ℃冰箱冷藏，熒光小管置于-70 ℃冰箱冷凍保存。

1.2.4 觀察指標(biāo)

1.2.4.1 大鼠狀態(tài)觀察：監(jiān)測給藥后大鼠體重，根據(jù)體重調(diào)整劑量，觀察大鼠毛色、精神、活動、飲食、尿量、大便等。

1.2.4.2 大鼠24 h尿蛋白定量檢測:分別于實驗開始后4、8、12 周末收集大鼠尿液，通過全自動生化分析儀用焦酚紅法做 24 h尿蛋白定量檢測。

1.2.4.3 血清生化指標(biāo)檢測：血肌酐(Scr)、尿素氮測定(BUN)：于實驗12周末，無菌條件下分離血清，通過全自動生化分析儀用酶法做指標(biāo)檢測。血清醛固酮(ADS)、血管緊張素(AngⅡ)檢測：于實驗12周末，無菌條件下分離血清，留取血液標(biāo)本 3 ml，注入硅化玻璃試管內(nèi)，4 ℃、3000 r/min 離心10 min，吸取上清液，-70 ℃低溫保存，采用放射免疫分析法檢測。

1.2.4.4 腎臟病理指標(biāo):腎臟動脈厚度的檢測。將masson染色標(biāo)本放在多功能電子顯微鏡下，選用400倍視野，選取腎動脈的近正中矢狀位橫截面照相，用醫(yī)學(xué)圖像分析管理系統(tǒng)分別檢測內(nèi)膜厚度/血管外徑反映內(nèi)膜增厚、中膜厚度/血管外徑反映中膜增厚、管壁厚度/血管外徑反映管壁增厚程度。

1.2.4.5 腎組織 VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá):將12周所采集的腎臟標(biāo)本石蠟組織切片，應(yīng)用免疫組織化學(xué) Envision System，二步法進(jìn)行檢測。一抗分別為3 種不同的抗體:VEGF 抗體(兔抗人)、PCNA 抗體(兔抗人)、MMP-9 抗體(小鼠抗人)。每種抗體加入后均使用磷酸鹽緩沖液(PBS)稀釋， MMP-9抗體稀釋比例為 1∶50，其余抗體稀釋比例為 1∶100。二抗為辣根，過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔或抗小鼠抗體(DAKO,Danmark)，原液不稀釋。操作步驟：取組織切片，常規(guī)脫蠟水化。浸入0.01 mmol/L的枸櫞酸鹽抗原修復(fù)液，98 ℃恒溫水浴鍋中加熱15 min，冷卻至室溫，滴加一抗，置濕盒中常溫孵化2 h，PBS液洗 5 min×2次，滴加2抗，置濕盒中常溫孵化 30 min，PBS液洗5 min×2次，滴加二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色液(棕黃色)，采用蘇木素染核。使用多功能電子顯微鏡，在200倍視野下拍攝所有小動脈，采用醫(yī)學(xué)圖像分析管理系統(tǒng)測量腎組織總體及小動脈區(qū)域 VEGF、MMP-9、PCNA灰度值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 23.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析。計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，若多組樣本滿足正態(tài)性檢驗以及方差齊性檢驗，采用方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組不同時間24 h尿蛋白定量比較 見表1。各組24 h尿蛋白定量比較，模型組與同時期空白組對比，尿蛋白定量明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；在4、8、12周時，腎復(fù)康組低于相應(yīng)時點(diǎn)模型組24 h尿蛋白定量，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；4周時點(diǎn)，腎復(fù)康組與黃葵組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，與螺內(nèi)酯組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；8周時點(diǎn)，腎復(fù)康組與黃葵組、螺內(nèi)酯組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；12周時點(diǎn)，腎復(fù)康組與螺內(nèi)酯組、黃葵組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表1 各組不同時間24 h尿蛋白定量比較(mg/24 h)

2.2 各組大鼠血清ADS、AngⅡ、BUN、Scr比較 見表2。在血清醛固酮方面，腎復(fù)康組與黃葵組、螺內(nèi)酯組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。AngⅡ方面，腎復(fù)康組與螺內(nèi)酯組、黃葵組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。尿素氮方面，各藥物組尿素氮均明顯下降，各藥物組與模型組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；腎復(fù)康組與螺內(nèi)酯組、黃葵組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。血肌酐方面，腎復(fù)康組與模型組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；螺內(nèi)酯組和黃葵組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；腎復(fù)康組與黃葵組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表2 各組大鼠血清ADS、AngⅡ、BUN、Scr比較

2.3 大鼠腎臟病理指標(biāo)

2.3.1 各組大鼠蛋白VEGF、MMP-9、PCNA的表達(dá)：從各組的蛋白表達(dá)情況來看，各組均服從正態(tài)分布，與空白組比較，模型組的VEGF、MMP-9、PCNA的表達(dá)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。腎復(fù)康組的VEGF、PCNA表達(dá)明顯低于黃葵組(P<0.05)；與螺內(nèi)酯組比較，腎復(fù)康組的VEGF、MMP-9、PCNA表達(dá)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 各組大鼠蛋白VEGF、MMP-9、PCNA的表達(dá)(陽性細(xì)胞數(shù)/mm2)

2.3.2 腎組織及小動脈VEGF、MMP-9、PCNA的免疫組化染色：VEGF染色以免疫酶標(biāo)記，以腎小球內(nèi)出現(xiàn)黃色或棕褐色顆粒為陽性指標(biāo)，從陽性表達(dá)染色面積看，腎復(fù)康組腎小球內(nèi)陽性表達(dá)分布面積明顯少于模型組(圖1)。MMP-9染色以染色酶標(biāo)記，以腎小球內(nèi)出現(xiàn)黃色或棕褐色顆粒為陽性指標(biāo)，從陽性表達(dá)染色面積看，腎復(fù)康組陽性表達(dá)分布面積較少于模型組(圖2)。PCNA染色以免疫酶標(biāo)記，以腎小球內(nèi)出現(xiàn)黃色或棕褐色顆粒為陽性指標(biāo)，從陽性表達(dá)染色面積看，腎復(fù)康組陽性表達(dá)分布面積明顯少于模型組(圖3)。

圖1 各組VEGF免疫組化染色(DAB染色，×200)

圖2 各組MMP-9免疫組化染色(DAB染色，×200)

圖3 各組PCNA免疫組化染色(DAB染色，×200)

2.3.3 各組大鼠腎內(nèi)小血管厚度比較：見表4。與模型組相比，其余各組的內(nèi)膜/血管外徑、管壁/血管外徑比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，中膜/血管外徑各組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表4 各組大鼠腎內(nèi)小血管厚度比較(mm)

2.4 IgAN腎內(nèi)小動脈病變與VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá)的相關(guān)性分析 見表5。IgAN的內(nèi)膜增厚與VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá)均低度正相關(guān)(0.3

表5 IgAN腎內(nèi)小動脈病變與VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá)的相關(guān)性分析

2.5 IgAN大鼠血清醛固酮與VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá)的相關(guān)性分析 見表6。血清醛固酮與VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá)均呈中度正相關(guān)關(guān)系(0.5

表6 IgAN大鼠血清醛固酮與VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá)的相關(guān)性分析

3 討 論

既往對IgAN機(jī)制探討重心多在腎小球及腎小管-間質(zhì)纖維化病變上。近期研究表明，腎內(nèi)小動脈病變也是IgAN病情進(jìn)展的重要因素之一[10]?，F(xiàn)有的研究報道中IgAN腎內(nèi)小動脈病變機(jī)制尚不明確。已有研究顯示，腎內(nèi)小動脈病變在IgAN患者人群發(fā)病率較高[11]，提示血管內(nèi)皮功能受損可能是IgAN小動脈病變的早期原因。Taiko等[12]研究證實，內(nèi)皮細(xì)胞損傷可能導(dǎo)致IgAN腎損傷進(jìn)一步加重。華軍誼等[13]證實了血管內(nèi)膜增厚與中膜平滑肌細(xì)胞肥大、增生、細(xì)胞外基質(zhì)的增加密切相關(guān)。進(jìn)一步提示了血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞增殖可能是動脈損傷的關(guān)鍵病理改變。而VEGF可維持血管通透性與完整性，在血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及遷移中具有重要的參與作用[14]。PCNA作為細(xì)胞周期的內(nèi)源性組織標(biāo)志物，反映了細(xì)胞增殖活性[15]。MMP-9則可能促進(jìn)血管的平滑肌細(xì)胞遷移和內(nèi)膜增生[16]。而免疫復(fù)合物的介導(dǎo)可促使醛固酮分泌增多，進(jìn)而激活 ERK/NF-κB 通路，啟動炎癥反應(yīng)，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞增殖。ERK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、遷移等生物學(xué)行為信號，具有誘導(dǎo)大鼠動脈平滑肌細(xì)胞PCNA增殖的功能[17]，醛固酮的增多也可增加血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的表達(dá)和 AngⅡ的產(chǎn)生，激活NF-κB，NF-κB 通路可調(diào)控黏附分子、細(xì)胞因子、趨化因子、血管緊張素原及其他增殖和免疫反應(yīng)相關(guān)的多種基因參與血管損傷的病理過程，具有使MMP-9、PCNA表達(dá)增強(qiáng)的功能[18]。陜西省中醫(yī)醫(yī)院在做大量腎臟病理診斷發(fā)現(xiàn)，在透射電鏡下IgAN患者的小血管中存在電子致密物沉積[19]。證實了小動脈病變與致密物沉積相關(guān)。這些論述均表明血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞增殖是動脈損傷的關(guān)鍵病理改變，醛固酮增多可誘導(dǎo)ERK、NF-κB信號通路促使VEGF、PCNA、MMP-9的表達(dá)增強(qiáng)，進(jìn)一步促使IgAN腎小動脈病變的形成。

本研究中以腎復(fù)康Ⅱ號膠囊組為治療組，以黃葵膠囊組作為中藥對比組，螺內(nèi)酯組作為西藥對比組，按規(guī)定給大鼠灌藥后于12周處死大鼠，檢測相關(guān)指標(biāo)。尿蛋白定量在4周時點(diǎn)時腎復(fù)康組與螺內(nèi)酯組差異有統(tǒng)計學(xué)意義，與黃葵組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；其余時點(diǎn)，三組差異比較無統(tǒng)計學(xué)意義。生化指標(biāo)方面，三組大鼠ADS比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，BUN、AngⅡ、Scr，三組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。腎小動脈血管厚度測量方面，模型組內(nèi)膜、中膜、管壁均高于空白組，三組內(nèi)膜、管壁的厚度低于模型組。腎內(nèi)小動脈病變與VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá)方面，內(nèi)膜增厚與蛋白表達(dá)呈低度正相關(guān)，管壁增厚與蛋白表達(dá)呈中度正相關(guān)；ADS與VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá)方面，均呈中度正相關(guān)關(guān)系。證實了ADS增多可使VEGF、PCNA、MMP-9的表達(dá)增強(qiáng)，并且管壁增厚與血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖等密切相關(guān)，進(jìn)而證實了IgA腎病小動脈病變的作用機(jī)理可能是ADS增多使VEGF、PCNA、MMP-9的表達(dá)增強(qiáng)，促使血管內(nèi)皮細(xì)胞等增殖，進(jìn)而加重IgAN病情。

祖國醫(yī)學(xué)對于IgAN無確定病名。國家中醫(yī)藥管理局根據(jù)其臨床表現(xiàn)將其命名為“腎風(fēng)”。而小動脈病變是IgAN的血管病變。陜西省中醫(yī)醫(yī)院通過大量鏡下病理觀察，發(fā)現(xiàn)腎內(nèi)小動脈病變管壁增厚、玻璃樣變具有“不動”“難破”的特點(diǎn)，同時腎內(nèi)小動脈病變會出現(xiàn)管腔狹窄，血流緩慢、腎小球、腎間質(zhì)缺血、纖維化等現(xiàn)象[6]。所以將腎內(nèi)小動脈病變稱為在腎臟局部的微型“癥積”。根據(jù)鏡下微觀病理辨證與中醫(yī)整體辨證相結(jié)合，陜西省中醫(yī)醫(yī)院將IgAN伴腎內(nèi)小動脈病變的中醫(yī)病機(jī)概括為“腎氣不足、痰瘀互結(jié)”[20]。根據(jù)此病機(jī)并且結(jié)合IgAN患者臨床腰痛、乏力、面色晦暗、舌質(zhì)紫黯等癥狀，以益腎散結(jié)化瘀為法，將山萸肉、炒杜仲、菟絲子、金櫻子、淫羊藿、醋鱉甲、王不留行、姜黃、僵蠶、赤芍、莪術(shù)等組成方劑，制成膠囊劑型并命名為“腎復(fù)康Ⅱ號膠囊”。腎復(fù)康Ⅱ號膠囊廣泛應(yīng)用于臨床IgAN的治療，既往陜西省中醫(yī)院在藥理實驗方面對“腎復(fù)康Ⅱ號膠囊”研究證明了腎復(fù)康Ⅱ號具有促進(jìn) MSCs 分泌抗纖維化因子抑制腎纖維化的作用，減輕腎小管損傷的程度，可明顯緩解免疫復(fù)合物型腎炎大鼠的高凝狀態(tài)、降低血清 AngⅡ的含量[5]。之后的研究也發(fā)現(xiàn)，腎復(fù)康Ⅱ號膠囊可通過靶點(diǎn)調(diào)控部分信號通路，進(jìn)而抑制炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激，進(jìn)而治療腎纖維化。既往陜西省中醫(yī)院也有研究發(fā)現(xiàn)腎復(fù)康Ⅱ號膠囊可抑制腎組織中PAI-1的生成，進(jìn)而延緩腎小球硬化程度，控制病情進(jìn)展[21]。本基礎(chǔ)研究通過實驗證實了血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞增殖是動脈損傷的關(guān)鍵病理改變，ADS增多可誘導(dǎo)ERK、NF-κB信號通路促使VEGF、PCNA、MMP-9的表達(dá)增強(qiáng)，進(jìn)一步促使IgAN腎小動脈病變的形成[9]。腎復(fù)康Ⅱ號膠囊可以通過抑制ADS的分泌，降低VEGF、PCNA、MMP-9的表達(dá)，進(jìn)而延緩IgAN病情的進(jìn)展。

從本次動物實驗研究來看，證實了ADS與VEGF、PCNA、MMP-9表達(dá)及管壁增厚呈相關(guān)，腎復(fù)康Ⅱ號膠囊可通過抑制醛固酮，降低VEGF、MMP-9、 PCNA表達(dá)，進(jìn)一步抑制腎內(nèi)小動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，減輕腎臟損傷。證實了腎復(fù)康Ⅱ號膠囊治療大鼠腎臟微型癥積療效明確，下一步可進(jìn)行臨床實驗，進(jìn)而臨床使用。