4株內(nèi)生真菌對沙地云杉立枯病的抗病作用

姜海燕，狄佳麟，叢 林，閆 偉，白娜娜，張 旭，白 慧

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 林學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；2.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018）

植物內(nèi)生真菌(endophytic fungi)是指那些全部或近整個生命周期生活在宿主植物的各類細(xì)胞及細(xì)胞間隙、組織、器官內(nèi)部，卻不會使寄主表現(xiàn)出不良癥狀的真菌類群[1-2]。大量研究表明：內(nèi)生真菌可以通過競爭生存空間和營養(yǎng)元素[3]、溶菌作用[4]、影響病原真菌菌絲生長及孢子發(fā)育方式[5]等抑制病原菌的生長，同時刺激根毛形成和根莖生長，提高植物感病時的光合作用及酶活性[6-7]，提高植物抗病能力。沙地云杉Picea mongolica是松科Pinaceae云杉屬Picea常綠針葉喬木，是內(nèi)蒙古特有樹種，沙質(zhì)土地上的活化石[8]。由于近年來大面積的立枯病等病蟲害的頻繁發(fā)生[9]，沙地云杉正面臨著可能滅絕的危險。目前，噴施化學(xué)農(nóng)藥是防治嚴(yán)重林木病害的主要措施，但農(nóng)藥利用率低下，極不適宜應(yīng)用于大面積的森林，急需開發(fā)天然生物資源代替?zhèn)鹘y(tǒng)化學(xué)農(nóng)藥試劑。本研究選取前期篩選的4株具有強(qiáng)拮抗作用的沙地云杉內(nèi)生真菌為試驗(yàn)材料，以沙地云杉立枯病病原真菌Fusariumsp.為靶標(biāo)菌，采用體外對峙和盆栽試驗(yàn)，探究內(nèi)生拮抗菌的拮抗活性和對沙地云杉的抗病作用，旨在為利用生物資源、開發(fā)生防菌提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試沙地云杉內(nèi)生拮抗菌 4株沙地云杉內(nèi)生拮抗菌由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院森林病理實(shí)驗(yàn)室提供[10]，分別是互隔鏈格孢菌Alternaria alternata(SDYS36)、三線鐮刀菌Fusarium tricinctum(SDYS63)、產(chǎn)黃青霉菌Penicillium chrysogenum(SDYS95)、聚多曲霉菌Aspergillus sydowii(SDYS180)。

1.1.2 供試林木病原真菌 沙地云杉立枯病病原菌Fusariumsp.由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院森林病理實(shí)驗(yàn)室提供。

1.1.3 供試沙地云杉種子 沙地云杉種子由赤峰市白音敖包自然保護(hù)區(qū)提供。除雜后挑選種實(shí)飽滿、色澤正常的健康種子，低溫保存?zhèn)溆?。千粒重?.011 4 g。

1.1.4 主要培養(yǎng)基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)固體培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖(PD)液體培養(yǎng)基。

1.2 方法

1.2.1 菌株培養(yǎng) 在超凈工作臺內(nèi)將沙地云杉內(nèi)生拮抗菌和沙地云杉立枯病病原菌供試菌株切成0.2 cm×0.2 cm的菌塊，接種于已滅菌的PDA平板進(jìn)行純培養(yǎng)；無菌條件下，用5 mm打孔器在培養(yǎng)7 d的供試菌株平板邊緣打成圓形菌餅，接種于加有100 mL滅菌后的PD液體培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，震蕩培養(yǎng) 5～7 d (28 ℃，180 r·min-1)，得到發(fā)酵菌液備用；取上述發(fā)酵液離心 (8 000 r·min-1，4 ℃) 2 min 后留上清液，在超凈工作臺通過0.22 μm濾膜，即為無菌發(fā)酵液。

1.2.2 內(nèi)生拮抗菌發(fā)酵液對沙地云杉立枯病病原菌的拮抗活性測定 采用生長速率法[11]，以立枯病病原菌為靶標(biāo)菌，測試沙地云杉內(nèi)生拮抗菌株發(fā)酵液拮抗活性。無菌條件下，加定量無菌發(fā)酵液于PDA培養(yǎng)基(40～50 ℃)混勻，制成平板(Ф=7.5 cm)，冷凝后在中心位置接入靶標(biāo)菌，每組均設(shè)5個重復(fù)，以加入相同比例無菌水的平板上靶標(biāo)菌的生長作為對照(ck)，25 ℃倒置培養(yǎng)。待對照中靶標(biāo)菌長滿平板時，測量靶標(biāo)菌的菌落直徑，計算相對抑菌率。相對抑菌率RI=(Rc-Rp)/Rc×100%。Rc為對照靶標(biāo)病原菌的菌落直徑，Rp為對峙實(shí)驗(yàn)中靶標(biāo)病原菌的菌落直徑。

1.2.3 內(nèi)生拮抗菌菌體對沙地云杉立枯病病原菌的拮抗活性測定 采用皿內(nèi)對峙法[12]，以立枯病病原菌為靶標(biāo)菌，測試沙地云杉內(nèi)生拮抗菌株拮抗活性。無菌條件下，將內(nèi)生拮抗菌株和靶標(biāo)菌分別接種在PDA平板(Ф=7.5 cm)上，各距中心位置2.5 cm，以單獨(dú)培養(yǎng)靶標(biāo)菌為對照(ck)，均設(shè)5個重復(fù)，25 ℃倒置培養(yǎng)。記錄對峙培養(yǎng)中靶標(biāo)菌菌落的相對生長距離，計算相對抑菌率。

1.2.4 內(nèi)生拮抗菌揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對沙地云杉立枯病病原菌的拮抗活性測定 采用對扣抑制法[13]，以立枯病病原菌為靶標(biāo)菌，測試沙地云杉內(nèi)生拮抗菌株揮發(fā)性代謝產(chǎn)物的拮抗活性。無菌條件下，將內(nèi)生拮抗菌株和靶標(biāo)菌分別接種在2個PDA平板(Ф=9.0 cm)中心，撤去皿蓋，靶標(biāo)菌在上、拮抗菌在下對扣放置，以單獨(dú)培養(yǎng)靶標(biāo)菌為對照(ck)，均設(shè)5個重復(fù)，25 ℃恒溫培養(yǎng)。記錄對峙培養(yǎng)中靶標(biāo)菌菌落的相對生長距離，計算相對抑菌率。

1.2.5 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對盆栽沙地云杉立枯病拮抗試驗(yàn) 參照袁宗勝等[14]、鄧勛等[15]的方法及《植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》[16]，通過灌根處理將內(nèi)生拮抗菌株及發(fā)酵菌液接種在外觀大小相似的1年生沙地云杉健壯幼苗上，并設(shè)置單獨(dú)澆灌PD液體培養(yǎng)基(PD)和清水(ck)等2組對照，每種處理設(shè)置苗200株，共有苗1 200株，待土壤表面干燥后接種沙地云杉立枯病原菌。發(fā)病后，比較病苗生長30和45 d時的形態(tài)(株高生長量、地徑生長量、根長生長量)和葉片組織的可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)、丙二醛質(zhì)量摩爾濃度、保護(hù)酶活性的變化，分析內(nèi)生拮抗菌株對沙地云杉染病幼苗抵抗立枯病的影響。

2 結(jié)果與分析

2.1 4株沙地云杉內(nèi)生拮抗菌株的體外拮抗活性

2.1.1 內(nèi)生拮抗菌株發(fā)酵液對沙地云杉立枯病病原菌的拮抗活性 4株內(nèi)生真菌的發(fā)酵液對病原菌均有顯著的抑制作用，抑菌率為51.64%～78.67%。4株內(nèi)生真菌對沙地云杉立枯病病原菌的抑菌率均在51.64%以上。SDYS180發(fā)酵液的抑菌率最高，達(dá)到78.67%。與另外3株內(nèi)生真菌發(fā)酵液間差異顯著(P＜0.05) (表1)。4株真菌發(fā)酵液的抑菌率從大到小依次為SDYS180、SDYS36、SDYS63、SDYS95。

表1 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌的拮抗作用Table 1 Antagonistic effects of endophytic fungi in P. mongolica on Fusarium sp.

2.1.2 內(nèi)生拮抗菌株對沙地云杉立枯病病原菌的拮抗活性 4株沙地云杉內(nèi)生真菌菌體本身對沙地云杉立枯病病原真菌均有顯著的抑制作用，抑菌率均大于51.96%。抑菌率從大到小依次為SDYS95、SDYS180、SDYS36、SDYS63。其中，SDYS95的抑制效果最強(qiáng)，抑菌率達(dá)到69.64%，與另外3株內(nèi)生真菌差異顯著 (P＜0.05) (表1)。

2.1.3 內(nèi)生拮抗菌株揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對沙地云杉立枯病病原菌的拮抗活性 4株沙地云杉內(nèi)生真菌菌株的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對沙地云杉立枯病病原真菌的生長有一定的拮抗作用，但抑制率較低，抑菌率從大到小依次為SDYS63、SDYS36、SDYS180、SDYS95(表1)。其中，拮抗效果最強(qiáng)的SDYS63，抑菌率僅達(dá)到16.94%，與SDYS95內(nèi)生真菌差異顯著(P＜0.05)；拮抗效果最弱的是SDYS95，抑菌率僅有13.06%。

2.2 4株沙地云杉內(nèi)生拮抗菌株對盆栽沙地云杉立枯病的拮抗作用

2.2.1 內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗形態(tài)指標(biāo)的影響 發(fā)病30 d時，各處理染病幼苗株高從高到低依次表現(xiàn)為SDYS180、SDYS95、SDYS63、SDYS36、ck、PD，試驗(yàn)組株高較ck高0.91%～16.01%，PD生長勢衰弱，可見菌絲著生。發(fā)病45 d時，各處理染病幼苗株高從高到低依次為SDYS180、SDYS95、SDYS63、SDYS36、ck、PD，試驗(yàn)組苗木的株高較ck高出1.42%～18.31%，ck葉片退綠枯黃或死亡。通過PD與ck的對比，說明病原菌抑制病苗株高生長；試驗(yàn)組相對ck株高顯著增加，說明內(nèi)生真菌能有效抑制病原菌。2次取樣SDYS180的病苗株高生長均最高，與ck和PD具有顯著差異(P＜0.05)。菌株SDYS180及其代謝產(chǎn)物在苗木株高生長上抗病效果最佳(圖1)。

圖1 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗株高的影響Figure 1 Effects of endophytic fungi of P. mongolica on the plant height of infected seedlings

30 d時，各處理染病幼苗地徑從大到小依次為SDYS36、SDYS63、SDYS180、SDYS95、ck、PD，試驗(yàn)組地徑較ck高5.90%～19.04%，PD較ck低10.22%。45 d時，各處理地徑從大到小依次呈現(xiàn)為SDYS180、SDYS36、SDYS95、SDYS63、ck、PD，帶菌植株地徑較ck高出14.59%～32.64%，PD較ck低13.96%。通過PD與ck的對比，說明病原菌抑制植株地徑的增長。試驗(yàn)組相對ck顯著增加，說明內(nèi)生真菌有效抑制發(fā)病；2次取樣SDYS180的增加幅度最大，與ck、PD差異性均達(dá)顯著水平(P＜0.05)，說明菌株SDYS180及其代謝產(chǎn)物在苗木地徑生長上抗病效果最佳(圖2)。

圖2 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗地徑的影響Figure 2 Effects of endophytic fungi of P. mongolica on the ground diameter of infected seedlings

30d時，各處理染病幼苗根長從大到小依次為SDYS63、SDYS95、SDYS180、SDYS36、ck、PD(圖3)，試驗(yàn)組根長較ck高0.42%～11.91%，PD較ck低10.22%。45d時，各處理染病幼苗根長從大到小依次為SDYS180、SDYS95、SDYS63、SDYS36、ck、PD，帶菌植株較ck高10.17%～16.56%，PD較ck低13.96%。通過PD與ck的對比，說明病原菌抑制植株根長生長。試驗(yàn)組相對ck顯著增加，說明內(nèi)生真菌有效抑制發(fā)病；2次取樣SDYS180的根長增加幅度最大，45 d取樣與ck、PD差異性均顯著(P＜0.05)，說明菌株SDYS180及其代謝產(chǎn)物在苗木根長生長上抗病效果最佳。

圖3 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗根長的影響Figure 3 Effects of endophytic fungi of P. mongolica on the root length of infected seedlings

2.2.2 內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗滲透調(diào)節(jié) (可溶性蛋白質(zhì))的影響 30d 時，各處理染病幼苗中可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)從高到低依次為SDYS180、SDYS95、SDYS63、ck、SDYS36、PD，SDYS180和SDYS95與ck、PD間差異性顯著(P＜0.05)，高出ck 2.68%和2.10%，PD較ck低2.43%(圖4)。45 d時各處理染病幼苗中可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)從高到低依次為SDYS95、SDYS36、SDYS63、SDYS180、ck、PD，試驗(yàn)組較ck高5.48%～13.41%，PD較ck低8.20%。2次取樣PD和ck葉片組織中可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)大幅下降，病原菌破壞植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)，影響滲透調(diào)節(jié)作用。SDYS180、SDYS95、SDYS63相對ck可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著增加，說明3株對應(yīng)內(nèi)生真菌有效抑制病原菌對滲透調(diào)節(jié)的破壞。其中SDYS95的增加幅度最大，說明菌株SDYS95及其代謝產(chǎn)物在苗木上抗病效果最佳，促進(jìn)植物組織中可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的提高。

圖4 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗可溶性蛋白質(zhì)的影響Figure 4 Effects of endophytic fungi of P. mongolica on the SP content of infected seedlings

2.2.3 內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗丙二醛質(zhì)量摩爾濃度的影響 丙二醛(MDA)是由于植物膜脂過氧化作用的重要產(chǎn)物。丙二醛質(zhì)量摩爾濃度越高，說明植物細(xì)胞膜受損越嚴(yán)重。30 d時，各處理染病幼苗中丙二醛質(zhì)量摩爾濃度從大到小依次為PD、SDYS63、ck、SDYS36、SDYS180、SDYS95，SDYS95和SDYS180較ck降低了24.46%和21.10%；SDYS36降低不明顯，和ck僅差0.05%；SDYS63較ck高0.08%，效果不明顯；PD較ck高3.70%。45 d時，丙二醛質(zhì)量摩爾濃度從大到小依次為PD、ck、SDYS95、SDYS36、SDYS180、SDYS63；試驗(yàn)組和對照組比較，丙二醛質(zhì)量摩爾濃度下降，說明內(nèi)生真菌抑制病原菌的傷害。其中菌株SDYS63在30 d樣品中高于ck，但在45 d樣本中丙二醛質(zhì)量摩爾濃度最低，說明SDYS63增強(qiáng)苗木抗病性，有效減少丙二醛質(zhì)量摩爾濃度，但拮抗效果不穩(wěn)定；在2次樣品中SDYS180和SDYS95的丙二醛質(zhì)量摩爾濃度均低于ck，但SDYS180在45 d較SDYS95低10.19%，說明菌株SDYS180拮抗效果良好，而SDYS95作用效果最佳(圖5)。

圖5 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗 MDA 的影響Figure 5 Effects of endophytic fungi of P. mongolica on MDA content of infected seedlings

2.2.4 內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗保護(hù)酶[過氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)]活性的影響 30 d 時，各處理染病幼苗 POD 活性從高到低依次為 SDYS95、SDYS180 和SDYS36、SDYS63、PD、ck，其中PD較ck高63.24%，試驗(yàn)組較ck高141.18%～250.00%；45 d時，各處理染病幼苗POD活性從高到低依次為SDYS95、SDYS63、SDYS180、SDYS36、PD、ck，其中PD較ck高48.37%，試驗(yàn)組較ck高141.13%～224.46%(圖6)。通過PD和ck的比較，說明病原菌對幼苗POD影響不大，反而可能刺激POD活性。在拮抗過程中，在一定程度上被內(nèi)生真菌抑制。在2次樣本中，SDYS95的POD活性均最高，說明菌株SDYS95對提高幼苗抗病性最佳。

圖6 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗 POD 活性的影響Figure 6 Effects of endophytic fungi of P. mongolica on POD activity of infected seedlings

30d時，各處理染病幼苗SOD活性從高到低依次為SDYS180、SDYS36、ck、SDYS95、SDYS95、PD，其中PD較ck低12.01%，SDYS180較其他處理表現(xiàn)出顯著差異(P＜0.05)，較ck高3.57%；45 d時，各處理染病幼苗SOD活性從高到低依次為SDYS63、SDYS36、SDYS95、SDYS180、ck、PD，其中PD較ck低37.56%，試驗(yàn)組較ck高10.32%～57.36%(圖7)。通過PD和ck的比較，說明病原菌對幼苗SOD活性具有抑制作用。在2次樣本中，SDYS95的SOD活性均高于ck，說明菌株SDYS95及其代謝產(chǎn)物穩(wěn)定提高幼苗抗病性；SDYS63在30 d時抑制效果稍弱，但在45 d時抑制效果大幅增加，表明菌種SDYS63的代謝產(chǎn)物的拮抗效果最佳，同時促進(jìn)SOD的活性增加。

圖7 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗 SOD 活性的影響Figure 7 Effects of endophytic fungi of P. mongolica on SOD activity of infected seedlings

30 d時，各處理染病幼苗CAT活性從高到低依次為SDYS95、SDYS180、SDYS63、SDYS36、ck、PD，其中PD較ck低58.71%，試驗(yàn)組較ck高3.87%～10.322%；45 d時，各處理染病幼苗CAT活性從高到低依次為SDYS36、SDYS180、SDYS63、SDYS95、ck、PD，其中PD較ck低60.66%，試驗(yàn)組較ck高9.02%～43.44%(圖8)。通過PD和ck的比較，說明病原菌致病嚴(yán)重，對幼苗CAT活性具有抑制作用，在拮抗過程中，被內(nèi)生真菌抑制。在30 d樣本中，SDYS95的CAT活性最高，說明菌株SDYS95抗病效果良好，可提高幼苗抗病性；SDYS36在30 d時抑制效果稍低，但在45 d時抑制效果最佳，表明菌種SDYS36的代謝產(chǎn)物的拮抗效果良好，同時促進(jìn)CAT活性增加。

圖8 沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對染病幼苗 CAT 活性的影響Figure 8 Effects of endophytic fungi of P. mongolica on CAT activity of infected seedlings

3 討論

3.1 4株沙地云杉內(nèi)生拮抗菌株體外拮抗活性

內(nèi)生真菌作為一類新型待開發(fā)的微生物資源，具有廣闊的應(yīng)用前景。目前，開展最廣泛的研究領(lǐng)域就是內(nèi)生真菌的拮抗作用[17]。大量研究表明：內(nèi)生真菌對多種病原真菌具有很強(qiáng)的拮抗作用和廣譜性，通常表現(xiàn)在對生存空間和營養(yǎng)資源的競爭，并產(chǎn)生拮抗活性物質(zhì)抑制病原菌的生長[18]。本研究結(jié)果表明：4種沙地云杉內(nèi)生真菌經(jīng)體外培養(yǎng)后，其菌體本身及其代謝產(chǎn)物對植物病原真菌均表現(xiàn)出較強(qiáng)的拮抗活性。但這種拮抗作用存在一定的選擇性，可能由不同原因造成。如青霉Penicillium和曲霉屬Aspergillus真菌具有更快的擴(kuò)展速度，在占據(jù)生存空間上具有很大的優(yōu)勢；雖然鐮刀菌Fusarium本身生長受到限制，但是可以通過產(chǎn)生具有拮抗活性的代謝產(chǎn)物，抑制病原真菌的生長。樊苗苗等[19]對樟葉越桔Vaccinium dunalianum葉中產(chǎn)黃青霉P. chrysogenum、曲霉、鏈格孢菌Alternaria、鐮刀菌等內(nèi)生真菌及其代謝產(chǎn)物的拮抗活性進(jìn)行研究，其結(jié)果與本研究一致。這些菌株及其代謝產(chǎn)物對病原真菌具有很好的拮抗活性。

3.2 4株沙地云杉內(nèi)生拮抗菌株對盆栽沙地云杉立枯病的拮抗作用

林木病原真菌可以破壞植物細(xì)胞壁，產(chǎn)生有毒物質(zhì)抑制寄主生長。植物內(nèi)生真菌及其代謝產(chǎn)物可以有效抑制植物病原菌在寄主植物中的萌發(fā)和生長，提高植物感病后的保護(hù)酶活性，從而有效提高植物的抗病能力[20]。本研究中，接種沙地云杉內(nèi)生真菌的感病植株生長幅度均高于對照，說明內(nèi)生真菌可以有效抑制沙地云杉染病植株上的病原菌，提高植株抗病能力，促進(jìn)植物組織快速生長。此結(jié)果與鄧勛等[15]的木霉菌Trichoderma防治松苗立枯病的研究結(jié)果一致。

接種沙地云杉內(nèi)生真菌的感病植株丙二醛質(zhì)量摩爾濃度顯著低于對照組。丙二醛是一種由于質(zhì)膜過氧化作用而產(chǎn)生的錯誤的代謝產(chǎn)物，其含量越低，表示細(xì)胞膜通透性越低，即受損程度越弱。本研究結(jié)果表明：沙地云杉內(nèi)生真菌可以有效降低組織中丙二醛質(zhì)量摩爾濃度，有效保護(hù)細(xì)胞膜。本研究結(jié)果與張晶晶等[21]的研究結(jié)果一致。

接種沙地云杉內(nèi)生真菌的感病植株中的過氧化氫酶、過氧化物酶、超氧化物歧化酶的活性比對照表現(xiàn)出不同程度提升。3種酶是植物細(xì)胞膜保護(hù)酶，起到清除活性氧的重要作用。本研究結(jié)果表明：內(nèi)生真菌可以有效激發(fā)沙地云杉抗氧化酶(保護(hù)酶)的活性。余承忠等[22]研究認(rèn)為：病原菌致病性與內(nèi)生真菌提高寄主抗病能力顯著相關(guān)。這與本研究結(jié)果一致。

可溶性蛋白質(zhì)既是重要的營養(yǎng)物質(zhì)，更是關(guān)鍵的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。本次研究結(jié)果表明：沙地云杉內(nèi)生真菌可以增加可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)，調(diào)節(jié)組織細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)作用。此結(jié)果與MA等[23]的研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

以沙地云杉立枯病病原真菌為靶標(biāo)菌，4株沙地云杉內(nèi)生拮抗菌的發(fā)酵液均表現(xiàn)出良好的拮抗活性，菌株SDYS180發(fā)酵液的拮抗活性最高，SDYS95的菌株對峙拮抗活性最高，SDYS63的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物的拮抗活性最高。

4株沙地云杉內(nèi)生拮抗菌對盆栽沙地云杉立枯病均表現(xiàn)出不同程度的拮抗活性。從病苗形態(tài)指標(biāo)來看，SDYS180對盆栽沙地云杉立枯病的拮抗活性最高；從生理指標(biāo)來看，拮抗活性最高的是SDYS95。