• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    越南伯克霍爾德氏菌B418配合噻唑膦提高對黃瓜根結(jié)線蟲的防控效果

    2022-04-02 00:16:24扈進(jìn)冬魏艷麗王貽蓮劉寶軍李紀(jì)順
    中國蔬菜 2022年3期

    扈進(jìn)冬 魏艷麗 王貽蓮 劉寶軍 李紀(jì)順

    〔齊魯工業(yè)大學(xué)(山東省科學(xué)院)山東省科學(xué)院生態(tài)研究所,山東省應(yīng)用微生物重點實驗室,山東濟(jì)南 250103〕

    根結(jié)線蟲是世界上危害植物健康最嚴(yán)重的寄生線蟲之一,目前已知對5 500 多種植物的生長發(fā)育及生產(chǎn)構(gòu)成威脅,其中包括糧食作物、蔬菜作物及經(jīng)濟(jì)作物等(Trudgill &Blok,2001;Jones et al.,2013)。在我國南方根結(jié)線蟲()、花生根結(jié)線蟲()、爪哇線蟲()和北方根結(jié)線蟲()4 種根結(jié)線蟲分布比例最高(Castagnone-Sereno et al.,2013;Fan et al.,2020)。伴隨著我國保護(hù)地蔬菜的迅猛發(fā)展,黃瓜、番茄等根結(jié)線蟲危害日趨嚴(yán)重,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重?fù)p失。北方保護(hù)地黃瓜生產(chǎn)中根結(jié)線蟲以南方根結(jié)線蟲為主,一旦發(fā)生常導(dǎo)致黃瓜嚴(yán)重減產(chǎn),甚至絕產(chǎn),是影響黃瓜生產(chǎn)的重要病害之一(彭德良,1998;成惠珍 等,2004;賈美清和吳光紅,2011)。然而目前市場上可供選擇的殺線劑主要以噻唑膦、阿維菌素、棉隆為主,在很多地方已經(jīng)產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗藥性(劉曉艷 等,2021)。農(nóng)民為了防治根結(jié)線蟲病,實際的化學(xué)殺線劑使用量也逐漸增加,不但增加了防治成本,而且也易產(chǎn)生藥害、農(nóng)藥殘留和環(huán)境污染(紀(jì)春濤 等,2010;Davies &Spiegel,2011;Sergio,2011),同時,防治效果和產(chǎn)量也提高有限。由于化學(xué)防治的局限性,以及人們環(huán)境保護(hù)、食品安全意識的提高,生物防治已被認(rèn)為是化學(xué)防治的一種有益補充及替代方法。在生物防治措施中,微生物拮抗劑是一種很有前景的防治植物病害的生物制劑,也越來越受到人們的廣泛關(guān)注(Sharifazizi et al.,2017;Vega,2018)。目前已報道的植物寄生線蟲生防微生物資源有淡紫擬青霉251、堅強芽孢桿菌I-1582、厚垣輪枝孢ZK7(Li et al.,2015)、長枝木霉T6(Zhang et al.,2017)、橘綠木霉Snef 1910(Fan et al.,2020)、越南伯克霍爾德氏菌B418(陳凱 等,2011)等,其中多株優(yōu)良生防菌株已被開發(fā)為生物殺線劑產(chǎn)品。

    越南伯克霍爾德氏菌B418 是山東省科學(xué)院生態(tài)研究所環(huán)境微生物研究室保存的一株多功能生防菌株,除具備防治植物根結(jié)線蟲病的作用,還兼有解磷、解鉀、固氮、促生等功能,并已在農(nóng)業(yè)部登記為微生物肥料產(chǎn)品(王貽蓮 等,2014)。在以往的試驗中主要單獨使用,對線蟲的防治效果還不甚理想,因此本試驗擬通過小區(qū)試驗測定越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦使用對黃瓜根結(jié)線蟲的田間防治效果及產(chǎn)量的影響,為黃瓜根結(jié)線蟲病的科學(xué)防治提供新思路。

    1 材料與方法

    1.1 供試菌株和藥劑

    越南伯克霍爾德氏菌B418(CGMCC No.1212)由山東省科學(xué)院生態(tài)研究所環(huán)境微生物實驗室保存,液體發(fā)酵后制備成粉狀菌劑(活菌含量5 × 10cfu·g)備用。10%噻唑膦顆粒劑(河北三農(nóng)農(nóng)用化工有限公司產(chǎn)品)按1∶9 比例與細(xì)沙混合備用。

    1.2 土壤樣品采集與土壤DNA 提取

    2021 年在山東省泰安市岱岳區(qū)明泰農(nóng)豐科技(泰安市)有限公司大棚采集土壤樣品,該棚棚齡11 年,土壤類型為棕壤。試驗棚劃分小區(qū)后,每小區(qū)按照五點取樣法取樣,采集0~20 cm 的表層土,將5 點采集的土壤混合均勻作為1 個土樣。室溫條件下風(fēng)干,取500 g 風(fēng)干后土樣氣流粉碎機粉碎后稱取0.5 g 土壤樣品,利用DNeasy Power Soil DNA Isolation Kit(Qiagen,Valencia,CA)試劑盒,按照說明書提取土壤DNA,最終洗脫體積為100 μL,0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA 質(zhì)量和濃度后,用于土壤樣品中根結(jié)線蟲的熒光定量PCR檢測。

    1.3 熒光定量PCR 分析

    采用毛小芳等(2004)改良的貝爾曼漏斗法分離土壤中根結(jié)線蟲二齡幼蟲,并在顯微鏡下挑取1 000 條二齡幼蟲,提取線蟲基因組DNA,并將其梯度稀釋,制成1 000、100、10、1、0.1 條線蟲的標(biāo)準(zhǔn)品,根據(jù)南方根結(jié)線蟲的ITS區(qū)(NCBI FJ534 516.1)ITS1部分保守序列,設(shè)計南方根結(jié)線蟲特異性引物MIITS7-F(5′-CCAATTTAATCGCAGTGGCTTG)和MIITS 127-R1(5′-CGACAGCCGTTTCACAACAATA)進(jìn) 行PCR 擴增。依據(jù)循環(huán)閾值(Cq 值)與根結(jié)線蟲二齡幼蟲的對數(shù)值之間的線性關(guān)系,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。土壤樣品中根結(jié)線蟲的種群密度根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算獲得。

    qPCR 采用二步法,擴增反應(yīng)條件:95 ℃ 5 min;95 ℃ 30 s,65 ℃ 30 s,共40 個循環(huán);循環(huán)結(jié)束后,樣品加熱到95 ℃保持1 min,立刻降至60 ℃保持5 s,然后每5 s 提高0.5 ℃遞增到95 ℃,建立熔解曲線。qPCR 反應(yīng)體系(20 μL):10 μL 2× SG Fast qPCR Master Mix 預(yù)混液〔生工生物工程(上海)股份有限公司〕,20 μmol·L引物MIITS7-F和MIITS127-R1 各1 μL,DNF Buffer 2 μL,土壤DNA 樣品1 μL,超純水補足20 μL,每個土壤DNA 樣品3 次重復(fù)。

    1.4 防治黃瓜根結(jié)線蟲的田間試驗方案

    2020 年11 月至2021 年3 月在泰安市大汶口鎮(zhèn)北藤村多年連作種植的黃瓜棚,進(jìn)行黃瓜根結(jié)線蟲防治試驗,每茬黃瓜根結(jié)線蟲病株率在90%以上。供試黃瓜品種為金禾1912,購自山東金禾農(nóng)科種業(yè)有限公司。在黃瓜移栽前采用1.2 和1.3 的方法測定各小區(qū)土壤中根結(jié)線蟲的種群密度,并根據(jù)土壤中線蟲的種群密度將各小區(qū)分為線蟲輕度、中度和重度小區(qū)3 種類型,其中線蟲輕度小區(qū)8 個,中度小區(qū)8 個,重度小區(qū)4 個。小區(qū)面積13.5 m(9 m × 1.5 m),每小區(qū)定植60 株黃瓜。試驗共設(shè)置4 個處理:越南伯克霍爾德氏菌菌劑(每穴9 g)、10%噻唑膦顆粒劑(每穴3 g)、復(fù)合處理(越南伯克霍爾德氏菌菌劑每穴9 g+10%噻唑膦顆粒劑每穴3 g)和空白對照,每處理設(shè)置5 個小區(qū),2 個小區(qū)在線蟲輕度小區(qū),2 個在線蟲中度小區(qū),1 個在線蟲重度小區(qū),同一類型小區(qū)內(nèi)各處理完全隨機排列。在黃瓜定植時,先將越南伯克霍爾德氏菌菌劑和10%噻唑膦顆粒劑施入定植穴內(nèi),和定植穴內(nèi)土壤均勻混合后移栽黃瓜幼苗,定植后各小區(qū)管理操作一致,試驗期間不施用防治根結(jié)線蟲的其他藥劑。

    在黃瓜定植后60 d 每小區(qū)隨機挖取5 株黃瓜,參照Bridge 和Page(1980)的方法,對各處理根系樣品的根結(jié)進(jìn)行分級,并計算根結(jié)病情指數(shù)和防效(Wei et al.,2014),定植后105 d 將剩余黃瓜植株全部挖出,按前述方法進(jìn)行根系根結(jié)分級并計算根結(jié)病情指數(shù)和防效。在定植后60 d 和90 d 時分別對各小區(qū)進(jìn)行產(chǎn)量測定,每次測產(chǎn)連續(xù)測定3 d,然后將3 d 的產(chǎn)量之和作為1 次測產(chǎn)結(jié)果。定植后105 d 隨機選取5 株黃瓜,挖取植株根系,并用清水小心沖洗后晾干,記錄主根上分出的側(cè)根數(shù)量。

    1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

    采用Excel 2010 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、使用SPSS statistics 20.0 統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,不同處理樣品采用Duncan 新復(fù)極差法(<0.05)分析差異顯著性。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 小區(qū)土壤中根結(jié)線蟲的種群密度

    依據(jù)Cq 值與根結(jié)線蟲二齡幼蟲的對數(shù)值之間的線性關(guān)系,建立根結(jié)線蟲標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1)。并據(jù)此測定了田間試驗中不同處理的25 個小區(qū)土壤中根結(jié)線蟲的種群密度,圖2 顯示熔解峰單一表明qPCR 產(chǎn)物特異性好,結(jié)果可以較好地反映土壤中南方根結(jié)線蟲的種群數(shù)量。本試驗測定的小區(qū)中每1 kg土壤中的根結(jié)線蟲數(shù)量在15.8~408.4條之間,從25 個小區(qū)中選取20 個作為試驗小區(qū),選取每1 kg 土壤中的根結(jié)線蟲數(shù)量在0~50 條之間的小區(qū)定為線蟲輕度小區(qū)組,共8 個小區(qū);將每1 kg 土壤中的根結(jié)線蟲數(shù)量在51~200 條之間的小區(qū)定為線蟲中度小區(qū)組,共8 個小區(qū);將每1 kg 土壤中的根結(jié)線蟲數(shù)量在201~400 條之間的小區(qū)定為線蟲重度小區(qū)組,共4 個小區(qū)。

    圖1 南方根結(jié)線蟲數(shù)量對數(shù)值與Cq 值間的擬合曲線

    圖2 土壤基因組DNA 樣本qPCR 擴增的熔解曲線

    2.2 不同藥劑處理對黃瓜根結(jié)線蟲病的防效

    黃瓜定植后60 d 的測定結(jié)果表明(表1),在線蟲輕度、中度和重度小區(qū)中越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦處理的根結(jié)線蟲病情指數(shù)為1.06~5.20,對根結(jié)線蟲的平均防效達(dá)72.50%,與10%噻唑膦(平均防效68.47%)或單一越南伯克霍爾德氏菌B418 菌劑(平均防效63.29%)施用相比,防效有一定程度的提升,但差異不顯著(以單獨計算的線蟲輕度、中度和重度小區(qū)的防效作為重復(fù)進(jìn)行統(tǒng)計,下同)。

    黃瓜定植后105 d 的測定結(jié)果表明(表1),在線蟲輕度、中度和重度小區(qū)中越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦處理的根結(jié)線蟲病情指數(shù)為3.87~13.84,對根結(jié)線蟲的平均防效達(dá)63.99%,與10%噻唑膦(平均防效58.34%)或單一越南伯克霍爾德氏菌B418 菌劑(平均防效57.08%)施用相比,具有顯著的增效作用(<0.05)。

    2.3 不同藥劑處理對黃瓜產(chǎn)量的影響

    不同藥劑處理對黃瓜產(chǎn)量的影響如表2 所示,根據(jù)定植前土壤線蟲種群密度劃分的輕度小區(qū)、中度小區(qū)和重度小區(qū)之間黃瓜產(chǎn)量差異非常大。黃瓜定植后60 d 時測產(chǎn),線蟲重度小區(qū)對照產(chǎn)量為3.20 kg,低于3 種類型小區(qū)對照的平均產(chǎn)量(3.58 kg),而且重度小區(qū)的對照病情指數(shù)(15.42)也是3 種類型小區(qū)中最高的(表1),說明從定植后60 d開始根結(jié)線蟲已經(jīng)對黃瓜產(chǎn)量產(chǎn)生影響。至定植后90 d 時,線蟲重度小區(qū)對照的產(chǎn)量僅為0.65 kg,說明根結(jié)線蟲已嚴(yán)重影響產(chǎn)量。越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦處理則可以更好地降低根結(jié)線蟲對黃瓜產(chǎn)量造成的損失,在定植后60 d 時,越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦處理與對照相比增產(chǎn)48.10%~101.56%,在定植后90 d 時增產(chǎn)達(dá)95.65%~392.31%,其增產(chǎn)效果明顯優(yōu)于單一越南伯克霍爾德氏菌B418 或單一噻唑膦處理;在定植后60、90 d 時增產(chǎn)率分別較單一噻唑膦處理提高8.86~71.87 百分點和21.74~230.77 百分點,在線蟲重度小區(qū)增產(chǎn)尤為明顯。說明越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦處理具有協(xié)同增效作用,在防治根結(jié)線蟲病的同時能有效減少線蟲危害造成的黃瓜產(chǎn)量損失。

    表1 不同藥劑處理對黃瓜根結(jié)線蟲病情指數(shù)和防效的影響

    表2 不同藥劑處理對黃瓜產(chǎn)量的影響

    2.4 不同藥劑處理對黃瓜根系的影響

    在定植后105 d 時從不同處理組中隨機挑選5株黃瓜,如圖3 所示,越南伯克霍爾德氏菌B418配合噻唑膦處理的根系側(cè)根明顯增多。其中,對照平均側(cè)根數(shù)5.1 條·根,但根結(jié)數(shù)較多;噻唑膦處理雖然根結(jié)數(shù)比對照少但平均側(cè)根數(shù)僅為4.2 條·根;越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦處理的平均側(cè)根數(shù)則為10.4 條·根,同時根結(jié)數(shù)也比對照少;單一越南伯克霍爾德氏菌B418 處理平均側(cè)根數(shù)為6.2 條·根,根結(jié)數(shù)介于對照和越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦處理組之間。說明雖然噻唑膦處理可以有效防治根結(jié)線蟲,但同時也會影響植株的根系生長發(fā)育,從而影響黃瓜產(chǎn)量,而越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦處理則可以改善單一噻唑膦處理對植株生長的這種負(fù)面影響,有助于黃瓜產(chǎn)量的提高。

    圖3 定植后105 d 不同處理對黃瓜根系的影響

    3 結(jié)論與討論

    本試驗針對土壤中線蟲種群密度分布不均勻的問題,改進(jìn)了小區(qū)試驗的隨機區(qū)組設(shè)計,首先采用qPCR 測定了每個小區(qū)土壤中根結(jié)線蟲數(shù)量,并按土壤中根結(jié)線蟲的種群密度將小區(qū)劃分為線蟲輕度、中度、重度3 個不同等級;然后,再將不同處理隨機排列到不同等級小區(qū)中,病情指數(shù)和防效在同等級小區(qū)內(nèi)測定,克服了直接隨機排列可能出現(xiàn)的不同處理的小區(qū)線蟲種群密度差異大對結(jié)果造成的不利影響。以對照為例,從表1 的結(jié)果可以看出,2 個線蟲輕度小區(qū)黃瓜定植后105 d 時對照的病情指數(shù)為12.05 和25.28,而線蟲重度小區(qū)則為38.24,差距較大。這也說明即使在同一蔬菜大棚中,根結(jié)線蟲的發(fā)生也常不均一,呈島狀分布。所以,按土壤中根結(jié)線蟲的種群密度將小區(qū)劃分成不同等級,同等級小區(qū)之間進(jìn)行比較結(jié)果才更準(zhǔn)確。此外,紀(jì)春濤等(2010)發(fā)現(xiàn)化學(xué)殺線劑雖然可以減少線蟲對植株的為害,但也會對植株根系發(fā)育造成影響,從圖3 可以看出,噻唑膦處理后植株側(cè)根數(shù)量明顯比對照及使用生防菌劑的處理少,因此,植株營養(yǎng)吸收也會相應(yīng)減弱,表2 的產(chǎn)量結(jié)果也進(jìn)一步印證了上述結(jié)果,在黃瓜定植后90 d 時噻唑膦處理組產(chǎn)量明顯低于越南伯克霍爾德氏菌B418配合噻唑膦處理組,在線蟲重度小區(qū)上述趨勢尤為明顯。

    綜上所述,采用越南伯克霍爾德氏菌B418 配合噻唑膦防治黃瓜根結(jié)線蟲病,與單一噻唑膦處理或單一越南伯克霍爾德氏菌B418 處理相比,在不同線蟲種群密度小區(qū)中均顯示出更佳的防病和增產(chǎn)效果,具有協(xié)同增效作用,不但增強了對黃瓜根結(jié)線蟲病的防治效果,還促進(jìn)了植株根系發(fā)育,提高了黃瓜產(chǎn)量。

    草草在线视频免费看| 亚洲av成人av| 99热只有精品国产| 久久久久久久久大av| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 熟女电影av网| 身体一侧抽搐| 免费av不卡在线播放| 十八禁国产超污无遮挡网站| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 日韩av在线大香蕉| 色播亚洲综合网| 99国产精品一区二区蜜桃av| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 欧美成人一区二区免费高清观看| 久久亚洲真实| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 中文字幕熟女人妻在线| 嫩草影院新地址| 免费大片18禁| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 嫩草影院精品99| 久久久精品欧美日韩精品| 欧美性猛交黑人性爽| or卡值多少钱| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 天美传媒精品一区二区| 18禁在线播放成人免费| 超碰av人人做人人爽久久| 狠狠狠狠99中文字幕| 日韩欧美免费精品| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲五月婷婷丁香| 一本一本综合久久| 国产成人av教育| 91麻豆av在线| 国产精品久久电影中文字幕| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲不卡免费看| 亚洲第一电影网av| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产欧美日韩精品一区二区| 伦理电影大哥的女人| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲精品在线观看二区| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚州av有码| 久久久久久久午夜电影| 黄色视频,在线免费观看| 51午夜福利影视在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 国产av不卡久久| 乱人视频在线观看| 欧美成人a在线观看| 简卡轻食公司| 国产人妻一区二区三区在| 一级黄片播放器| 久久草成人影院| 色av中文字幕| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品电影一区二区三区| 久久久久久久久中文| 91在线观看av| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 日本成人三级电影网站| 全区人妻精品视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产一级毛片七仙女欲春2| 大型黄色视频在线免费观看| 男人舔奶头视频| 精品久久久久久,| 我的女老师完整版在线观看| 国产精品一及| 九色成人免费人妻av| 久久久久久久精品吃奶| АⅤ资源中文在线天堂| 久久久久久久午夜电影| 极品教师在线免费播放| 日本a在线网址| 欧美在线一区亚洲| 中国美女看黄片| 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产久久久一区二区三区| 日韩欧美国产在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 欧美一级a爱片免费观看看| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 成人精品一区二区免费| 日韩国内少妇激情av| 欧美三级亚洲精品| 午夜免费成人在线视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲,欧美精品.| 乱人视频在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产亚洲欧美98| 色视频www国产| 中文字幕免费在线视频6| 成年女人永久免费观看视频| www.熟女人妻精品国产| 又紧又爽又黄一区二区| 婷婷色综合大香蕉| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 天美传媒精品一区二区| 国产精品女同一区二区软件 | 一级毛片久久久久久久久女| 欧美日韩乱码在线| 一个人观看的视频www高清免费观看| 日本一二三区视频观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产精品野战在线观看| 特级一级黄色大片| 在线天堂最新版资源| 人人妻人人澡欧美一区二区| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 变态另类丝袜制服| 一个人免费在线观看电影| 久久午夜福利片| 给我免费播放毛片高清在线观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久久久免费精品人妻一区二区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | www日本黄色视频网| 99热只有精品国产| 两个人视频免费观看高清| a在线观看视频网站| 久久久国产成人精品二区| 禁无遮挡网站| 老鸭窝网址在线观看| 51国产日韩欧美| 如何舔出高潮| 级片在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 永久网站在线| av国产免费在线观看| 免费高清视频大片| 俄罗斯特黄特色一大片| 一边摸一边抽搐一进一小说| 色视频www国产| 淫妇啪啪啪对白视频| 免费看光身美女| 成人毛片a级毛片在线播放| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲内射少妇av| 国产伦人伦偷精品视频| 一区二区三区免费毛片| 最新在线观看一区二区三区| 九色国产91popny在线| 免费看光身美女| 国产高清视频在线播放一区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 欧美性猛交黑人性爽| 免费搜索国产男女视频| 可以在线观看的亚洲视频| 国产成人欧美在线观看| 丁香六月欧美| 欧美日韩综合久久久久久 | 亚洲一区二区三区不卡视频| 婷婷精品国产亚洲av| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲美女视频黄频| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲成av人片免费观看| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲精品在线美女| 草草在线视频免费看| 亚洲av成人av| 高清日韩中文字幕在线| 色综合站精品国产| АⅤ资源中文在线天堂| 毛片一级片免费看久久久久 | 91麻豆精品激情在线观看国产| 亚洲国产欧美人成| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 极品教师在线视频| netflix在线观看网站| 亚洲成人久久性| 黄色女人牲交| 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 中文亚洲av片在线观看爽| 久久国产乱子免费精品| 久久久久久大精品| 精品久久久久久久末码| 国产视频内射| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 九九在线视频观看精品| 男人舔女人下体高潮全视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲成人久久爱视频| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 在线观看免费视频日本深夜| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲av.av天堂| 日韩欧美免费精品| 午夜激情欧美在线| 99热精品在线国产| 国语自产精品视频在线第100页| 日韩免费av在线播放| 国产高清视频在线观看网站| 十八禁人妻一区二区| 午夜福利成人在线免费观看| 搞女人的毛片| 国产乱人视频| 欧美精品国产亚洲| 日韩高清综合在线| 成年女人毛片免费观看观看9| 午夜日韩欧美国产| 久久精品91蜜桃| eeuss影院久久| 亚洲国产欧美人成| 成人av在线播放网站| 国产大屁股一区二区在线视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| 2021天堂中文幕一二区在线观| 精品久久国产蜜桃| 亚洲最大成人手机在线| 最近最新中文字幕大全电影3| 免费无遮挡裸体视频| 91av网一区二区| 久久久久久久午夜电影| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲男人的天堂狠狠| 欧美+日韩+精品| 日本免费一区二区三区高清不卡| 色吧在线观看| 亚洲精华国产精华精| 成人亚洲精品av一区二区| 一个人看视频在线观看www免费| 久久欧美精品欧美久久欧美| 床上黄色一级片| 午夜精品在线福利| 最近最新中文字幕大全电影3| 一级黄色大片毛片| 亚洲美女视频黄频| 亚洲黑人精品在线| 黄色丝袜av网址大全| av天堂中文字幕网| 久久这里只有精品中国| 午夜福利在线观看吧| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 一本综合久久免费| av在线观看视频网站免费| 90打野战视频偷拍视频| 少妇人妻精品综合一区二区 | 久久99热6这里只有精品| 窝窝影院91人妻| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 一二三四社区在线视频社区8| 能在线免费观看的黄片| 亚洲成av人片在线播放无| 久久精品国产自在天天线| a在线观看视频网站| 男女那种视频在线观看| 国产老妇女一区| 99久久精品热视频| 最近中文字幕高清免费大全6 | 国产高清有码在线观看视频| 婷婷色综合大香蕉| 美女大奶头视频| 乱人视频在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 在线国产一区二区在线| 国产野战对白在线观看| 90打野战视频偷拍视频| x7x7x7水蜜桃| 九色国产91popny在线| 亚洲一区二区三区不卡视频| 亚洲真实伦在线观看| a级毛片免费高清观看在线播放| 一进一出抽搐动态| 欧美最黄视频在线播放免费| 悠悠久久av| 亚洲av电影在线进入| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲无线观看免费| 国产精品影院久久| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美丝袜亚洲另类 | 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 黄色女人牲交| 久久午夜福利片| 级片在线观看| 不卡一级毛片| 免费高清视频大片| 欧美乱妇无乱码| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲自偷自拍三级| 国产成人av教育| 亚洲欧美日韩东京热| 美女大奶头视频| 丝袜美腿在线中文| 最近最新中文字幕大全电影3| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久人人爽人人爽人人片va | 亚洲中文日韩欧美视频| 国产一区二区三区视频了| 波多野结衣高清作品| 麻豆成人午夜福利视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 成年女人毛片免费观看观看9| 一个人看的www免费观看视频| 久久久久久久久大av| 99精品久久久久人妻精品| netflix在线观看网站| 热99在线观看视频| 日韩欧美免费精品| 成熟少妇高潮喷水视频| 欧美区成人在线视频| 97超视频在线观看视频| 国产成人av教育| 免费看光身美女| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲欧美清纯卡通| 午夜视频国产福利| 亚洲欧美日韩无卡精品| 日韩av在线大香蕉| 精品久久久久久久久久免费视频| 一进一出抽搐gif免费好疼| 偷拍熟女少妇极品色| 国产久久久一区二区三区| 色哟哟哟哟哟哟| 我要看日韩黄色一级片| 99热这里只有精品一区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 一级黄片播放器| 亚洲,欧美,日韩| 免费电影在线观看免费观看| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 午夜老司机福利剧场| 麻豆一二三区av精品| 成人三级黄色视频| 日韩欧美精品免费久久 | 91麻豆精品激情在线观看国产| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲,欧美,日韩| 宅男免费午夜| 无人区码免费观看不卡| 国产精品亚洲美女久久久| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 99在线视频只有这里精品首页| 99久久99久久久精品蜜桃| 在线观看一区二区三区| 毛片女人毛片| 91在线观看av| 日韩欧美一区二区三区在线观看| av女优亚洲男人天堂| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 色吧在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 欧美激情国产日韩精品一区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产亚洲精品久久久com| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 成人三级黄色视频| 青草久久国产| 看黄色毛片网站| 搡老岳熟女国产| 男插女下体视频免费在线播放| 18+在线观看网站| 热99在线观看视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 免费av观看视频| 美女黄网站色视频| 国内精品久久久久久久电影| 亚洲av五月六月丁香网| 九色成人免费人妻av| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲无线在线观看| 国产精品久久电影中文字幕| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 观看美女的网站| 亚洲在线自拍视频| 午夜免费成人在线视频| 最后的刺客免费高清国语| 国产精品不卡视频一区二区 | 亚洲精品456在线播放app | 日本黄大片高清| 两个人视频免费观看高清| 精品国内亚洲2022精品成人| 午夜福利欧美成人| 真人一进一出gif抽搐免费| 国内精品一区二区在线观看| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久热精品热| 日韩欧美精品免费久久 | 我要搜黄色片| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲自拍偷在线| 真人一进一出gif抽搐免费| 婷婷亚洲欧美| 色综合站精品国产| 黄色丝袜av网址大全| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产精品亚洲美女久久久| 在线免费观看的www视频| 美女高潮的动态| 不卡一级毛片| 一区二区三区四区激情视频 | 亚洲经典国产精华液单 | 国产精品不卡视频一区二区 | 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 免费看光身美女| 丰满乱子伦码专区| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 久久人人精品亚洲av| 欧美乱妇无乱码| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 精品国产亚洲在线| 18美女黄网站色大片免费观看| 亚洲无线观看免费| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲不卡免费看| 精品人妻视频免费看| 久久午夜亚洲精品久久| 国内精品一区二区在线观看| 有码 亚洲区| 久久精品国产亚洲av天美| 一区二区三区高清视频在线| 久久6这里有精品| 天堂网av新在线| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 欧美日韩乱码在线| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 成年女人毛片免费观看观看9| 久久久久九九精品影院| 在线观看舔阴道视频| 一二三四社区在线视频社区8| 国产av一区在线观看免费| 精华霜和精华液先用哪个| 成人性生交大片免费视频hd| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 一本综合久久免费| 国产精品久久久久久精品电影| 欧美黄色淫秽网站| 日韩欧美 国产精品| 日本 欧美在线| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲三级黄色毛片| 久久中文看片网| 亚洲美女搞黄在线观看 | 亚洲第一电影网av| 国产野战对白在线观看| 久9热在线精品视频| 在线观看免费视频日本深夜| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 观看免费一级毛片| 一进一出好大好爽视频| 人妻久久中文字幕网| 成人国产一区最新在线观看| 男人和女人高潮做爰伦理| 一个人看的www免费观看视频| av在线天堂中文字幕| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久久久久久久大av| 免费看日本二区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 日韩有码中文字幕| 1000部很黄的大片| 最近最新免费中文字幕在线| 在线播放无遮挡| 国产成人福利小说| 中文字幕久久专区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产av在哪里看| 热99re8久久精品国产| 1000部很黄的大片| 国产亚洲精品久久久com| 国产毛片a区久久久久| av在线天堂中文字幕| 少妇的逼水好多| 国产av不卡久久| 男女那种视频在线观看| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 无人区码免费观看不卡| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99在线视频只有这里精品首页| 精品国产亚洲在线| 在线观看午夜福利视频| 免费无遮挡裸体视频| 色播亚洲综合网| 黄色配什么色好看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 免费高清视频大片| 亚洲在线自拍视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产综合懂色| 丰满人妻一区二区三区视频av| 老女人水多毛片| 色吧在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲av.av天堂| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产精品av视频在线免费观看| 久久精品国产亚洲av天美| 婷婷六月久久综合丁香| 校园春色视频在线观看| 欧美bdsm另类| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 免费观看人在逋| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产精品久久电影中文字幕| 我的老师免费观看完整版| 亚洲五月天丁香| 国产精品久久久久久久电影| 美女cb高潮喷水在线观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 精品久久久久久成人av| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美最新免费一区二区三区 | 成年免费大片在线观看| 精品国产亚洲在线| 免费看美女性在线毛片视频| 18+在线观看网站| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲精品在线美女| 久久久色成人| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 一进一出抽搐动态| 神马国产精品三级电影在线观看| 一级黄片播放器| 亚洲美女黄片视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 丁香欧美五月| 久久草成人影院| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲人成网站在线播| 国产高清激情床上av| 高清在线国产一区| 精品乱码久久久久久99久播| 成人美女网站在线观看视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 成人欧美大片| 亚洲av电影在线进入| 国产伦一二天堂av在线观看| 51午夜福利影视在线观看| 精品福利观看| 成人无遮挡网站| 全区人妻精品视频| 性色avwww在线观看| 不卡一级毛片| 久99久视频精品免费| 婷婷精品国产亚洲av在线| 首页视频小说图片口味搜索| 婷婷色综合大香蕉| 在线播放国产精品三级| 欧美黄色片欧美黄色片| av专区在线播放| 露出奶头的视频| 内射极品少妇av片p| 久久6这里有精品| 又紧又爽又黄一区二区| 国产真实乱freesex| 99久久99久久久精品蜜桃| 制服丝袜大香蕉在线| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲黑人精品在线| 午夜两性在线视频| 一级作爱视频免费观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 99久国产av精品| www.色视频.com| 国产综合懂色| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产精品野战在线观看| 制服丝袜大香蕉在线| 国产探花极品一区二区| 精品久久久久久久末码| 亚洲第一区二区三区不卡| 男插女下体视频免费在线播放| ponron亚洲| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| av在线老鸭窝| a级毛片免费高清观看在线播放| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产高清视频在线播放一区|