產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶腸桿菌科細(xì)菌的分離、分布情況及耐藥特點(diǎn)研究

全紅

【摘要】 目的：探討產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）腸桿菌科細(xì)菌的分離、分布情況及耐藥特點(diǎn)。方法：選取2019年1月-2020年1月佳木斯市中心醫(yī)院感染科送檢的各類標(biāo)本129份，對(duì)標(biāo)本中的細(xì)菌進(jìn)行分離、培養(yǎng)、鑒定，并進(jìn)行藥敏性試驗(yàn)。對(duì)產(chǎn)ESBLs腸桿菌的檢出率、分布情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較，并對(duì)藥敏結(jié)果特點(diǎn)進(jìn)行綜合評(píng)估。結(jié)果：129份感染標(biāo)本中，共檢出各類菌株145株，其中產(chǎn)ESBLs腸桿菌92株，檢出率63.45%，其中產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌57株，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌35株。分布情況：產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌以引流液為主，科室分布以外科為主;產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌以痰液為主，科室以內(nèi)科為主。耐藥性：產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對(duì)美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、氨曲南、萬(wàn)古霉素等耐藥率低，對(duì)頭孢菌素、青霉素類抗生素高度耐藥。結(jié)論：在臨床感染疾病中產(chǎn)ESBLs腸桿菌有較高的發(fā)病率，其中以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌為主，菌株標(biāo)本來(lái)源及科室分布呈現(xiàn)規(guī)律性。對(duì)青霉素、頭孢菌素等多數(shù)抗菌藥高度耐藥，對(duì)碳青霉烯類抗生素敏感，臨床應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理選用抗菌藥物進(jìn)行治療。

【關(guān)鍵詞】 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶 腸桿菌科細(xì)菌 分布情況 耐藥特點(diǎn)

Analysis of Isolation， Distribution and Characteristics of Drug Resistance of Producing Extended Spectrum β-lactamase Enterobacter/QUAN Hong. //Medical Innovation of China， 2022， 19（05）： -172

[Abstract] Objective： To study the isolation， distribution and drug resistance characteristics of producing extended spectrum β-lactamase （ESBLs） Enterobacter. Method： A total of 129 specimens of various types submitted for inspection by the Department of Infectious Diseases of our hospital from January 2019 to January 2020 were selected to isolate， culture， and identify bacteria in the specimens， and conduct drug susceptibility tests. The detection rate and distribution of producing ESBLs Enterobacter were statistically compared， and the characteristics of drug susceptibility results were comprehensively evaluated. Result： A total of 145 strains of various strains were detected in 129 infected specimens， of which 92 strains of ESBLs-producing Enterobacter， with a detection rate of 63.45%， of which 57 strains of producing ESBLs Escherichia coli and 35 strains of producing ESBLs Klebsiella pneumoniae. Distribution： producing ESBLs Escherichia coli was dominated by drainage fluid， the distribution of departments was dominated by surgery， producing ESBLs Klebsiella pneumoniae was dominated by sputum， and departments were dominated by internal medicine. Resistance： producing ESBLs Escherichia coli and producing ESBLs Klebsiella pneumoniae had low resistance rates to Meropenem， Imipenem， Amikacin， Aztreonam， Vancomycin， etc.， and high resistant to Cephalosporins and Penicillin antibiotics. Conclusion： Producing ESBLs Enterobacter has a high incidence rate in clinical infectious diseases， among which Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae are the main ones， the source of strains and the distribution of the departments show regularity. It is highly resistant to most antibacterial drugs such as Penicillin and Cephalosporin， and is sensitive to carbapenem antibiotics， the clinical application of antibacterial drugs should be based on the results of drug sensitivity.

[Key words] Extended spectrum β-lactamase Enterobacteriaceae Distribution Characteristics of drug resistance

First-author’s address： Jiamusi Center Hospital， Heilongjiang Province， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.05.042

近些年隨著抗菌藥物的不斷增多，以及致病微生物的物種不斷復(fù)雜化，加之抗生素的濫用情況加劇，使得耐藥菌株的種類和數(shù)量也在不斷增多[1]。其中超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（extended spectrum β-lactamases，ESBLs）腸桿菌引起的耐藥現(xiàn)象最為嚴(yán)重。ESBLs是以滅活窄譜和廣譜頭孢菌素、單環(huán)類抗生素及抗革蘭陰性桿菌青霉素等抗生素為特征的β-內(nèi)酰胺酶，可通過(guò)與各種抗生素結(jié)合靶位的改變，使抗生素作用下降[2-3]。近些年產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的耐藥性也在不斷發(fā)生變化，從單純的院內(nèi)感染發(fā)展到社區(qū)獲得性感染，從以往的單純耐藥發(fā)展為多重耐藥，其中以產(chǎn)ESBLs腸桿菌的耐藥情況最為嚴(yán)重[4]。產(chǎn)ESBLs腸桿菌的出現(xiàn)不利于患者感染性疾病的抗感染治療，若在治療期間錯(cuò)誤的選擇抗菌藥物將可能進(jìn)一步惡化患者腸桿菌的耐藥情況[5-6]。因此，為了更好地控制產(chǎn)ESBLs腸桿菌在院內(nèi)、院外的傳播和流行，以及在治療過(guò)程中合理選取敏感的抗菌藥物進(jìn)行針對(duì)性的治療，有著重要的臨床實(shí)踐意義[7]。為此，對(duì)佳木斯市中心醫(yī)院近期感染可送檢的各類標(biāo)本進(jìn)行產(chǎn)ESBLs腸桿菌的分離和檢出，并深入分析產(chǎn)ESBLs腸桿菌的耐藥情況，以期為臨床選用合理的抗生素治療方案提供參考依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月-2020年1月佳木斯市中心醫(yī)院感染科送檢的各類標(biāo)本129份。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①標(biāo)本均來(lái)自本院住院患者;②采集標(biāo)本的患者均有發(fā)熱、滲出等感染癥狀;③每例患者均采集一份相應(yīng)的標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè);④入組前未采取相應(yīng)的治療措施干預(yù);⑤精神狀態(tài)良好，能配合本研究。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①已經(jīng)明確感染的致病菌種類的患者;②基礎(chǔ)資料、臨床檢測(cè)資料不完整;③其他未完成調(diào)查研究的各種情況。本研究已經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書(shū)。129例患者中，男65例，女64例;年齡34～76歲，平均（56.34±9.88）歲;體質(zhì)指數(shù)（body mass index，BMI）18～26 kg/m，平均（22.81±2.76） kg/m;標(biāo)本類型：血液23份，尿液32份，痰液31份，引流液27份，傷口分泌物16份;標(biāo)本來(lái)源科室：內(nèi)科34份，外科43份，婦產(chǎn)科9份，ICU 19份，腫瘤科18份，其他科室6份。

1.2 方法 病原菌培養(yǎng)按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的相關(guān)要求進(jìn)行，所取標(biāo)本置于滅菌容器中，立即送檢進(jìn)行細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。將標(biāo)本接種于血瓊脂培養(yǎng)基上，置于LHS-150型恒溫培養(yǎng)箱（上海坤天科學(xué)儀器廠）中進(jìn)行分離培養(yǎng)24～48 h。菌株分類后采用HX-21A型多功能細(xì)菌鑒定儀（上海銘遠(yuǎn)實(shí)業(yè)有限公司）進(jìn)行鑒定，所采用的質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603。并進(jìn)一步對(duì)產(chǎn)ESBLs進(jìn)行鑒定，鑒定方法為在分離后的菌株中加入克拉維酸與不加克拉維酸的抑菌圈相差≥5 mm時(shí)即可判斷為產(chǎn)ESBLs陽(yáng)性菌株。最后根據(jù)菌株分離鑒定結(jié)果，統(tǒng)計(jì)產(chǎn)ESBLs腸桿菌檢出率，以及對(duì)應(yīng)標(biāo)本的類型、科室來(lái)源等進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

采用梅里埃VITEK 2 Compact型全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（北京蘭伯瑞生物技術(shù)有限公司）進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，選用本院常用的抗菌藥物青霉素鈉、頭孢哌酮、氨芐西林、頭孢呋辛、哌拉西林、頭孢唑林、阿米卡星、慶大霉素、萬(wàn)古霉素、美羅培南、呋喃妥因、氨曲南、亞胺培南、伏立康唑、兩性霉素B、氟康唑等進(jìn)藥敏試驗(yàn)，檢查方法為紙片瓊脂擴(kuò)散法。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 21.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示。

2 結(jié)果

2.1 產(chǎn)ESBLs腸桿菌檢出情況 129份感染標(biāo)本中，共檢出各類菌株145株，其中產(chǎn)ESBLs腸桿菌92株，檢出率63.45%，其中產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌57株，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌35株，見(jiàn)表1。

2.2 產(chǎn)ESBLs腸桿菌標(biāo)本類型分布情況 產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌標(biāo)本以引流液為主，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌標(biāo)本以痰液為主，見(jiàn)表2。

2.3 產(chǎn)ESBLs腸桿菌標(biāo)本科室來(lái)源分布情況 產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌科室分布以外科為主，依次為外科、內(nèi)科、ICU、腫瘤科、婦產(chǎn)科、其他科室;產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌科室以內(nèi)科為主，依次為內(nèi)科、外科、ICU、腫瘤科、婦產(chǎn)科、其他科室。見(jiàn)表3。

2.4 產(chǎn)ESBLs腸桿菌耐藥特點(diǎn) 產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對(duì)美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、氨曲南、萬(wàn)古霉素等耐藥率低，對(duì)頭孢菌素、青霉素類抗生素高度耐，見(jiàn)表4。

3 討論

產(chǎn)ESBLs腸桿菌耐藥問(wèn)題是抗感染治療中最為嚴(yán)重的一類細(xì)菌耐藥問(wèn)題，是由普通的β內(nèi)酰胺酶基因突變而來(lái)，耐藥性較常規(guī)的β內(nèi)酰胺酶更為嚴(yán)重，突出表現(xiàn)為耐藥的抗生素種類數(shù)量較多以及多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，其耐藥的機(jī)制主要是通過(guò)ESBLs使得抗菌藥物與致病菌結(jié)合靶位的改變，進(jìn)而使得抗菌藥物殺菌和抑菌作用大大下降，另外ESBLs還可使得抗菌藥物不能有效穿透細(xì)菌的細(xì)胞壁，阻斷其與細(xì)菌的結(jié)合過(guò)程[8-10]。近些年隨著抗生素藥物的濫用加劇以及細(xì)菌等致病微生物譜系的變化，產(chǎn)ESBLs腸桿菌的耐藥情況愈加嚴(yán)重，已成為感染科治療研究的重點(diǎn)方向[11-12]。因此，對(duì)于產(chǎn)ESBLs腸桿菌的分離、鑒定、分布及耐藥性特點(diǎn)的研究，有助于掌握產(chǎn)ESBLs腸桿菌的感染規(guī)律，為臨床產(chǎn)ESBLs腸桿菌感染的抗菌治療提供參考[13]。

在本研究中通過(guò)129份各類感染標(biāo)本進(jìn)行菌株培養(yǎng)和分離鑒定，共檢出各類菌株145株，其中產(chǎn)ESBLs腸桿菌92株，檢出率63.45%，其中產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌57株，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌35株。表明產(chǎn)ESBLs腸桿菌有較高的發(fā)病率，與既往臨床報(bào)道的結(jié)果基本一致[14-15]，需引起臨床感染科醫(yī)師的高度重視。在產(chǎn)ESBLs腸桿菌標(biāo)本類型分布中，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌以引流液為主，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌以痰液為主。在產(chǎn)ESBLs腸桿菌標(biāo)本科室來(lái)源分布中，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌以科室分布以外科為主，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌科室以內(nèi)科為主[16-17]，這與本院臨床治療情況基本吻合，這是因?yàn)榇竽c埃希菌主要以腸道感染和腸道外的外傷術(shù)口感染為主，而本院外科收治的大部分是住院接受手術(shù)治療的患者，術(shù)后均進(jìn)行術(shù)后引流，而這類手術(shù)患者通常在圍術(shù)期使用了預(yù)防性或治療性的抗菌藥物，加重了患者出現(xiàn)耐藥的可能性，因此在引流液中檢出較多的產(chǎn)ESBLs腸桿菌[18-19]。肺炎克雷伯菌是呼吸道和腸道中的常見(jiàn)菌，機(jī)體抵抗力降低時(shí)，便經(jīng)呼吸道進(jìn)入肺內(nèi)而引起大葉或小葉融合性實(shí)變，因此較多的在痰液中檢出，多以接受藥物治療內(nèi)科呼吸系統(tǒng)疾病患者為主[20-21]。在藥敏性結(jié)果中，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對(duì)美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、氨曲南、萬(wàn)古霉素等耐藥率低，對(duì)頭孢菌素、青霉素類抗生素高度耐藥，與既往臨床報(bào)道的耐藥特點(diǎn)基本吻合[22-23]，表明對(duì)于產(chǎn)ESBLs腸桿菌的治療首選碳青霉烯類抗菌藥物。產(chǎn)ESBLs腸桿菌對(duì)青霉素和頭孢菌素類的高度耐藥，充分體現(xiàn)了這類細(xì)菌有較強(qiáng)的產(chǎn)ESBLs能力，這些產(chǎn)酶的菌株可以在同種或異種菌間通過(guò)質(zhì)粒發(fā)生傳遞，從而使耐藥菌株廣泛傳播與流行，增強(qiáng)了對(duì)青霉素、頭孢菌素等抗菌藥物活性的抑制，呈現(xiàn)高度廣譜的多藥耐藥機(jī)制。因此，根據(jù)產(chǎn)ESBLs腸桿菌耐藥特點(diǎn)的分析，對(duì)于此類患者的抗菌治療可經(jīng)驗(yàn)性選用碳青霉烯類抗生素進(jìn)行治療，同時(shí)還應(yīng)繼續(xù)加強(qiáng)對(duì)患者病原菌分布和抗生素耐藥性的監(jiān)測(cè)，以防耐藥菌株的出現(xiàn)，并及時(shí)調(diào)整抗菌藥物的治療方案[24-25]。

綜上所述，在臨床感染疾病中產(chǎn)ESBLs腸桿菌有較高的發(fā)病率，其中以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌為主，菌株標(biāo)本來(lái)源及科室分布呈現(xiàn)規(guī)律性。對(duì)青霉素、頭孢菌素等多數(shù)抗菌藥高度耐藥，對(duì)碳青霉烯類抗生素敏感，臨床應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理選用抗菌藥物進(jìn)行治療。

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（收稿日期：2021-06-04） （本文編輯：程旭然）