多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)方法在自身免疫性疾病診斷中的臨床意義

陳振興 甄廣懷 李新亮 馬碧藍(lán) 黃 秀

臺(tái)山市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 (廣東 臺(tái)山 529200)

自身免疫性疾病在臨床中并不少見[1-2]，此類疾病患者的血清中通常能夠檢測(cè)到高滴度的自身抗體，通過檢測(cè)自身抗體，可對(duì)疾病的活動(dòng)過程、療效進(jìn)行判斷[3]。但自身抗體的存在并不意味著受檢者存在自身免疫性疾病，尤其是在無自身免疫性疾病的老年群體中也可檢測(cè)到自身抗體。臨床認(rèn)為自身抗原的出現(xiàn)、免疫調(diào)節(jié)異常、交叉抗原、遺傳等因素是導(dǎo)致自身免疫性疾病發(fā)生的重要原因[4]，臨床上一般結(jié)合臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查對(duì)自身免疫性疾病進(jìn)行診斷，但是單一抗體檢測(cè)的敏感性、特異性有較大的差異存在，會(huì)導(dǎo)致誤診、漏診等情況的發(fā)生，因此本文對(duì)多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)的診斷效果進(jìn)行觀察分析，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料本研究時(shí)間段為2019年1月至2020年6月，所擇取的研究對(duì)象為本院收治的患者116例。其中，男60例，女56例；年齡為18～72歲，平均年齡(44.85±6.28)歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：既往無自身免疫性疾病史者；進(jìn)期為接受過手術(shù)或放療治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)：近期使用過可能影響檢查結(jié)果的藥物者；存在怠慢性感染性疾病、血液系統(tǒng)疾病的患者；存在精神心理障礙的患者。

1.2 方法檢測(cè)方法：抽取所有患者早晨空腹?fàn)顟B(tài)下的靜脈血4mL，以每分鐘3500轉(zhuǎn)的速度進(jìn)行離心處理，時(shí)間為5min，分離出血清，應(yīng)用間接免疫熒光法測(cè)定抗核抗體(ANA)、抗雙鏈DNA抗體(dsDNA)，免疫狀態(tài)指數(shù)(ISR)在1.10及以上判定為陽性。應(yīng)由免疫印跡法測(cè)定ENA抗體，質(zhì)控區(qū)為膜條字母段第一段區(qū)域，若黑色質(zhì)控帶之外的其余膜條包被抗原的部位為線性黑色，則表明為陽性?？笴CP抗體應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測(cè)，其中抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體＞5.0IU/ml說明結(jié)果為陽性?？垢稍锞C合征抗原A抗體(SSA)、抗干燥綜合征抗原B抗體(SSB)、抗Smith抗體(Sm)、抗Scl-70、抗小分子細(xì)胞核核糖核蛋白抗體(U1RNP)應(yīng)用斑點(diǎn)法進(jìn)行檢測(cè)，以膜條上各抗原帶著色的深淺判斷檢查結(jié)果。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn)(1)觀察不同性別多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)的自身免疫性疾病陽性檢出率。(2)多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果。(3)單一抗體檢測(cè)自身免疫性疾病的結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法運(yùn)用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同性別的陽性檢出率116例患者中接受多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)的患者中，共檢測(cè)出54例(46.55%)呈陽性的患者，男女之間的陽性率進(jìn)行比較存在較大差異(χ2=29.037，P=0.001)，如表1所示。

表1 不同性別的陽性檢出率

2.2 多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果54例陽性患者中，共有非自身免疫性疾病患者20例(37.04%)，自身免疫性疾病患者檢出34例(62.96%)，自身免疫性疾病檢出率比非自身免疫性疾病檢出率高，數(shù)據(jù)對(duì)比差異較大(χ2=7.259，P=0.007)，如表2所示。

表2 多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果

2.3 單一抗體檢測(cè)自身免疫性疾病的結(jié)果34例自身免疫性疾病患者的單一檢測(cè)的結(jié)果如表3所示，SLE患者中的ANA抗體陽性率最高，RA患者中的抗CCP抗體陽性率最高，MCTD患者的ANA抗體、抗U1RNP抗體陽性率最高，SS的ANA抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體陽性率最高。

表3 對(duì)比單一抗體檢測(cè)自身免疫性疾病的結(jié)果[n(%)]

3 討 論

自身免疫性疾病患者的體內(nèi)能夠根據(jù)正常細(xì)胞的不同成分產(chǎn)生自身抗體[5]，其經(jīng)過現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)部分自身抗體同部分特定的疾病之間存在相關(guān)性，人體中的自身抗體是判斷自身免疫性疾病的重要標(biāo)志[6]，并在人體中高滴度存在，可對(duì)疾病的活動(dòng)性進(jìn)行反映。自身免疫性疾病的譜型廣且自身抗體比較多樣化，臨床癥狀表現(xiàn)比較復(fù)雜多樣，因此臨床檢測(cè)存在一定的難度[7]。以往臨床中在結(jié)合臨床癥狀表現(xiàn)的同時(shí)應(yīng)用抗dsDNA抗體進(jìn)行鑒別診斷，發(fā)現(xiàn)單一抗體檢測(cè)的診斷效能有著區(qū)別，會(huì)影響臨床醫(yī)生對(duì)疾病的判斷，故需要聯(lián)合多種自身抗體進(jìn)行檢測(cè)，以減小或避免檢測(cè)誤差。

SLE、RA、MCTD、SS是比較常見的自身免疫性疾病[8]，其中SLE在青年女性中多發(fā)，并會(huì)累及到多個(gè)臟器，該病的發(fā)生同遺傳、環(huán)境、內(nèi)分泌、感染、免疫異常等多種因素相關(guān)，另外在補(bǔ)體的參與下會(huì)導(dǎo)致急慢性炎癥或組織壞死情況的發(fā)生，或自身抗體直接與組織細(xì)胞抗原發(fā)生作用，破壞系統(tǒng)，損害機(jī)體多個(gè)系統(tǒng)；目前臨床上尚未完全明確RA的發(fā)病機(jī)制，但認(rèn)會(huì)出現(xiàn)明顯的病理改變，入軟骨及骨組織的破壞等，且在女性中多發(fā)；MCTD是指同時(shí)或不同時(shí)存在SLE、RA、SS、多發(fā)性肌炎(PM)等疾病的混合表現(xiàn)，血中可檢測(cè)到高滴度效價(jià)的斑點(diǎn)型ANA以及高滴度的U1RNP抗體；SS亦多發(fā)于女性中，同時(shí)在血清中能夠檢測(cè)到多種自身抗體，可發(fā)現(xiàn)高免疫球蛋白血癥。一種自身免疫性疾病能夠檢測(cè)出多種自身抗體，一種抗核抗體在多種疾病患者中存在，提示臨床醫(yī)師需要根據(jù)多項(xiàng)指數(shù)的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，并綜合病史、臨床變現(xiàn)等充分考慮。

本研究中共涉及到8個(gè)自身抗體，其中ANA抗體是由細(xì)胞核內(nèi)DNA、RNA、蛋白質(zhì)分子或復(fù)合物產(chǎn)生的自身抗體[9-10]，其能夠?qū)Ω鞣N細(xì)胞核組分進(jìn)行識(shí)別，在較多自身免疫性疾病中特征性存在。受到檢測(cè)方法敏感度差異性的影響，ANA的陽性率同dsDNA的陽性率難以實(shí)現(xiàn)完全吻合，但觀察本文研究數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，ANA在上述四種自身免疫性疾病中具有較高的陽性檢出率，說明ANA可作為診斷該病的重要指標(biāo)之一?？箚捂淒NA(ssDNA)在臨床診斷中無較大的價(jià)值，故多應(yīng)用dsDNA，雖然抗dsDNA的SLE診斷特異性超過90%，但是敏感性大約為30%，故臨床診斷存在一定缺陷，且在抗dsDNA檢測(cè)結(jié)果呈陰性，也不能完全排除受檢者非SLE。同時(shí)本文研究結(jié)果顯示，抗dsDNA在SAE中的檢出率為最高，在其他三種疾病中的檢出率相對(duì)不高，因此表明抗dsDNA可作為診斷SLE的重要參考指標(biāo)?？筍SA抗體在SLE、SS中的特異性較高，可對(duì)這兩種疾病進(jìn)行鑒別；抗SSB抗體主要在SS中存在[11]，為該病的血清特異性抗體?？筍SA抗體、抗SSB抗體不僅能夠鑒別診斷SS，還可對(duì)該病的預(yù)后進(jìn)行判斷，故此次研究數(shù)據(jù)顯示SS患者的ANA抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體均為100.00%?？筍m抗體在SLE患者中的陽性率及特異性較高，因此能夠作為SLE的血清標(biāo)記抗體，通過檢測(cè)抗Sm抗體可對(duì)早期、不典型的SLE或治療緩解后的SLE進(jìn)行診斷分析[12]。此次研究數(shù)據(jù)顯示抗Sm抗體在SLE中的檢出率最高，而未在其他疾病中檢測(cè)到?？筍cl-70抗體為系統(tǒng)性硬化的血清特異性抗體，因此在本研究中四種疾病類型中未檢測(cè)到抗Scl-70抗體。抗U1RNP抗體在多種自身免疫性疾病中存在，但其在MCTD患者中的檢出率最高。抗CCP抗體是RA的標(biāo)志性抗體，數(shù)據(jù)顯示檢出率為66.67%。

本研究結(jié)果顯示，女性多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)的陽性率比男性更高，同時(shí)自身免疫性疾病的檢出率相對(duì)較高，不同自身抗體在不同自身免疫性疾病中呈現(xiàn)不同檢出率。

總之，通過多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)能夠更好地鑒別診斷自身免疫性疾病。