急性鹽度脅迫下黃鰭棘鯛NKCC1a分子特征及其表達(dá)

李亞玲，朱克誠(chéng)，劉寶鎖，郭華陽(yáng)，郭 梁，張 楠，楊靜文，江世貴，張殿昌

急性鹽度脅迫下黃鰭棘鯛分子特征及其表達(dá)

李亞玲1,2，朱克誠(chéng)1,3，劉寶鎖1,3，郭華陽(yáng)1,3，郭 梁1,3，張 楠1,3，楊靜文1,3，江世貴1,3，張殿昌1,3

（1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開(kāi)發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510300；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院，北京 100089；3.廣東省海洋生物種業(yè)工程技術(shù)研究中心，廣東 廣州 510300）

【目的】研究基因在急性鹽度脅迫下對(duì)黃鰭棘鯛（）的滲透壓調(diào)控機(jī)理?！痉椒ā坑蒙镄畔W(xué)軟件分析的序列特征，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)檢測(cè)其在黃鰭棘鯛各組織內(nèi)的表達(dá)情況及其在鹽度0、8、16、24（對(duì)照）和32條件下的表達(dá)模式?！窘Y(jié)果】開(kāi)放閱讀框（ORF）大小為3 435 bp，共編碼1 144個(gè)氨基酸，存在一個(gè)經(jīng)典的Na+-K+-Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC12A結(jié)構(gòu)域，且在不同物種中有高保守性。在13個(gè)組織中均有表達(dá)，在腦中表達(dá)量最高，顯著高于其他組織（< 0.05）；其次為鰓，在性腺和肝臟中表達(dá)量則顯著低于其他組織（< 0.05）。鹽度脅迫6 h時(shí)，在淡水組（鹽度0）中表達(dá)量顯著上升（< 0.05）；在鹽度為8和16處理組中，表達(dá)量先降低后逐漸升高，隨后趨于平穩(wěn)；在鹽度32處理組，表達(dá)量呈先升高后降低最后又升高趨勢(shì)，在24 h時(shí)最大?！窘Y(jié)論】基因在黃鰭棘鯛鹽度適應(yīng)中發(fā)揮重要作用。

黃鰭棘鯛；；基因表達(dá)；急性鹽度脅迫

Na+/K+/2Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（Na+/K+/2Cl-Cotransporter，NKCC）是促進(jìn)Na+、K+、Cl-進(jìn)出細(xì)胞的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，廣泛存在于多種動(dòng)物。NKCC有NKCC1和NKCC2兩種亞型，同屬于溶質(zhì)載體12轉(zhuǎn)運(yùn)家族Na+依賴性亞群[1]。其中，NKCC1含有NKCC1a和NKCC1b兩個(gè)亞型[2-3]。參與魚(yú)類(lèi)滲透壓調(diào)節(jié)的相關(guān)過(guò)程，且在維持細(xì)胞體積穩(wěn)態(tài)、電解質(zhì)含量等方面發(fā)揮重要作用。

目前，在底鳉()[4]、鯔()[5]、瑪麗魚(yú)()[6]、綠腹麗魚(yú)（）[7]、舌齒鱸（）[8]、莫桑比克羅非魚(yú)（）[9-12]、歐洲鰻鱺（）[2]、青鳉（）[13]、大西洋鮭（）[14-15]和攀鱸（）[16]等海水硬骨魚(yú)類(lèi)中已有報(bào)道，表明在魚(yú)體滲透壓調(diào)節(jié)過(guò)程中起關(guān)鍵性作用。底鳉（）移入淡水后，各組織表達(dá)均受抑制；在半咸水轉(zhuǎn)海水后，表達(dá)增加[17]。海水馴化后，日本鰻鱺（）鰓的mRNA水平出現(xiàn)明顯上調(diào)[2]。在慢性鹽度脅迫條件下，“吉麗”羅非魚(yú) [薩羅羅非魚(yú)（）♂×尼羅羅非魚(yú)（）♀] 鰓內(nèi)的表達(dá)量和外界水體鹽度呈正相關(guān)關(guān)系[18]，其他海水硬骨魚(yú)類(lèi)有類(lèi)似結(jié)果[3,19,20]。宋慧[21]提出，在一定鹽度范圍內(nèi)，隨水體鹽度升高，大銀魚(yú)（）胚胎表達(dá)量升高。而不同急性鹽度脅迫下，卵形鯧鲹（）鰓、腸和腎的表達(dá)量顯著上升[22]。在急性低鹽脅迫條件下，紅鰭東方鲀（）幼魚(yú)基因的表達(dá)量因鹽度變化和持續(xù)時(shí)間的差異而不同[23]。由此可見(jiàn)，在魚(yú)類(lèi)適應(yīng)鹽度變化的過(guò)程中，NKCC是一種負(fù)責(zé)離子滲透的關(guān)鍵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，在魚(yú)類(lèi)滲透調(diào)節(jié)中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。

黃鰭棘鯛（）屬淺海暖水性底層魚(yú)類(lèi)，是重要的海水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)。近年來(lái)，由于過(guò)度捕撈、環(huán)境污染嚴(yán)重、魚(yú)病頻發(fā)等，黃鰭棘鯛種質(zhì)退化嚴(yán)重，天然黃鰭棘鯛苗種遠(yuǎn)不能滿足實(shí)際需要[24]。黃鰭棘鯛苗種培育已取得一定進(jìn)展，但育苗技術(shù)還不穩(wěn)定。稚魚(yú)培育是黃鰭棘鯛苗種培育的關(guān)鍵階段，鹽度是影響苗種成活與健康生長(zhǎng)最重要的環(huán)境因子之一。目前對(duì)黃鰭棘鯛的抗鹽脅迫相關(guān)基因的研究還未見(jiàn)報(bào)道，為深入研究基因在急性鹽度脅迫下對(duì)黃鰭棘鯛的滲透壓調(diào)控機(jī)理，筆者用生物信息學(xué)軟件分析其序列特征，并用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)檢測(cè)在黃鰭棘鯛各組織內(nèi)的表達(dá)情況及其在急性鹽度脅迫條件下的表達(dá)模式，以期為解析基因在黃鰭棘鯛稚魚(yú)調(diào)節(jié)滲透壓和離子平衡過(guò)程中的功能機(jī)制奠定基礎(chǔ)，并為黃鰭棘鯛早期苗種培育提供一定參考。

1 材料與方法

1.1 材料和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)用黃鰭棘鯛稚魚(yú)由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所深圳試驗(yàn)基地提供，體長(zhǎng)（13.76 ± 0.74）mm、體質(zhì)量（0.042 ± 0.022）g（= 80），實(shí)驗(yàn)前暫養(yǎng)一周，保持充氧，水溫（23 ± 2）℃。健康黃鰭棘鯛購(gòu)自水產(chǎn)市場(chǎng)，隨機(jī)取魚(yú)3尾，取腦、鰓、鰭、眼、脾、胃、心、腸、皮膚、腎、肌、肝和性腺等13個(gè)組織，經(jīng)液氮速凍后置于-80℃?zhèn)溆谩?/p>

設(shè)置0、8、16、24（對(duì)照組）和32等5個(gè)鹽度梯度，每梯度設(shè)3個(gè)平行組。取暫養(yǎng)的規(guī)格相近健康黃鰭棘鯛稚魚(yú)120尾，分別于各鹽度條件下脅迫0、6、12、24、48、72和96 h，每組每時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)取稚魚(yú)6尾，經(jīng)液氮速凍后置于-80℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2 總RNA提取與cDNA合成

按照HiPure UnIversal RNA Mini Kit（Megen，廣州）試劑盒說(shuō)明書(shū)抽提上述黃鰭棘鯛的總RNA。通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳、NanoDrop 2000（Thermo Fisher，美國(guó)）檢測(cè)其完整性及濃度和純度。參照RT Kit with gDNA Clean for qPCR Ⅱ（瑞真，廣州）試劑盒說(shuō)明書(shū)把上述RNA樣品逆轉(zhuǎn)錄為cDNA用于qRT-PCR。

1.3 NKCC1a序列的獲取

本課題組采用全基因組測(cè)序技術(shù)獲得黃鰭棘鯛序列[25]，經(jīng)GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)比對(duì)后發(fā)現(xiàn)，其與其他魚(yú)類(lèi)的同源性較高。此外，利用Primer Premier 5.0設(shè)計(jì)特異性引物（表1）對(duì)其開(kāi)放閱讀框（ORF）進(jìn)行驗(yàn)證。以黃鰭棘鯛cDNA為模板進(jìn)行PCR，25 μL反應(yīng)體系包括：16.7 μL ddH2O，2.5 μL 10×buffer，2 μL dNTPs，1.5 μL MgCl2，100 μmol?L–1上下游引物各0.5 μL，0.3 μL rTaq酶，(50 ± 5) ng模板cDNA；反應(yīng)程序：94℃ 5 min；94℃ 30 s，55℃ 30 s，72℃ 60 s，35個(gè)循環(huán)；72℃ 10 min。PCR產(chǎn)物送至廣州睿博生物有限公司測(cè)序。

表1 實(shí)驗(yàn)用引物

1.4 NKCC1a基因生物信息學(xué)分析

用DNAman拼接測(cè)序片段，用ORF Finder（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/）預(yù)測(cè)開(kāi)放閱讀框，用ExPASy-Compute pI/Mw tool（https://web.expasy.org/compute_pi/）預(yù)測(cè)等電點(diǎn)和分子質(zhì)量，用NetNGlyc 1.0 Server（hrvices/NetNGlyc/）預(yù)測(cè)糖基化位點(diǎn)，用NetPhos 3.1 Server（http://www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos/）預(yù)測(cè)磷酸化位點(diǎn)，用TMHMM Server, v.2.0（htts/TMHMM/）預(yù)測(cè)跨膜結(jié)構(gòu)域，用SignalP 4.1 Server（http://www.cbs.dtu.dk/services/ SignalP/）預(yù)測(cè)信號(hào)肽，通過(guò)NCBI（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Structure/cdd/wrpsb.cgi）預(yù)測(cè)結(jié)構(gòu)域，用SWISS-MODEL（https://swissmodel.expasy.org/）預(yù)測(cè)三維結(jié)構(gòu)，用ClustalW、GENEDOC進(jìn)行多重序列比對(duì)，用MEGA7.0構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。

1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR (qRT-PCR)

采用Primer Premier 5.0設(shè)計(jì)的熒光定量引物（表1）。選擇黃鰭棘鯛作為內(nèi)參基因并設(shè)計(jì)引物（表1）。對(duì)健康黃鰭棘鯛的腦、鰓、鰭、眼、脾、胃、心、腸、皮膚、腎、肌、肝和性腺組織進(jìn)行定量分析。采用qPCR檢測(cè)在急性鹽度脅迫下，黃鰭棘鯛稚魚(yú)在0、6、12、24、48、72和96 h時(shí)的表達(dá)水平。

根據(jù)SYBR Green Premix Pro Taq HS qPCR Kit（瑞真，廣州）說(shuō)明書(shū)在Roche LightCycler?480Ⅱ（Roche）上進(jìn)行qPCR反應(yīng)。反應(yīng)體系：2×SYBR Green Pro Taq HS Premix 6.25 μL、cDNA模板(50 ± 5) ng，-qF、-qR各0.5 μL（100 μmol·L–1），ddH2O 4.25 μL。反應(yīng)程序：95℃30 s；95℃ 10 s，60℃ 30 s，72℃ 30 s，40個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣品設(shè)3個(gè)重復(fù)。PCR結(jié)束后確認(rèn)擴(kuò)增曲線及熔解曲線，以確保其特異性。

1.6 數(shù)據(jù)處理

實(shí)時(shí)熒光定量PCR數(shù)據(jù)處理使用2-ΔΔCT法。運(yùn)用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-Way ANOVA），并采用Duncan檢驗(yàn)多重比較，結(jié)果用平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)差表示，顯著性水平為0.05。用Graphpad Prism軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 NKCC1a生物信息學(xué)分析

基因的開(kāi)放閱讀框（ORF，GenBank登錄號(hào)：OK324137）為3 435 bp，編碼1 144個(gè)氨基酸，分子質(zhì)量約124.5 ku，理論等電點(diǎn)為5.75。在預(yù)測(cè)的氨基酸序列中發(fā)現(xiàn)有3個(gè)N-糖基化位點(diǎn)，15個(gè)保守的半胱氨酸殘基和107個(gè)磷酸化位點(diǎn)（其中包括64個(gè)絲氨酸位點(diǎn)和43個(gè)蘇氨酸位點(diǎn)）。SignalP5.0分析顯示，NKCC1a無(wú)信號(hào)肽（圖1）。

方框內(nèi)為起始密碼子ATG，用*標(biāo)記終止密碼子TAA；下劃線部分代表跨膜結(jié)構(gòu)域；陰影部分代表糖基化位點(diǎn)；圓圈表示保守的半胱氨酸

圖1顯示，黃鰭棘鯛NKCC1a含有11個(gè)疏水性跨膜（TM）結(jié)構(gòu)域，分別位于第232 ～ 254、264 ～ 286、306 ～ 328、348 ～ 370、377 ～ 399、428 ～ 450、457 ～ 479、541 ～ 563、598 ～ 620、624 ～ 643和656 ～ 678位氨基酸。其中，在TM7和TM8之間存在N-糖基化位點(diǎn)。分析表明，在第158 ～ 1 144位氨基酸是2a30蛋白超家族結(jié)構(gòu)域，典型的NKCC1協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白氨基酸通透酶結(jié)構(gòu)域和Na+-K+-Cl-共同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC12A結(jié)構(gòu)域分別位于第232 ～ 734和743 ～ 1 144位氨基酸。NKCC1a的二級(jí)蛋白結(jié)構(gòu)表明，β折疊（4.55%）、α螺旋（42.83%）、無(wú)規(guī)則卷曲（38.20%）和延伸主鏈（14.42%）。其預(yù)測(cè)的三維結(jié)構(gòu)如圖2所示。

氨基酸序列比對(duì)表明，黃鰭棘鯛NKCC1a氨基酸與金頭鯛() 的同源性最高（98.51%），其次為舌齒鱸（，93.79%）、眼斑擬石首魚(yú)（，93.27%）、大黃魚(yú)（，92.57%）、莫桑比克羅非魚(yú)（，90.38%）。與人（）、非洲爪蟾（）和小鼠（）的同源性較低，分別是75.35%、75.14%和74.98%，表明NKCC1a基因在魚(yú)類(lèi)中較為保守（圖3）。

圖2 黃鰭棘鯛NKCC1a三級(jí)結(jié)構(gòu)

黑色下劃線表示11個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域（TMD1-11）；虛線表示Na+-K+-Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC12A結(jié)構(gòu)域

Black underline indicates 11 transmembrane domains (TMD1-11); The dotted line indicates the Na+-K+-Cl- cotransporter SLC12A domain

圖3 黃鰭棘鯛NKCC1a與其他物種NKCC氨基酸序列比對(duì)

Fig.3 Alignment of amino acid sequence of NKCC fromand other species

系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示，24個(gè)物種的NKCC序列分成NKCC1和NKCC2兩個(gè)進(jìn)化支。其中，黃鰭棘鯛NKCC1a聚集到NKCC1a分支中（圖4）。

2.2 NKCC1a組織表達(dá)

圖5表明，黃鰭棘鯛13個(gè)組織中均有表達(dá)，其中表達(dá)量最高的組織為腦，且顯著高于其他組織（< 0.05），其次為鰓，而在性腺和肝臟中的表達(dá)量則顯著低于其他組織（< 0.05）。

圖4 NKCC1a系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)

不同小寫(xiě)字母表示兩組間差異顯著(P<0.05)

2.3 在急性鹽度脅迫后NKCC1a基因的表達(dá)

圖6可見(jiàn)，隨著脅迫時(shí)間的增加，不同鹽度組表達(dá)量的增減趨勢(shì)不同。自脅迫6 h起，淡水組（鹽度0）表達(dá)量顯著上升（< 0.05）；鹽度8和16組先降后升，隨后趨于平穩(wěn)；鹽度32組呈先升高后降低最后又升高趨勢(shì)，在24、96 h時(shí)顯著高于其他時(shí)間點(diǎn)（< 0.05）。。

相同時(shí)間點(diǎn)，各實(shí)驗(yàn)組表達(dá)量與鹽度24組（對(duì)照）均有顯著差異。在6 h時(shí)，鹽度0組表達(dá)量顯著高于對(duì)照組（< 0.05）；而鹽度8和16組表達(dá)量顯著低于對(duì)照組（< 0.05）。在24和96 h時(shí)，鹽度32組的表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組（< 0.05）。

不同小寫(xiě)字母表示同一時(shí)間下不同處理組之間差異顯著(P < 0.05)；不同大寫(xiě)字母表示同一鹽度下不同時(shí)間之間差異顯著(P < 0.05)

3 討論

NKCC1a是上皮細(xì)胞內(nèi)的電中性跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。本研究表明，黃鰭棘鯛NKCC1a N端氨基酸無(wú)信號(hào)肽，為非分泌型蛋白，中心疏水區(qū)由11個(gè)疏水性跨膜（TM）結(jié)構(gòu)域組成。TM2與陽(yáng)離子親和力有關(guān)，TM4和TM7主要影響陰離子親和力[26]。糖基化位點(diǎn)位于TM7-8的胞外環(huán)，該糖基化對(duì)細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)活性至關(guān)重要[27]。當(dāng)水體鹽度發(fā)生改變時(shí)，魚(yú)體通過(guò)改變跨膜結(jié)構(gòu)域的離子親和力，控制胞內(nèi)離子的排泄和吸收而維持穩(wěn)態(tài)平衡。在第743 ～ 1 144位氨基酸有經(jīng)典的Na+-K+-Cl-共同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC12A結(jié)構(gòu)域，與金頭鯛、舌齒鱸、斑馬魚(yú)（）等的NKCC1a結(jié)構(gòu)域高度一致，表明NKCC1a結(jié)構(gòu)域在不同物種中高度保守，黃鰭棘鯛NKCC1a與其他物種一樣，有潛在的Na+-K+-Cl-離子共同轉(zhuǎn)運(yùn)功能。

在莫桑比克羅非魚(yú)[3]、卵形鯧鲹[22]、大西洋鮭[28]和舌齒鱸[8]等硬骨魚(yú)類(lèi)組織中均有表達(dá)。本研究中，黃鰭棘鯛組織表達(dá)譜有廣泛性，在13個(gè)組織中均有表達(dá)。腦中表達(dá)量最高，顯著高于其他組織（<0.05），其次為鰓，而在性腺和肝臟中表達(dá)量則顯著低于其他組織（<0.05）。NKCC是依靠Na+-K+-ATPase產(chǎn)生的Na+跨膜電化學(xué)勢(shì)能差，跨膜運(yùn)輸Na+、K+、Cl-的繼發(fā)性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白[29]。在生物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞內(nèi)外Na+、K+濃度會(huì)短暫性變化，因此，為滿足黃鰭棘鯛腦組織在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中對(duì)能量及離子等的需求，在腦中會(huì)出現(xiàn)高表達(dá)現(xiàn)象[30]；此外，鰓組織是大部分海水魚(yú)類(lèi)維持體內(nèi)滲透壓平衡的重要調(diào)節(jié)器官[31]。由此推斷，黃鰭棘鯛在滲透調(diào)節(jié)器官中有一定功能。

本研究表明，對(duì)鹽度變化反應(yīng)迅速，在轉(zhuǎn)入淡水后6 h時(shí)表達(dá)量顯著上升，與卵形鯧鲹（）腸的結(jié)果[22]類(lèi)似。海水硬骨魚(yú)類(lèi)對(duì)鹽度適應(yīng)機(jī)制為滲透調(diào)節(jié)型[32]，先通過(guò)吞飲大量海水吸取水分，后經(jīng)腸道消化吸收，最后由腎和鰓排泄大量離子維持體內(nèi)滲透壓。置淡水環(huán)境時(shí)，吞食水的反射和水分的擴(kuò)散使魚(yú)機(jī)體腸內(nèi)水量增加。為進(jìn)一步阻止反射和促進(jìn)水分排泄，魚(yú)體內(nèi)NKCC被激活，基因表達(dá)量升高，從而促進(jìn)離子進(jìn)入細(xì)胞，導(dǎo)致胞內(nèi)離子濃度增加[22]。黃鰭棘鯛雖有較強(qiáng)的滲透壓調(diào)節(jié)能力，但不能在急性條件下很好地適應(yīng)淡水[33]，即會(huì)激活基因以適應(yīng)低鹽脅迫。在高鹽脅迫下，黃鰭棘鯛表達(dá)量增加，表明在黃鰭棘鯛適應(yīng)高鹽環(huán)境時(shí)發(fā)揮一定作用。在歐洲鰻鱺[2]、黑鯛（）[34]、底鳉[17]、莫桑比克羅非魚(yú)[9]和龜紋圓鲀（）[35]中也有類(lèi)似結(jié)果。另外，有學(xué)者曾解釋?zhuān)磉_(dá)量增加與高失水細(xì)胞體積恢復(fù)相關(guān)，表達(dá)量增加提高了NKCC活性，將離子從胞外轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)胞內(nèi)，使細(xì)胞內(nèi)離子濃度升高，從而有助于高鹽失水后的細(xì)胞吸取水分，最終使細(xì)胞體積恢復(fù)到正常狀態(tài)[35]。本研究高鹽度（鹽度32）脅迫后期，黃鰭棘鯛表達(dá)量增加也可能與高失水細(xì)胞的體積恢復(fù)相關(guān)。綜上，該研究有助于揭示黃鰭棘鯛參與細(xì)胞滲透壓調(diào)節(jié)的功能機(jī)理，為魚(yú)類(lèi)滲透壓調(diào)節(jié)研究提供一定理論基礎(chǔ)。

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Molecular Characteristics and Expression Analysis offromunder Acute Salinity Stress

LI Ya-ling1,2, ZHU Ke-cheng1,3, LIU Bao-suo1,3, GUO Hua-yang1,3, GUO Liang1,3, ZHANG Nan1,3, YANG Jing-wen1,3, JIANG Shi-gui1,3, ZHANG Dian-chang1,3

（1./&,,510300,; 2.,100089,; 3.,510300,）

【Objective】To study the role ofin the osmoregulation ofunder acute salinity stress.【Method】Bioinformatic approach was used to analyze the sequence of, and real-time quantitative PCR (qRT-PCR) was used to study the expression pattern ofin 13 tissues under acute salinity stress [salinity 0, 8, 16, 24 (control) and 32].【Result】 The open reading frame ofis 3435 bpencoding a 1 144 amino acids protein and has a classic Na+/K+/2Cl-co-transporter SLC12A domain, which is highly conserved in different species.Tissue expression analysis shows thatwas expressed in the 13 tested tissues, highest in the brain and then in gill, lowest in gonads and liver (< 0.05).Under acute salinity stress, the expression level ofin fresh-water group (salinity 0) increased significantly from the 6th hour.In the 8 and 16 salinity group, the expression level ofdecreased initially, then gradually increased, and then leveled off; In the 32 salinity group, the expression level ofshowed an increasing-decreasing-increasing trend, and reached the maximum at the 24th hour.【Conclusion】The results suggest that thegene plays an important role insalinity adaptation.

;; gene expression; acute salinity stress

S917.4

A

1673-9159（2022）02-0020-09

10.3969/j.issn.1673-9159.2022.02.003

2021-11-03

農(nóng)業(yè)部財(cái)政重大專(zhuān)項(xiàng) (NHYYSWZZZYKZX2020)；廣東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系海水魚(yú)產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新項(xiàng)目 (2019KJ143)

李亞玲（1996―），女，碩士研究生，研究方向?yàn)樗a(chǎn)養(yǎng)殖和遺傳育種。E-mail：940971037@qq.com

張殿昌（1977―），男，博士，研究員，從事水產(chǎn)種質(zhì)資源與遺傳育種研究。E-mail：zhangdch@scsfri.ac.cn

李亞玲，朱克誠(chéng)，劉寶鎖，等.急性鹽度脅迫下黃鰭棘鯛分子特征及其表達(dá)[J].廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，42（2）：20-28.

（責(zé)任編輯：劉慶穎）