地榆對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的腸道屏障損傷模型的保護(hù)作用＊

楊麗萍，宋娜麗，陳 普，段小花＊＊

（1.云南中醫(yī)藥大學(xué)云南省傣醫(yī)藥與彝醫(yī)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 昆明 650500；2.云南省中醫(yī)中藥研究院 昆明 650223）

腸道黏膜是機(jī)體防御的第一道防線(xiàn)，具有選擇通透性。完整的腸道屏障對(duì)維持上皮細(xì)胞通透性、機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)有關(guān)鍵作用。腸道屏障功能的破壞可引起腸上皮通透性升高，導(dǎo)致腸腔內(nèi)細(xì)菌和內(nèi)毒素等通過(guò)腸上皮進(jìn)入機(jī)體造成炎癥反應(yīng)，甚至可出現(xiàn)多器官功能衰竭[1]。腸屏障功能受多種細(xì)胞因子和細(xì)菌內(nèi)毒素的調(diào)控，并且與多種疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，如炎癥性腸道疾病、胰腺炎、肝病以及代謝紊亂性疾病等[2]。預(yù)防和治療腸黏膜屏障功能損傷已成為當(dāng)前研究的重要課題之一[3-4]。研究發(fā)現(xiàn)，腸道屏障在炎癥性腸病的病理過(guò)程中起關(guān)鍵作用，腸黏膜屏障完整性的破壞是炎癥性腸病發(fā)生和發(fā)展的基本過(guò)程，由此引發(fā)的腸道對(duì)細(xì)菌、內(nèi)毒素等的吸收增加從而導(dǎo)致機(jī)體異常免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)，是病情進(jìn)展的核心環(huán)節(jié)[5-6]。因此，保護(hù)腸屏障的完整性在一定程度上能夠抑制炎癥性腸病的病理進(jìn)程，可作為改善炎癥性腸病臨床癥狀的潛在治療方法之一[7]。

地榆（Sanguisorbae Radix）為薔薇科植物地榆（Sanguisorba officinalis L.）或 長(zhǎng) 葉 地 榆Sanguisorba officinalis L.var. longifolia (Bert). Yü et Li的干燥根，具有涼血止血、解毒斂瘡的功效，有“痔科圣藥”之稱(chēng)，常用來(lái)治療直腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎等腸道疾病。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，地榆對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型作用顯著，其作用可能與抑制炎性細(xì)胞因子有關(guān)[8-9]，其單藥或復(fù)方在臨床中也常治療潰瘍性結(jié)腸炎等腸道相關(guān)疾病[10-13]。李麗等[14]研究發(fā)現(xiàn)，地榆可通過(guò)調(diào)節(jié)急性潰瘍性性結(jié)腸炎大鼠腸道菌群，修復(fù)腸道屏障而發(fā)揮治療作用。但更進(jìn)一步的，地榆對(duì)腸道屏障的修復(fù)是否還與調(diào)節(jié)腸道緊密連結(jié)和細(xì)胞凋亡等有關(guān)，目前暫未發(fā)現(xiàn)相關(guān)報(bào)道。

基于此，本研究利用LPS建立體內(nèi)外腸道屏障功能損傷模型，通過(guò)腸上皮細(xì)胞凋亡、緊密連結(jié)以及細(xì)胞炎癥因子等方面深入探討地榆對(duì)腸道屏障功能的作用，以期從腸道屏障的角度為地榆的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 動(dòng)物和細(xì)胞株

昆明種小鼠SPF級(jí)72只，雌雄各半，體質(zhì)量（20 ±2）g，購(gòu)自四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（川）2015-030；IEC-6細(xì)胞購(gòu)自美國(guó)ATCC細(xì)胞庫(kù)。

1.2 主要試劑和儀器

DMEM高 糖 培 養(yǎng) 基（BI，貨 號(hào) 06-1055-57-1ACS）；胰蛋白酶（BI，貨號(hào) 03-050-1B）；胎牛血清（BI，貨號(hào)04-001-1A）；青霉素/鏈霉素（BI，貨號(hào)03-031-1B）；脂多糖 LPS（sigma，貨號(hào) L2630-25MG）；occludin（proteintech，貨號(hào) 27260-1-AP）；Goat antirabbit secondary antibody（proteintech，貨號(hào) SA00001-2）；IL-1β ELISA Kit（proteintech，貨 號(hào) KE10003）；TNF-α ELISA Kit（proteintech，貨號(hào) KE10002）；DLactate Assay Kit（abcam，貨號(hào)ab83429）；總RNA提取試劑盒（promega，貨號(hào)LS1040）；Eastep RT Master Mix(5X) 逆轉(zhuǎn)錄預(yù)混液（promega，貨號(hào) LS2050）；Eastep qPCR Master Mix（2X）試劑盒（promega，貨號(hào)LS2062）；Annexin V/PI試劑盒（凱基生物，貨號(hào)KGA107）；二氧化碳培養(yǎng)箱（美國(guó)nuaire，NU-4750E）；酶標(biāo)儀（美國(guó)Thermofisher，VariosKan Flash）；倒置顯微鏡（日本尼康）；流式細(xì)胞儀（德國(guó)CyFlow Cube6）；熒光定量PCR儀（美國(guó)ABI，7500）。

1.3 地榆醇提物的制備

地榆購(gòu)自云南鴻翔一心堂藥業(yè)股份有限公司，經(jīng)鑒定為質(zhì)量合格的中藥飲片。稱(chēng)取地榆藥材1 kg，用10倍70%乙醇提取3次，每次1 h，合并3次提取液，濃縮至合適的體積后-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2 方法

2.1 體外實(shí)驗(yàn)

2.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)和處理

IEC-6細(xì)胞以含10%胎牛血清和1%青霉素/鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基在37℃、5% CO2條件下培養(yǎng)，等細(xì)胞融合至70%-80%進(jìn)行傳代。0.25%胰酶消化處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞并接種于96孔板中，分為空白組、LPS組、LPS+地榆不同劑量組（35，70，140，280，560 μg生藥·mL-1），每組設(shè)6個(gè)重復(fù)，培養(yǎng)24 h后每組分別加入不同濃度的藥物，1 h后加入100 μg·mL-1的LPS，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)。

2.1.2 MTT檢測(cè)細(xì)胞活力

IEC-6 細(xì)胞以 1 × 105cells·mL-1接種于 96 孔 板24 h后，換入無(wú)血清培養(yǎng)基，24 h細(xì)胞周期同步化后，分組并加入相應(yīng)藥物及含血清培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后進(jìn)行MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率，以吸光度（OD）表示細(xì)胞相對(duì)活力。

2.1.3 免疫熒光檢測(cè)occludin蛋白的表達(dá)和分布

IEC-6細(xì)胞按1 × 104接種至6孔板培養(yǎng)過(guò)夜后更換培養(yǎng)基并加入地榆提取物，1 h后加LPS（100 μg·mL-1）繼續(xù)培養(yǎng)。24 h后棄去培養(yǎng)基并用多聚甲醛固定，用0.1% Triton X 100透化并用羊血清封閉30 min，加一抗4℃過(guò)夜，PBS清洗后二抗37℃孵育30 min，封片并在熒光顯微鏡下觀(guān)察和拍照。Image J軟件進(jìn)行平均光密度（AOD）分析。

2.1.4 ELISA檢測(cè)IL-1β和TNF-α水平

IEC-6細(xì)胞按1 × 105cells·mL-1）接種于96孔板并過(guò)夜，分組并給予相應(yīng)藥物處理24 h后收集細(xì)胞上清液，3000 r·min-1離心20 min，收集上清液后按相應(yīng)的ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)用酶標(biāo)儀檢測(cè)IL-1β和TNF-α的水平。

2.1.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡

IEC-6細(xì)胞按 1 × 105cells·mL-1接種于 6 孔板，藥物處理24 h后收集細(xì)胞，按照Annexin V/PI試劑盒說(shuō)明書(shū)的步驟處理細(xì)胞并上流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平。

2.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)

2.2.1 動(dòng)物給藥和分組

昆明小鼠分為正常對(duì)照組、LPS組和地榆高、低劑量組，參考文獻(xiàn)建立小鼠腸道屏障損傷模型[15]，正常組和LPS灌胃給予蒸餾水，剩下兩組灌胃給予不同劑量的地榆（2.25，6.75 g·kg-1），在第7天灌胃結(jié)束2 h后，對(duì)除正常組外的其余組別小鼠一次性腹腔注射5 mg·kg-1的LPS，2 h后摘眼球取血分離血清檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)，另取結(jié)腸部分于液氮中保存?zhèn)溆?，另一部分?0%福爾馬林中固定用于后續(xù)組織病理學(xué)檢測(cè)。

2.2.2 ELISA檢測(cè)小鼠血清D-乳酸水平

取小鼠血清，按ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)，用酶標(biāo)儀檢測(cè)小鼠血清中D-乳酸水平，用來(lái)檢測(cè)腸道通透性。

2.2.3 Western Blot檢測(cè)occludin蛋白的表達(dá)

小鼠結(jié)腸用裂解液裂解后，BSA測(cè)蛋白濃度并調(diào)整濃度后采用SDS-PAGE凝膠電泳分離、轉(zhuǎn)膜并封閉后一抗孵育過(guò)夜，后用二抗孵育2 h，曝光檢測(cè)，以β-actin作為內(nèi)參采用Image-J軟件對(duì)條帶進(jìn)行量化分析。

2.2.4 RT-PCR檢測(cè)小鼠結(jié)腸TNF-α mRNA和IL-1β mRNA的表達(dá)

將已取好的結(jié)腸在液氮下研磨后提取總RNA，紫外和電泳檢測(cè)RNA純度及完整度，按逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書(shū)完成逆轉(zhuǎn)錄，以生成的cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃ 5 min，（ 95℃，15 s）× 40，60℃ 30 s。采用2-△△CT相對(duì)定量法計(jì)算各組結(jié)腸TNF-α mRNA和IL-1β mRNA的相對(duì)表達(dá)水平。引物序列見(jiàn)表1。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用GraphPad prim 5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組比較采用單因素方差分析，P＜ 0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 地榆對(duì)IEC-6細(xì)胞活力的影響

圖1結(jié)果顯示，地榆在35-560 μg·mL-1范圍內(nèi)對(duì)正常IEC-6細(xì)胞活力無(wú)顯著影響，各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞ 0.05），說(shuō)明地榆在這個(gè)劑量范圍內(nèi)無(wú)明顯毒性。加入100μg·mL-1的LPS處理24 h后，可顯著抑制IEC-6細(xì)胞活力，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.01），不同濃度地榆預(yù)孵育能減弱LPS對(duì)IEC-6細(xì)胞活力的抑制效應(yīng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），說(shuō)明地榆對(duì)LPS誘導(dǎo)的IEC-6細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用。

3.2 地榆對(duì)LPS導(dǎo)致的IEC-6細(xì)胞凋亡的影響（晚期Q2+早期Q3，%）

流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明，和對(duì)照組相比，LPS刺激組細(xì)胞早凋和晚凋細(xì)胞數(shù)量明顯增加，細(xì)胞凋亡率明顯增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.01），地榆預(yù)處理后可以明顯減少LPS導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡增加（P＜ 0.05）（見(jiàn)圖2）。

3.3 地榆對(duì)IEC-6細(xì)胞緊密連接蛋白o(hù)ccludin表達(dá)的影響

圖3免疫熒光結(jié)果表明，正常IEC-6細(xì)胞occludin蛋白主要分布在細(xì)胞膜，呈蜂巢狀線(xiàn)性分布，在細(xì)胞周?chē)纬森h(huán)狀結(jié)構(gòu)。LPS處理后細(xì)胞膜上occludin的環(huán)狀結(jié)構(gòu)出現(xiàn)斷裂，熒光信號(hào)較弱。地榆預(yù)處理后occludin在細(xì)胞膜上的熒光信號(hào)相對(duì)LPS組明顯增強(qiáng)，且未出現(xiàn)明顯斷裂。

表1 RT-PCR引物序列

圖1 地榆對(duì)IEC-6細(xì)胞活力的影響

圖2 地榆對(duì)LPS誘導(dǎo)的IEC-6細(xì)胞凋亡的影響

圖3 地榆對(duì)LPS誘導(dǎo)的IEC-6細(xì)胞occludin緊密連接蛋白表達(dá)的影響（400X）

圖4 地榆對(duì)小鼠血清D-乳酸水平的影響

3.4 地榆對(duì)LPS導(dǎo)致的小鼠腸道屏障通透性的影響

圖4顯示，腹腔注射LPS后，小鼠血中D-乳酸水平明顯升高，說(shuō)明腸道黏膜損傷后引起腸道通透性增加（P＜ 0.01），地榆在6.75 g·kg-1劑量下能顯著減少小鼠血清中D-乳酸的水平（P＜ 0.05），表明地榆有利于LPS導(dǎo)致的小鼠腸道屏障完整性和通透性的改善。

3.5 地榆對(duì)小鼠結(jié)腸組織中緊密連接蛋白o(hù)ccludin表達(dá)的影響

與正常組比較，LPS組小鼠結(jié)腸occludin蛋白表達(dá)水平顯著降低（P＜ 0.01），與LPS組比較，地榆高劑量組結(jié)腸的occludin表達(dá)顯著升高（P＜ 0.01）。見(jiàn)圖5。

3.6 地榆對(duì)LPS導(dǎo)致的炎癥因子水平的影響

圖5 地榆對(duì)小鼠結(jié)腸組織occludin表達(dá)水平的影響

圖6 地榆對(duì)IL-1β和TNF-α的影響

從圖6可知，LPS組細(xì)胞上清液中IL-1β和TNF-α水平顯著增加（P＜ 0.01），地榆預(yù)處理后能夠明顯抑制LPS導(dǎo)致的IL-1β和TNF-α水平增高（P＜ 0.05），表明地榆能夠緩解LPS刺激導(dǎo)致的炎癥因子的釋放增加。RT-PCR檢測(cè)結(jié)果表明，地榆能顯著抑制LPS誘導(dǎo)后小鼠結(jié)腸中IL-1β和TNF-α的mRNA表達(dá)增加（P＜ 0.05），和體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

4 討論

腸道作為抵御各種病原體和抗原入侵的屏障，是由完整的腸上皮細(xì)胞和相鄰細(xì)胞間的緊密連接及粘液層構(gòu)成，腸道內(nèi)的細(xì)菌、炎性物質(zhì)、內(nèi)毒素以及上皮細(xì)胞凋亡都會(huì)影響腸屏障功能[16]。當(dāng)遭受損傷時(shí)，腸道內(nèi)細(xì)菌通過(guò)受損部位進(jìn)入血液循環(huán)，引起一系列炎癥反應(yīng)加重腸黏膜屏障損傷，導(dǎo)致腸道通透性升高，引起腸道細(xì)菌移位和促炎因子大量釋放，進(jìn)一步破壞腸黏膜屏障的完整性，導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)，從而加重原發(fā)疾病，甚至誘發(fā)多器官功能紊亂和衰竭[17]。LPS是革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素，研究表明，LPS可刺激巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞釋放炎癥介質(zhì)，損傷腸上皮緊密連接，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡發(fā)生，增加腸道通透性，誘發(fā)炎癥反應(yīng)導(dǎo)致腸道屏障功能障礙[18-19]。當(dāng)屏障結(jié)構(gòu)受到損傷時(shí)，引起腸道內(nèi)細(xì)菌、內(nèi)毒素等病原體穿過(guò)腸屏障入侵機(jī)體，引起機(jī)體的炎癥反應(yīng)等，從而危害機(jī)體健康。腸黏膜屏障在防止細(xì)菌和內(nèi)毒素易位方面起著至關(guān)重要的作用[20]。

小腸隱窩上皮細(xì)胞在腸道細(xì)胞中是一種重要的功能性細(xì)胞，腸道黏膜損傷后主要依靠隱窩上皮細(xì)胞的不斷增殖、分化來(lái)完成修復(fù)，以重建腸道的屏障功能，是對(duì)抗腸道細(xì)菌、毒素的第一道防線(xiàn)[21]。IEC-6細(xì)胞來(lái)源于大鼠小腸隱窩細(xì)胞，廣泛用于腸屏障修復(fù)相關(guān)的研究[22]。研究報(bào)道LPS可抑制IEC-6細(xì)胞增殖[23-24]，本文結(jié)果和文獻(xiàn)報(bào)道一致，LPS在100 mg·mL-1濃度下能夠明顯抑制IEC-6細(xì)胞的活力，而地榆能夠明顯抑制LPS導(dǎo)致的IEC-6細(xì)胞毒效應(yīng)，且在該有效濃度內(nèi)對(duì)無(wú)明顯毒性。研究表明，上皮細(xì)胞凋亡增加是腸道屏障功能障礙的原因之一[25]，腸炎患者腸上皮細(xì)胞的凋亡速率增加，細(xì)胞凋亡后所留下的空隙不能被及時(shí)有效的填充，導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞屏障連續(xù)完整性破壞，腸道通透性增加，細(xì)菌和內(nèi)毒素等物質(zhì)可通過(guò)腸道入血，刺激炎性細(xì)胞因子的過(guò)度釋放[26]。本研究中細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示LPS可以誘導(dǎo)IEC-6腸上皮細(xì)胞的凋亡，地榆則可顯著降低LPS引起的細(xì)胞凋亡率，可能是保護(hù)炎癥環(huán)境下腸屏障功能的機(jī)制之一。

腸道緊密連接是一種腸黏膜上皮細(xì)胞間特殊的結(jié)構(gòu)，由不同功能的蛋白質(zhì)（occludin、ZO-1等）組成并包繞在細(xì)胞腔側(cè)端，在維持腸上皮細(xì)胞通透性中起著極其重要的作用，它能夠選擇性的允許離子和小分子物質(zhì)通過(guò)，阻止腸腔內(nèi)病原微生物進(jìn)入體內(nèi)，緊密連接蛋白受損會(huì)引起腸道通透性改變[27-28]。D-乳酸是細(xì)菌發(fā)酵的代謝產(chǎn)物，在腸道黏膜屏障完整時(shí)不會(huì)進(jìn)入血液循環(huán)，一旦腸道屏障受損，通透性增加，腸道大量D-乳酸會(huì)進(jìn)入血液中，檢測(cè)D-乳酸可以有效反映腸黏膜損害程度和腸道通透性的變化[29]。因此，D-乳酸被認(rèn)為是腸黏膜損害和通透性增加的有效預(yù)警指標(biāo)[30-31]。在LPS導(dǎo)致的小鼠腸道屏障損傷模型中，LPS組小鼠血清中D-乳酸顯著高于正常組，提示LPS引起腸道屏障受損，導(dǎo)致腸道通透性增加。地榆可顯著降低LPS導(dǎo)致的小鼠血清D-乳酸水平，結(jié)腸HE染色發(fā)現(xiàn)地榆對(duì)LPS導(dǎo)致的結(jié)腸病理?yè)p傷具有一定的改善作用。免疫熒光結(jié)果發(fā)現(xiàn)，LPS可引起IEC-6細(xì)胞緊密連接蛋白o(hù)ccludin表達(dá)和分布異常，而地榆預(yù)處理后可見(jiàn)occludin的表達(dá)明顯增強(qiáng)。結(jié)果提示，地榆可以維持和保護(hù)LPS導(dǎo)致的腸道屏障功能受損。

細(xì)胞炎癥因子在腸屏障功能損傷病變中具有非常重要的作用，參與了各類(lèi)炎癥反應(yīng)的發(fā)生過(guò)程[32]。腸屏障受損時(shí)，腸腔內(nèi)抗原分子移位并激活免疫細(xì)胞，產(chǎn)生大量炎性細(xì)胞因子，如IL-1β和TNF-α等，這些因子通過(guò)炎性反應(yīng)調(diào)節(jié)緊密連接蛋白的表達(dá)，增加腸上皮屏障通透性，加劇腸屏障的損傷，導(dǎo)致惡性循環(huán)[33]。TNF-α為早期單核或巨噬細(xì)胞合成并釋放的炎性因子，在炎癥反應(yīng)中主導(dǎo)激活細(xì)胞因子級(jí)聯(lián)反應(yīng)，啟動(dòng)其他一系列細(xì)胞因子的產(chǎn)生和釋放，使炎癥介質(zhì)大量過(guò)度釋放。研究表明，TNF-α是引起腸道屏障損傷的重要啟動(dòng)因子，它不僅可以通過(guò)破壞緊密連接蛋白使腸道通透性增加，而且還會(huì)誘導(dǎo)IL-1β和IL-6等細(xì)胞因子分泌，推動(dòng)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，進(jìn)一步加劇緊密連接的損傷[34-36]。IL-1β為單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的高效促炎細(xì)胞因子，研究認(rèn)為與腸道炎癥的發(fā)展有關(guān)。在感染、粘膜損傷和壓力的作用下，巨噬細(xì)胞能夠釋放IL-1β，進(jìn)而刺激T細(xì)胞增殖并觸發(fā)粘膜免疫反應(yīng)，從而促進(jìn)TNF-α表達(dá)的上調(diào)[37]。研究報(bào)道IL-1β還可通過(guò)激活腸上皮細(xì)胞NF-κB通路，增加腸道通透性，降低緊密連接蛋白的表達(dá)[38]。既往研究表明，地榆可以抑制潰瘍性結(jié)腸炎大鼠血清IL-1β和腸組織中NF-κB表達(dá)，升高IL-10水平[8]。本文研究結(jié)果顯示，LPS刺激后的IEC-6細(xì)胞以及小鼠均出現(xiàn)TNF-α和IL-1β表達(dá)顯著上升的現(xiàn)象，地榆可以顯著抑制LPS刺激導(dǎo)致的炎癥細(xì)胞因子釋放增加，提示地榆對(duì)腸道屏障功能的保護(hù)作用與減輕炎癥有關(guān)。

綜上所述，地榆可抑制炎癥細(xì)胞因子釋放和腸上皮細(xì)胞凋亡，促進(jìn)緊密連接恢復(fù)，改善腸道通透性，從而維持和保護(hù)腸道屏障功能。通過(guò)研究結(jié)果，可推測(cè)地榆對(duì)腸道屏障的保護(hù)作用可能和其抗炎作用和抑制凋亡有關(guān)。

以往研究顯示地榆可以通過(guò)改善潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的腸道菌群組成而修復(fù)腸黏膜屏障[14]，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步深入探討了地榆對(duì)腸道物理屏障關(guān)鍵指標(biāo)的影響，為地榆在臨床中治療腸道相關(guān)疾病提供了實(shí)驗(yàn)證據(jù)。

近年研究結(jié)果顯示，腸道屏障功能損傷除了和腸道相關(guān)疾病有關(guān)外，更和糖尿病、肝病、精神疾病等息息相關(guān)[39]。在后續(xù)的研究中，我們將對(duì)對(duì)地榆保護(hù)腸道屏障的作用組分或成分做進(jìn)一步的研究和探索，并對(duì)其中相關(guān)機(jī)制進(jìn)行深入研究，為保護(hù)腸道屏障功能的藥物研發(fā)提供一定參考。