基于JAK2/STAT3信號通路探討參茸地黃湯調(diào)控自噬改善糖尿病的作用機制＊

金美英，潘韋韋，崔鎮(zhèn)海＊＊

（1.長春中醫(yī)藥大學附屬第三臨床醫(yī)院 長春 130117；2.長春醫(yī)學高等?？茖W校健康學院 長春 130031）

2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）是一組以高血糖為特征由胰島素抵抗和胰島β細胞缺陷共同形成的代謝紊亂綜合征[1]。其發(fā)病隱匿，病程長，容易被人忽視，致使糖尿病患者較正常人發(fā)生嚴重危及生命事件的風險大大增加，且給患者及社會帶來較重的醫(yī)療負擔[2]，因此防治糖尿病已經(jīng)成為刻不容緩的重大問題。

中醫(yī)學將T2DM稱之為消渴病，又名“脾癉”、“消中”、“消癉”，《金匱要略》首以“消渴”為篇名，以腎虛辨治消渴，認為腎虛是消渴病發(fā)生發(fā)展的關鍵，先天稟賦不足，腎精虧虛，腎陰陽虛衰，封藏失司，上不能蒸騰津液于肺，下不能氣化達于膀胱，開闔失司，氣不化津，故見消渴諸癥，腎精虧損日久，精血難生，脈道不充，加之氣血津液不行，脈道瘀阻，結(jié)而成瘀，因此本研究以“腎虛血瘀”理論為基礎，擬參茸地黃湯，本方由鹿茸、熟地、丹參、山藥、山萸肉、黃連、茯苓、牡丹皮、骨碎補組成，以補腎活血，添精益腎。

JAK2/STAT3信號通路是參與機體分化、代謝、血管再生與侵襲的重要信號通路[3]，對氧化應激及細胞自噬、增殖、凋亡等發(fā)揮重要作用[4]。內(nèi)源性酪氨酸激酶2（ja-nus kinase signal transducers 2，JAK2）是一種信號轉(zhuǎn)導因子，信號傳導和轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transduc-ers and activators of transcription 3，STAT3）為其受體，JAK2/STAT3信號通路的啟動需要IL-6、TNF-α等炎癥因子的參與，其中IL-6等TH2族細胞因子抑制自噬，TNF-α等TH1族細胞因子能夠誘導自噬[5]。同時，該通路的活化又可促進大量炎癥因子的釋放，形成瀑布式炎癥級聯(lián)反應[6]。當炎癥基因表達的水平過高時，通過激活自噬可抑制炎癥因子水平[7]，減少組織損傷。自噬是存在于真核細胞中的一種程序化降解機制。自噬失衡參與了T2DM的發(fā)生發(fā)展[8-11]。Liang等[12]首次證實Beclin-1是一種自噬標志性蛋白質(zhì)，Beclin-1屬于酵母Atg6基因的同源物，為第一個在哺乳動物細胞中被發(fā)現(xiàn)的自噬基因[13]，當Beclin-1蛋白質(zhì)的BH3結(jié)構與凋亡抑制蛋白質(zhì)B細胞淋巴瘤類蛋白質(zhì)的結(jié)合可抑制自噬的發(fā)生，而當?shù)蛲鲆种频鞍譈淋巴瘤類蛋白質(zhì)從Beclin-1上脫落時，自噬可被誘導[14]。微管相關蛋白 1A/1B-輕鏈 3（Microtubuleassociated protein 1A/1B-light chain 3，LC3）屬于自噬體膜上標志性蛋白，其修飾對自噬體的形成至關重要[15-16]，LC3的存在是胞漿到空泡靶向囊泡的必要條件[17]，其表達情況在一定程度上可以反應自噬體的數(shù)量，這與證實自噬存在具有密切相關性[18]。研究表明：細胞自噬是細胞器功能和胰島素信號的重要調(diào)節(jié)因子[19]，抑制自噬能減緩因內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激而導致的胰島素受體水平減少[20]。葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4（GLUT4）是胰島素敏感組織的主要葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白，主要介導胰島素作用下的葡萄糖轉(zhuǎn)運，在肝臟組織葡萄糖利用中發(fā)揮限速作用[21]，GLUT4在2型糖尿病小鼠的肝臟中表達降低，是肝臟胰島素抵抗的重要原因之一[22]，自噬可通過胰島素信號通路達到對GLUT4蛋白的轉(zhuǎn)位（從細胞質(zhì)轉(zhuǎn)位于細胞膜）和GLUT4儲存囊泡釋放的影響[23]?；诖耍狙芯炕贘AK2/STAT3信號通路，探討參茸地黃湯影響自噬治療2型糖尿病的可能作用機制，為中醫(yī)藥防治2型糖尿病尋找新的靶點。

1 材料與儀器

1.1 動物

8周齡SPF級SD雄性大鼠，實驗動物購自長春市億斯實驗動物技術有限責任公司，許可證號：SCXK（吉）2018-0007。體質(zhì)量180-220 g，共80只，飼養(yǎng)于長春中醫(yī)藥大學實驗動物中心無特殊病原體動物（SPF）級屏障實驗室（許可證號：SYXK（吉）2018-0013）。

1.2 實驗飼料

SD大鼠普通維持飼料購自長春市億斯實驗動物技術有限責任公司，許可證號：SCXK（吉）2015-0005，成分：18%粗蛋白+4%粗脂肪+5%粗纖維+8粗灰分+1%鈣+0.6%磷+10%水分+0.82%賴氨酸+0.53%（蛋氨酸+胱氨酸）；高脂飼料購自北京科澳協(xié)力飼料有限公司，許可證號：SCXK（京）2019-0003，成分：67%維持飼料+10%豬油+20%蔗糖+2.5%膽固醇+0.5%膽酸鈉。

1.3 藥物及試劑

參茸地黃湯由長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院制劑室提供，保存于4℃冰箱，參茸地黃湯藥物組成：鹿茸10 g、熟地20 g、丹參20 g、山藥20 g、山萸肉15 g、黃連15 g、茯苓15 g、牡丹皮15 g、骨碎補20 g。按比例混合中藥，水煎濾渣取汁，制成中藥溶液。鹽酸二甲雙胍片（中美上海施貴寶制藥有限公司，國藥準字H20023371）。鏈脲佐菌素（美國Sigma公司，貨號WXBC2044V）；JAK2抗體（Proteintech，貨號17670-1-AP）；STAT3抗體（Proteintech，貨號60199-1-1g）；LC3抗體（Proteintech，貨號 14600-1-AP）；Beclin-1抗體（Proteintech，貨號11306-1-AP）；GLUT2抗體（Proteintech，貨號20436-1-AP ）；β-actin抗體（Proteintech，貨號600008-1-lg）；WB羊抗兔IgG HRP標記（Proteintech，貨號SA00001-2）。

1.4 儀器

全自動生化分析儀（深圳雷杜生命科技，型號Chemray 800）；病理切片機（上海徠卡儀器有限公司，型號RM2016）；包埋機（武漢俊杰電子有限公司；型號JB-P5）；-80℃冰箱（深圳市科力易翔儀器設備有限公司，型號DW-86L490J）；高速冷凍離心機（DRAGONLAB，型號D3024R）；電泳儀（BIOTED；型號1704486）；凝膠成像系統(tǒng)（上海天能科技有限公司；型號Tanon-1600R）；電子天平（賽多利斯科學儀器有限公司；SQP）。

2 方法

2.1 動物模型的建立

SD大鼠適應性喂養(yǎng)3天后，10只SD大鼠予普通維持飼料，其余70只SD大鼠予高脂飼料，所有SD大鼠均自由進食水，高脂飼料喂養(yǎng)4周后，予進食高脂飼料的70只SD大鼠禁食不禁水12 h，予鏈脲佐菌素（STZ）40 mg·kg-1單次腹腔注射，72 h后用羅氏血糖儀（ACCU-CHEK）及試紙測大鼠空腹尾靜脈血糖≥16.7 mmol·L-1[12]，即為造模成功。

2.2 分組及給藥

10只SD大鼠為對照組，造模成功的2型糖尿病SD大鼠隨機分為4組，即模型組（12只）、參茸地黃湯低劑量組（12只）、高劑量組（12只），鹽酸二甲雙胍組（12只）?？瞻讓φ战MSD大鼠予維持飼料，模型組、參茸地黃湯低、高劑量組、鹽酸二甲雙胍組大鼠繼續(xù)予高脂飼料喂養(yǎng)，各組大鼠均自由進食水。分組后，模型組與對照組大鼠以等體積蒸餾水灌胃，參茸地黃湯低劑量組灌胃劑量為1.5 g·kg-1·d-1，高劑量組灌胃劑量為4.5 g·kg-1·d-1，鹽酸二甲雙胍組以鹽酸二甲雙胍片研磨成粉末，溶于蒸餾水配置鹽酸二甲雙胍藥物溶液,給藥劑量為 0.15 g·kg-1·d-1，各組每日固定時間灌胃，每日1次，均灌胃4周。

2.3 樣本制備

各組大鼠灌胃4周后，禁食不禁水12 h，大鼠用10%水合氯醛（0.35 mL·100 g-1）腹腔注射麻醉，經(jīng)大鼠腹主動脈取血，于10 mL離心管中靜置2 h，3500 r·min-1低溫高速離心15分min，取上層血清，放入2.5 mL離心管,置于-80℃冰箱保存待后續(xù)檢測。處死SD大鼠后，冰上取材，暴露SD大鼠腹腔及肝臟組織，迅速用鑷子及剪刀分離并取出肝臟組織，取出離體的肝臟組織迅速置于4%多聚甲醛固定液中固定，部分放入凍存管置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.4 檢測方法

2.4.1 一般狀態(tài)及體質(zhì)量檢測

觀察各組大鼠的活動狀態(tài)、皮毛色澤及精神狀態(tài)，從藥物干預第1周開始，每周測1次各組SD大鼠的體質(zhì)量，觀察各組SD大鼠體質(zhì)量變化。

2.4.2 血清學檢測

全自動生化儀檢測空腹血糖（FBG）、糖化學清蛋白（GSP）、甘油三酯（TG）、膽固醇（CHO）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、游離脂肪酸（FFA）。空腹血清胰島素（INS），計算胰島素抵抗指數(shù)HOMA-IR=FBG×FINS/22.5。

2.4.3 HE染色

將大鼠肝臟組織切片用二甲苯、無水乙醇和酒精進行脫蠟，脫蠟后用蒸餾水清洗，然后進行蘇木素染色及伊紅染色，染色完成后進行透明處理，并用中性樹膠封片。最后用顯微鏡鏡檢觀察SD大鼠肝臟組織形態(tài)，并圖像采集分析。

2.4.4 Western blot法檢測 JAK2、STAT3、Beclin-1、LC3、GLUT2蛋白的表達

大鼠肝臟組織用預冷PBS清洗后分成小塊，置于勻漿管中，加入蛋白酶抑制劑，加入RIPA裂解液進行勻漿。后放入裂解液讓肝臟組織完全裂解并以12000 r·min-14℃離心10 min得到總蛋白溶液。用BCA蛋白濃度測定試劑盒測取未變性的蛋白溶液濃度。蛋白質(zhì)溶液加入5×還原型蛋白上樣緩沖液，并置于沸水浴中15 min變性，然后在-20℃冰箱中保存。配置5%的濃縮膠，加入TEMED后立即混合均勻并灌膠，膠制備好后，準備電泳。準備好濾紙和PVDF膜，甲醇活化2 min，在盆里放入轉(zhuǎn)移液，300 mA恒流進行轉(zhuǎn)膜30 min。轉(zhuǎn)模時設備放入冰水中降溫。孵育槽中加入TBST，將轉(zhuǎn)印完的膜放入其中，清洗后，加入的脫脂奶粉，然后進行封閉。按說明書稀釋并加入一抗、二抗，反復用TBST洗膜直至干凈。將PVDF膜的蛋白面朝上置于兩膜之間，進行顯影和定影，根據(jù)不同的發(fā)光強度調(diào)整曝光條件。

2.5 統(tǒng)計學分析

運用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件進行分析，數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布又符合方差齊性，使用單因素ANOVA分析，不符合正態(tài)分布，使用Kruskal Wallis秩和檢驗。數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差（）表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.01為差異有顯著意義。繪圖應用GraphPad Prism 7軟件。

3 結(jié)果

3.1 參茸地黃湯對SD大鼠一般狀態(tài)、體質(zhì)量的影響

3.1.1 參茸地黃湯對大鼠的一般狀態(tài)的影響

對照組SD大鼠精神狀態(tài)良好，反應靈敏，皮毛有光澤；模型組的2型糖尿病SD大鼠倦怠嗜睡，動作遲緩，皮毛脫落無光澤，參茸地黃湯低、高劑量組及鹽酸二甲雙胍組2型糖尿病SD大鼠活動狀態(tài)、皮毛色澤以及精神狀態(tài)方面，均較模型組2型糖尿病SD大鼠改善，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，動作靈敏度增加，皮毛脫落減少，整體狀況優(yōu)于模型組。

3.1.2 參茸地黃湯對大鼠體質(zhì)量的影響

造模成功后，予2型糖尿病SD大鼠參茸地黃湯低、高劑量及鹽酸二甲雙胍藥物干預，從繪制的各組SD大鼠體質(zhì)量折線圖可以看出，對照組SD大鼠體質(zhì)量平穩(wěn)上升，模型組、參茸地黃湯低、高劑量組及鹽酸二甲雙胍組大鼠體質(zhì)量均呈下降趨勢，但各給藥組大鼠體質(zhì)量下降幅度均較模型組減慢（表1）。

3.2 參茸地黃湯對SD大鼠糖、脂代謝的影響

3.2.1 參茸地黃湯對SD大鼠糖代謝的影響

藥物干預4周后，與對照組比較，模型組大鼠FBG、GSP、FINS均顯著上升（P＜0.05，P＜0.01），參茸地黃湯低、高劑量組及鹽酸二甲雙胍組可顯著降低2型糖尿病大鼠FBG、GSP、FINS水平（P＜0.05，P＜0.01），計算大鼠HOMA-IR，與對照組比較，模型組大鼠HOMAIR顯著上升，參茸地黃湯低、高劑量組及鹽酸二甲雙胍組顯著下降（P＜0.01）（表2）。

3.2.2 參茸地黃湯對 SD 大鼠脂代謝的影響

藥物干預4周后，與對照組比較，模型組大鼠TG、CHO、LDL-C、FFA均顯著上升（P＜0.05，P＜0.01），參茸地黃湯低、高劑量組及鹽酸二甲雙胍組可顯著降低2型糖尿病大鼠TG、CHO、LDL-C、FFA水平（P＜0.05，P＜0.01）。與對照組比較，模型組大鼠HDL-C顯著下降，參茸地黃湯及鹽酸二甲雙胍組可提高HDL-C水平（P＜0.01）（表3）。

3.3 參茸地黃湯對SD大鼠肝臟組織病理形態(tài)的影響

對照組SD大鼠肝臟組織整體結(jié)構完整清晰,細胞排列緊密有序、大小均勻；模型組SD大鼠肝臟組織細胞排列散亂，可見大量脂肪空泡，細胞間隙擴大；與模型組大鼠比較，參茸地黃湯低、高劑量組及鹽酸二甲雙胍組大鼠肝臟組織形態(tài)結(jié)構均有改善（圖1）。

3.4 參茸地黃湯對SD大鼠肝臟組織JAK2、STAT3、Beclin-1、LC3、GLUT4蛋白表達的影響

3.4.1 參茸地黃湯對SD大鼠肝臟組織JAK2、STAT3蛋白表達的影響

Western blot結(jié)果顯示，與對照組相比，模型組SD大鼠肝臟組織JAK2蛋白表達顯著降低（P＜0.01），與模型組比較，參茸地黃湯低、高劑量組及鹽酸二甲雙胍組JAK2蛋白表達顯著升高（P＜0.01），中藥高劑量組升高較西藥組更為明顯（P＜0.01）（圖2）。

表1 參茸地黃湯對SD大鼠體質(zhì)量的影響（，g）

表1 參茸地黃湯對SD大鼠體質(zhì)量的影響（，g）

注：中藥組即參茸地黃湯；西藥組即鹽酸二甲雙胍；與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；給藥組與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；中藥組與西藥組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

給藥第4周410.42±7.33 307.21±8.84**329.83±15.06**351.08±16.56**#337.70±8.98**組別對照組模型組中藥低劑量組中藥高劑量組西藥組例數(shù)10 8 9 1 0 10給藥第1周330.37±4.19 370.40±8.07**364.50±5.74**360.91±8.92**353.46±9.95*給藥第2周355.80±4.44 334.12±8.02*345.72±6.68 352.02±8.74 345.32±9.20給藥第3周386.40±5.35 321.82±8.01**330.50±8.53**345.40±14.57*337.59±10.83**

表2 參茸地黃湯對SD大鼠糖代謝的影響（）

表2 參茸地黃湯對SD大鼠糖代謝的影響（）

注：中藥組即參茸地黃湯；西藥組即鹽酸二甲雙胍。與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。給藥組與模型組比較，#P＜0.05，##P ＜ 0.01，參茸地黃湯組與鹽酸二甲雙胍組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

HOMA-IR 1.81±0.08 11.83±1.35**6.76±0.79**##6.29±1.16**##7.16±0.96**##組別對照組模型組中藥低劑量組中藥高劑量組西藥組例數(shù)10 8 9 1 0 10 FBG（mmol·L-1）5.53±0.27 24.36±1.17**19.20±1.73**#14.91±2.59**##17.17±2.11**##GSP（mmol·L-1）1.58±1.12 2.42±0.17*1.96±0.17#1.97±0.12#1.94±0.15#FINS（mU·L-1）7.88±0.12 11.86±0.74**8.91±0.39#8.47±0.56##9.40±1.19#

表3 參茸地黃湯對SD大鼠脂代謝的影響（，mmol·L-1）

表3 參茸地黃湯對SD大鼠脂代謝的影響（，mmol·L-1）

注：中藥組即參茸地黃湯；西藥組即鹽酸二甲雙胍；與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。；給藥組與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；參茸地黃湯組與鹽酸二甲雙胍組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

FFA 0.85±0.14 1.46±0.15*1.05±0.09#0.93±0.07##1.24±0.13*組別對照組模型組中藥低劑量組中藥高劑量組西藥組例數(shù)10 8 9 1 0 10 TG 0.91±0.12 1.45±0.22*1.06±0.08 1.05±0.07 1.05±0.20 CHO 1.97±1.13 4.72±0.33**3.22±0.14**##3.19±0.11**##3.43±0.16**##HDL-C 1.62±0.20 0.87±0.06**1.05±0.06**▲1.46±0.05##1.49±0.16##LDL-C 0.41±0.05 1.35±0.14*0.62±0.10##0.56±0.4##0.66±0.14##

與對照組相比，模型組SD大鼠肝臟組織STAT3顯著降低（P＜0.01），與模型組比較，參茸地黃湯低、高劑量組及鹽酸二甲雙胍組STAT3顯著升高（P＜0.01），其中西藥組升高較中藥組明顯（P＜0.01，P＜0.05）（圖2）。

3.4.2 參茸地黃湯對 SD 大鼠肝臟組織Beclin-1、LC3蛋白表達的影響

Western blot 結(jié)果顯示，與對照組相比，模型組SD大鼠肝臟組織Beclin-1蛋白表達顯著升高（P＜0.01），與模型組比較，參茸地黃湯高劑量組及鹽酸二甲雙胍組Beclin-1蛋白表達顯著下降（P＜0.01，P＜0.05），鹽酸二甲雙胍組Beclin-1蛋白表達水平下降與中藥組有顯著差異（P＜0.01）（圖3）。

與對照組相比，模型組SD大鼠肝臟組織LC3Ⅱ/Ⅰ顯著升高（P＜0.01），與模型組比較，參茸地黃湯低、中劑量組及鹽酸二甲雙胍組LC3II/I顯著降低（P＜0.01），參茸地黃湯低、中劑量組的LC3II/I降低較鹽酸二甲雙胍組更為明顯（P＜0.01）（圖3）。

3.4.3 參茸地黃湯對SD大鼠肝臟組織GLUT4蛋白表達的影響

圖1 各組SD大鼠肝臟組織HE染色（×200）

圖2 各組SD大鼠肝臟組織JAK2、STAT3蛋白表達情況

圖3 各組SD大鼠肝臟組織Beclin-1、LC3蛋白表達情況

圖4 各組SD大鼠肝臟組織GLUT4蛋白表達情況

Western blot結(jié)果顯示，與對照組相比，模型組SD大鼠肝臟組織GLUT4蛋白表達顯著降低（P＜0.01），與模型組比較，參茸地黃湯低、高劑量組及鹽酸二甲雙胍組GLUT4蛋白表達顯著升高（P＜0.01），鹽酸二甲雙胍組GLUT4蛋白表達水平與中藥組比差異顯著（P＜0.01）（圖4）。

4 討論

2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）是一種慢性代謝性疾病，發(fā)病早期癥狀不明顯，往往被人忽視，導致致殘、致死率不容樂觀[24]?！锻馀_秘要·消渴消中》中記載：“…腎氣虛耗故也，下焦生熱，熱則腎燥，腎燥則渴。”腎氣虧耗是消渴病的主要病機，日久氣血虛損，脈道不充，氣機運行無力，化而為瘀，以致上無法散布津液潤澤于肺，下不能氣化于膀胱，因此常表現(xiàn)為多飲多食多尿。本研究以“腎虛血瘀”理論指導擬參茸地黃湯以補腎活血，組方鹿茸10 g、熟地20 g、丹參20 g、山藥20 g、山萸肉15 g、黃連15 g、茯苓15 g、牡丹皮15 g、骨碎補20 g，且其中多味藥被證實有良好的改善2型糖尿病的作用[25-30]。鹿茸性甘、咸、溫，歸肝腎經(jīng)，補腎陽、益精血、強筋骨，熟地性甘，微溫，入心肝腎經(jīng)，滋腎陰、補精血，二藥合用以補腎益髓，共為君藥。丹參苦、微寒，入心肝經(jīng)，活血通絡，山藥甘、溫、平，入肺脾腎經(jīng)，健脾補肺，固腎益精，山萸肉性酸、澀、微溫，入肝腎經(jīng)，補益肝腎，收澀固脫，黃連味苦，性寒、歸心、脾、胃、肝、膽、大腸經(jīng)，清熱燥濕，瀉火解毒?！睹t(yī)別錄》：“止消渴，利骨”。山藥、山萸肉補益三臟之陰，丹參、黃連活血祛瘀，且使補而不滯，五藥共為臣藥；茯苓入脾腎經(jīng)，利水滲濕，健脾寧心，牡丹皮入肝、腎經(jīng)，清熱涼血，活血化瘀，二藥共為佐藥；骨碎補入肝、腎經(jīng)，補腎強骨，入腎經(jīng)，引諸藥入腎，為本方之使，全方陰陽并補，補中有散，共奏補腎活血之效。

鹽酸二甲雙胍屬于雙胍類降糖藥物，通過減少糖異生、增加肝糖原儲存來治療糖尿病，研究表明，二甲雙胍具有明確的調(diào)控自噬的作用[31]。本研究中，STZ聯(lián)合高脂飼料誘導的2型糖尿病SD大鼠的肝臟組織JAK2、STAT3蛋白水平表達下降，予參茸地黃湯及鹽酸二甲雙胍后，JAK2、STAT3表達水平上升，其中JAK2蛋白表達參茸地黃湯高劑量組優(yōu)于鹽酸二甲雙胍組（P＜0.01），STAT3蛋白表達鹽酸二甲雙胍組優(yōu)于參茸地黃湯組（P＜0.05），實驗中模型組大鼠的肝臟組織Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ表達升高，自噬水平增強，而予參茸地黃湯及鹽酸二甲雙胍后，大鼠Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ表達水平下降，鹽酸二甲雙胍組Beclin-1蛋白表達下降較參茸地黃湯組明顯（P＜0.01），參茸地黃湯組LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表達下降優(yōu)于鹽酸二甲雙胍組（P＜0.01），各給藥組肝臟組織的過度自噬均緩解。在本研究中，模型組大鼠肝臟組織GLUT4表達下降，參茸地黃湯及鹽酸二甲雙胍給藥干預后，各給藥組GLUT4表達均提高（P＜0.01），鹽酸二甲雙胍組優(yōu)于參茸地黃湯組（P＜0.01），提示糖尿病大鼠肝臟組織的胰島素抵抗得到改善。

以上研究表明，參茸地黃湯治療2型糖尿病的機制可能是通過干預JAK2/STAT3信號通路，緩解2型糖尿病SD大鼠肝臟組織的過度自噬，提高GLUT4表達水平，改善胰島素抵抗實現(xiàn)的，為中醫(yī)防治2型糖尿病的現(xiàn)代化研究提供參考，但其具體的作用機制有待于進一步研究。