李國林,林平,李詠富,何揚波
(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展研究所,貴州 貴陽 550006;2.貴州金農(nóng)輻照科技有限責(zé)任公司,貴州 貴陽 550006)
動物源食品,富含蛋白質(zhì)、必需氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等多種營養(yǎng)成分,但是,豐富的營養(yǎng)為多種病原微生物提供了良好的生長條件,導(dǎo)致肉制品在加工、貯運過程中易受沙門氏菌、大腸桿菌、李斯特氏菌、鏈球菌屬等多種微生物的侵染[1]。有報道顯示由禽類及其肉制品引起的食源性疾病在全球時有發(fā)生[2]。加熱滅菌是動物源食品常用的控制微生物的措施,但加熱產(chǎn)生的高溫會對有些即食肉制品的食用品質(zhì)產(chǎn)生不良影響,例如高溫使肉制品中生成雜環(huán)胺等有害物質(zhì)[3]。
輻照保鮮技術(shù)是利用高能光子或帶電粒子殺滅食品中的病原微生物和害蟲,是一種典型的非熱殺菌技術(shù)[4],在解決食品安全和食品保鮮貯藏等問題中發(fā)揮著越來越重要的作用。聯(lián)合國糧農(nóng)組織(Food and Agriculture Organization of the United Nations,F(xiàn)AO)、世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)和國際原子能機構(gòu)(International Atomic Energy Agency,IAEA)于1980年在大量毒理學(xué)實驗研究基礎(chǔ)上證實10 kGy以下輻照處理的任何食品均不會產(chǎn)生毒理學(xué)上的危害[5],我國也通過大量輻照食品安全性的動物和人體實驗,證明了輻照食品對人體無害[6]。輻照技術(shù)在食品中的應(yīng)用已比較普遍,根據(jù)FAO和IAEA的統(tǒng)計,全世界超過55個國家批準(zhǔn)上市的輻照食品每年超50萬t,品類已達(dá)200多種[7-8]。輻照技術(shù)的商業(yè)化應(yīng)用范圍不斷擴大,越來越多的食品采取輻照方法進(jìn)行滅菌保鮮[9]。國際食品輻照咨詢小組推薦了七大類食品的輻照應(yīng)用,包括豆類、谷物及其制品,干果果脯類,熟畜禽肉類,冷凍包裝畜禽肉類,香辛料類,新鮮水果、蔬菜類以及水產(chǎn)品類[10]。
輻照加工方法主要有電離輻照技術(shù),如紫外線照射、γ-射線、電子束輻照以及非電離的微波輻照技術(shù)[9]。γ-射線和電子加速器產(chǎn)生的電子束因具有較高的能量,可以有效殺死食品中的微生物。因此,γ-射線和電子束輻照被廣泛用于動物源食品加工中[11]。電子加速器產(chǎn)生的電子束的能量通常高于γ-射線,但穿透性弱于γ-射線[12]。輻照可以殺滅肉中的微生物,寄生蟲,其原理是電離能量被DNA分子吸收后造成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中磷酸二酯鍵的斷裂,從而造成細(xì)胞不能自我復(fù)制[13]。與進(jìn)行食品保鮮的傳統(tǒng)物理方法(如加熱蒸煮、干燥、冷凍等處理方法)和化學(xué)方法(環(huán)氧乙烷、溴甲烷等化學(xué)消毒法或添加化學(xué)防腐劑法)相比,電離輻照技術(shù)具有安全、高效、“冷加工”等特點,能夠最大限度地保留食品的原有性狀和口感[14]。輻照技術(shù)應(yīng)用在動物源食品加工中不僅可以提高衛(wèi)生質(zhì)量,延長產(chǎn)品貨架期,而且可以減少亞硝酸鹽等化學(xué)防腐劑的添加量[1]。本文主要探討γ-射線輻照和電子束輻照以及與其保鮮措施復(fù)合使用在動物源食品中的應(yīng)用研究進(jìn)展,為輻照技術(shù)在動物源食品加工工業(yè)提供參考。
γ-射線輻照是最早應(yīng)用于肉制品加工中的輻照方法,適宜劑量的γ-射線照射不僅可以控制食源性微生物的生長,而且可以起到改善肉類品質(zhì)的作用。Hassanzadeh 等[15]研究表明,低劑量(約 2.5kGy)γ-射線輻照雞肉可以使雞肉的保質(zhì)期延長2周以上。0~10 kGy γ-射線輻照醬驢肉,對肉品色澤參數(shù)(L*值、a*值和b*值)以及硬度、膠著度、咀嚼度、彈性、黏聚性和回復(fù)性等質(zhì)構(gòu)指標(biāo)的影響沒有規(guī)律性,這說明在10 kGy以下沒有引起醬驢肉色澤和質(zhì)構(gòu)特性的顯著變化[16]。王守經(jīng)等[17]采用2.0 kGy~10.0 kGy輻照處理真空包裝醬驢肉,可以有效殺滅肉品表面的微生物,延緩貯藏期間微生物的繁殖,并且存在顯著的劑量效應(yīng),2.0 kGy~10.0 kGy的輻照劑量能夠有效抑制醬驢肉的pH值上升和揮發(fā)性鹽基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)含量增加,但劑量超過8 kGy時能夠誘發(fā)形成明顯的輻照味,影響產(chǎn)品的可接受性。朱佳延等[18]用高劑量γ-射線輻照雞肉脯后發(fā)現(xiàn),50 kGy以下劑量輻照處理后,雞肉脯的色澤、風(fēng)味與滋味、口感無明顯變化,可接受性好,當(dāng)劑量達(dá)到100 kGy~200 kGy顏色輕微變淺,呈棕色或棕褐色,但不影響品質(zhì),風(fēng)味與滋味沒有顯著變化,可接受性良好。
γ-射線在水產(chǎn)品中還具有脫敏的作用。研究發(fā)現(xiàn),γ-射線輻照可以使蟹肉中過敏蛋白的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,使過敏蛋白溶液的濃度下降,濁度增加,疏水性提高,過敏蛋白條帶消失,硝酸纖維素膜上無過敏條帶產(chǎn)生,并且隨輻照劑量增加,過敏蛋白與抗體的結(jié)合能力減弱,說明輻照有效降低了蟹過敏蛋白的致敏性[19]。顧可飛等[20]用γ-射線對蝦過敏蛋白進(jìn)行輻照后發(fā)現(xiàn)蝦過敏蛋白的結(jié)構(gòu)、濁度和疏水性均發(fā)生改變,并分析了不同存在狀態(tài)下過敏原輻照免疫學(xué)效應(yīng),發(fā)現(xiàn)輻照同樣可有效降低蝦過敏原的致敏性。廖濤等[21]用大劑量(10 kGy~70 kGy)γ-射線輻照克氏原螯蝦顯示,輻照能夠破壞致敏蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu),使多肽鏈斷裂或者相互交聯(lián),從而使抗原決定簇被掩蓋或破壞,降低致敏性,但在70 kGy未能使所有致敏蛋白質(zhì)條帶完全降解。
由此可見,不同劑量的γ-射線輻照不同種類的動物源食品會產(chǎn)生不同的效果,在禽、畜產(chǎn)肉產(chǎn)品中多以滅菌為主要用途,在水產(chǎn)品中主要以降低致敏性為主要目的,因此在選擇輻照劑量時應(yīng)根據(jù)不同的要求或目的和產(chǎn)品自身的特性選擇適宜的殺菌劑量。
電子束相對于γ-射線具有輻照時間短的特點,但射線穿透性較弱,適宜于密度低、包裝體積小的產(chǎn)品。肖歡等[22]對比γ-射線和電子束輻照對冷鮮雞肉中菌群的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)2.5 kGy的γ-射線和電子束輻照能夠顯著降低菌落總數(shù),且電子束處理組比γ-射線輻照處理組滅菌效果更好。Jo等[23]使用電子束處理熏鴨肉的原料肉,結(jié)果表明鴨肉中的亮氨酸、異亮氨酸、組氨酸、絲氨酸等含量增加,不飽和脂肪酸含量下降,在3 kGy劑量下,熏鴨產(chǎn)品在保持原有品質(zhì)的前提下,貨架期得到顯著延長。Feng等[24]探討不同電子束輻照劑量(0~4.5 kGy)對生牛肉品質(zhì)的影響,結(jié)果表明,小于4.5 kGy電子束輻照是真空包裝生牛肉的最佳劑量,能夠有限延長貨架期且不影響其理化特性。
近年來,電子束輻照在水產(chǎn)品的應(yīng)用研究逐漸增多。鉏曉艷等[25]發(fā)現(xiàn)4 kGy電子束輻照鱸魚半成品,可達(dá)到滅菌目的,并有效控制魚肉色度、pH值和持水性,最大限度地保持產(chǎn)品原有風(fēng)味和品質(zhì)。郭紅霞等[26]發(fā)現(xiàn),三文魚經(jīng)1.0 kGy電子束輻照后,其貨架期由6 d延長至12 d,并且樣品的感官品質(zhì)變化較小,貯藏期內(nèi)魚肉的K值、TVB-N值增加的速度均低于對照組,但2 kGy處理組和4 kGy處理組的樣品色澤變淡,產(chǎn)生輕微輻照味。Yang等[27]推薦0.5 kGy電子束輻照鮭魚結(jié)合真空包裝能夠?qū)Ⅴq魚貨架期從6 d延長到12 d,理化指標(biāo)(TVB-N,pH值,水溶蛋白)沒有發(fā)生明顯變化。當(dāng)電子束劑量為6 kGy時,即食小龍蝦的總氨基酸、必需氨基酸和呈味氨基酸含量顯著增加,含硫化合物含量較低,無輻照味,質(zhì)構(gòu)影響不明顯,6 kGy電子束輻照提升了即食小龍蝦的營養(yǎng)價值及風(fēng)味,顯著延長其常溫下的貯藏時間[28]。
電子束輻照對水產(chǎn)品不僅能夠延長貯藏期,而且可以改變魚糜內(nèi)源性轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(transglutaminase,TGase)的結(jié)構(gòu)及其活性,從而影響魚糜凝膠的形成[29-30]。Deng等[31]利用電子束輻照處理梅魚魚糜,發(fā)現(xiàn)5 kGy劑量可以顯著提高魚糜凝膠強度,這可能與輻照引起魚肉肌原纖維蛋白α-螺旋含量的下降有關(guān);Malik等[32]研究發(fā)現(xiàn)輻照作用于向日葵蛋白,引起蛋白α-螺旋含量降低和β-折疊含量增加;顧可飛[33]發(fā)現(xiàn)電子束輻照能抑制液態(tài)多酚氧化酶的活性;羅華彬等[34]認(rèn)為電子束輻照通過影響帶魚魚糜肌原纖維結(jié)合型絲氨酸蛋白酶和組織蛋白酶L的二級結(jié)構(gòu),抑制這兩種內(nèi)源性蛋白酶活性,減輕對肌原纖維蛋白的降解作用,從而起到防止凝膠劣化,有利于形成高品質(zhì)帶魚魚糜凝膠的作用。輻照引起魚糜TGase分子中的二級結(jié)構(gòu)單元轉(zhuǎn)變,導(dǎo)致其構(gòu)象變化,適宜劑量電子束輻照能使TGase酶蛋白分子中結(jié)構(gòu)相對緊密的α-螺旋和β-轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化為較松散的β-折疊及無規(guī)卷曲,有利于TGase活性基團(tuán)的暴露,有效提高魚糜TGase活性,促進(jìn)帶魚魚糜凝膠的形成,提高帶魚的食用品質(zhì)[35]。
與γ-射線相比,電子束輻照同樣可以達(dá)到殺菌的效果,對一些水產(chǎn)品也能夠起到改善食用品質(zhì)的作用,但有研究指出,電子束輻照照引起的脂肪氧化效應(yīng)小于同等劑量γ-射線輻照引起的氧化效應(yīng),這可能是由于電子束存在還原效應(yīng)[36-37]。
食品在適當(dāng)?shù)膭┝肯逻M(jìn)行輻照處理,不會引起食品中原子核的變化,但會產(chǎn)生一些其他的化學(xué)反應(yīng),比如食品中的核酸、蛋白質(zhì)、脂類等生物大分子經(jīng)輻照后易發(fā)生電離、激發(fā)和化學(xué)鍵斷裂,導(dǎo)致結(jié)構(gòu)破壞和功能喪失,其次食物中的水分子發(fā)生輻解,形成羥基自由基、水合電子、過氧化氫等強氧化或強還原的帶電物質(zhì),再作用于生物大分子,導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)破壞,從而使生物體活性受到損傷[11,38]。
脂肪是食物成分中最不穩(wěn)定的物質(zhì),對輻照非常敏感。關(guān)于輻照促進(jìn)食品中脂類氧化的報道較多,Xiao等[39]研究指出在3 kGy輻照雞大腿肉會加速脂肪的氧化,并與劑量存在正相關(guān)關(guān)系。Badr等[40]發(fā)現(xiàn)經(jīng)過輻照加工的牛肉,其過氧化值、硫代巴比妥酸反應(yīng)物(thiobarbituric acid reactive substances,TBARS)值及羰基化程度都有顯著增高。輻照處理后的肉品在有氧條件下貯藏,很快產(chǎn)生特征輻照味,輻照加速了脂肪中不飽和脂肪酸的自動氧化過程,產(chǎn)生大量的氫過氧化物和羰基化合物等含氧產(chǎn)物[13]。
此外,肉制品中的水溶性維生素與水的輻解產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng),脂溶性維生素與脂質(zhì)的輻解產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)。維生素B1是對輻照最敏感的維生素,而其他的B族維生素卻對輻照不敏感。維生素C在肉中起到抗氧化劑的作用,經(jīng)輻照后轉(zhuǎn)變?yōu)槊摎淇箟难?,維生素A和維生素E是所有脂溶性維生素中對輻照較為敏感的兩種維生素[11]?;谝陨显?,輻照肉制品在實際生產(chǎn)中存在一些瓶頸,比如脂肪的輻射氧化、蛋白質(zhì)輻射裂解、輻照味的產(chǎn)生等,因此常常需要其他輔助措施完成輻照工藝,降低因輻照工藝帶來的負(fù)面影響。
生鮮雞肉添加3%姜黃粉在1kGy~2kGyγ-射線輻照后,細(xì)菌總數(shù)顯著降低,在2kGy時,細(xì)菌全部殺滅,雞肉中血紅素各項指標(biāo)均優(yōu)于對照組處理,過氧化值、TVB-N值均低于未添加姜黃粉的處理組[2]。2.5 kGy γ-射線復(fù)合殼聚糖(含0.1%葡萄籽提取物)涂膜輻照雞肉,結(jié)果表明,殼聚糖涂膜組能夠延緩由輻照引起的脂質(zhì)過氧化,TBARS和pH值均低于未涂膜的對照組,且雞肉的風(fēng)味,外觀和整體的可接受度均優(yōu)于對照組[15]。Abdeldaiem等[41]研究γ-射線輻照雞腿肉,發(fā)現(xiàn)由2%木瓜乙醇提取物和果膠制成的可食性涂膜對輻照雞腿肉具有保護(hù)作用,在6 kGy輻照后,TBARS僅有輕微的增加,TVB-N沒有變化,在感官品質(zhì)方面,涂膜后的雞腿肉并沒有不良?xì)馕懂a(chǎn)生。龍明秀等[42]對7種抗氧化劑進(jìn)行復(fù)配研究來提高在4 kGy劑量下輻照鹵雞翅貯藏過程中的氧化穩(wěn)定性,植酸和茶多酚按1∶1(0.01 g/100 mL 植酸+0.01 g/100 mL 茶多酚) 復(fù)配時,樣品pH值、過氧化值、酸價和TBARS變化最小,協(xié)同抗氧化效果最佳,且樣品的感官品質(zhì)和色澤保持較好,其能較好地保持輻照鹵制雞翅的品質(zhì)和風(fēng)味。Nisar等[43]研究指出辣木根葉也具有提高輻照雞肉貯藏品質(zhì)的作用,在辣木根葉粉末添加量為2%的條件下雞肉輻照1.5 kGy和3.0 kGy,結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加辣木根葉粉的處理組在輻照后需氧細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群被有效控制,同時品質(zhì)指標(biāo)也未出現(xiàn)明顯改變,并得出結(jié)論1.5 kGy輻照和2%辣木根葉復(fù)合是最佳的輻照條件。包裝方式同樣對維持輻照肉制品的品質(zhì)有關(guān)鍵的作用。研究發(fā)現(xiàn),真空包裝能夠很好的提升肉制品輻照后的貯藏品質(zhì),減緩輻照帶來的負(fù)面效應(yīng)[1,44],周亞軍等[45]比較了真空包裝與氣調(diào)包裝(75% CO2+25% N2)醬牛肉,發(fā)現(xiàn)真空包裝的醬牛肉能更好地抑制輻照引起的品質(zhì)改變,且貨架期更長。綜上所述,輻照作為一種殺菌方法也有其局限性,單一采用某一種殺菌方法很難達(dá)到預(yù)期的保鮮效果,因此輻照與其他保鮮方法聯(lián)合施用是未來食品輻照保鮮的一個重要方向。
輻照加工,無論是γ-射線還是電子束都對動物源食品中的微生物起到良好控制作用,提高食用安全性和貯藏品質(zhì)不僅如此,輻照在抑制發(fā)芽、殺蟲、脫敏、降農(nóng)殘和脫除真菌毒素方面均有作用[46-48]。
目前,輻照技術(shù)在多種肉制品的保鮮中均有不同程度的嘗試和應(yīng)用,但多集中在試驗研究階段,還未大范圍的應(yīng)用在實際生產(chǎn)中,這可能是因為肉制品中脂肪含量較多,而脂肪對輻照劑量較敏感。因此,選擇適當(dāng)?shù)妮椪談┝渴侨庵破份椪展に囍兄匾目刂茀?shù)。多種研究表明,肉制品輻照時結(jié)合少量的抗氧化劑、防腐劑及其其他一些天然的食品添加劑的復(fù)合保鮮方法能夠降低由輻照引起的對肉制品品質(zhì)的負(fù)面影響。