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    血液分析聯(lián)合白細(xì)胞分類散點圖在急性白血病初診患者中的診斷價值

    2022-03-12 13:22:28包艷尹春瓊耿婭萍呂金娥董靜
    實用檢驗醫(yī)師雜志 2022年4期
    關(guān)鍵詞:血細(xì)胞側(cè)向血常規(guī)

    包艷 尹春瓊 耿婭萍 呂金娥 董靜

    作者單位:655000 云南曲靖,云南省曲靖市第二人民醫(yī)院檢驗科

    白血病是一種造血干細(xì)胞惡性增殖性疾病,急性白血病是白血病的一種,主要表現(xiàn)為在較早階段出現(xiàn)血細(xì)胞分化阻滯。胸骨壓痛、肝脾和淋巴結(jié)腫大為白血病的主要臨床癥狀,同時可以出現(xiàn)不同程度的貧血、出血和感染。由于白血病細(xì)胞大量增生,骨髓腔內(nèi)壓力增高,以及白血病細(xì)胞浸潤,使竇樣隙屏障被破壞,各階段的不成熟細(xì)胞進入血液,浸潤其他器官和組織,外周血常出現(xiàn)白細(xì)胞增多,并可見各階段幼稚細(xì)胞,以及出現(xiàn)髓外白血病浸潤現(xiàn)象[1]。白血病的發(fā)病率在各類腫瘤中位居第六,是兒童和青年中最常見的一種惡性腫瘤,約占腫瘤總患者數(shù)的3%。目前我國有約400萬名白血病患者,且患者的增長速度在近年來呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢,每年約有新增白血病患者6.6萬名,病死率也逐漸增高,每年約有5.5萬名白血病患者死亡[2]。目前,白血病的診斷主要依據(jù)患者的臨床表現(xiàn)、血象及骨髓象,以及基因檢測;并與骨髓增生異常綜合征(elodysplastic syndromes,MDS)等疾病進行鑒別診斷。白血病最常用的初篩手段為血常規(guī)檢查,通過觀察血常規(guī)指標(biāo)變化,早期診斷白血病一直是檢驗支撐臨床的重要體現(xiàn)[3]。本研究以2013年9月28日—2022年3月31日曲靖市第二人民醫(yī)院收治的129例白血病患者作為研究對象,對其血常規(guī)指標(biāo)及白細(xì)胞散點圖等資料進行回顧性分析,旨在探討白細(xì)胞散點圖聯(lián)合血常規(guī)指標(biāo)在白血病初篩中的應(yīng)用價值,現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

    1 資料和方法

    1.1研究對象及分組 選擇曲靖市第二人民醫(yī)院2013年9月28日—2022年3月31日收治的首次診斷為急性白血病的129例患者作為研究對象,納入急性白血病組;另外選擇同期入院體檢的100名健康體檢者作為對照組。

    1.1.1納入標(biāo)準(zhǔn) 首次在本院確診為急性白血病。

    1.1.2排除標(biāo)準(zhǔn) ① MDS患者;② 其他原因?qū)е掳准?xì)胞異常;③ 近期使用過可能導(dǎo)致血常規(guī)指標(biāo)發(fā)生變化的藥物;④ 患有巨幼細(xì)胞性貧血。

    1.1.3倫理學(xué) 本研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn),并經(jīng)本院倫理委員會審批(審批號:2022-074-01),所有檢測均獲得過本人或家屬的知情同意。

    1.2儀器與試劑 sysmex系列全自動血細(xì)胞分析儀(包括XN9000、XT-4000i、XT-2000i型號,購自日本希森美康株式會社);奧林巴斯CX53顯微鏡〔購自奧林巴斯(中國)有限公司〕;瑞氏-吉姆薩染色液(購自珠海貝索公司);乙二胺四乙酸二鉀(dipotassium ethylene diamine tetraacetate,EDTA-K2)真空抗凝管。

    1.3研究方法 急性白血病組患者確診后于治療前進行血常規(guī)檢查,檢查前禁煙、酒,檢查日晨起空腹采血。采用全自動血細(xì)胞分析儀檢查血常規(guī),統(tǒng)計兩組白細(xì)胞計數(shù)(white blood cell count,WBC)、血紅蛋白(hemoglobin,Hb)與血小板計數(shù)(platelet count,PLT)水平。利用射頻、電阻抗和細(xì)胞化學(xué)染色法原理,通過結(jié)合幼稚細(xì)胞計數(shù)、免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)、白細(xì)胞分類散點圖來進行白血病篩查和初步分類。對于出現(xiàn)異常白細(xì)胞分類散點圖的標(biāo)本進行染色鏡檢,判斷是否存在異常細(xì)胞?;仡櫡治黾毙园籽〗M的血常規(guī)及白細(xì)胞分類散點圖,結(jié)果顯示W(wǎng)BC處于正常參考值范圍的急性白血病患者有20例,對這20例患者進行分析。

    1.4正常參考值范圍 WBC:(4.0~10.0)×109/L。Hb:男性120~160 g/L,女性110~150 g/L;老年人(70歲以上):男性94.2~122.2 g/L,女性86.5~111.8 g/L。PLT:(100~300)×109/L。

    1.5白細(xì)胞散點圖各區(qū)域判讀 全自動血細(xì)胞分析儀主要借助半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞計數(shù)和核酸熒光技術(shù)檢測血液中的有形細(xì)胞,借助光學(xué)檢測器進行分析,利用半導(dǎo)體激光束,使用流式細(xì)胞計量方法檢測前向散射光、側(cè)向散射光和側(cè)向熒光,并繪制二維散點圖和直方圖。通過結(jié)合WBC、Ig、幼稚細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞分類散點圖來進行白血病篩查和初步分類。流式激光散射聯(lián)合熒光染色技術(shù)的基本原理是在鞘流作用下,以波長633 nm激光照射細(xì)胞,收集三類信號:① 前向散射光FSC反映細(xì)胞體積大??;② 側(cè)向散射光SSC反映細(xì)胞內(nèi)部構(gòu)造復(fù)雜程度;③ 側(cè)向熒光SFL反映細(xì)胞內(nèi)核酸及細(xì)胞器種類和多少。在散點圖上X軸表示側(cè)向散射光的強度,Y軸則表示側(cè)向熒光的強度。見圖1。

    圖1 白細(xì)胞散點圖各區(qū)域判讀

    1.6統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 23.0軟件分析相關(guān)數(shù)據(jù)。計量資料符合正態(tài)分布以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗;計數(shù)資料以例(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1一般資料 兩組性別、年齡等一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),有可比性。見表1。

    表1 對照組和急性白血病組的一般資料比較

    2.2兩組血常規(guī)指標(biāo)水平比較 急性白血病組的WBC水平明顯高于對照組,Hb和PLT水平均明顯低于對照組(均P<0.05)。見表2。

    表2 急性白血病組和對照組的血常規(guī)指標(biāo)水平比較(±s)

    表2 急性白血病組和對照組的血常規(guī)指標(biāo)水平比較(±s)

    注:WBC為白細(xì)胞計數(shù),Hb為血紅蛋白,PLT為血小板計數(shù)

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    2.3急性白血病患者血細(xì)胞數(shù)目異常情況和白細(xì)胞分類散點圖比較 20例WBC正常的患者白細(xì)胞分類散點圖都存在異常。見圖2。129例急性白血病患者中,WBC水平升高61例,降低39例,異常率為77.52%(100/129);Hb水平升高4例,降低110例,異常率為88.37%(114/129);PLT水平升高2例,降低103例,異常率為81.40%(105/129)。見表3。

    表3 急性白血病患者血常規(guī)指標(biāo)異常情況比較

    圖2 20例白細(xì)胞計數(shù)正常的急性白血病患者白細(xì)胞分類散點圖

    3 討論

    白血病的發(fā)病機制是因為造血干細(xì)胞異常的克隆增殖失控,細(xì)胞凋亡受阻,白血病細(xì)胞在骨髓中大量積聚,正常的造血功能受到抑制,臨床上以胸骨壓痛、肝脾和淋巴結(jié)腫大為主,同時可以出現(xiàn)不同程度的出血、貧血和感染等癥狀;白血病細(xì)胞的大量增生導(dǎo)致了骨髓腔內(nèi)壓力增高,同時白血病細(xì)胞浸潤,最終竇樣隙屏障遭到破壞,因此各階段的不成熟細(xì)胞可以順利進入血液,浸潤其他器官和組織。因此在外周血象中表現(xiàn)出白細(xì)胞增多,并可見各階段幼稚細(xì)胞,同時還出現(xiàn)髓外白血病浸潤。世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)對白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn):① 外周血/骨髓原始粒(或單核)細(xì)胞比例≥20%,可診斷為急性髓系白血?。虎?骨髓中原始/幼稚淋巴細(xì)胞≥20%,可診斷為急性淋巴細(xì)胞白血病/淋巴母細(xì)胞淋巴瘤[4]。

    隨著白血病診斷水平的不斷提高,其發(fā)病檢出率也呈逐年上升趨勢,尤其出現(xiàn)大量癥狀隱匿和體征不典型的病例,入院體檢血常規(guī)時發(fā)現(xiàn)異常,并在進一步的檢查中確診。本院統(tǒng)計的129例急性白血病中,血常規(guī)結(jié)果有109例WBC異常,20例WBC正常。其中20例WBC正常的白血病患者白細(xì)胞散點圖存在異常情況。此類患者若發(fā)現(xiàn)不及時,便很容易造成漏檢,延誤治療的最佳時機,造成患者死亡。相關(guān)研究指出,白細(xì)胞分類散點圖在急性白血病的早期診斷中具有重要的提示作用,異常散點圖對于白血病初篩以及輔助判斷白血病類型的具有較高的指導(dǎo)價值[5-6]。血細(xì)胞分析儀借助半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞計數(shù)和核酸熒光技術(shù)檢測血液有形細(xì)胞;借助光學(xué)檢測器進行分析,利用半導(dǎo)體激光束,使用流式細(xì)胞計量方法檢測前向散射光、側(cè)向散射光、側(cè)向熒光,并繪制二維散點圖和直方圖。血細(xì)胞分析儀的主要工作原理是以低頻電流完成對細(xì)胞體積的測量,高頻電磁實現(xiàn)對細(xì)胞內(nèi)含物的檢測,單色激光散射實現(xiàn)對細(xì)胞具體形狀、構(gòu)造等信息的確認(rèn)[7-8]。結(jié)合核酸含量及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在的顆粒大小等,系統(tǒng)性地進行分析。白血病一旦發(fā)病,無論是血細(xì)胞計數(shù)或成分都會發(fā)生明顯改變,在散點圖上具有特征性變化[9]。白細(xì)胞散點圖篩選出疑似白血病患者,再使用顯微鏡完成對疑似白血病患者的復(fù)檢,可以有效提升初篩的準(zhǔn)確率。

    本研究結(jié)果顯示,129例急性白血病患者中,WBC異常率為77.52%,Hb異常率為88.37%,PLT異常率為81.40%。其中20例WBC處于正常參考值范圍內(nèi)的患者白細(xì)胞分類散點圖均存在異常。109例患者綜合分析血常規(guī)指標(biāo)和白細(xì)胞散點圖變化,及時與臨床溝通,建議下一步檢查,降低初診白血病患者的漏診率[10-11]。

    綜上,日常臨檢工作通過分析血常規(guī)相關(guān)指標(biāo)和白細(xì)胞散點圖的異常結(jié)果,可提高白血病的初篩檢出率。同時可以為臨床診斷白血病提供重要的參考,縮短診斷時間,以及病情監(jiān)測均有重要的價值。

    利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突

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