• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    甜高粱EMS誘變獲得新種質(zhì)的研究

    2022-03-11 04:48:12葛玉彬羅俊杰葉春雷
    核農(nóng)學(xué)報 2022年1期
    關(guān)鍵詞:含糖量致死率高粱

    王 煒 陳 琛 葛玉彬 羅俊杰 葉春雷

    (1 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所,甘肅 蘭州 730070;2 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所,甘肅 蘭州 730070)

    甜高粱(SorghumbicolorL. Moench)為粒用高粱的變種,是一種重要的飼草作物和能源作物[1-2]。甜高粱具有生物量大、莖稈含糖量高、抗旱耐鹽堿等優(yōu)點,適合在降水稀少、鹽堿地、貧瘠和邊際土地中種植[3-4]。近年來隨著人民生活水平的持續(xù)提高,人們對肉蛋奶等產(chǎn)品的需求日益擴大,國家適時推出農(nóng)業(yè)供給側(cè)改革,為促進畜牧業(yè)的快速發(fā)展,調(diào)整種植業(yè)結(jié)構(gòu)[5]。此外,甜高粱是生產(chǎn)生物乙醇的主要作物之一,具有抗逆、耐瘠薄等特性,符合我國在“不與糧爭地,不與人爭糧”的原則下發(fā)展非糧生物質(zhì)能源的政策導(dǎo)向[6]。因此,作為能飼兼用的甜高粱在我國農(nóng)牧業(yè)的產(chǎn)業(yè)調(diào)整中具有重要意義,其中甜高粱種質(zhì)資源創(chuàng)制及新品種培育是一項重要的基礎(chǔ)性工作。

    甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate,EMS)是一種最常用化學(xué)誘變劑,其操作簡單易行、誘變效果好速度快,誘變產(chǎn)生的突變體主要是單基因突變,誘變后代材料穩(wěn)定,因此EMS誘變已被廣泛應(yīng)用于小麥[7-9]、大麥[10-11]、花生[12-13]、黃瓜[14-15]、亞麻[16-17]等多種作物的種質(zhì)資源創(chuàng)制和突變體庫構(gòu)建。在高粱上,研究者采用EMS誘變獲得了具有矮稈[18-21]、多分蘗[18]、早熟[19-20]、不育[22-23]等特性的突變體,但大部分這些突變體僅為早期世代材料,性狀尚未穩(wěn)定,在基礎(chǔ)研究中不能作為永久性材料保存而重復(fù)使用,在應(yīng)用研究中則不能作為種質(zhì)使用。因此,本研究以甜高粱自交系甜94為供試材料,采用EMS誘變技術(shù)進行甜高粱新種質(zhì)的創(chuàng)制,以期獲得可穩(wěn)定遺傳的特異性狀突變體材料,為甜高粱新品種的選育及其功能基因組研究提供基礎(chǔ)材料。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    供試材料為甜高粱自交系甜94,由平?jīng)鍪修r(nóng)業(yè)科學(xué)院高粱課題組提供。

    1.2 方法

    誘變劑EMS(分子式C3H8O3S,分子量124.16,M0880-5G)購自美國Sigma公司。采用WYT手持糖度儀(成都豪創(chuàng)光電儀器有限公司生產(chǎn))測定含糖量;采用游標卡尺測量莖粗。

    1.2.1 EMS誘變甜高粱適宜劑量與時間組合的篩選 參照Kim等[24]和董文科等[25]的方法,用磷酸緩沖液(0.1 mol·L-1,pH值7.0)分別配制0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的EMS溶液,以蒸餾水處理作為對照(CK),終止溶液為1 mol·L-1的硫代硫酸鈉(Na2S2O3)。選取飽滿、大小一致的甜94種子,自來水沖洗5~10 min清除甜高粱種子表面的灰塵等雜質(zhì),蒸餾水沖洗3次,將種子置于濾紙上吸干表面水分,之后放入150 mL的三角瓶中,分別加入已配制好的EMS溶液120 mL,處理時間分為8 h和16 h,各3次重復(fù)。處理期間置于搖床中(轉(zhuǎn)速60 r·min-1,溫度25℃),黑布覆蓋搖床,防止EMS見光分解。誘變完成后,將置于搖床中的離心管取出,加入適量1 mol·L-1的Na2S2O3清洗1遍,再用濃度為100 mmol·L-1的Na2S2O3洗3遍,每次輕搖 5 min,將溶液倒掉,自來水沖洗5~6 h,之后用蒸餾水沖洗5次,每次5 min,以除去種子表面殘留的EMS;將種子置于濾紙上吸干表面水分,自然風(fēng)干后將處理后的種子放入鋪有2層無菌濾紙的培養(yǎng)皿(培養(yǎng)皿直徑10 cm)中,每個培養(yǎng)皿中加入5 mL蒸餾水,置于培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)(溫度25℃)。觀察種子萌發(fā)情況,2周后統(tǒng)計發(fā)芽率(germination rate,GR)、成苗率(plantlet survival rate,PSR)和致死率(lethality rate,LR)。將存活幼苗移栽入大田,1周后再次統(tǒng)計幼苗存活率。以致死率達到50%(半致死率)作為適宜的EMS誘變甜高粱的適宜濃度和時間組合[4,7]。

    發(fā)芽率=發(fā)芽種子數(shù)/供試種子總數(shù)×100%

    成苗率=苗存活數(shù)/供試種子總數(shù)×100%

    致死率=(1-誘變成苗率/對照成苗率)×100%

    1.2.2 甜高粱的EMS誘變處理 按照上述方法,于2015年3月26日取大小均勻一致、飽滿的甜94種子5 000粒,用篩選的適宜EMS濃度以及時間處理組合進行浸種處理。處理后的種子點播于育苗穴盤中,澆足水后置于溫室中(溫度15~28℃),每天以噴灑形式適量澆水。出苗后將誘變后成活的M1代移栽至甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州細胞工程育種試驗地,大田覆膜,按行長6.4 m,行距和株距均為0.4 m移栽,每12行設(shè)2行對照,常規(guī)管理,開花前套袋自交,成熟后全部按單株收獲。M2~M5代按株行育苗移栽,大田覆膜,常規(guī)管理,參考何振富等[26]的方法觀察統(tǒng)計出苗率、中脈顏色、葉片大小、穗型等;并測定株高、單株鮮重等表型性狀;測定莖粗、含糖量。淘汰與對照無顯著差異的材料后按單株收獲。M2代時隨機選取200個誘變單株測定各性狀,計算誘變株各性狀的誘變系數(shù)(mutation index,MI)及分布頻率(distribution frequency,DF)。

    誘變系數(shù)=誘變株性狀測定值/對照相應(yīng)性狀測定值

    分布頻率=處于某性狀測定值區(qū)間內(nèi)誘變植株的個數(shù)/總誘變植株數(shù)×100%

    1.2.3 部分誘變株系品質(zhì)檢測 通過逐代鑒定篩選,至M5代時部分誘變株系已基本穩(wěn)定,乳熟期取其中5份矮稈、早熟、高含糖量、白粒和散穗的代表性材料的地上部,用刀切至2~4 cm長后置于室內(nèi)陰干,粉碎后裝入自封袋,由甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)測試中心對樣品的部分品質(zhì)指標進行測定。其中水分采用直接干燥法[27],粗蛋白含量用凱氏定氮法[28],粗淀粉含量用酸水解法[29],粗脂肪含量用殘余法[30],鈣含量用原子吸收分光光譜法[31]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 適宜的EMS處理濃度與時間組合

    采用5個EMS濃度梯度(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%)和2個時間梯度(8 h和16 h),共計10個組合,對甜高粱自交系甜94種子進行誘變處理。結(jié)果表明(表1),濃度和時間對甜高粱種子發(fā)芽率、成苗率和致死率有明顯影響,表現(xiàn)出較強的濃度依賴性。1.0%/8 h、0.8%/16 h、1.0%/16 h 3種處理組合情況下成苗率均為0,致死率為100%;當(dāng)處理組合為0.2%/16 h時,甜94的致死率為51.04%,接近于半致死劑量,因此可確定0.2%/16 h為較適宜的甜高粱EMS誘變處理組合。

    2.2 誘變甜高粱M1代的出苗、移栽和田間表現(xiàn)

    EMS處理后共計出苗1 762株,出苗率35.24%,移栽后成活1 607株,成苗率32.14%,致死率為62.18%。受到藥物處理的原因,M1代誘變苗前期生長緩慢,出現(xiàn)許多畸形苗,生育期明顯延長,有部分誘變苗育性喪失,因此有588株未能獲得種子,10月下旬收獲時僅結(jié)實1 019株,結(jié)實率為63.41%。對照甜94呈紡錘形穗、穗型中緊、籽粒紅色、生育期140.00~155.00 d、株高280.00~315.00 cm、莖粗1.09~1.42 cm、葉面積482.00~520.00 cm2、千粒重7.50~11.30 g;與對照相比,誘變甜高粱M1代部分植株在生育期、株高、葉部、穗部、莖部、籽粒顏色和大小等性狀方面均發(fā)生明顯變異(表2)。

    2.3 誘變甜高粱M2代的田間表現(xiàn)

    M2代種子(M1代1 019株的籽粒)在溫室育苗后,按株行全部移栽于覆膜大田。隨機選取200份材料測定其生育期、株高、葉面積、莖粗、分蘗數(shù)、鮮重、含糖量等7個指標(表3)。結(jié)果表明,誘變甜高粱M2代生育期、株高和鮮重3個性狀的平均值分別為126.28 d、225.69 cm、0.25 kg,生育期較對照平均提前21.12 d,株高較對照平均降低66.71 cm,單株鮮重則降低0.10 kg。其他性狀方面則與對照差異較小。

    表1 不同EMS濃度和處理時間對甜94種子發(fā)芽及成苗的影響Table 1 Effects of different EMS treatmenTCombinations on seed germination and plantlet survival of sweet sorghum Tian94

    表2 誘變甜高粱M1代植株變異表型性狀Table 2 Phenotypic variation of some EMS induced sweet sorghum plants in M1 generation

    表3 誘變甜高粱M2代性狀表現(xiàn)Table 3 Some traits of EMS induced sweet sorghum in M2 generation

    進一步參照連續(xù)變數(shù)的次數(shù)分布統(tǒng)計方法,將各性狀誘變系數(shù)(即該性狀的測定值與對照平均值的比值)以不同組距分成組區(qū)間,制作成次數(shù)分布頻率表(表4)。結(jié)果表明,81%的誘變株生育期較對照提前,90%的誘變株株高較對照降低,88%的誘變株鮮重較對照降低,這與上述結(jié)果相吻合;同時也提示這些材料在控制生育期、株高、鮮重等方面的基因可能發(fā)生了突變;而莖粗、葉面積、分蘗數(shù)呈現(xiàn)近正態(tài)分布。

    2.4 誘變甜高粱M3~M5代逐代鑒定篩選

    在M3~M5代繼續(xù)進行了表型觀察及部分性狀鑒定,通過逐代篩選,在M5代獲得已經(jīng)基本穩(wěn)定的早熟品系2份、高含糖量品系4份、矮稈品系6份、白粒品系3份、散穗品系3份(表5)。從表中可以看出,早熟材料ZS1和ZS2分別較對照提早成熟38.14和44.14 d;高含糖量材料TG1、TG2、TG3、TG4的含糖量均在23.01%以上,較對照提高6.36個百分點(對照一般在16%~18%之間,平均16.65%);矮稈材料AG1、AG2、AG3、AG4、AG5、AG6株高較對照降低59.02%~63.62%;白粒、散穗等材料除了粒色和穗型不同外,其余性狀與對照均無顯著區(qū)別。

    從18份M5代誘變系中選擇具有代表性的早熟、高含糖量、矮稈、白粒及散穗各1份,對其品質(zhì)相關(guān)指標進行檢測(表6)。結(jié)果表明,水分含量均較對照有所降低,說明這些材料的相對干物質(zhì)量增加;1份材料的粗蛋白含量較對照有所增加,1份持平,其余略有降低;其中1份材料(TG1)的粗淀粉含量較對照提高;所有誘變系的粗脂肪含量均較對照增加;早熟材料ZS1中鈣含量達到640 mg·kg-1,較對照提高1.78倍,其余材料則較對照有所降低。尤其是TG1的水分含量、粗蛋白含量、粗淀粉含量、粗脂肪含量等4項指標均優(yōu)于對照,是一份具有開發(fā)利用潛力的材料。

    表6 部分誘變甜高粱M5代性狀表現(xiàn)Table 6 Some traits of EMS induced sweet sorghum in M5 generation

    3 討論

    EMS誘變具有操作簡單易行、突變頻率高、誘變基因位點單一等優(yōu)點,是進行植物突變體庫構(gòu)建和種質(zhì)資源創(chuàng)制最常用的方法[32-35]。對于不同植物,甚至同一植物的不同基因型,適宜EMS誘變的處理條件并不一致[18-23, 32]。因此,在進行大規(guī)模誘變之前,需要研究誘變野生型材料的適宜EMS處理濃度和時間組合[36]。目前通常以EMS半致死率作為標準[32-34]。在高粱EMS誘變研究中,王春語等[19]、劉言龍等[20]和Xin等[37]以粒用高粱自交系BTx623種子為供體的研究結(jié)果顯示,適宜的EMS處理濃度時間組合在0.10%~0.25%/12~20 h之間;白鴻雁等[38]和范昕琦等[39]的結(jié)果則表明不同基因型高粱對EMS敏感度不同,半致死濃度也不一致,用于不同基因型以及突變體篩選的適宜EMS濃度時間處理組合在0.20%~0.35%/10~15 h之間。本研究結(jié)果為0.20%/16 h,與上述研究結(jié)果相似。

    通過對EMS處理的誘變后代(M1~M5)進行連續(xù)的逐代表型觀察、鑒定和篩選,獲得基本穩(wěn)定的具有早熟、高含糖量等特性的甜高粱種質(zhì)材料18份(表5)。這些材料總體較原野生型對照的生育期提前、株高、葉面積與鮮重降低,這可能與早期誘變世代中若干材料因晚熟而未能結(jié)實而被自然淘汰、同時大部分株高較高的材料一般較晚熟等因素相關(guān)。在品質(zhì)方面,所有材料的含糖量均超過對照,測定的5份材料中水分含量低于對照,而粗脂肪含量超過對照(表6)。由此可見,這些誘變甜高粱材料在作為飼草和能源作物上,有產(chǎn)量(鮮重)降低的缺點,但在若干品質(zhì)指標上則有所提高。因此這些材料的特異性狀如早熟、矮稈、高含糖量、白粒、散穗等性狀可作為甜高粱相關(guān)性狀功能基因定位研究,而這些材料也可作為部分遺傳改良的種質(zhì)資源材料。

    4 結(jié)論

    本研究結(jié)果表明,適宜甜高粱自交系甜94號EMS誘變處理的干種子浸泡法濃度時間組合為0.20%/16h。與原野生型對照相比,本研究創(chuàng)制了在生育期、株高、含糖量等性狀方面具有明顯差異的突變種質(zhì)材料18份,其中早熟2份、高含糖量4份、矮稈6份、白粒3份、散穗3份。這些突變材料為甜高粱遺傳改良和功能基因研究提供了新種質(zhì)和基礎(chǔ)材料,相關(guān)誘變處理及誘變后代的逐代觀察、鑒定和篩選等方法可為甜高粱EMS誘變育種研究提供借鑒。

    猜你喜歡
    含糖量致死率高粱
    水果越甜含糖越多嗎
    水果越甜含糖越多嗎
    我終于認識高粱了
    高粱名稱考釋
    高粱紅了
    低毒高效空倉煙霧殺蟲技術(shù)應(yīng)用探究
    臺灣致死率升至5.2%
    月圓之夜車禍致死率高
    星巴克等熱飲含糖量驚人
    食品與健康(2016年5期)2016-05-14 23:09:02
    S. longicaudum X—7線蟲對草坪地下害蟲小云斑鰓金龜幼蟲的致病力
    变态另类丝袜制服| 午夜精品在线福利| 婷婷精品国产亚洲av在线| 日韩国内少妇激情av| 亚洲欧美精品综合久久99| 免费搜索国产男女视频| 男女床上黄色一级片免费看| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久久久久久久久中文| 狂野欧美激情性xxxx| 男女之事视频高清在线观看| 黄色女人牲交| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产1区2区3区精品| 国产熟女午夜一区二区三区| 变态另类丝袜制服| 日韩欧美国产在线观看| 午夜免费激情av| 91成年电影在线观看| 午夜a级毛片| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 精品福利观看| 国内精品久久久久精免费| 99久久精品国产亚洲精品| 国产不卡一卡二| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产精品 国内视频| 90打野战视频偷拍视频| 一进一出好大好爽视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 91大片在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 电影成人av| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 搡老岳熟女国产| 操出白浆在线播放| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 午夜免费鲁丝| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 黄色视频不卡| 欧美国产精品va在线观看不卡| 一二三四在线观看免费中文在| 国产精品一区二区在线不卡| 国产91精品成人一区二区三区| 日本在线视频免费播放| 久久久水蜜桃国产精品网| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产精品一区二区在线不卡| 日本a在线网址| 亚洲精品一区av在线观看| 97人妻天天添夜夜摸| 精品一区二区三区四区五区乱码| 午夜免费观看网址| 日韩国内少妇激情av| 欧美中文日本在线观看视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲国产欧美网| 黄色片一级片一级黄色片| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲 欧美一区二区三区| 后天国语完整版免费观看| 久久久精品欧美日韩精品| 黄色 视频免费看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 午夜精品国产一区二区电影| 黄色片一级片一级黄色片| 婷婷六月久久综合丁香| 精品国产国语对白av| 成年人黄色毛片网站| 成人亚洲精品一区在线观看| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久久久精品国产欧美久久久| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产xxxxx性猛交| 一级毛片精品| av片东京热男人的天堂| 亚洲av成人av| 欧美日韩黄片免| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 视频在线观看一区二区三区| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲成人免费电影在线观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 午夜老司机福利片| 满18在线观看网站| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲一区中文字幕在线| 黄色丝袜av网址大全| 视频在线观看一区二区三区| 天堂√8在线中文| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 女人精品久久久久毛片| 叶爱在线成人免费视频播放| 九色亚洲精品在线播放| 国产极品粉嫩免费观看在线| 久久久久久国产a免费观看| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲精品中文字幕在线视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 一进一出抽搐动态| 淫秽高清视频在线观看| 18禁国产床啪视频网站| 12—13女人毛片做爰片一| www日本在线高清视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 视频在线观看一区二区三区| 午夜福利,免费看| 乱人伦中国视频| 9191精品国产免费久久| www.熟女人妻精品国产| 两性夫妻黄色片| 欧美激情高清一区二区三区| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 日本黄色视频三级网站网址| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 成年人黄色毛片网站| 99热只有精品国产| 999精品在线视频| 精品久久久久久,| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 麻豆成人av在线观看| 欧美乱色亚洲激情| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产区一区二久久| 日本免费a在线| 国产91精品成人一区二区三区| 国产精品影院久久| 亚洲五月色婷婷综合| 看片在线看免费视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 又大又爽又粗| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲精品在线观看二区| 欧美久久黑人一区二区| 后天国语完整版免费观看| 国产成人精品在线电影| av免费在线观看网站| 极品人妻少妇av视频| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 自线自在国产av| 无限看片的www在线观看| 日韩欧美在线二视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 91av网站免费观看| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美一区二区精品小视频在线| 女性生殖器流出的白浆| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 午夜久久久在线观看| 日本免费a在线| 亚洲第一av免费看| 欧美一区二区精品小视频在线| 欧美不卡视频在线免费观看 | av免费在线观看网站| 午夜久久久久精精品| 免费在线观看亚洲国产| 免费观看人在逋| 黄色视频不卡| 国产一区在线观看成人免费| 国产成人欧美| 欧美日韩精品网址| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲人成电影免费在线| 免费高清视频大片| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久国产精品人妻蜜桃| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美日本中文国产一区发布| 午夜精品国产一区二区电影| 国产片内射在线| 午夜精品在线福利| 日韩欧美三级三区| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 午夜免费激情av| 日韩三级视频一区二区三区| 一级a爱片免费观看的视频| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产黄a三级三级三级人| 99re在线观看精品视频| 一二三四在线观看免费中文在| 免费在线观看日本一区| 人妻久久中文字幕网| av视频在线观看入口| 国产三级在线视频| 此物有八面人人有两片| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 久久午夜综合久久蜜桃| 美女 人体艺术 gogo| 18禁美女被吸乳视频| 18禁国产床啪视频网站| 成人国产一区最新在线观看| 不卡av一区二区三区| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 多毛熟女@视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产色视频综合| 久久久精品欧美日韩精品| av天堂在线播放| 国产乱人伦免费视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 日日夜夜操网爽| 一区在线观看完整版| 免费搜索国产男女视频| 国产亚洲精品久久久久5区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产高清视频在线播放一区| 一二三四在线观看免费中文在| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 色综合欧美亚洲国产小说| 可以在线观看的亚洲视频| tocl精华| 日本精品一区二区三区蜜桃| 成人特级黄色片久久久久久久| 9191精品国产免费久久| 免费在线观看日本一区| 9色porny在线观看| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲精华国产精华精| 欧美日韩乱码在线| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 一进一出好大好爽视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲成人免费电影在线观看| 麻豆成人av在线观看| 激情在线观看视频在线高清| 很黄的视频免费| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 最近最新免费中文字幕在线| 一区二区三区精品91| 一本久久中文字幕| av视频在线观看入口| 俄罗斯特黄特色一大片| 91成人精品电影| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲国产欧美网| 三级毛片av免费| 性少妇av在线| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 99香蕉大伊视频| 免费无遮挡裸体视频| 无人区码免费观看不卡| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产精品一区二区在线不卡| 91精品国产国语对白视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲熟女毛片儿| 麻豆久久精品国产亚洲av| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产免费av片在线观看野外av| 国产精品一区二区三区四区久久 | 一级毛片精品| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 丝袜在线中文字幕| 国产野战对白在线观看| 国产一区二区三区综合在线观看| 电影成人av| 桃色一区二区三区在线观看| 天堂影院成人在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 成人国产综合亚洲| 此物有八面人人有两片| 一进一出好大好爽视频| 国产成人精品久久二区二区91| 久久草成人影院| 黑人操中国人逼视频| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产午夜精品久久久久久| 日韩av在线大香蕉| 操美女的视频在线观看| 黄色丝袜av网址大全| 国产免费男女视频| 亚洲全国av大片| 国产私拍福利视频在线观看| 18禁美女被吸乳视频| 99久久国产精品久久久| 日本三级黄在线观看| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲av成人av| 国产精品久久视频播放| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产成人免费无遮挡视频| 国产精品1区2区在线观看.| 国产精品影院久久| 波多野结衣av一区二区av| 免费高清视频大片| 国产精品久久视频播放| 国产成人av教育| 嫁个100分男人电影在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲成av片中文字幕在线观看| cao死你这个sao货| 女人精品久久久久毛片| 一级毛片精品| 久久精品91蜜桃| 国产一区在线观看成人免费| 一个人免费在线观看的高清视频| 成人手机av| 国产激情久久老熟女| 亚洲专区字幕在线| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 天堂动漫精品| 99riav亚洲国产免费| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲国产精品999在线| 亚洲av成人av| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 午夜精品在线福利| 国产成人啪精品午夜网站| 91精品国产国语对白视频| 久久香蕉精品热| 久久狼人影院| 搡老妇女老女人老熟妇| 日韩有码中文字幕| 精品国产乱子伦一区二区三区| 又紧又爽又黄一区二区| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| bbb黄色大片| 国产单亲对白刺激| 搡老熟女国产l中国老女人| 成人国产一区最新在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 99国产综合亚洲精品| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产激情欧美一区二区| 欧美亚洲日本最大视频资源| 黄色女人牲交| 男女下面插进去视频免费观看| 国产成人欧美在线观看| 色综合婷婷激情| 国产精品综合久久久久久久免费 | 天堂动漫精品| 极品教师在线免费播放| av超薄肉色丝袜交足视频| 久久久久国产一级毛片高清牌| netflix在线观看网站| 午夜福利高清视频| 国产一区二区在线av高清观看| 香蕉国产在线看| 黄色a级毛片大全视频| 激情视频va一区二区三区| 一进一出好大好爽视频| 亚洲五月天丁香| 在线播放国产精品三级| 国产精品国产高清国产av| 波多野结衣av一区二区av| 桃红色精品国产亚洲av| 国产欧美日韩一区二区精品| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 亚洲一区二区三区色噜噜| 久久中文看片网| 香蕉国产在线看| 午夜免费鲁丝| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲国产看品久久| 岛国视频午夜一区免费看| cao死你这个sao货| 中文字幕色久视频| 搡老熟女国产l中国老女人| 精品电影一区二区在线| av在线播放免费不卡| 久久久久久大精品| 又大又爽又粗| 女人被狂操c到高潮| 看黄色毛片网站| 成人三级黄色视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产精品二区激情视频| 啦啦啦免费观看视频1| av中文乱码字幕在线| 1024香蕉在线观看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 可以在线观看的亚洲视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 午夜免费鲁丝| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产精品影院久久| 精品国产美女av久久久久小说| av网站免费在线观看视频| 国内精品久久久久久久电影| 一级毛片高清免费大全| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品av久久久久免费| 两性夫妻黄色片| 中文字幕高清在线视频| 亚洲精品一区av在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产成人精品久久二区二区91| 亚洲avbb在线观看| netflix在线观看网站| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲精品国产精品久久久不卡| www.www免费av| 成人三级做爰电影| 看片在线看免费视频| 成年版毛片免费区| 亚洲精品在线观看二区| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 91国产中文字幕| 亚洲精华国产精华精| 操美女的视频在线观看| 中文字幕高清在线视频| 国产亚洲精品一区二区www| 在线国产一区二区在线| 成年版毛片免费区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 精品一品国产午夜福利视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲色图综合在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久久久精品欧美日韩精品| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产乱人伦免费视频| 美女免费视频网站| 久热爱精品视频在线9| 国产三级在线视频| av欧美777| 中亚洲国语对白在线视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 色尼玛亚洲综合影院| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲中文字幕日韩| 色综合站精品国产| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产视频一区二区在线看| 精品乱码久久久久久99久播| 国产麻豆成人av免费视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 黄片小视频在线播放| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 757午夜福利合集在线观看| 久久亚洲精品不卡| 国产欧美日韩一区二区精品| av电影中文网址| 精品国产美女av久久久久小说| 两性夫妻黄色片| 韩国av一区二区三区四区| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 午夜亚洲福利在线播放| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 免费av毛片视频| 国产成人精品久久二区二区91| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| av欧美777| 成人手机av| 中文字幕高清在线视频| 少妇粗大呻吟视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产区一区二久久| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 91成年电影在线观看| 久久久国产成人精品二区| 亚洲三区欧美一区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 在线观看午夜福利视频| 久久影院123| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 极品人妻少妇av视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 在线观看免费视频网站a站| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 精品日产1卡2卡| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久中文字幕一级| 国产亚洲av嫩草精品影院| 丝袜美足系列| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产私拍福利视频在线观看| 国产色视频综合| 亚洲中文日韩欧美视频| 波多野结衣高清无吗| 久久精品人人爽人人爽视色| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲最大成人中文| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲精品粉嫩美女一区| 一级,二级,三级黄色视频| 久久久久久久精品吃奶| 免费不卡黄色视频| 757午夜福利合集在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 久99久视频精品免费| 欧美国产精品va在线观看不卡| 午夜福利,免费看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 亚洲男人天堂网一区| 午夜福利成人在线免费观看| 村上凉子中文字幕在线| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 亚洲情色 制服丝袜| 神马国产精品三级电影在线观看 | 国产成人精品久久二区二区免费| 精品国产亚洲在线| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 午夜福利视频1000在线观看 | 成人三级黄色视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产成人av教育| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 精品无人区乱码1区二区| 少妇的丰满在线观看| 亚洲精品在线美女| 亚洲精品美女久久av网站| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲五月色婷婷综合| 长腿黑丝高跟| 男人的好看免费观看在线视频 | 久久婷婷成人综合色麻豆| 黄片小视频在线播放| 欧美日韩福利视频一区二区| svipshipincom国产片| 男人舔女人的私密视频| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲免费av在线视频| 搞女人的毛片| 色在线成人网| cao死你这个sao货| 日本三级黄在线观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久久国产精品麻豆| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 亚洲av五月六月丁香网| 欧美午夜高清在线| 午夜老司机福利片| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 久久亚洲真实| 色综合婷婷激情| 亚洲成人精品中文字幕电影| 色精品久久人妻99蜜桃| 欧美性长视频在线观看| 亚洲成人国产一区在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲欧美日韩另类电影网站| videosex国产| 十分钟在线观看高清视频www| 自线自在国产av| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲精品国产色婷婷电影| 91成人精品电影| 欧美成人性av电影在线观看| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲美女黄片视频| 日韩高清综合在线| 在线观看舔阴道视频| 久久久久久大精品| 日本三级黄在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲黑人精品在线| 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 日日干狠狠操夜夜爽| 91大片在线观看| 亚洲第一电影网av| 激情视频va一区二区三区| 国产三级黄色录像| 我的亚洲天堂| 自线自在国产av| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲av五月六月丁香网| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲国产精品合色在线| 制服丝袜大香蕉在线| 国产免费男女视频| 日本免费a在线| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 无限看片的www在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 国产精品电影一区二区三区| 欧美+亚洲+日韩+国产| 男女下面插进去视频免费观看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| АⅤ资源中文在线天堂| 精品久久蜜臀av无| 美女大奶头视频| 禁无遮挡网站| 亚洲一区二区三区色噜噜| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲成人久久性| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 99re在线观看精品视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产又爽黄色视频| www.精华液| 午夜免费观看网址| 我的亚洲天堂| av有码第一页|