• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    甜高粱EMS誘變獲得新種質(zhì)的研究

    2022-03-11 04:48:12葛玉彬羅俊杰葉春雷
    核農(nóng)學(xué)報 2022年1期
    關(guān)鍵詞:含糖量致死率高粱

    王 煒 陳 琛 葛玉彬 羅俊杰 葉春雷

    (1 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所,甘肅 蘭州 730070;2 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所,甘肅 蘭州 730070)

    甜高粱(SorghumbicolorL. Moench)為粒用高粱的變種,是一種重要的飼草作物和能源作物[1-2]。甜高粱具有生物量大、莖稈含糖量高、抗旱耐鹽堿等優(yōu)點,適合在降水稀少、鹽堿地、貧瘠和邊際土地中種植[3-4]。近年來隨著人民生活水平的持續(xù)提高,人們對肉蛋奶等產(chǎn)品的需求日益擴大,國家適時推出農(nóng)業(yè)供給側(cè)改革,為促進畜牧業(yè)的快速發(fā)展,調(diào)整種植業(yè)結(jié)構(gòu)[5]。此外,甜高粱是生產(chǎn)生物乙醇的主要作物之一,具有抗逆、耐瘠薄等特性,符合我國在“不與糧爭地,不與人爭糧”的原則下發(fā)展非糧生物質(zhì)能源的政策導(dǎo)向[6]。因此,作為能飼兼用的甜高粱在我國農(nóng)牧業(yè)的產(chǎn)業(yè)調(diào)整中具有重要意義,其中甜高粱種質(zhì)資源創(chuàng)制及新品種培育是一項重要的基礎(chǔ)性工作。

    甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate,EMS)是一種最常用化學(xué)誘變劑,其操作簡單易行、誘變效果好速度快,誘變產(chǎn)生的突變體主要是單基因突變,誘變后代材料穩(wěn)定,因此EMS誘變已被廣泛應(yīng)用于小麥[7-9]、大麥[10-11]、花生[12-13]、黃瓜[14-15]、亞麻[16-17]等多種作物的種質(zhì)資源創(chuàng)制和突變體庫構(gòu)建。在高粱上,研究者采用EMS誘變獲得了具有矮稈[18-21]、多分蘗[18]、早熟[19-20]、不育[22-23]等特性的突變體,但大部分這些突變體僅為早期世代材料,性狀尚未穩(wěn)定,在基礎(chǔ)研究中不能作為永久性材料保存而重復(fù)使用,在應(yīng)用研究中則不能作為種質(zhì)使用。因此,本研究以甜高粱自交系甜94為供試材料,采用EMS誘變技術(shù)進行甜高粱新種質(zhì)的創(chuàng)制,以期獲得可穩(wěn)定遺傳的特異性狀突變體材料,為甜高粱新品種的選育及其功能基因組研究提供基礎(chǔ)材料。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    供試材料為甜高粱自交系甜94,由平?jīng)鍪修r(nóng)業(yè)科學(xué)院高粱課題組提供。

    1.2 方法

    誘變劑EMS(分子式C3H8O3S,分子量124.16,M0880-5G)購自美國Sigma公司。采用WYT手持糖度儀(成都豪創(chuàng)光電儀器有限公司生產(chǎn))測定含糖量;采用游標卡尺測量莖粗。

    1.2.1 EMS誘變甜高粱適宜劑量與時間組合的篩選 參照Kim等[24]和董文科等[25]的方法,用磷酸緩沖液(0.1 mol·L-1,pH值7.0)分別配制0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的EMS溶液,以蒸餾水處理作為對照(CK),終止溶液為1 mol·L-1的硫代硫酸鈉(Na2S2O3)。選取飽滿、大小一致的甜94種子,自來水沖洗5~10 min清除甜高粱種子表面的灰塵等雜質(zhì),蒸餾水沖洗3次,將種子置于濾紙上吸干表面水分,之后放入150 mL的三角瓶中,分別加入已配制好的EMS溶液120 mL,處理時間分為8 h和16 h,各3次重復(fù)。處理期間置于搖床中(轉(zhuǎn)速60 r·min-1,溫度25℃),黑布覆蓋搖床,防止EMS見光分解。誘變完成后,將置于搖床中的離心管取出,加入適量1 mol·L-1的Na2S2O3清洗1遍,再用濃度為100 mmol·L-1的Na2S2O3洗3遍,每次輕搖 5 min,將溶液倒掉,自來水沖洗5~6 h,之后用蒸餾水沖洗5次,每次5 min,以除去種子表面殘留的EMS;將種子置于濾紙上吸干表面水分,自然風(fēng)干后將處理后的種子放入鋪有2層無菌濾紙的培養(yǎng)皿(培養(yǎng)皿直徑10 cm)中,每個培養(yǎng)皿中加入5 mL蒸餾水,置于培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)(溫度25℃)。觀察種子萌發(fā)情況,2周后統(tǒng)計發(fā)芽率(germination rate,GR)、成苗率(plantlet survival rate,PSR)和致死率(lethality rate,LR)。將存活幼苗移栽入大田,1周后再次統(tǒng)計幼苗存活率。以致死率達到50%(半致死率)作為適宜的EMS誘變甜高粱的適宜濃度和時間組合[4,7]。

    發(fā)芽率=發(fā)芽種子數(shù)/供試種子總數(shù)×100%

    成苗率=苗存活數(shù)/供試種子總數(shù)×100%

    致死率=(1-誘變成苗率/對照成苗率)×100%

    1.2.2 甜高粱的EMS誘變處理 按照上述方法,于2015年3月26日取大小均勻一致、飽滿的甜94種子5 000粒,用篩選的適宜EMS濃度以及時間處理組合進行浸種處理。處理后的種子點播于育苗穴盤中,澆足水后置于溫室中(溫度15~28℃),每天以噴灑形式適量澆水。出苗后將誘變后成活的M1代移栽至甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州細胞工程育種試驗地,大田覆膜,按行長6.4 m,行距和株距均為0.4 m移栽,每12行設(shè)2行對照,常規(guī)管理,開花前套袋自交,成熟后全部按單株收獲。M2~M5代按株行育苗移栽,大田覆膜,常規(guī)管理,參考何振富等[26]的方法觀察統(tǒng)計出苗率、中脈顏色、葉片大小、穗型等;并測定株高、單株鮮重等表型性狀;測定莖粗、含糖量。淘汰與對照無顯著差異的材料后按單株收獲。M2代時隨機選取200個誘變單株測定各性狀,計算誘變株各性狀的誘變系數(shù)(mutation index,MI)及分布頻率(distribution frequency,DF)。

    誘變系數(shù)=誘變株性狀測定值/對照相應(yīng)性狀測定值

    分布頻率=處于某性狀測定值區(qū)間內(nèi)誘變植株的個數(shù)/總誘變植株數(shù)×100%

    1.2.3 部分誘變株系品質(zhì)檢測 通過逐代鑒定篩選,至M5代時部分誘變株系已基本穩(wěn)定,乳熟期取其中5份矮稈、早熟、高含糖量、白粒和散穗的代表性材料的地上部,用刀切至2~4 cm長后置于室內(nèi)陰干,粉碎后裝入自封袋,由甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)測試中心對樣品的部分品質(zhì)指標進行測定。其中水分采用直接干燥法[27],粗蛋白含量用凱氏定氮法[28],粗淀粉含量用酸水解法[29],粗脂肪含量用殘余法[30],鈣含量用原子吸收分光光譜法[31]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 適宜的EMS處理濃度與時間組合

    采用5個EMS濃度梯度(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%)和2個時間梯度(8 h和16 h),共計10個組合,對甜高粱自交系甜94種子進行誘變處理。結(jié)果表明(表1),濃度和時間對甜高粱種子發(fā)芽率、成苗率和致死率有明顯影響,表現(xiàn)出較強的濃度依賴性。1.0%/8 h、0.8%/16 h、1.0%/16 h 3種處理組合情況下成苗率均為0,致死率為100%;當(dāng)處理組合為0.2%/16 h時,甜94的致死率為51.04%,接近于半致死劑量,因此可確定0.2%/16 h為較適宜的甜高粱EMS誘變處理組合。

    2.2 誘變甜高粱M1代的出苗、移栽和田間表現(xiàn)

    EMS處理后共計出苗1 762株,出苗率35.24%,移栽后成活1 607株,成苗率32.14%,致死率為62.18%。受到藥物處理的原因,M1代誘變苗前期生長緩慢,出現(xiàn)許多畸形苗,生育期明顯延長,有部分誘變苗育性喪失,因此有588株未能獲得種子,10月下旬收獲時僅結(jié)實1 019株,結(jié)實率為63.41%。對照甜94呈紡錘形穗、穗型中緊、籽粒紅色、生育期140.00~155.00 d、株高280.00~315.00 cm、莖粗1.09~1.42 cm、葉面積482.00~520.00 cm2、千粒重7.50~11.30 g;與對照相比,誘變甜高粱M1代部分植株在生育期、株高、葉部、穗部、莖部、籽粒顏色和大小等性狀方面均發(fā)生明顯變異(表2)。

    2.3 誘變甜高粱M2代的田間表現(xiàn)

    M2代種子(M1代1 019株的籽粒)在溫室育苗后,按株行全部移栽于覆膜大田。隨機選取200份材料測定其生育期、株高、葉面積、莖粗、分蘗數(shù)、鮮重、含糖量等7個指標(表3)。結(jié)果表明,誘變甜高粱M2代生育期、株高和鮮重3個性狀的平均值分別為126.28 d、225.69 cm、0.25 kg,生育期較對照平均提前21.12 d,株高較對照平均降低66.71 cm,單株鮮重則降低0.10 kg。其他性狀方面則與對照差異較小。

    表1 不同EMS濃度和處理時間對甜94種子發(fā)芽及成苗的影響Table 1 Effects of different EMS treatmenTCombinations on seed germination and plantlet survival of sweet sorghum Tian94

    表2 誘變甜高粱M1代植株變異表型性狀Table 2 Phenotypic variation of some EMS induced sweet sorghum plants in M1 generation

    表3 誘變甜高粱M2代性狀表現(xiàn)Table 3 Some traits of EMS induced sweet sorghum in M2 generation

    進一步參照連續(xù)變數(shù)的次數(shù)分布統(tǒng)計方法,將各性狀誘變系數(shù)(即該性狀的測定值與對照平均值的比值)以不同組距分成組區(qū)間,制作成次數(shù)分布頻率表(表4)。結(jié)果表明,81%的誘變株生育期較對照提前,90%的誘變株株高較對照降低,88%的誘變株鮮重較對照降低,這與上述結(jié)果相吻合;同時也提示這些材料在控制生育期、株高、鮮重等方面的基因可能發(fā)生了突變;而莖粗、葉面積、分蘗數(shù)呈現(xiàn)近正態(tài)分布。

    2.4 誘變甜高粱M3~M5代逐代鑒定篩選

    在M3~M5代繼續(xù)進行了表型觀察及部分性狀鑒定,通過逐代篩選,在M5代獲得已經(jīng)基本穩(wěn)定的早熟品系2份、高含糖量品系4份、矮稈品系6份、白粒品系3份、散穗品系3份(表5)。從表中可以看出,早熟材料ZS1和ZS2分別較對照提早成熟38.14和44.14 d;高含糖量材料TG1、TG2、TG3、TG4的含糖量均在23.01%以上,較對照提高6.36個百分點(對照一般在16%~18%之間,平均16.65%);矮稈材料AG1、AG2、AG3、AG4、AG5、AG6株高較對照降低59.02%~63.62%;白粒、散穗等材料除了粒色和穗型不同外,其余性狀與對照均無顯著區(qū)別。

    從18份M5代誘變系中選擇具有代表性的早熟、高含糖量、矮稈、白粒及散穗各1份,對其品質(zhì)相關(guān)指標進行檢測(表6)。結(jié)果表明,水分含量均較對照有所降低,說明這些材料的相對干物質(zhì)量增加;1份材料的粗蛋白含量較對照有所增加,1份持平,其余略有降低;其中1份材料(TG1)的粗淀粉含量較對照提高;所有誘變系的粗脂肪含量均較對照增加;早熟材料ZS1中鈣含量達到640 mg·kg-1,較對照提高1.78倍,其余材料則較對照有所降低。尤其是TG1的水分含量、粗蛋白含量、粗淀粉含量、粗脂肪含量等4項指標均優(yōu)于對照,是一份具有開發(fā)利用潛力的材料。

    表6 部分誘變甜高粱M5代性狀表現(xiàn)Table 6 Some traits of EMS induced sweet sorghum in M5 generation

    3 討論

    EMS誘變具有操作簡單易行、突變頻率高、誘變基因位點單一等優(yōu)點,是進行植物突變體庫構(gòu)建和種質(zhì)資源創(chuàng)制最常用的方法[32-35]。對于不同植物,甚至同一植物的不同基因型,適宜EMS誘變的處理條件并不一致[18-23, 32]。因此,在進行大規(guī)模誘變之前,需要研究誘變野生型材料的適宜EMS處理濃度和時間組合[36]。目前通常以EMS半致死率作為標準[32-34]。在高粱EMS誘變研究中,王春語等[19]、劉言龍等[20]和Xin等[37]以粒用高粱自交系BTx623種子為供體的研究結(jié)果顯示,適宜的EMS處理濃度時間組合在0.10%~0.25%/12~20 h之間;白鴻雁等[38]和范昕琦等[39]的結(jié)果則表明不同基因型高粱對EMS敏感度不同,半致死濃度也不一致,用于不同基因型以及突變體篩選的適宜EMS濃度時間處理組合在0.20%~0.35%/10~15 h之間。本研究結(jié)果為0.20%/16 h,與上述研究結(jié)果相似。

    通過對EMS處理的誘變后代(M1~M5)進行連續(xù)的逐代表型觀察、鑒定和篩選,獲得基本穩(wěn)定的具有早熟、高含糖量等特性的甜高粱種質(zhì)材料18份(表5)。這些材料總體較原野生型對照的生育期提前、株高、葉面積與鮮重降低,這可能與早期誘變世代中若干材料因晚熟而未能結(jié)實而被自然淘汰、同時大部分株高較高的材料一般較晚熟等因素相關(guān)。在品質(zhì)方面,所有材料的含糖量均超過對照,測定的5份材料中水分含量低于對照,而粗脂肪含量超過對照(表6)。由此可見,這些誘變甜高粱材料在作為飼草和能源作物上,有產(chǎn)量(鮮重)降低的缺點,但在若干品質(zhì)指標上則有所提高。因此這些材料的特異性狀如早熟、矮稈、高含糖量、白粒、散穗等性狀可作為甜高粱相關(guān)性狀功能基因定位研究,而這些材料也可作為部分遺傳改良的種質(zhì)資源材料。

    4 結(jié)論

    本研究結(jié)果表明,適宜甜高粱自交系甜94號EMS誘變處理的干種子浸泡法濃度時間組合為0.20%/16h。與原野生型對照相比,本研究創(chuàng)制了在生育期、株高、含糖量等性狀方面具有明顯差異的突變種質(zhì)材料18份,其中早熟2份、高含糖量4份、矮稈6份、白粒3份、散穗3份。這些突變材料為甜高粱遺傳改良和功能基因研究提供了新種質(zhì)和基礎(chǔ)材料,相關(guān)誘變處理及誘變后代的逐代觀察、鑒定和篩選等方法可為甜高粱EMS誘變育種研究提供借鑒。

    猜你喜歡
    含糖量致死率高粱
    水果越甜含糖越多嗎
    水果越甜含糖越多嗎
    我終于認識高粱了
    高粱名稱考釋
    高粱紅了
    低毒高效空倉煙霧殺蟲技術(shù)應(yīng)用探究
    臺灣致死率升至5.2%
    月圓之夜車禍致死率高
    星巴克等熱飲含糖量驚人
    食品與健康(2016年5期)2016-05-14 23:09:02
    S. longicaudum X—7線蟲對草坪地下害蟲小云斑鰓金龜幼蟲的致病力
    亚洲欧美日韩高清在线视频| 熟女人妻精品中文字幕| 少妇熟女欧美另类| 亚洲av成人精品一区久久| 成人精品一区二区免费| 国产爱豆传媒在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 夜夜爽天天搞| 精品午夜福利视频在线观看一区| 免费人成在线观看视频色| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲成人久久性| 色综合亚洲欧美另类图片| 成人午夜高清在线视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 青春草视频在线免费观看| 亚洲中文字幕日韩| 97超视频在线观看视频| 久久午夜亚洲精品久久| 日本一本二区三区精品| 亚洲一区二区三区色噜噜| 一进一出好大好爽视频| 在线观看午夜福利视频| 亚洲美女搞黄在线观看 | 精品一区二区免费观看| 久久午夜福利片| 色av中文字幕| 一个人看的www免费观看视频| 搡老岳熟女国产| 中国国产av一级| 亚洲成人久久爱视频| 91精品国产九色| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 校园春色视频在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 91狼人影院| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 少妇丰满av| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲综合色惰| 国产成人福利小说| 国产黄色小视频在线观看| 午夜福利在线观看吧| 97热精品久久久久久| 最后的刺客免费高清国语| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 特大巨黑吊av在线直播| 国产在线精品亚洲第一网站| 少妇的逼水好多| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 色5月婷婷丁香| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 哪里可以看免费的av片| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产精品不卡视频一区二区| 日韩中字成人| 中国美女看黄片| 国产在视频线在精品| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 一区福利在线观看| 免费观看的影片在线观看| 天堂影院成人在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 午夜老司机福利剧场| 日本三级黄在线观看| 伦理电影大哥的女人| 少妇丰满av| 嫩草影院入口| 观看免费一级毛片| 一区二区三区高清视频在线| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲精品456在线播放app| 国产精品99久久久久久久久| 精品国产三级普通话版| 久久久色成人| 国产精品不卡视频一区二区| 国产一区二区在线观看日韩| 97热精品久久久久久| 国产 一区 欧美 日韩| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 热99在线观看视频| 欧美成人a在线观看| 国产久久久一区二区三区| 在线观看66精品国产| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 日韩欧美三级三区| 插阴视频在线观看视频| 日韩一区二区视频免费看| 精品不卡国产一区二区三区| 变态另类丝袜制服| 国产精品伦人一区二区| 免费av不卡在线播放| 99热网站在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产男靠女视频免费网站| 免费大片18禁| 日韩欧美国产在线观看| 国产爱豆传媒在线观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 欧美高清性xxxxhd video| av天堂中文字幕网| 99在线人妻在线中文字幕| 午夜激情欧美在线| 久久久久国产网址| 日本 av在线| 国产精品久久视频播放| 国产成人a区在线观看| 国产精品一区二区性色av| 97在线视频观看| 麻豆乱淫一区二区| 成年版毛片免费区| 高清日韩中文字幕在线| 99在线视频只有这里精品首页| 国产探花在线观看一区二区| 深夜a级毛片| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 中文字幕免费在线视频6| 国产精品1区2区在线观看.| 91麻豆精品激情在线观看国产| 美女cb高潮喷水在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产精品福利在线免费观看| 国模一区二区三区四区视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 少妇丰满av| 午夜免费激情av| 成人综合一区亚洲| 深夜a级毛片| 久久午夜福利片| 国产探花在线观看一区二区| 蜜臀久久99精品久久宅男| 校园人妻丝袜中文字幕| 男女那种视频在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 级片在线观看| 日本与韩国留学比较| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 午夜久久久久精精品| 久久久久久九九精品二区国产| 日韩欧美免费精品| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲成人久久性| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲av不卡在线观看| 国产老妇女一区| 变态另类丝袜制服| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲第一区二区三区不卡| or卡值多少钱| av黄色大香蕉| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 中文字幕久久专区| 精品久久久噜噜| 国产免费男女视频| 在线观看免费视频日本深夜| 久久精品国产自在天天线| 有码 亚洲区| 午夜免费激情av| 日本黄色片子视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 久久久久九九精品影院| 国产精品爽爽va在线观看网站| 成人av在线播放网站| 欧美+日韩+精品| 男女啪啪激烈高潮av片| 69人妻影院| 国产精品一区二区免费欧美| 国产精品无大码| 亚洲五月天丁香| 午夜精品一区二区三区免费看| 此物有八面人人有两片| 日本一二三区视频观看| 18+在线观看网站| 国产不卡一卡二| 日日干狠狠操夜夜爽| 一区二区三区免费毛片| 老熟妇仑乱视频hdxx| 日本免费一区二区三区高清不卡| 免费看a级黄色片| 日韩欧美 国产精品| 久久这里只有精品中国| 国产一区二区激情短视频| 久久这里只有精品中国| 亚洲精品色激情综合| 精品免费久久久久久久清纯| 午夜激情欧美在线| 国产成人a区在线观看| 日本-黄色视频高清免费观看| 色在线成人网| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 成年女人毛片免费观看观看9| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 精品熟女少妇av免费看| 少妇丰满av| 欧美激情在线99| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 青春草视频在线免费观看| 午夜久久久久精精品| 十八禁网站免费在线| 国产精品三级大全| 可以在线观看的亚洲视频| 午夜日韩欧美国产| 亚洲乱码一区二区免费版| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 亚洲人成网站高清观看| 国产精品1区2区在线观看.| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 最近最新中文字幕大全电影3| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久99热这里只有精品18| 69av精品久久久久久| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 精品久久久噜噜| 亚洲中文字幕日韩| 九色成人免费人妻av| 嫩草影院入口| 特级一级黄色大片| АⅤ资源中文在线天堂| 久久久久精品国产欧美久久久| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲av一区综合| 日本三级黄在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲欧美日韩高清专用| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 综合色丁香网| 免费人成在线观看视频色| 精品久久久久久久久亚洲| 国产人妻一区二区三区在| 少妇高潮的动态图| 99九九线精品视频在线观看视频| 国产大屁股一区二区在线视频| 欧美又色又爽又黄视频| 成人性生交大片免费视频hd| 精品熟女少妇av免费看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 免费看光身美女| 久久人人爽人人爽人人片va| 观看免费一级毛片| 精品一区二区免费观看| 亚洲人成网站在线播| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲最大成人手机在线| .国产精品久久| 一级毛片久久久久久久久女| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品一区二区免费观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 午夜久久久久精精品| 美女大奶头视频| 亚洲国产精品成人久久小说 | 国产高清激情床上av| 热99re8久久精品国产| 中文亚洲av片在线观看爽| 两个人视频免费观看高清| 国产精品野战在线观看| 久久精品影院6| 九九爱精品视频在线观看| av在线观看视频网站免费| 欧美色视频一区免费| 免费av不卡在线播放| 观看美女的网站| 午夜视频国产福利| 五月玫瑰六月丁香| 天堂影院成人在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲国产色片| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产精品一区二区性色av| 男女视频在线观看网站免费| 伊人久久精品亚洲午夜| 午夜亚洲福利在线播放| 成人精品一区二区免费| 国产精品日韩av在线免费观看| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 国产真实乱freesex| 国产老妇女一区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 一级毛片电影观看 | 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产在线男女| 精品午夜福利在线看| 直男gayav资源| 午夜福利18| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲av美国av| 国产乱人偷精品视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产欧美日韩一区二区精品| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 国产高清有码在线观看视频| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 久久久久久久久久黄片| 国产在视频线在精品| 午夜a级毛片| 日本黄色片子视频| 午夜福利18| 最近的中文字幕免费完整| 日本黄大片高清| videossex国产| 国产精品乱码一区二三区的特点| 我要搜黄色片| 欧美激情国产日韩精品一区| 天美传媒精品一区二区| 伊人久久精品亚洲午夜| av在线播放精品| 国产精品不卡视频一区二区| 成人漫画全彩无遮挡| 麻豆一二三区av精品| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲三级黄色毛片| 长腿黑丝高跟| 亚洲三级黄色毛片| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲在线观看片| 一进一出好大好爽视频| 最近最新中文字幕大全电影3| 日韩制服骚丝袜av| 午夜久久久久精精品| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲国产精品成人综合色| 99久国产av精品| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 欧美日韩综合久久久久久| 日韩制服骚丝袜av| 日韩高清综合在线| 日本三级黄在线观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲精品在线观看二区| 成人漫画全彩无遮挡| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久鲁丝午夜福利片| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 在线观看美女被高潮喷水网站| 色av中文字幕| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲av一区综合| 亚洲天堂国产精品一区在线| 日本免费一区二区三区高清不卡| 黄色视频,在线免费观看| 久久草成人影院| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 亚洲四区av| 亚洲欧美精品自产自拍| 夜夜爽天天搞| 九九在线视频观看精品| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲第一区二区三区不卡| 久久国内精品自在自线图片| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产片特级美女逼逼视频| 插逼视频在线观看| 一本一本综合久久| 我的老师免费观看完整版| 麻豆国产av国片精品| av在线蜜桃| 久久九九热精品免费| 不卡一级毛片| 可以在线观看的亚洲视频| 日韩人妻高清精品专区| 国产精品一二三区在线看| 神马国产精品三级电影在线观看| a级毛色黄片| 久久人人精品亚洲av| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产真实伦视频高清在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲精品日韩av片在线观看| 色av中文字幕| 亚洲av.av天堂| 天堂影院成人在线观看| 国产男人的电影天堂91| 美女被艹到高潮喷水动态| 久久久久久久午夜电影| 欧美日韩国产亚洲二区| 亚洲av第一区精品v没综合| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 一区二区三区四区激情视频 | 国产伦精品一区二区三区视频9| 成年av动漫网址| 国内揄拍国产精品人妻在线| 99久久成人亚洲精品观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产综合懂色| 国产一区二区在线av高清观看| 波多野结衣巨乳人妻| 最近视频中文字幕2019在线8| 成人永久免费在线观看视频| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲精品久久国产高清桃花| 免费观看在线日韩| 国产美女午夜福利| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产精品久久久久久久久免| 丰满的人妻完整版| 亚洲在线自拍视频| 露出奶头的视频| 久久久久久久久久成人| 天天躁日日操中文字幕| 在线天堂最新版资源| 日韩亚洲欧美综合| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 桃色一区二区三区在线观看| www日本黄色视频网| 日本在线视频免费播放| 波多野结衣高清作品| 精品国内亚洲2022精品成人| 俄罗斯特黄特色一大片| 国内精品一区二区在线观看| 一本久久中文字幕| 精品人妻偷拍中文字幕| 一级av片app| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲国产精品国产精品| 欧美精品国产亚洲| 久久久欧美国产精品| 校园人妻丝袜中文字幕| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产乱人视频| 99久国产av精品| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产精品一区二区免费欧美| a级毛片a级免费在线| 亚洲无线观看免费| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 日本黄色片子视频| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 久久久久久久亚洲中文字幕| or卡值多少钱| 看十八女毛片水多多多| 日韩亚洲欧美综合| 国产精品福利在线免费观看| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲无线观看免费| videossex国产| 国产免费一级a男人的天堂| 日韩av不卡免费在线播放| 最近在线观看免费完整版| 婷婷精品国产亚洲av在线| 在线看三级毛片| 婷婷色综合大香蕉| 男女那种视频在线观看| 舔av片在线| 日本熟妇午夜| 一级毛片我不卡| 我的老师免费观看完整版| 国产日本99.免费观看| 在线观看一区二区三区| 欧美一级a爱片免费观看看| 久久久精品欧美日韩精品| 大香蕉久久网| 麻豆国产av国片精品| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产乱人偷精品视频| 变态另类丝袜制服| 日本熟妇午夜| 久久九九热精品免费| 欧美又色又爽又黄视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲内射少妇av| 特级一级黄色大片| 春色校园在线视频观看| 国产三级中文精品| 99热这里只有精品一区| 国产男人的电影天堂91| 久久久久久久久久成人| 最近手机中文字幕大全| av天堂在线播放| 成人亚洲精品av一区二区| 深夜精品福利| 国产精品99久久久久久久久| 高清毛片免费观看视频网站| 欧美+亚洲+日韩+国产| 成熟少妇高潮喷水视频| 长腿黑丝高跟| 亚洲欧美日韩东京热| 在线观看午夜福利视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产av不卡久久| 国产免费男女视频| 久久国内精品自在自线图片| 村上凉子中文字幕在线| 级片在线观看| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲av二区三区四区| 1024手机看黄色片| 亚洲自拍偷在线| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲色图av天堂| 老司机影院成人| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产乱人偷精品视频| 欧美性猛交黑人性爽| 亚洲av五月六月丁香网| 久99久视频精品免费| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久精品大字幕| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲电影在线观看av| 国产亚洲欧美98| 我的女老师完整版在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 国模一区二区三区四区视频| 午夜福利在线在线| 一本精品99久久精品77| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 婷婷六月久久综合丁香| 午夜日韩欧美国产| 99riav亚洲国产免费| 日本五十路高清| 午夜久久久久精精品| 乱人视频在线观看| 精品不卡国产一区二区三区| 夜夜夜夜夜久久久久| 一级a爱片免费观看的视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 久久久久久九九精品二区国产| 日韩中字成人| 日本黄色片子视频| 国产一区二区三区av在线 | 男人狂女人下面高潮的视频| 一进一出好大好爽视频| 又爽又黄a免费视频| 久久亚洲精品不卡| 别揉我奶头 嗯啊视频| 免费高清视频大片| 欧美日韩国产亚洲二区| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲中文字幕日韩| 男人和女人高潮做爰伦理| 此物有八面人人有两片| 免费看日本二区| 亚洲乱码一区二区免费版| 免费看av在线观看网站| 最新中文字幕久久久久| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲精品国产成人久久av| 伦理电影大哥的女人| 日韩亚洲欧美综合| 欧美日韩在线观看h| 国产av一区在线观看免费| 国产精品人妻久久久影院| 免费一级毛片在线播放高清视频| 深爱激情五月婷婷| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产美女午夜福利| 五月伊人婷婷丁香| 精品一区二区三区av网在线观看| a级毛片a级免费在线| 99久久九九国产精品国产免费| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 国产黄色视频一区二区在线观看 | 欧美激情国产日韩精品一区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产精品国产高清国产av| 91久久精品国产一区二区成人| 免费av不卡在线播放| 嫩草影院入口| 国产黄片美女视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 高清毛片免费看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 午夜福利在线在线| 国产69精品久久久久777片| 精品人妻视频免费看| 国产69精品久久久久777片| 国产不卡一卡二| 精品久久久久久成人av| 久久久久久伊人网av| 成人综合一区亚洲| 色哟哟·www| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲av一区综合| 黄色配什么色好看| 男插女下体视频免费在线播放| 小说图片视频综合网站| 99riav亚洲国产免费| 亚洲欧美精品自产自拍| 乱系列少妇在线播放| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 欧美极品一区二区三区四区| 中文字幕熟女人妻在线| 免费观看在线日韩| 内地一区二区视频在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 日韩欧美 国产精品| 级片在线观看| 成人午夜高清在线视频| 国产av在哪里看| 欧美最黄视频在线播放免费| 性插视频无遮挡在线免费观看| 无遮挡黄片免费观看|