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    S. longicaudum X—7線蟲對(duì)草坪地下害蟲小云斑鰓金龜幼蟲的致病力

    2015-10-20 14:43范芳芳張宗豪徐成體
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年9期
    關(guān)鍵詞:致死率線蟲

    范芳芳++張宗豪++徐成體

    摘要:室內(nèi)測(cè)定了不同濃度S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜不同齡期幼蟲的侵染效果,結(jié)果表明,線蟲侵染劑量、侵染時(shí)間對(duì)致死小云斑鰓金龜幼蟲具有重要意義。該線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的感染活性較高,致死時(shí)間主要集中在48 h內(nèi),當(dāng)線蟲濃度為3 000 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)1齡小云斑鰓金龜幼蟲的致死率可達(dá)92.86%;該線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率較低,當(dāng)線蟲濃度為2 500 IJs/mL時(shí),致死率僅為40%,當(dāng)線蟲劑量為3 000、3 500 IJs/mL時(shí),該線蟲對(duì)1齡幼蟲的致死率均極顯著高于3齡幼蟲。通過(guò)提高線蟲用量、延長(zhǎng)致死時(shí)間,在小云斑鰓金龜幼蟲1齡期可達(dá)到預(yù)期的防治效果。

    關(guān)鍵詞:線蟲;小云斑鰓金龜;致死率

    中圖分類號(hào): S433.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào):1002-1302(2015)09-0162-02

    蠐螬(Polyphylla gracilicornis)為危害青海省西寧地區(qū)草坪的主要地下害蟲,主要咬食草坪草根部,導(dǎo)致草坪草枯黃,且草坪地下害蟲蠐螬的隱蔽性很強(qiáng),使用化學(xué)藥劑往往難以取得理想的防治效果,而且容易導(dǎo)致“3R”問(wèn)題的產(chǎn)生,加上人們對(duì)草坪開發(fā)利用強(qiáng)度越來(lái)越大,極大地限制了化學(xué)藥劑的使用。西寧地區(qū)蠐螬危害極為嚴(yán)重,最高可達(dá)37頭/m2,主要以小云斑鰓金龜(Polyphylla gracilicornis)幼蟲為主,S. longicaudum X-7線蟲是安全、高效的生物制劑,能專性寄生并快速殺死昆蟲,目前在我國(guó)南方地區(qū)已將其成功應(yīng)用于草坪地下害蟲的防治[1-3]。本研究探討S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜幼蟲的致病力,旨在為開發(fā)利用草坪提供依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1供試線蟲

    由廣東省昆蟲研究所提供。

    1.2供試害蟲

    小云斑鰓金龜幼蟲采集于西寧地區(qū)周邊草坪地,選用蟲齡大小一致的小云斑鰓金龜幼蟲。

    1.3供試線蟲的制備與計(jì)量

    將貯存S. longicaudum X-7線蟲的海綿塊取出后放入燒杯中,用滅菌水反復(fù)沖洗,得到線蟲稀釋液。用微量取樣器吸取線蟲液25 μL,滴于培養(yǎng)皿上,鏡檢解剖鏡視野內(nèi)的線蟲數(shù),計(jì)算線蟲濃度。

    1.4方法

    1.4.1不同侵染劑量對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的毒力測(cè)定制備S. longicaudum X-7線蟲梯度濃度溶液,濃度分別設(shè)置為2 000、2 500、3 000、3 500 IJs/mL。

    選取蟲齡一致的 1齡幼蟲,使用硬塑料杯,每杯底墊2層中速濾紙,滴加無(wú)菌水使濾紙保持濕潤(rùn),每孔放入1頭1齡幼蟲,并放入數(shù)塊馬鈴薯,每孔滴加1 mL相應(yīng)濃度S. longicaudum X-7線蟲至蟲體上,每處理 10頭 幼蟲,重復(fù)3次,設(shè)置清水對(duì)照。24 h觀察1次,統(tǒng)計(jì)死蟲數(shù)目,及時(shí)補(bǔ)充更換飼料。飼養(yǎng)條件:溫度為(25± 2) ℃,相對(duì)濕度為80%~85%,無(wú)光照。連續(xù)觀察144 h,記錄幼蟲的死亡數(shù)目。

    1.4.2不同侵染劑量對(duì)3齡幼蟲的毒力測(cè)定制備線蟲梯度濃度液配,濃度設(shè)置為1 000、1 500、2 000、2 500、3 000 IJs/mL。選取蟲齡一致的 3齡幼蟲,使用硬塑料杯,每孔墊2層中速濾紙,滴加無(wú)菌水使濾紙保持濕潤(rùn),每孔放入1頭3齡幼蟲,并放入數(shù)塊馬鈴薯,每孔滴加1 mL相應(yīng)濃度S. longicaudum X-7 線蟲至蟲體上,每處理 5頭幼蟲,重復(fù)3次,設(shè)置清水對(duì)照,及時(shí)補(bǔ)充更換飼料。飼養(yǎng)條件:(25± 2) ℃,相對(duì)濕度為80%~85%,無(wú)光照。連續(xù)觀察10 d,觀察并記錄幼蟲的死亡數(shù)目。

    2結(jié)果與分析

    2.1S. longicaudum X-7線蟲不同侵染劑量對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死效果

    由表1可知,144 h線蟲劑量為2 000、2 500、3 000、3 500 IJs/mL 時(shí),S. longicaudum X-7對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的較正死亡率分別為50.00%、53.58%、82.14%、9286%。線蟲劑量為2 000、2 500 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死率差異不顯著;線蟲劑量為 3 000、3 500 IJs/mL時(shí),S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死率差異不顯著,但顯著高于線蟲劑量為2 000、2 500 IJs/mL 時(shí)的致死率。當(dāng)線蟲劑量大于 3 000 IJs/mL 時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲具有很高的致死率。

    由圖1可知,24 h線蟲劑量為2 000、2 500、3 000、3 500 IJs/mL 時(shí),S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死率分別為20.69%、27.59%、55.18%、4828%,其中3 000 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死率極顯著高于線蟲劑量為2 000、2 500 IJs/mL時(shí)的致死率。48 h線蟲劑量為2 000、2 500、3 000、3 500 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死率分別為37.93%、41.38%、72.41%、82.76%,其中線蟲劑量為3 000、3 500 IJs/mL 時(shí)的致死率極顯著高于線蟲劑量為2 000、2 500 IJs/mL 時(shí)的致死率。144 h線蟲劑量為2 000、2 500、3 000、3 500 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死率分別為50.00%、53.58%、82.14%、92.59%,其中線蟲劑量為3 000、3 500 IJs/mL時(shí)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死率極顯著高于線蟲劑量為2 000、2 500 IJs/mL時(shí)的致死率??梢娫诟鱾€(gè)時(shí)間段線蟲濃度大對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死率也較高,線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的致死時(shí)間主要集中在48 h之內(nèi)。

    2.2S . longicaudum X-7線蟲不同侵染劑量對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死效果

    由表2可知,第10天線蟲劑量為2 000、2 500、3 000、3 500、4 000 IJs/mL時(shí),S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率分別為26.27%、26.67%、33.33%、40.00%、40.00%。線蟲劑量為3 000、3 500、4 000 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率顯著高于線蟲劑量為 2 000、2 500 IJs/mL時(shí)線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率,且隨著線蟲濃度的增加,線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率有所提高,直至線蟲濃度為3 500 IJs/mL時(shí),致死率最高達(dá)40%,線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率不再隨濃度的增加而提高。S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率比較低,即S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的侵染力較低。

    由圖2可知,當(dāng)?shù)?天線蟲劑量為1 000、2 000、3 000 IJs/mL 時(shí),S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率分別為13.33%、26.67%、26.67%,線蟲劑量為2 000、3 000 IJs/mL時(shí)線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率高于線蟲劑量為1 000 IJs/mL時(shí)的致死率,差異不顯著。第6天線蟲劑量為1 000、2 000、3 000 IJs/mL時(shí),對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率分別為26.67%、33.33%、40.00%,線蟲劑量為3 000 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率高于線蟲劑量為2 000 IJs/mL時(shí)的致死率,線蟲劑量為2 000 IJs/mL時(shí)線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率高于線蟲劑量為 1 000 IJs/mL 時(shí)的致死率,但差異不顯著。第10天當(dāng)線蟲劑量為1 000、2 000、3 000 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率分別為26.70%、40.00%、4000%,線蟲劑量為3 000、2 000 IJs/mL 時(shí)線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率極顯著高于線蟲劑量為1 000 IJs/mL時(shí)的致死率。第2—6天,線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率呈緩慢提高趨勢(shì),第6—10天,線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率幾乎不再提高。

    2.3S. longicaudum X-7線蟲對(duì)不同齡期小云斑鰓金龜幼蟲的侵染效果

    由圖3可知,線蟲劑量為2 000 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓1齡幼蟲、3齡幼蟲的致死率分別為53.33%、26.67%。當(dāng)

    線蟲劑量為2 500 IJs/mL時(shí),S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡、3齡幼蟲的致死率分別為56.67%、26.67%,當(dāng)線蟲劑量為3 000 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)1齡、3齡幼蟲的致死率分別為83.33%、40.00%,其中線蟲對(duì)小云斑鰓1齡幼蟲的致死率極顯著高于3齡幼蟲。當(dāng)線蟲劑量為3 500 IJs/mL時(shí),線蟲對(duì)小云斑鰓1齡、3齡幼蟲的致死率分別為93.33%、40.00%,其中線蟲對(duì)小云斑鰓1齡幼蟲的致死率極顯著高于3齡幼蟲,可見隨著小云斑鰓金龜幼蟲蟲齡的增長(zhǎng),其抵抗線蟲的能力也在逐漸增強(qiáng),說(shuō)明齡期是影響線蟲侵染小云斑鰓金龜幼蟲的重要因素。

    3結(jié)論與討論

    本研究測(cè)定了不同濃度S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡、3齡幼蟲的致死效果,結(jié)果表明,增大線蟲濃度或延長(zhǎng)施用時(shí)間對(duì)小云斑鰓金龜1齡、3齡幼蟲都會(huì)產(chǎn)生更高的致死率。劉樹森研究表明,不同線蟲品系對(duì)不同齡期線蟲具有不同的侵染效果[4]。本研究結(jié)果表明,S. longicaudum X-7線蟲對(duì)小云斑鰓金龜1齡幼蟲的侵染率最高可達(dá)92.86%,極顯著高于對(duì)3齡幼蟲的侵染率,且線蟲對(duì)小云斑鰓1齡幼蟲的致死率主要在48 h內(nèi),之后致死率變化緩慢。線蟲對(duì)小云斑鰓金龜3齡幼蟲的致死率較低,第10天濃度為 3 500 IJs/mL 時(shí),致死率最高可達(dá)40%,當(dāng)線蟲濃度增大到 4 000 IJs/mL 時(shí),致死率不再變化,致死效果不明顯,因此選用線蟲防治時(shí)應(yīng)根據(jù)小云斑鰓金龜幼蟲的生物學(xué)特性在1齡期進(jìn)行防治。

    參考文獻(xiàn):

    [1]叢斌,劉維志,楊懷文. 昆蟲病原線蟲研究和利用的歷史、現(xiàn)狀與展望[J]. 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1999,30(3):343-353.

    [2]Georgis R. Commercialization of Steinernematid and Heterorhabditid entomopathogenic nematodes[J]. Brighton Crop Prot Conf Insectic Fungic,1990,1:275-280.

    [3]Zimmerman R J,Cranshaw W S. Compatibility of three entomogenous nematodes(Rhabditida) in aqueous solutions of pesticides used in turfgrass maintenance[J]. J Econ Entomol,1990,83:97-100.

    [4]劉樹森. 昆蟲病原線蟲的篩選鑒定及其對(duì)蠐螬的致病性研究[D]. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2009.歐克芳. 再力花葉枯病病原菌鑒定[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,43(9):164-165.

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