肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜對(duì)采后番木瓜炭疽病的防治效果及作用機(jī)制分析

黃文佳　杜麗清　谷會(huì)

摘? 要：番木瓜是我國(guó)著名的熱帶、亞熱帶水果之一，但番木瓜屬于呼吸躍變型果實(shí)，采后不耐貯運(yùn)，其中由炭疽病引起的腐爛損失最為嚴(yán)重。因此，如何防治番木瓜采后炭疽病，降低番木瓜腐爛損失，延長(zhǎng)貯藏保鮮期，成了制約番木瓜產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的瓶頸問(wèn)題。本文以‘大青’番木瓜為試驗(yàn)材料，以綠色環(huán)保的肉桂精油-殼聚糖復(fù)合保鮮液為處理手段，研究其對(duì)采后番木瓜炭疽病的防治效果及作用機(jī)制，為我國(guó)番木瓜采后貯運(yùn)保鮮產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供理論依據(jù)和應(yīng)用參考。分別用0.5%殼聚糖、0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油、0.5%殼聚糖+0.5%肉桂精油、0.5%殼聚糖+0.7%肉桂精油溶液對(duì)采后番木瓜果實(shí)進(jìn)行噴霧處理，清水處理作為對(duì)照，處理后的番木瓜分為2組，其中一組處理后置于25℃下恒溫貯藏，定期測(cè)定果實(shí)病情指數(shù);另一組處理后置于25℃下恒溫貯藏24?h后，在果面刺傷接種番木瓜炭疽菌，定期調(diào)查果實(shí)病斑直徑，并對(duì)果皮進(jìn)行取樣，測(cè)定不同處理果實(shí)的抗病相關(guān)物質(zhì)含量和抗病相關(guān)酶活性的變化情況。番木瓜炭疽菌的離體抑菌實(shí)驗(yàn)采用含藥PDA平板抑菌法進(jìn)行測(cè)定。研究結(jié)果表明：0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理對(duì)番木瓜炭疽病的防治效果最好，復(fù)合處理可完全抑制離體番木瓜炭疽菌的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢，復(fù)合處理顯著降低了番木瓜果實(shí)的病斑直徑，提高了抗病相關(guān)物質(zhì)木質(zhì)素、總酚（TP）和過(guò)氧化氫（HO）的含量，提高了抗病相關(guān)酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）、過(guò)氧化物酶（POD）和β-1，3葡聚糖酶（β-1，3-GA）的活性，但對(duì)幾丁質(zhì)酶（CHI）活性影響不大。由此可見(jiàn)，肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜對(duì)番木瓜炭疽菌有較好的防控效果，一方面是由于復(fù)合處理抑制了番木瓜炭疽菌的生長(zhǎng)，另一方面是復(fù)合處理誘導(dǎo)番木瓜果實(shí)提高了抗病性。因此，適宜濃度的肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜處理為防控番木瓜采后炭疽病提供了一種綠色新途徑。

關(guān)鍵詞：番木瓜;殼聚糖;肉桂精油;炭疽病;作用機(jī)制

中圖分類號(hào)：TS255.3??????文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

Analysis of Control Effect and Mechanism of Cinnamon Essential Oil Composite Chitosan Coatings on Postharvest Papaya Anthracnose

HUANG Wenjia ?DU Liqing ?GU Hui

1. College of Horticulture， Hainan University， Haikou， Hainan 570228， China; 2. South Subtropical Crops Research Institute， Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences / Key Laboratory of Hainan Province for Postharvest Physiology and Technology of Tropical Horticultural Products， Zhanjiang， Guangdong 524091， China

Papaya is one of the famous tropical and subtropical fruits in China， but papaya is a kind of respiratory climacteric fruit， and is intolerance to storage and transportation after harvest， and the postharvest rot caused by anthracnose is the most serious problem. Therefore， how to control papaya postharvest anthracnose， reduce the postharvest rot， and prolong the preservation period has become a critical restricting the healthy development of the papaya industry. In this paper， ‘Daqing’ papaya was used as the test material， and the green and environmentally friendly cinnamon essential oil-chitosan composite preservation solution was used as the treating method to study the control effect and mechanism to postharvest papaya anthracnose for the purpose of the development of the storage and preservation industry of papaya after harvest to provide theoretical basis and application reference. In this paper， 0.5% chitosan， 0.5% chitosan + 0.3% cinnamon essential oil， 0.5% chitosan + 0.5% cinnamon essential oil， 0.5% chitosan + 0.7% cinnamon essential oil were used on postharvest papaya. The treated method was spraying and treated with water as the control. The treated papayas were divided into two groups， one group was treated and stored at 25℃， the fruit disease index was measured regularly， and the other group was wounded inoculated papaya on the fruit surface after stored for 24 h at 25℃， and the diameter of the fruit lesions were investigated regularly， meanwhile， the papaya peels were sampled， and the content of disease resistance related substances and the changes of disease resistance related enzyme activity in the fruits were determined. The in vitro anti-fungus experiment of papaya was determined by the drug-containing PDA plate anti-fungus method. The results showed that the treatment of 0.5% chitosan + 0.3% cinnamon essential oil had the best control effect on papaya anthracnose， and the combined treatment could completely inhibit the growth and sporulation of in vitro. The combined treatment significantly reduced the diameter of anthracnose lesion on papaya fruit. The content of disease resistance related substances lignin， total phenol （TP） and hydrogen peroxide （HO） was increased， and disease resistance related enzymes phenylalanine ammonia lyase （PAL）， peroxidase （POD） and β-1，3-glucanase （β-1，3-GA） activity increased， but had little effect on chitinase （CHI） activity. It was clear that cinnamon essential oil composite chitosan coatings had good control effect on papaya anthracnose. The combined treatment inhibited the growth of papaya and induced papaya fruit to improve disease resistance. Therefore， the appropriate concentration of cinnamon essential oil combined with chitosan coating treatment would provide a new green way to control the postharvest papaya anthracnose.

papaya; chitosan; cinnamon essential oil; anthracnose; mechanism

10.3969/j.issn.1000-2561.2022.02.018

番木瓜（ L.）俗名木瓜、乳瓜、萬(wàn)壽果，是番木瓜科，是著名的熱帶亞熱帶水果之一，原產(chǎn)于非洲和熱帶美洲，番木瓜與菠蘿、香蕉并稱為“熱帶三大草本果樹(shù)”，素有“嶺南佳果”的美譽(yù)。番木瓜果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，富含糖類、蛋白質(zhì)、多種無(wú)機(jī)礦物質(zhì)和維生素，尤其胡蘿卜素和Vc的含量分別是菠蘿的20倍和4倍，還有延緩衰老、增強(qiáng)人體免疫力等功能，因此具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。但是，由于番木瓜屬于呼吸躍變型果實(shí)，采后極容易變黃、軟化最后導(dǎo)致腐爛，并且番木瓜的貨架期短，因而番木瓜的貯藏和運(yùn)輸成為亟需解決的主要問(wèn)題。這嚴(yán)重影響了番木瓜產(chǎn)業(yè)鏈的健康發(fā)展，因此，如何延長(zhǎng)番木瓜的保鮮成為了我們研究的主要方向。

殼聚糖（chitosan， CTS）是天然甲殼素的脫乙?；a(chǎn)物，也是自然界中唯一的天然堿性多糖。因其具有來(lái)源豐富，并無(wú)毒無(wú)害、可降解、可食用、良好的成膜特性，抗氧化性、不溶于水、和廣譜抗菌性等性征，且可溶于醋酸稀溶液，易在物體表面形成半透膜，近年來(lái)其在食品工業(yè)中的應(yīng)用成為了研究的熱點(diǎn)。但單一的殼聚糖作為食品涂膜保鮮劑時(shí)存在一些問(wèn)題，如膜的機(jī)械強(qiáng)度較弱，且對(duì)一些微生物的抑制效果不佳，因而影響保鮮品的品質(zhì)。為了進(jìn)一步強(qiáng)化殼聚糖膜的抗菌能力及膜的整體性能，殼聚糖中經(jīng)常加入精油。植物精油是天然的混合物，是從芳香植物中提取出來(lái)，具有揮發(fā)性，無(wú)毒無(wú)害，且具有良好的抗菌性，部分精油還有抗氧化性，被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)定為“公認(rèn)安全類產(chǎn)品”。

殼聚糖富含活性基團(tuán)，能有效包埋植物精油、提高抗菌性、發(fā)揮精油的緩釋作用，植物精油本身具有一定的刺激性，但通過(guò)殼聚糖包埋后，精油的刺激性氣味就會(huì)被掩蓋，從而降低精油的刺激性氣味對(duì)食品風(fēng)味產(chǎn)生的影響。另一方面，植物精油具有疏水性，可以增強(qiáng)植物精油和殼聚糖復(fù)合膜的防水性能，使保鮮效果更好。王建清等研究發(fā)現(xiàn)，30?μL/mL的肉桂精油與1%的酸溶性殼聚糖涂膜能延長(zhǎng)草莓的貨架壽命48?h以上，達(dá)到了保鮮效果。王磊明等研究發(fā)現(xiàn)，在低溫4℃下，0.8%肉桂精油+1.2%的殼聚糖處理藍(lán)莓效果最好，保鮮指標(biāo)的平均貢獻(xiàn)率為0.205。高文華等研究發(fā)現(xiàn)殼聚糖肉桂精油涂膜圣女果，其保鮮期延長(zhǎng)了14?d。楊震宇等研究發(fā)現(xiàn)，在低溫4℃下，1.5%殼聚糖+0.4%肉桂精油復(fù)合保鮮液處理對(duì)鮮切雪蓮果具有保鮮效果，貯藏6?d時(shí)，依舊新鮮。薛瓊等研究發(fā)現(xiàn)，以殼聚糖肉桂精油復(fù)合3∶1比例制備微膠囊處理對(duì)葡萄具有較好的保鮮效果。然而肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜對(duì)番木瓜果實(shí)炭疽病的防治作用及其生理機(jī)制研究尚未見(jiàn)報(bào)道。因此本文以此為切入點(diǎn)，探究肉桂精油與可食性殼聚糖涂膜對(duì)番木瓜炭疽病的防治效果，同時(shí)對(duì)番木瓜果實(shí)的抗病生理特性展開(kāi)研究，為我國(guó)番木瓜產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展提供理論依據(jù)和應(yīng)用參考。

? 材料與方法

? 材料

1.1.1? 供試番木瓜品種? 本研究所用番木瓜品種為‘大青’番木瓜（Carica papaya L.），于2021年4月采自廣東省湛江市徐聞縣金龜嶺果園，采摘時(shí)挑選形狀、大小、外觀顏色相對(duì)一致，成熟度為七八成熟，無(wú)機(jī)械損傷無(wú)病蟲(chóng)害的果實(shí)，每個(gè)果實(shí)留取1?cm左右果柄，采后立即運(yùn)回中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院南亞熱帶作物研究所實(shí)驗(yàn)室備用。

1.1.2? 化學(xué)試劑? 殼聚糖（低粘度：<200?mPa·s），國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;肉桂精油，陜西森朗生物化工有限公司;冰醋酸（分析純），天津市江天化工技術(shù)有限公司;纖維素納米纖維，開(kāi)翊新材料科技（上海）有限公司;馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA），廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。

1.1.3? 供試菌株? 番木瓜膠孢炭疽菌（Penz.），由中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院南亞熱帶作物研究所采后保鮮實(shí)驗(yàn)室分離保存。

? 方法

1.2.1? 肉桂精油殼聚糖復(fù)合乳液的制備? 用體積分?jǐn)?shù)為0.5%冰醋酸溶液溶解殼聚糖，將殼聚糖加入冰醋酸溶液后，在1000?r/min磁力攪拌器上攪拌1?h使殼聚糖在常溫狀態(tài)下完全溶解，殼聚糖溶液的終濃度為0.5%，之后依次加入0.1%的纖維素納米纖維和肉桂精油，用錫箔紙包裹，在不透光條件下用磁力攪拌器攪拌1?h，再用10 000?r/min剪切分散乳化機(jī)攪拌2?min直至液體互溶乳化，靜置，待泡沫消失后備用。

1.2.2? 番木瓜果實(shí)炭疽病病情指數(shù)的測(cè)定? 將采回的番木瓜果實(shí)用0.25?g/L咪鮮胺浸泡果柄5?min，晾干后分別用處理組試劑進(jìn)行噴霧處理番木瓜果面，4個(gè)處理組分別為：0.5%殼聚糖、0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油、0.5%殼聚糖+0.5%肉桂精油、0.5%殼聚糖+0.7%肉桂精油，清水處理作為對(duì)照，晾干后裝入聚乙烯（PE）保鮮袋于常溫25℃條件下貯藏，每隔3?d調(diào)查果實(shí)病情，計(jì)算病情指數(shù)及防治效果，每處理21個(gè)果實(shí)，3次重復(fù)。果實(shí)病斑面積分級(jí)及病情指數(shù)的計(jì)算參照陳文的方法。

病情指數(shù)=Σ[（病害果數(shù)×病害級(jí)值）/總果數(shù)×最高病害級(jí)值]×100

防治效果=（對(duì)照病情指數(shù)–處理病情指數(shù)）/對(duì)照病情指數(shù)×100%

1.2.3? 番木瓜果實(shí)炭疽病病斑直徑的測(cè)定? 前處理方法同1.2.2，將在常溫25℃下貯藏24?h后的番木瓜果實(shí)取出，用針刺接種法接種，在每個(gè)番木瓜果面靠近兩端刺出2個(gè)接種點(diǎn)，接種直徑為5?mm的炭疽菌菌塊，用含無(wú)菌水的棉塊保濕，之后將果實(shí)裝入PE保鮮袋，25℃下培養(yǎng)24?h后取下菌快，每隔3?d用十字交叉法測(cè)定一次病斑直徑，每處理23個(gè)果實(shí)，3次重復(fù)。

1.2.4? 肉桂精油復(fù)合殼聚糖處理對(duì)番木瓜炭疽菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢影響? 制作PDA平板培養(yǎng)基，其中處理組PDA平板中分別含有0.0125%肉桂精油、0.025%肉桂精油、0.3%肉桂精油、0.3%肉桂精油+0.5%殼聚糖、0.5%殼聚糖，空白PDA平板作為對(duì)照。取提前培養(yǎng)好的番木瓜炭疽菌平板，在其邊緣打取直徑為5?mm的菌苔接種到已制作好的PDA平板中央，在28℃下恒溫培養(yǎng)，用十字交叉法每天測(cè)量炭疽菌的菌落直徑，并在培養(yǎng)5?d后用血球計(jì)數(shù)板計(jì)量每個(gè)培養(yǎng)皿的產(chǎn)孢量，產(chǎn)孢量的單位為個(gè)/皿，3次重復(fù)。

1.2.5? 番木瓜果實(shí)抗病相關(guān)物質(zhì)含量和抗病相關(guān)酶活性的測(cè)定? 處理方法同1.2.3，處理組為0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油，清水處理為對(duì)照，分別在采后0、3、6、9、12、15?d時(shí)取樣，取樣部位為果實(shí)病健交界處的果皮組織，每處理23個(gè)果實(shí)，重復(fù)3次。木質(zhì)素含量、總酚（TP）含量、過(guò)氧化氫（HO）含量及苯丙氨酸解氨酶（PAL）、多酚氧化酶（PPO）、過(guò)氧化物酶（POD）、幾丁質(zhì)酶（CHI）、β-1，3葡聚糖酶（β-1，3-GA）的活性均采用蘇州科銘生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

? 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Excel 2010軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤并制圖。采用SPSS 22.0軟件，利用ANOVA進(jìn)行差異顯著性分析，0.05表示差異顯著。

? 結(jié)果與分析

? 肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜對(duì)番木瓜炭疽病的防治效果

由圖1可以看出，番木瓜貯藏12?d時(shí)，對(duì)照及其他處理均發(fā)病，但0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理仍沒(méi)有發(fā)病;15?d時(shí)，對(duì)照及各處理都發(fā)病，且從整體上看，各處理的病情指數(shù)都顯著低于對(duì)照，貯藏15?d時(shí)，殼聚糖處理、0.5%殼聚糖+ 0.3%肉桂精油處理、0.5%殼聚糖+0.5%肉桂精油處理、0.5%殼聚糖+0.7%肉桂精油處理的防治效果分別為45.8%、92.5%、63.3%、61.3%，其中0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理的防治效果最佳。

? 肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜對(duì)番木瓜炭疽病病斑直徑的影響

從圖2可以看出，處理組的炭疽病病斑直徑整體顯著低于對(duì)照，其中0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理效果最佳，在貯藏9、12、15?d時(shí)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理的病斑直徑分別為4.1、9.0、14.0?mm，抑制率分別82.0%、73.6%、72.8%。

? 肉桂精油復(fù)合殼聚糖處理對(duì)番木瓜炭疽菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢影響

由表1可知，番木瓜炭疽菌在不同處理的平板上恒溫培養(yǎng)5?d后，0.025%肉桂精油、0.3%肉桂精油、0.3%肉桂精油+0.5%殼聚糖處理的菌落直徑和產(chǎn)孢量均為0，而0.5%殼聚糖單獨(dú)處理的菌落直徑為71.3?mm，產(chǎn)孢量為0.7×10個(gè)/皿，0.0125%肉桂精油處理的菌落直徑為60.6 mm，產(chǎn)孢量為0.6×10個(gè)/皿。說(shuō)明0.5%殼聚糖對(duì)離體炭疽菌也有一定抑制作用，但0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理能夠完全抑制炭疽菌的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢，其中起主要抑菌作用的是肉桂精油，肉桂精油濃度≥0.025%即可完全抑制炭疽菌的菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢。

? 肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜對(duì)番木瓜抗病相關(guān)物質(zhì)含量的影響

由圖3A可以看出，從整體上看，HO含量呈現(xiàn)先上升后下降再上升的趨勢(shì)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理的HO含量整體比對(duì)照的高，貯藏3?d時(shí)，處理與對(duì)照間無(wú)顯著性差異，到9?d時(shí)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理和對(duì)照具有顯著性差異，且都達(dá)到最大值，HO含量別為13.3?μmol/g和9.0?μmol/g。圖3B可以看出，在整個(gè)貯藏過(guò)程中，木質(zhì)素含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，在0、3、6?d時(shí)0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理和對(duì)照無(wú)顯著性差異，在貯藏9、12、15?d時(shí)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理明顯高于對(duì)照處理，且在6?d時(shí)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理迅速上升，到9 d時(shí)達(dá)到最大值94.7mg/g。圖3C表明，在整個(gè)貯藏過(guò)程中，總酚含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理的總酚含量整體比對(duì)照的高，且在6?d之前，處理與對(duì)照無(wú)顯著性差異，但在9、12、15?d時(shí)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理明顯高于對(duì)照，且在9?d時(shí)，處理與對(duì)照都達(dá)到最高值，總酚含量分別是16.8?mg/g和13.5?mg/g。

? 肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜對(duì)番木瓜抗病性相關(guān)酶活性的影響

從圖4A可以看出，在貯藏過(guò)程中，PAL酶活性整體呈現(xiàn)先上升后再下降的趨勢(shì)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理的PAL酶活性在整個(gè)過(guò)程中都高于對(duì)照。在貯藏3?d后，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理和對(duì)照都呈現(xiàn)較快的上升趨勢(shì)，直到9?d時(shí)達(dá)到高峰，PAL酶活性分別為19?U/g和15?U/g。圖4B可以看出，在整個(gè)貯藏過(guò)程中，PPO酶活性呈現(xiàn)先下降后上升再下降的趨勢(shì)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理的POD酶活性整體高于對(duì)照，且在3?d時(shí)，酶活性快速上升，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理的POD酶活性在9?d時(shí)達(dá)到最高值，比對(duì)照高79.2?U/g。圖4C可以看出，PPO酶活性整體呈現(xiàn)先上升后下降再上升趨勢(shì)，對(duì)照整體高于0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理，15?d時(shí)，達(dá)到最大值，對(duì)照和處理的PPO酶活性分別為128?U/g和98?U/g。圖4D可以看出，CHI酶活性整體呈現(xiàn)先上升后下降然后又上升的趨勢(shì)，在3?d時(shí)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理高于對(duì)照，但在6?d之后，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理與對(duì)照基本上無(wú)顯著差異。圖4E可以看出，在貯藏過(guò)程中，β-1，3-GA酶活性整體呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)，在貯藏3、6、9、12、15?d時(shí)，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理的β-1，3-GA酶活性整體比對(duì)照高，且9?d時(shí)均達(dá)到最高值，β-1，3-GA酶活性分別為65.5?U/g和50.7?U/g。

? 討論

不同濃度肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜處理對(duì)番木瓜炭疽病有一定的抑制效果，由研究結(jié)果可以看出，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理后的效果最佳，在貯藏9、12、15?d時(shí)的抑制率分別是82.0%、73.6%、72.8%。其中貯藏9?d時(shí)的抑制作用最為顯著，之后呈現(xiàn)緩慢下降的趨勢(shì)，原因可能是貯藏前期，肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜處理提高了番木瓜果實(shí)本身的抗性，增強(qiáng)了對(duì)炭疽菌的抑制作用，而后期一方面由于番木瓜自身后熟衰老加速，另一方面肉桂精油會(huì)揮發(fā)散失，最終導(dǎo)致復(fù)合處理的誘導(dǎo)抗病性減弱，抑制效果呈下降趨勢(shì)。

肉桂精油含有肉桂醛等主要成分，具有良好的抑菌效果，其抑菌機(jī)理主要是由于破壞細(xì)胞膜的完整性，阻礙菌體能量代謝過(guò)程，從而抑制孢子、菌絲正常生長(zhǎng)發(fā)育。如TZORTZAKIS等研究發(fā)現(xiàn)肉桂精油對(duì)球孢炭疽菌、草芽孢桿菌、

黑曲霉、灰葡萄球菌等表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗菌作用，且降低了產(chǎn)孢量。肉桂精油對(duì)藍(lán)莓鏈格孢霉、柑橘酸腐病菌、蘋果黑星病菌等多種水果病原真菌均表現(xiàn)出較好的抑制效果。本文的離體抑菌結(jié)果顯示，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理能夠完全抑制離體番木瓜炭疽菌的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢，其中起主要抑菌作用的是肉桂精油，0.025%的肉桂精油即可完全抑制炭疽菌的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢，這與前人研究結(jié)果相似。而本文在果實(shí)上的防治效果實(shí)驗(yàn)顯示，0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油的防治效果最好，貯藏15?d的防治效果為92.5%，復(fù)配液中精油的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于0.025%，對(duì)炭疽病的防治效果并未達(dá)到100%，其原因可能是離體實(shí)驗(yàn)是精油直接接觸到病原菌而表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用，而在果實(shí)上，病原菌潛伏在木瓜果皮中，精油不能直接接觸或者接觸的不充分從而降低了抑制效果。

果實(shí)采后誘導(dǎo)抗病性與PAL、POD、PPO、CHI和β-1，3-GA酶等抗病性相關(guān)酶活性以及HO、木質(zhì)素和總酚等抗病相關(guān)物質(zhì)密切相關(guān)。PAL在植物抗病過(guò)程中起關(guān)鍵作用，是植物苯丙烷代謝途徑的關(guān)鍵酶，能夠促進(jìn)木質(zhì)素和酚類物質(zhì)等抗病物質(zhì)的合成，與果實(shí)性狀及抗性關(guān)系密切;POD參與木質(zhì)素以及其他酚類的合成;PPO可以氧化酚類物質(zhì)，提高機(jī)體抗病能力;CHI的累積增強(qiáng)果實(shí)的抗病能力。肉桂精油和殼聚糖處理提高果蔬采后抗病性方面的研究已有很多報(bào)道，如蔣帥研究發(fā)現(xiàn)肉桂精油結(jié)合殼聚糖處理提高了蘋果抗病性與PAL、POD酶活性及總酚含量的增高有直接關(guān)系。梁清志等研究發(fā)現(xiàn)肉桂提取物處理芒果，提高了果實(shí)中HO含量及β-1，3-GA酶活性，從而增強(qiáng)了芒果的抗病特性。劉鋒等研究發(fā)現(xiàn)，殼聚糖處理提高了臍橙的抗病性與PAL、CHI、β-1，3-GA酶活性的提高有直接關(guān)系。周會(huì)玲等研究發(fā)現(xiàn)殼聚糖處理增強(qiáng)蘋果采后抗病性與PAL、POD酶活性、總酚、木質(zhì)素含量提高及PPO酶活性降低有關(guān)。本研究與前人研究相似之處是肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜可顯著提高番木瓜果實(shí)中的PAL、POD、β-1，3-GA酶活性以及木質(zhì)素、總酚、HO含量，而復(fù)合處理對(duì)CHI酶活性影響不顯著。本研究總酚含量的提高一方面可能是復(fù)合處理誘導(dǎo)果實(shí)合成更多的酚類物質(zhì)，也可能是PPO酶活性的降低，減少了對(duì)酚類物質(zhì)的降解，這與周會(huì)玲等在蘋果上的研究結(jié)果一致。所以，肉桂精油復(fù)合殼聚糖處理提高采后番木瓜果實(shí)抗病性的生理機(jī)制主要是由于提高了果實(shí)中PAL、POD、β-1，3-GA酶活性及抗病相關(guān)物質(zhì)的含量。

植物的抗病過(guò)程與體內(nèi)的活性氧自由基有不可分割的關(guān)系，而HO作為典型活性自由基，當(dāng)植物受到病原菌侵染時(shí)，植物體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生HO，從而抑制病原菌孢子萌發(fā)甚至殺死病原物，另外，HO充當(dāng)著植物反應(yīng)中的一個(gè)重要的信號(hào)物質(zhì)，作為第二信使參與植物的信號(hào)傳導(dǎo)，激活和調(diào)控植物體內(nèi)脅迫相關(guān)基因，并將信號(hào)最終放大為蛋白的翻譯表達(dá)，在植物體中即為產(chǎn)生各種抗病相關(guān)物質(zhì)。關(guān)于HO的探索，前人也做了許多研究，如李會(huì)佳等用BABA和BTH處理番茄的白粉病菌，發(fā)現(xiàn)番茄抵抗白粉病菌的侵染與HO含量增加有關(guān)。谷會(huì)等研究發(fā)現(xiàn)氯化鈣處理菠蘿誘導(dǎo)HO含量的增加，調(diào)控了病程相關(guān)蛋白，增強(qiáng)了果實(shí)的抗病能力。本研究也得出了類似的結(jié)果，肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜可顯著提高采后番木瓜果實(shí)中HO含量，并在第9天達(dá)到峰值，而處理后番木瓜果實(shí)抗病相關(guān)酶PAL、POD、β-1，3-GA酶活性及抗病相關(guān)物質(zhì)木質(zhì)素、總酚含量也是在第9天達(dá)到峰值，說(shuō)明可能是復(fù)合處理后，HO作為信號(hào)分子參與了番木瓜果實(shí)內(nèi)的抗病信號(hào)傳導(dǎo)。

總之，不同濃度的肉桂精油復(fù)合殼聚糖涂膜對(duì)番木瓜采后炭疽病有較好的防治效果，其中0.5%殼聚糖+0.3%肉桂精油處理的防治效果最好，貯藏15?d后仍達(dá)92.5%。防治相關(guān)機(jī)制主要有兩方面，一方面是由于肉桂精油抑制了番木瓜炭疽菌的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢，另一方面是復(fù)合處理提高了抗病相關(guān)物質(zhì)木質(zhì)素、總酚、HO的含量，提高了抗病相關(guān)酶PAL、POD、β-1，3-GA酶的活性，從而誘導(dǎo)番木瓜果實(shí)提高了抗病性。

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8. 收稿日期 2021-07-06;修回日期 2021-09-26

   基金項(xiàng)目 廣東省優(yōu)稀水果現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)項(xiàng)目（No. 2021KJ116）;中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)

   務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目（No. 1630062017031）。

   作者簡(jiǎn)介 黃文佳（1996—），女，碩士研究生，研究方向：熱帶果蔬采后生理與貯運(yùn)保鮮。*通信作者（Corresponding author）：

   杜麗清（DU Liqing），E-mail：duliqing927618@163.com;谷 會(huì)（GU Hui），E-mail：guhui0309@163.com。