微小RNA-21在眼科疾病發(fā)生和發(fā)展中的作用

孫吉君 綜述 阮慶國(guó) 史偉云 審校

1山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬眼科研究所 山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬眼科醫(yī)院(山東省眼科醫(yī)院)，濟(jì)南 250021；2山東省眼科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室-省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，青島 266071；3山東第一醫(yī)科大學(xué)眼科學(xué)院，濟(jì)南 250000

微小RNA(microRNA，miRNA)是長(zhǎng)度約為22個(gè)核苷酸的非編碼RNA，廣泛存在于真核物種中，在RNA沉默和基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中起作用[1]。每個(gè)miRNA都能夠調(diào)控幾個(gè),甚至幾百個(gè)靶基因的表達(dá)，并參與胚胎發(fā)育、免疫反應(yīng)、炎癥、腫瘤發(fā)生以及細(xì)胞生長(zhǎng)和增生等重要過程[2]。miR-21位于第17號(hào)染色體轉(zhuǎn)膜蛋白49基因的第10號(hào)內(nèi)含子上[3]，是較早發(fā)現(xiàn)的人類miRNA之一。研究表明miR-21作為抗凋亡基因在多種細(xì)胞類型中起作用[4-5]，目前已發(fā)現(xiàn)并證實(shí)的miR-21靶基因有幾十種，其中很多與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展有著密切關(guān)系，如程序性細(xì)胞死亡因子4(programmed cell death 4，PDCD4)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，染色體10上缺失的磷酸酶和張力蛋白同源物基因(phosphate and tension homology deleted on chromosome ten，PTEN)抑制細(xì)胞增生和遷移，B淋巴細(xì)胞瘤2基因(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)抑制細(xì)胞凋亡，組織金屬蛋白酶抑制因子3(tissue inhibitor of metalloproteinase 3，TIMP3)參與胞外信號(hào)引導(dǎo)細(xì)胞凋亡等[6]。miR-21通過調(diào)控上述靶基因，在細(xì)胞生長(zhǎng)、代謝等病理生理過程尤其是腫瘤細(xì)胞增生、分化、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移等過程中發(fā)揮重要作用。最近的研究表明，miR-21可促進(jìn)炎癥反應(yīng)，在免疫系統(tǒng)功能的調(diào)節(jié)中也起著關(guān)鍵作用[7]。雖然miR-21在非活化T細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞中維持低表達(dá)水平，但是這些細(xì)胞激活后miR-21的表達(dá)顯著上調(diào)[8-10]。Ruan等[11]發(fā)現(xiàn)miR-21通過負(fù)調(diào)控其靶基因腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8類似蛋白2的表達(dá),從而抑制活化T細(xì)胞的凋亡。miR-21可在角膜成纖維細(xì)胞、視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)細(xì)胞、視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(retinal microvascular endothelial cells，RMEC)等正常眼部細(xì)胞中表達(dá)；在疾病狀態(tài)下，miR-21可在角膜移植排斥的角膜組織、堿燒傷后的角膜組織、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma，RB)腫瘤組織、增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變患者的玻璃體液、青光眼患者的房水和受損的小梁網(wǎng)細(xì)胞中表達(dá)。進(jìn)一步研究表明，miR-21在眾多眼科疾病的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要的調(diào)控作用，并且靶向miR-21可能是預(yù)防或治療多種眼科疾病的潛在方法。本文就miR-21在眼科疾病中的研究進(jìn)展做一綜述。

1 miR-21與角膜疾病

1.1 miR-21與角膜移植排斥

我國(guó)角膜盲患者約400萬，角膜移植手術(shù)是這些盲人復(fù)明的重要手段，而術(shù)后免疫排斥反應(yīng)是導(dǎo)致手術(shù)失敗的最主要原因。Wang等[12]通過基因芯片分析發(fā)現(xiàn)，在異系小鼠角膜移植排斥組中miR-21表達(dá)較同系自體角膜移植組并無顯著改變；但Lu等[13]通過對(duì)大鼠移植角膜深度測(cè)序發(fā)現(xiàn)，miR-21-5P在同系角膜移植中較正常角膜升高，miR-21-3P在異系角膜移植中表達(dá)高于同系角膜移植。我們認(rèn)為結(jié)果不一致的原因主要是由于兩者所采用的分析方法及研究動(dòng)物種系不同，Wang等[12]采用miRCURY LNA陣列平臺(tái)分析數(shù)據(jù)，Lu等[13]采用深度測(cè)序的方法以每百萬轉(zhuǎn)錄數(shù)標(biāo)準(zhǔn)化各組miRNA的水平分析數(shù)據(jù)。可以看出Lu等[13]采用的檢測(cè)及數(shù)據(jù)分析方法靈敏度更高，但是以上2種研究均未行角膜組織細(xì)胞分離，未研究miR-21在角膜上皮、基質(zhì)、內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)是否發(fā)生改變。可見，miR-21在角膜移植排斥中是否存在表達(dá)水平的改變及其作用、機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

1.2 miR-21與角膜堿燒傷

眼化學(xué)性燒傷是由化學(xué)物品的溶液、粉塵或氣體接觸眼部所致，多發(fā)生在化工廠、實(shí)驗(yàn)室或施工場(chǎng)所，其中酸堿燒傷最為常見，是臨床常見、處理棘手的眼外傷之一。近期研究發(fā)現(xiàn)，miR-21可以調(diào)控角膜堿燒傷后新生血管的形成。Zhang等[14]在小鼠堿燒傷動(dòng)物模型中觀察到miR-21在損傷后的角膜組織中表達(dá)顯著增加，其表達(dá)與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(vascular endothelial growth factor-A，VEGF-A)和缺氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α)的mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)；并且，使用miR-21拮抗劑可以有效抑制角膜堿燒傷后VEGF-A和HIF-1α的表達(dá)；抑制miR-21可能通過Sprouty 2/4介導(dǎo)的磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶失活改善角膜新生血管的形成。由此可見，靶向miR-21可能可以用來預(yù)防或治療由角膜新生血管引起的視力喪失。

1.3 miR-21與顆粒狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良2型

顆粒狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良2型(granular corneal dystrophy type 2，GCD2)是由染色體5q31轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)誘導(dǎo)基因(TGFBI)中的點(diǎn)突變(R124H)引起的常染色體顯性遺傳病。研究發(fā)現(xiàn)miR-21與該病的發(fā)生相關(guān)。據(jù)報(bào)道m(xù)iR-21是參與TGFBI調(diào)節(jié)的主要miRNA，可通過使TGFBI mRNA去穩(wěn)定化負(fù)調(diào)節(jié)TGFBI蛋白水平，而TGFBI蛋白水平可影響GCD2表型[15]。雖然miRNA陣列實(shí)驗(yàn)顯示野生型和GCD2純合子角膜成纖維細(xì)胞之間的miR-21表達(dá)水平?jīng)]有顯著差異。但是，miR-21水平與角膜成纖維細(xì)胞中TGFBI的mRNA和蛋白水平呈正相關(guān)。TGF-β1誘導(dǎo)角膜成纖維細(xì)胞表達(dá)miR-21，miR-21可以通過靶向TGFBI的3'UTR下調(diào)TGFBI的基因表達(dá)。由此可見，miR-21和促進(jìn)TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)的藥物可能具有治療TGFBI相關(guān)角膜營(yíng)養(yǎng)不良的潛力。

2 miR-21與青光眼

青光眼是全世界第二位致盲性眼病，可導(dǎo)致永久性視神經(jīng)損害，表現(xiàn)為視神經(jīng)損傷、視野缺損、眼壓升高或正常。近期研究發(fā)現(xiàn)miR-21在青光眼發(fā)病過程中起到重要作用。通過收集青光眼患者房水，行細(xì)胞外miRNA分析得出miR-21是青光眼患者中顯著改變的miRNA，并且經(jīng)H2O2處理后的小梁網(wǎng)細(xì)胞外液可檢測(cè)到大量miR-21表達(dá)[16]。研究表明miR-21和Fas配體的表達(dá)之間存在負(fù)相關(guān)，F(xiàn)as配體是外在(即線粒體外)細(xì)胞凋亡途徑的主要激活因子。缺氧小膠質(zhì)細(xì)胞激活后，F(xiàn)as配體的過量產(chǎn)生誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡，而miR-21的異位表達(dá)部分可保護(hù)神經(jīng)元免受由缺氧激活的小膠質(zhì)細(xì)胞引起的細(xì)胞死亡[17]。實(shí)際上，miR-21可抑制細(xì)胞凋亡[18]；而在青光眼發(fā)生期間，小梁網(wǎng)細(xì)胞可以通過Fas/FasL途徑被刺激，進(jìn)而引起細(xì)胞凋亡[19]。此外，miR-21的表達(dá)由活性氧物質(zhì)誘導(dǎo)，并通過核因子κB和ERK 1/2信號(hào)通路抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化[20-21]。因此，來自受損小梁網(wǎng)的miR-21釋放可以被解釋為旨在限制小梁網(wǎng)中的凋亡細(xì)胞損失和減弱神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞活化的適應(yīng)性反應(yīng)，由此推測(cè)，miR-21的表達(dá)可延緩青光眼的進(jìn)展。

Tan等[22]發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性開角型青光眼(primary open-angle glaucoma，POAG)患者房水中miR-21-5P 的表達(dá)降低。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miR-21-5P可以通過促進(jìn)PTEN及內(nèi)皮型一氧化氮合酶信號(hào)通路增加Schlemm管內(nèi)皮細(xì)胞的通透性，促進(jìn)房水流出；通過靶向SMAD7和FGF18以促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)9降解細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)來降低眼壓；通過抑制ras同源物基因家族成員B(ras homolog gene family member B，RhoB)調(diào)節(jié)Schlemm管內(nèi)皮細(xì)胞的收縮性及抑制TIMP3調(diào)節(jié)ECM的更新促進(jìn)房水流出，從而治療POAG。

3 miR-21與眼底疾病

3.1 miR-21與增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變

增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferative vitreoretinopathy，PVR)是視網(wǎng)膜表面發(fā)生的無血管、纖維細(xì)胞性的膜增生，是引起視網(wǎng)膜再脫離的主要原因。研究表明玻璃體中miR-21水平升高與視網(wǎng)膜纖維化相關(guān)[24]，RPE細(xì)胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)在視網(wǎng)膜纖維化中起關(guān)鍵作用。Usui-Ouchi等[24]研究發(fā)現(xiàn)，miR-21在人RPE細(xì)胞中的表達(dá)是通過TGF-β誘導(dǎo)的，且在高葡萄糖培養(yǎng)條件下表達(dá)升高，表明miR-21表達(dá)與PVR的進(jìn)展呈正相關(guān)。更進(jìn)一步的增益和功能喪失研究結(jié)果表明，miR-21促進(jìn)人RPE細(xì)胞株ARPE-19細(xì)胞的增生和遷移，而不影響EMT相關(guān)的基因表達(dá)?？傊?，miR-21參與視網(wǎng)膜纖維化的發(fā)展，并且可能成為PVR的新標(biāo)記。

3.2 miR-21與糖尿病視網(wǎng)膜病變

糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy，DR)是指因高血糖導(dǎo)致眼組織的微血管發(fā)生病變，表現(xiàn)為毛細(xì)血管的周細(xì)胞壞死，隨后內(nèi)皮細(xì)胞變薄，內(nèi)屏障功能受損，血管內(nèi)的液體成分由管內(nèi)滲出到組織中，最終造成視網(wǎng)膜病變和功能障礙。我國(guó)糖尿病患者中DR患病率為44.0%～41.3%，是50歲以上患者主要的致盲原因。

miR-21因參與調(diào)節(jié)視網(wǎng)膜新生血管的生成與此類疾病的發(fā)展相關(guān)。除了高糖培養(yǎng)下上調(diào)VEGF表達(dá)以外，miR-21可以在缺血缺氧環(huán)境中下調(diào)色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor，PEDF)的表達(dá)。有研究報(bào)道m(xù)iR-21在缺血性視網(wǎng)膜病變的RPE細(xì)胞中表達(dá)增加，因?yàn)槿毖跽T導(dǎo)的miR-21表達(dá)有助于增加視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞中MMP2和MMP9活性，而缺血性視網(wǎng)膜中MMP2和MMP9活性的增加與PEDF蛋白水解降解有關(guān)。故而miR-21可以通過其阻斷過氧化物酶體增殖激活受體α(peroxisome proliferators-activated receptors，PPARα)表達(dá)的能力從而下調(diào)PEDF表達(dá)[25]。

由于視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)于血管生成是必需的，并且參與維持屏障選擇性和血管的張力。Guduric-Fuchs等[26]通過牛RMEC深度測(cè)序發(fā)現(xiàn)，與內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)的高表達(dá)miRNA中miR-21表達(dá)最多，miR-21抑制劑顯著降低了RMEC的增生、遷移和血管形成能力。由此可以推測(cè)miR-21參與調(diào)節(jié)視網(wǎng)膜新生血管的生成。

進(jìn)一步對(duì)缺氧條件下的人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞和氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變的研究表明，TIMP3是STAT3/miR-21途徑的下游靶標(biāo)，在氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變小鼠模型中，通過特異性反義阻斷miR-21可以增加TIMP3表達(dá)從而抑制視網(wǎng)膜新生血管形成[27]?？梢妋iR-21在缺血性視網(wǎng)膜病變中介導(dǎo)STAT3促血管生成作用，因此阻斷其表達(dá)可作為防治視網(wǎng)膜新生血管的潛在方法。

此外，通過觀察靜息、促血管及抗血管生成條件下的人RMEC發(fā)現(xiàn)，促血管條件較靜息條件miR-21表達(dá)下調(diào)[28]。Jiang等[29]研究發(fā)現(xiàn)DR患者外周血中miR-21含量與DR嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。經(jīng)高糖培養(yǎng)的ARPE-19細(xì)胞中可檢測(cè)出miR-21的表達(dá)顯著上調(diào)，同時(shí)腎素受體、VEGF和VEGFR2高表達(dá)，相關(guān)機(jī)制研究表明高葡萄糖誘導(dǎo)的miR-21通過ERK信號(hào)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)VEGF的表達(dá)[30]。過表達(dá)miR-21可能通過抑制PTEN的表達(dá)激活PI3K/Akt/VEGF信號(hào)通路，刺激DR大鼠的視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)新生血管生成[31]，這些發(fā)現(xiàn)對(duì)靶向miR-21在DR中調(diào)控新生血管生成具有重要意義。

miR-21除了參與DR新生血管的形成，還可以通過調(diào)控視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡影響DR的發(fā)生和發(fā)展。人RMEC體外研究表明高糖可以增加miR-21-5p、VEGF、VEGFR2的表達(dá)和細(xì)胞增生活性；抑制miR-21-5p可減少高葡萄糖誘導(dǎo)的人RMEC增生、遷移及血管形成，這些作用可能部分依賴于PI3K/AKT和ERK通路通過其靶蛋白maspin的調(diào)節(jié)[32]。此外，研究鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型發(fā)現(xiàn)，miR-21通過下調(diào)PDCD4可以促進(jìn)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡，抑制miR-21可使視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞存活率顯著增加，凋亡率顯著降低[33]。

同樣，Chen等[34]發(fā)現(xiàn)miR-21過表達(dá)、db/db小鼠(2型糖尿病模型)視網(wǎng)膜中PPARα水平降低，這種改變?cè)谧貦八崽幚淼囊暰W(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞中同樣存在，miR-21通過抑制PPARα的mRNA翻譯來靶向PPARα。敲除miR-21可阻止PPARa減少，緩解微血管損傷，改善炎癥，并減少db/db小鼠視網(wǎng)膜中的細(xì)胞凋亡。進(jìn)一步研究表明，玻璃體腔注射miR-21抑制劑可減少PPARα下調(diào)，改善db/db糖尿病小鼠的視網(wǎng)膜炎。因此，DR患者外周血中miR-21的水平可以評(píng)估DR的嚴(yán)重程度，抑制miR-21可以作為DR的潛在治療方法。

4 miR-21與視神經(jīng)損傷

視神經(jīng)損傷是不可逆視力損害的主要原因，甚至可致盲。星形膠質(zhì)細(xì)胞過度活化不利于視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cell，RGC)的修復(fù)和恢復(fù)。對(duì)大鼠視神經(jīng)損傷模型的研究表明，抑制miR-21減弱了星形膠質(zhì)細(xì)胞的過度活化和膠質(zhì)瘢痕形成，從而通過調(diào)節(jié)表皮生長(zhǎng)因子受體途徑促進(jìn)軸突再生。抑制miR-21不僅可以增強(qiáng)軸突再生，還能促進(jìn)視神經(jīng)損傷大鼠模型中閃光視覺誘發(fā)電位的功能恢復(fù)[35]。同樣，Li等[36]的研究揭示了抑制miR-21可通過調(diào)節(jié)大鼠視神經(jīng)損傷后Müller膠質(zhì)細(xì)胞增生，促進(jìn)RGC存活、視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層增厚和RGC功能的恢復(fù)。因此，抑制miR-21可用于視神經(jīng)損傷的治療。

但是，在氧葡萄糖剝奪和黃芪甲苷處理的RGC細(xì)胞株RGC-5中miR-21的表達(dá)顯著上調(diào)，上調(diào)的miR-21激活PTEN-PI3K/AKT和Wnt/β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)途徑，減少RGC-5細(xì)胞損傷，提示黃芪甲苷或許可以通過高表達(dá)miR-21來治療視神經(jīng)損傷[37]。miR-21調(diào)控RGC存活不一致的原因可能有以下2個(gè)：(1)所研究的細(xì)胞種類不同，一類是視神經(jīng)損傷模型的體內(nèi)研究，另一類是細(xì)胞株的體外研究；(2)刺激的條件不一樣，一類是誘導(dǎo)的視神經(jīng)損傷模型，細(xì)胞處在復(fù)雜的炎癥微環(huán)境中；另一類是氧葡萄糖剝奪下使用黃芪甲苷單一因素處理細(xì)胞。而且目前對(duì)于RGC-5細(xì)胞株存在爭(zhēng)議，部分研究者認(rèn)為此細(xì)胞株是小鼠的光受體細(xì)胞系，不能代表RGC。可見，關(guān)于miR-21對(duì)RGC存活的調(diào)控需要進(jìn)一步系統(tǒng)的探討，為miR-21用于人視神經(jīng)損傷性疾病的治療提供理論依據(jù)。

5 miR-21與眼部腫瘤

5.1 miR-21與RB

RB是由2個(gè)等位基因(Rb1基因)上的突變引起的兒童眼部疾病。Rb1和其他相關(guān)基因可以通過miRNA與其靶點(diǎn)互補(bǔ)配對(duì)來調(diào)節(jié)。miR-21具有靶向幾種腫瘤抑制基因(包括PDCD4)的致癌潛力，并調(diào)節(jié)腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移[38]。

已有研究發(fā)現(xiàn)，RB組織樣本及RB細(xì)胞系HXO-RB44細(xì)胞中miR-21的水平高于視網(wǎng)膜正常組織中的表達(dá)，抗miR-21在體外通過下調(diào)的磷酸化信號(hào)傳導(dǎo)途徑導(dǎo)致RB細(xì)胞增生、遷移和集落形成顯著抑制[39]。在RB細(xì)胞系Weri-Rb-1細(xì)胞中，miR-21抑制劑可以抑制腫瘤細(xì)胞活力，通過調(diào)節(jié)PDCD4、Bax和Bcl-2的水平來增加腫瘤細(xì)胞凋亡率[40]。同時(shí)，通過抑制MMP2和MMP9的蛋白水平抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲，并顯著影響PTEN、PI3K和p-AKT的表達(dá)，表明miR-21抑制劑通過PTEN/PI3K/AKT信號(hào)途徑抑制腫瘤細(xì)胞增生、遷移和侵襲?？梢?，靶向miR-21能夠通過多種途徑抑制RB進(jìn)展，可以作為RB的治療靶點(diǎn)。

5.2 miR-21與葡萄膜腫瘤

葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma，UM)是成人常見的眼內(nèi)惡性腫瘤，起源于虹膜、睫狀體或脈絡(luò)膜中的黑色素細(xì)胞。近期研究發(fā)現(xiàn)，在UM患者血清及瘤體組織中miR-21-5p顯著上調(diào)，并且其可能通過抑制P53基因并增加LIM和SH3蛋白1的表達(dá)來促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增生及轉(zhuǎn)移[41-42]。

6 miR-21與葡萄膜炎

葡萄膜炎是虹膜、睫狀體及脈絡(luò)膜組織炎癥的總稱，廣義上還包括葡萄膜、視網(wǎng)膜、視網(wǎng)膜血管、玻璃體的炎癥，是主要的致盲原因之一。研究發(fā)現(xiàn)miR-21與葡萄膜炎的發(fā)生相關(guān)。Ishida等[43]在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis，EAU)小鼠模型中通過miRCURY LNA陣列平臺(tái)發(fā)現(xiàn)miR-21表達(dá)顯著上調(diào)；實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示，去除角膜及晶狀體的眼組織細(xì)胞中，miR-21于建模后第7天開始上調(diào)，至建模第21天表達(dá)水平最高，至建模第28天仍維持較高水平。Hsu等[44]在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性前葡萄膜炎大鼠模型中發(fā)現(xiàn)miR-21在虹膜睫狀體中表達(dá)，其表達(dá)水平至建模第10天先升高而后下降，至建模第25天顯著降低；Watanabe等[45]在EAU大鼠模型中發(fā)現(xiàn)建模第14天及第21天miR-21在視網(wǎng)膜中表達(dá)升高。同期，Rossi等[46]發(fā)現(xiàn)在內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠葡萄膜炎模型中，使用消退素1聯(lián)合脂多糖玻璃體腔注射較單純脂多糖玻璃體腔注射誘導(dǎo)的大鼠模型B和T淋巴細(xì)胞減少，miR-21表達(dá)上調(diào)。此外，Choi等[47]發(fā)現(xiàn)miR-21在白塞病患者外周血中表達(dá)上調(diào)，且在單純皰疹病毒誘導(dǎo)的白塞病小鼠模型中，miR-21在淋巴結(jié)中表達(dá)上調(diào)。實(shí)驗(yàn)中使用藥物降低miR-21表達(dá)水平可以改善白塞病小鼠的癥狀，抑制miR-21不僅導(dǎo)致血清IL-17和IL-6水平下調(diào)，PDCD4、RhoB、程序性死亡受體1、IL-12p35和Toll樣受體4的表達(dá)水平也受調(diào)節(jié)而發(fā)生變化，但是葡萄膜炎發(fā)病情況及變化此研究并未見報(bào)道。此外，研究發(fā)現(xiàn)，miR-21可促進(jìn)Th17細(xì)胞分化，在免疫調(diào)控中發(fā)揮重要作用。Th17細(xì)胞分化在EAU的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用[48]，并且miR-21在疾病中表達(dá)顯著上調(diào)，但對(duì)于miR-21是否通過促進(jìn)Th17細(xì)胞分化調(diào)控EAU的發(fā)生和發(fā)展尚不明確，目前我們正在利用miR-21缺失的小鼠進(jìn)行相關(guān)研究。

7 miR-21與其他眼科疾病

近年來，外泌體作為信號(hào)分子調(diào)節(jié)細(xì)胞狀態(tài)與功能成為研究熱點(diǎn)。Morris等[49]研究發(fā)現(xiàn)，RPE細(xì)胞外泌體介導(dǎo)的miR-21轉(zhuǎn)移入小膠質(zhì)細(xì)胞影響了p53通路下游基因的表達(dá)，有助于調(diào)節(jié)衰老視網(wǎng)膜中的小膠質(zhì)細(xì)胞功能，這一信號(hào)傳遞方式可能是RPE細(xì)胞衰老過程中與慢性炎癥相關(guān)的信號(hào)傳遞機(jī)制，可見靶向miR-21有望治療年齡相關(guān)性黃斑變性。

Deng等[50]近期研究發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell，MSC)外泌體中的miR-21通過靶向PDCD4對(duì)N-甲基-N-亞硝基脲誘導(dǎo)的感光細(xì)胞凋亡和視網(wǎng)膜功能障礙有治療作用，可以治療視網(wǎng)膜變性[50]。

另外，Zhang等[51]研究發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)miR-21或抑制Sprouty2降低了細(xì)胞角蛋白(cytokeratin，CK)-3和CK-12的水平并促進(jìn)了角膜上皮細(xì)胞的EMT，從而促進(jìn)角膜上皮損傷修復(fù)；Liu等[52]進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，人臍帶MSC衍生的小細(xì)胞外囊泡可以通過轉(zhuǎn)移miR-21抑制PTEN來促進(jìn)角膜上皮傷口的恢復(fù)，提示miR-21可成為一種新的角膜傷口修復(fù)治療劑。

雖然miR-21眼部相關(guān)研究近年來已取得一定成果，然而仍有很多問題尚未解決，譬如miR-21與許多眼科疾病具有一定的相關(guān)性，其可否用于這些疾病的早期診斷仍需進(jìn)一步探討；又如目前的許多研究都局限于細(xì)胞株，miR-21在原代細(xì)胞、眼科疾病模型的炎癥微環(huán)境下是否存在不同的作用仍需進(jìn)一步研究；再如除RB和葡萄膜腫瘤外，miR-21是否參與其他眼科腫瘤的發(fā)生和發(fā)展等。相信隨著對(duì)miR-21研究的不斷深入，將為以后靶向miR-21治療眼科相關(guān)疾病提供更詳盡的理論依據(jù)。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突