杜仲提取物多次給藥后在正常大鼠和SHR 模型體內(nèi)的藥動學(xué)比較研究

張 青李夢婷李 梅鮑紅松黃 勇鄭 林李月婷陳穎鞏仔鵬*

(1.貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省藥物制劑重點實驗室民族藥與中藥開發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心藥學(xué)院, 貴陽 550004；2.中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所,北京 100700)

杜仲為被子門杜仲科(Eucommiaceae)杜仲屬(Eucommia)植物杜仲(Eucommia ulmoidesOlive.)的干燥樹皮,其在我國已擁有悠久的用藥歷史。 據(jù)報道,杜仲的主要活性成分包括木脂素類、環(huán)烯醚萜類、苯丙素類和黃酮類,并且木脂素類中的松脂醇二葡萄糖苷,環(huán)烯醚萜類中的京尼平苷酸、京尼平苷和桃葉珊瑚苷,苯丙素類中的綠原酸等成分都具有較好的血管舒張作用[1-2]。 各成分降壓機制主要與維持NO 系統(tǒng)的平衡,進而保護內(nèi)皮細(xì)胞功能、拮抗Ca2+通道、抑制腎素-血管緊張素-醛固酮以及作用血管平滑肌等有關(guān)[3]。 目前關(guān)于杜仲活性成分的藥代動力學(xué)研究依然很欠缺,本研究基于其降壓活性成分經(jīng)多次給藥后在正常和自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHRs)模型體內(nèi)的蓄積情況進行考察,以期為杜仲藥材的臨床長期合理安全使用提供一定的參考依據(jù)。

藥物的組織分布常用于評價藥物的靶向性和判斷藥物在體內(nèi)蓄積的有無以及程度,其主要受到藥物性質(zhì)和機體狀況兩個因素的影響[4],這些因素將導(dǎo)致藥物的組織分布差異,最終影響到藥物療效。 對于需多次長期用藥的慢性疾病,藥物的蓄積和毒副作用等安全性問題不容小覷,因此藥物蓄積的研究顯得至關(guān)重要。

課題組前期通過調(diào)研發(fā)現(xiàn)杜仲潛在的降壓活性成分主要包括松脂醇二葡萄糖苷(PDG)、松脂醇單葡萄糖苷(PG)、京尼平苷酸(GA)、原兒茶酸(PCA)、綠原酸(CA)、新綠原酸(NCA)、隱綠原酸(CCA)等。 因此本實驗選用Wistar 大鼠與SHR 模型,通過多次灌胃給予杜仲提取物后研究上述7 種降壓活性成分在生理和自發(fā)性高血壓病理狀態(tài)下大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)行為,通過比較京尼平苷酸等7個代表成分在正常大鼠和SHR 模型體內(nèi)的藥動學(xué)和蓄積差異,初步探究自發(fā)性高血壓對杜仲提取物藥動學(xué)和蓄積情況的影響,以期為指導(dǎo)杜仲在臨床上對于治療原發(fā)性高血壓長期合理安全用藥的方案設(shè)計提供一定的參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

SPF 級健康 Wistar 大鼠與 SHR 模型各 6 只,雄性,周齡7～9 周,體重(275±25)g,由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供[SCXK(京)2016-0006],飼養(yǎng)于貴州醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心[SYXK(黔)2018-001]。 實驗經(jīng)貴州醫(yī)科大學(xué)實驗動物倫理委員會批準(zhǔn)(1702077),遵循3R 原則。

飼養(yǎng)條件:購入的大鼠進入動物房后,按每籠6只分裝飼養(yǎng)管理,以標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)并每天更換新鮮純凈水。 動物房光照充足,通風(fēng)良好,室溫18℃～25℃,相對濕度50%～70%,動物飼養(yǎng)室按常規(guī)要求定期消毒。

1.2 主要試劑與儀器

杜仲藥材購于貴陽市藥材公司,由貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥用植物與生藥學(xué)教研室劉春花副教授鑒定為杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoidesOliv.的干燥樹皮。 松脂醇二葡萄糖苷(PDG)、京尼平苷酸(GA)、綠原酸(CA)、原兒茶酸(PCA)、葛根素對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號分別為111537-201204、 111828-201403、 110753-201415、 110809-201205、 110752-201514, 純 度 分 別 ≥ 90.9%、 ≥94.6%、≥96.2%、≥99.9%、≥95.5%)；新綠原酸(NCA)、隱綠原酸(CCA)對照品(四川維克奇生物科技有限公司,批號分別為160318、160304,純度均≥98%)；松脂醇單葡萄糖苷(PG)對照品(上海源葉生物科技有限公司,批號P09J7F8760,純度≥98%)；甲醇(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司,色譜純)；乙腈(德國Merck 公司,色譜純)；甲酸(北京迪科馬科技有限公司,批號為6040672)；實驗用水為屈臣氏純凈水。

UPLC Xevo TQ-S 型超高效液相三重四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀(ACQUITY UPLC I-Class 系統(tǒng),MassLynx質(zhì)譜工作站,美國沃特世公司)；低溫高速離心機(Allegra X-30 R,美國貝克曼公司)；大鼠無創(chuàng)血壓計(美國)；超聲波清洗器(KQ-300DE,昆山市超聲儀器有限公司)；氮氣吹干儀裝置(MTN-2800D,天津奧特塞恩斯儀器有限公司)；多管渦旋振蕩器(VX-III,北京踏錦科技有限公司)；萬分之一電子天平(EL204,上海METTLER TOLEDO 公司),玻璃勻漿器(上海壘固儀器有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 大鼠血壓的測定

實驗前對所購買的SHR 模型進行血壓測定,選取合格的大鼠進行本部分的實驗(大鼠的3 次收縮壓值的平均值≥150 mmHg 為合格標(biāo)準(zhǔn))。 測壓方法:測壓前將隨機選取的SHR 模型置于37℃預(yù)熱箱中10 min,之后用MRBP 無創(chuàng)血壓計測定大鼠尾動脈收縮壓(SBP),記錄大鼠安靜狀態(tài)下較穩(wěn)定的3次結(jié)果,取其平均值,即得。

1.3.2 多次給藥的藥代動力學(xué)和蓄積實驗研究

健康Wistar 大鼠和合格SHR 模型各6 只,每天灌胃給予杜仲提取物溶液1 次,給藥劑量為5.4 g/kg,連續(xù)灌胃7 d,第6 天晚上分別進行頸靜脈插管手術(shù),待大鼠恢復(fù)12 h 以上后,對其灌胃給予最后1 次杜仲提取物溶液,給藥劑量為5.4 g/kg,于給藥前和給藥后 5 min、15 min、30 min、45 min、1 h、1.5 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h、和24 h 從頸靜脈插管處采血約250 μL 放入肝素化的EP 管中,同時補充250 μL 肝素溶液(1 mg/mL)。 將獲得的全血離心(4500 r/min,5 min),取血漿 100 μL 于-80℃冰箱中保存以備分析。 于末次采血后迅速取出心、肝、脾、肺、腎、腦、胃、小腸、肌肉及睪丸組織,置于冰生理鹽水中清洗干凈,并用濾紙將其沾干。 對各組織進行稱重、裝袋后置于冰箱(-80℃)保存?zhèn)溆谩?采用UPLC-MS/MS 方法測定7 個代表成分在大鼠主要臟器中的含量以及在血漿中的藥動學(xué)參數(shù),并就此分析模型組和正常組之間的差異。 組織和血漿的前處理以及測定方法詳見課題組前期發(fā)表論文[5-6]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用WinNonLin 6.4(Phoenix,美國Pharsight 公司)數(shù)據(jù)處理軟件中的非房室模型(NCA)分析方法擬合各藥動學(xué)參數(shù),AUC、MRT 等參數(shù)選用統(tǒng)計矩方法進行計算。 采用SPSS 17.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析,實驗結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(ˉx±s)表示,用獨立樣本t檢驗進行組間比較,P＜0.05 認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 多次給藥的藥代動力學(xué)實驗結(jié)果

正常大鼠和SHR 模型多次灌胃給予杜仲提取物后各時間點血藥濃度,平均血藥濃度-時間曲線見圖1。 采用 WinNonLin 6.4 軟件計算藥動學(xué)參數(shù),并對藥物在大鼠體內(nèi)的動力學(xué)過程進行非房室模型擬合,相關(guān)藥動學(xué)參數(shù)見表1 ～表4。 對杜仲提取物中GA 等7 種成分在SHR 模型和正常大鼠血漿中的藥動學(xué)參數(shù)包括生物半衰期(T1/2)、血藥濃度達峰時間(Tmax)、達峰濃度(Cmax)、藥時曲線下面積(AUC)、表觀分布容積(Vd/F)、清除率(CL/F)以及平均滯留時間(MRT)進行考察。 結(jié)果表明,GA 在 SHR 模型組中的 T1/2、Vd/F、CL/F、MRT0-∞明 顯 高 于 正 常 組,而 Tmax、AUC0-t以 及AUC0-∞顯著低于正常組；PCA 在 SHR 模型組中的T1/2和Vd/F 相較于正常組顯著增高；與正常組相比,CA 的 T1/2、Vd/F 和 MRT0-∞在 SHR 模型組中表現(xiàn)更高,而AUC0-t則明顯降低；在SHR 模型組中,PDG 的 T1/2、Vd/F 和 MRT0-∞顯著低于正常組；PG在SHR 模型組中的T1/2明顯低于正常組；CCA 和NCA 在兩組中的各藥動學(xué)參數(shù)無明顯差異。 在0～24 h 內(nèi),自發(fā)性高血壓病理狀態(tài)降低了GA 的入血濃度,其余 6 種成分中 CA、PCA、PDG、PG 在SHR 模型中的C-t 曲線變化趨勢與正常組相比基本一致,而NCA 和CCA 在兩組之間的C-t 曲線則有所差異。 GA 在SHR 組內(nèi)整體的藥動學(xué)參數(shù)與正常組相比差異最為明顯。

表1 多次灌胃給藥后PDG 和GA 在正常及模型大鼠體內(nèi)的PK 參數(shù)(,n=6)Table 1 Pharmacokinetic parameters of PDG and GA in normal and SHR model after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

表1 多次灌胃給藥后PDG 和GA 在正常及模型大鼠體內(nèi)的PK 參數(shù)(,n=6)Table 1 Pharmacokinetic parameters of PDG and GA in normal and SHR model after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

注:與正常組相比,*P＜0.05,**P＜0.01,***P＜0.001。Note. Compared with the control group,*P＜0.05,**P＜0.01,***P＜0.001.

藥動參數(shù)Pharmacokinetic parameters京尼平苷酸GA正常組Control松脂醇二葡萄糖苷PDG模型組Model正常組Control模型組Model T1/2(h) 37.15±15.33 9.65±3.49* 7.41±0.98 16.27±7.45*Tmax(h) 0.15±0.09 0.12±0.07 5.65±3.48 0.21±0.09***Cmax(μg/L) 666.07±185.26 862.02±183.39 4852±1343.82 4703.71±1282.64 AUC0-t((h·μg)/L) 735.15±216.65 800.46±230.71 66450.43±12635.04 33284.00±16490.31**AUC0-∞((h·μg)/L) 1346.46±386.24 970.15±174.63 77155.00±14796.21 37851.00±12383.17**Vd/F (L/kg) 1243.20±356.00 490.41±130.56*** 9.12±2.05 37.78±13.84*CL/F (L/(h·kg)) 28.36±13.24 34.51±6.13 0.85±0.15 1.67±0.17***MRT0-t(h) 6.42±2.20 5.48±1.09 9.37±0.65 9.72±1.65 MRT0-∞(h) 41.52±15.78 12.13±7.03** 12.89±1.65 25.43±5.17*

表2 多次灌胃給藥后PG 和PCA 在正常及模型大鼠體內(nèi)的PK 參數(shù)(,n=6)Table 2 Pharmacokinetic parameters of PG and PCA in normal and SHR model after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

表2 多次灌胃給藥后PG 和PCA 在正常及模型大鼠體內(nèi)的PK 參數(shù)(,n=6)Table 2 Pharmacokinetic parameters of PG and PCA in normal and SHR model after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

注:與正常組相比,*P＜0.05。Note. Compared with the control group,*P＜0.05.

藥動參數(shù)Pharmacokinetic parameters原兒茶酸PCA正常組Control松脂醇單葡萄糖苷PG模型組Model正常組Control模型組Model T1/2(h) 30.53±10.96 16.64±5.55* 12.09±2.33 24.62±11.70*Tmax(h) 0.12±0.07 0.12±0.07 0.15±0.09 0.15±0.09 Cmax(μg/L) 134.44±76.79 150.99±37.12 508.75±330.99 543.04±389.56 AUC0-t((h·μg)/L) 226.86±73.12 202.58±29.15 1066.52±431.19 1096.68±422.56 AUC0-∞((h·μg)/L) 494.62±148.33 347.68±27.21 1381.12±303.59 1690.24±740.91 Vd/F (L/kg) 2209.39±877.16 1903.07±552.52 56.86±12.96 79.65±17.88*CL/F (L/(h·kg)) 67.47±28.36 80.20±6.36 3.18±0.72 2.88±1.15 MRT0-t(h) 8.88±1.82 8.93±0.87 7.61±1.60 7.38±1.89 MRT0-∞(h) 24.50±7.58 25.58±5.97 17.32±5.75 27.93±10.44

表3 多次灌胃給藥后CA 和CCA 在正常及模型大鼠體內(nèi)的PK 參數(shù)(,n=6)Table 3 Pharmacokinetic parameters of CA and CCA in normal and SHR model after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

表3 多次灌胃給藥后CA 和CCA 在正常及模型大鼠體內(nèi)的PK 參數(shù)(,n=6)Table 3 Pharmacokinetic parameters of CA and CCA in normal and SHR model after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

注:與正常組相比,*P＜0.05。Note. Compared with the control group,*P＜0.05.

藥動參數(shù)Pharmacokinetic parameters隱綠原酸CCA正常組Control綠原酸CA模型組Model正常組Control模型組Model T1/2(h) 12.33±3.23 23.80±16.42* 55.78±18.71 36.42±15.18 Tmax(h) 0.17±0.09 0.12±0.08 0.17±0.09 0.12±0.07 Cmax (μg/L) 850.88±291.03 638.01±125.39 239.05±104.91 244.82±96.69 AUC0-t((h·μg)/L) 1206.93±381.46 772.37±90.93* 512.45±118.75 480.14±98.37 AUC0-∞((h·μg)/L) 1742.18±373.00 1634.97±464.82 1694.51±515.95 1295.87±375.05 Vd/F (L/kg) 62.54±23.61 112.84±24.57* 201.81±84.95 157.50±80.29 CL/F (L/(h·kg)) 3.42±0.51 3.81±1.03 3.04±1.32 4.40±1.93 MRT0-t(h) 7.84±2.05 7.64±0.34 9.28±1.36 9.73±1.76 MRT0-∞(h) 18.82±7.25 34.15±10.53* 78.29±21.39 54.35±15.03

表4 多次灌胃給藥后NCA 在正常及模型大鼠體內(nèi)的PK 參數(shù)(,n=6)Table 4 Pharmacokinetic parameters of NCA in normal and SHR model after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

表4 多次灌胃給藥后NCA 在正常及模型大鼠體內(nèi)的PK 參數(shù)(,n=6)Table 4 Pharmacokinetic parameters of NCA in normal and SHR model after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

藥動參數(shù)Pharmacokinetic parameters新綠原酸NCA正常組Control模型組Model T1/2(h) 50.47±18.16 38.40±10.96 Tmax(h) 0.12±0.08 0.12±0.07 Cmax(μg/L) 155.71±40.10 119.52±54.30 AUC0-t((h·μ g)/L) 483.00±31.38 448.82±42.28 AUC0-∞((h·μg)/L) 1645.22±377.43 1377.90±622.31 Vd/F (L/kg) 99.13±16.07 86.01±20.80 CL/F (L/(h·kg)) 1.47±0.43 1.89±0.66 MRT0-t(h) 10.12±0.85 10.68±0.96 MRT0-∞(h) 71.78±24.35 57.74±15.65

圖1 大鼠多次灌胃給予杜仲提取物后GA、PG、CA、PCA、PDG、NCA、CCA 的C-t 藥時曲線(,n=6)Figure 1 Concentration-time profiles of GA,PG,CA,PCA,PDG,NCA,CCA in normal and SHR model after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

2.2 杜仲提取物多次給藥后其7 個活性成分在正常大鼠和SHR 模型體內(nèi)的蓄積實驗結(jié)果

大鼠灌胃給予杜仲提取物溶液24 h 后,GA 等7種被測成分在正常大鼠和SHR 體內(nèi)各組織中的含量見表5～表7。

表5 多次給予杜仲提取物后CA、NCA、CCA 在正常大鼠和SHR 模型體內(nèi)各組織的含量(,n=6)Table 5 Content of CA, NCA, CCA in rat different tissues homogenate of normal and SHR model at 24 h after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

表5 多次給予杜仲提取物后CA、NCA、CCA 在正常大鼠和SHR 模型體內(nèi)各組織的含量(,n=6)Table 5 Content of CA, NCA, CCA in rat different tissues homogenate of normal and SHR model at 24 h after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

注:與正常組相比,*P＜0.05,**P＜0.01。Note. Compared with the control group,*P＜0.05,**P＜0.01.

組織Tissue新綠原酸NCA 綠原酸CA 隱綠原酸CCA正常Control SHR 模型Model正常Control SHR 模型Model正常Control SHR 模型Model心 Heart 10.24±2.20 8.94±2.10 4.20±1.85 3.78±0.57 39.90±10.88 43.43±12.23肝 Liver 8.29±2.48 7.87±1.98 3.28±0.64 3.38±0.90 42.56±13.54 29.41±1.92脾 Spleen 2.07±0.46 1.83±0.42 1.51±0.17 1.48±0.10 1.96±0.52 1.29±0.39肺 Lung 2.76±0.88 3.47±0.94 3.65±0.19 4.08±0.75 4.79±0.27 4.90±0.40腎 Kidney 1.86±0.47 2.81±0.43* 1.18±0.36 0.79±0.10* 1.71±0.54 1.82±0.41胃 Stomach 8.04±1.67 9.52±2.52 12.78±0.83 12.98±1.43 5.12±1.16 5.05±0.28腦 Brain 2.18±0.66 0.92±0.20* 0.93±0.27 0.63±0.20 1.35±0.27 1.55±0.34腸 Intestine 5.74±0.96 10.14±3.30 3.04±0.88 5.83±1.07** 8.57±2.73 7.67±0.99肌肉 Muscle 1.49±0.44 1.13±0.23 1.04±0.13 0.97±0.08 0.83±0.10 1.00±0.12睪丸 Testis 1.44±0.30 1.30±0.20 1.03±0.07 0.91±0.06* 0.92±0.14 1.09±0.24

表6 多次給予杜仲提取物后PCA、GA 在正常大鼠和SHR 模型體內(nèi)各組織中的含量(,n=6)Table 6 Content of PCA, GA in rat different tissues homogenate of normal and SHR model at 24 h after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

表6 多次給予杜仲提取物后PCA、GA 在正常大鼠和SHR 模型體內(nèi)各組織中的含量(,n=6)Table 6 Content of PCA, GA in rat different tissues homogenate of normal and SHR model at 24 h after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

注:與正常組相比,*P＜0.05,**P＜0.01,***P＜0.001。Note. Compared with the control group,*P＜0.05,**P＜0.01,***P＜0.001.

組織Tissue京尼平苷酸GA正常Control原兒茶酸PCA SHR 模型Model正常Control SHR 模型Model心 Heart 2.51±0.73 2.41±0.75 166.27±17.36 151.78±46.22肝 Liver 4.49±1.75 7.69±1.13* 165.60±19.16 147.45±15.58脾 Spleen 1.90±0.72 2.34±0.37 14.70±1.28 14.53±2.17肺 Lung 5.47±1.19 10.29±2.75* 183.99±33.66 206.83±58.15腎 Kidney 9.62±3.13 6.52±2.03 440.89±70.64 118.70±27.50***胃 Stomach 146.22±20.12 646.99±124.07*** 211.08±71.41 1160.87±132.01***腦 Brain 1.46±0.22 2.88±0.37** 2.93±0.87 2.19±0.38腸 Intestine 161.81±29.59 172.60±42.62 1514.85±548.69 1157.89±41.46肌肉 Muscle 1.41±0.33 1.20±0.16 14.42±2.80 3.36±0.95**睪丸 Testis 1.50±0.47 2.34±0.47* 11.75±2.58 7.07±1.49**

表7 多次給予杜仲提取物后PG、PDG 在正常大鼠和SHR 模型體內(nèi)各組織中的含量(,n=6)Table 7 Content of PG,PDG in rat different tissues homogenate of normal and SHR model at 24 h after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

表7 多次給予杜仲提取物后PG、PDG 在正常大鼠和SHR 模型體內(nèi)各組織中的含量(,n=6)Table 7 Content of PG,PDG in rat different tissues homogenate of normal and SHR model at 24 h after multiple intragastrically administered Eucommia ulmoides extract

注:ND:未檢測到。 與正常組相比,*P＜0.05,**P＜0.01,***P＜0.001。Note. ND,Not detected. Compared with the control group,*P＜0.05,**P＜0.01,***P＜0.001.

組織Tissue松脂醇單葡萄糖苷PG 松脂醇二葡萄糖苷PDG正常Control SHR 模型Model正常Control SHR 模型Model心 Heart 2.39±0.61 5.46±1.65** 104.92±10.54 114.57±31.93肝 Liver ND ND 116.46±7.39 111.61±4.23脾 Spleen 1.42±0.33 2.86±0.74** 6.06±2.48 9.81±2.97肺 Lung 13.32±3.13 38.17±8.83* 90.60±7.85 98.05±14.39腎 Kidney 0.16±0.02 0.17±0.04 ND ND胃 Stomach 228.00±72.67 1459.74±218.79*** 238.37±70.94 3023.48±702.49**腦 Brain ND ND 3.16±0.97 3.83±0.66腸 Intestine 103.15±23.23 51.37±3.90** 1430.19±499.56 138.50±17.19**肌肉 Muscle 2.41±0.45 4.31±0.59** 4.79±0.76 3.11±0.95睪丸 Testis 1.82±0.57 1.04±0.24* 1.58±0.41 1.91±0.38

7 種活性成分在正常大鼠體內(nèi)各組織器官中的含量排列順序為(1)PCA:腸＞胃＞腎＞肺＞肝＞心＞脾＞睪丸＞腦＞肌肉。 (2)GA:腸＞腎＞胃＞肺＞心＞肝＞脾＞肌肉＞睪丸＞腦。(3)PG:胃＞腸＞肺＞肌肉＞心＞睪丸＞脾＞腎。 (4)PDG:腸＞胃＞肝＞心＞肺＞脾＞肌肉＞腦＞睪丸。 (5)CA:心＞肝＞胃＞腸＞肺＞腦＞脾＞腎＞肌肉＞睪丸。 (6)NCA:胃＞心＞肺＞肝＞腸＞脾＞腎＞肌肉＞睪丸＞腦。 (7)CCA:肝＞心＞腸＞胃＞肺＞脾＞腦＞腎＞睪＞肌肉。

7 種活性成分在SHR 模型體內(nèi)各組織器官中的含量排列順序為(1)PCA:胃＞腸＞肺＞肝＞腎＞腦＞心＞脾＞睪＞肌肉。 (2)GA:胃＞腸＞肺＞心＞肝＞腎＞脾＞睪＞肌肉＞腦。 (3)PG:胃＞腸＞肺＞心＞肌肉＞脾＞睪丸＞腎。 (4)PDG:胃＞腸＞心＞肝＞肺＞脾＞腦＞肌肉＞睪丸。 (5)CA:腸＞胃＞心＞肝＞肺＞腎＞脾＞睪丸＞肌肉＞腦。 (6)NCA:胃＞腸＞肺＞心＞肝＞脾＞肌肉＞睪丸＞腎＞腦。 (7)CCA:心＞肝＞腸＞胃＞肺＞腎＞腦＞脾＞睪＞肌肉。

3 討論

藥物一般作用于疾病患者,而機體的疾病狀態(tài)對藥物的藥代動力學(xué)有著不同程度的影響,這對于臨床用藥是否安全有效而言至關(guān)重要[7]。 對于口服給藥,藥物首先從給藥部位吸收進入血液循環(huán),隨血流分布到全身各個組織器官、體液和細(xì)胞,這種藥物在血液和組織之間的轉(zhuǎn)運現(xiàn)象稱為分布[8]。了解藥物的體內(nèi)分布特征對于保證安全用藥和新藥開發(fā)意義重大。 而通過研究病理生理狀態(tài)下不同成分在不同組織器官之間的蓄積差異情況可以作為合理安全用藥的參考。

在藥動學(xué)實驗研究中,杜仲提取物中的NCA 和CCA 兩種成分的藥動學(xué)參數(shù)未見明顯的組間差異。PDG 在 SHR 模型組中的 T1/2、MRT0-∞、Vd/F 分別較正常組顯著降低；除了 Cmax、MRT0-t外,GA 在 SHR 模型組中的 T1/2、Vd/F、CL/F、MRT0-∞與正常組相比明顯上升,而其 Tmax、AUC0-t、AUC0-∞則表現(xiàn)相反；PG在SHR 模型組中T1/2與正常組相比下降顯著；相比正常組,PCA 在SHR 模型組中的 T1/2和 Vd/F 增加明顯；與 AUC0-t相反,CA 的 T1/2、Vd/F、MRT0-∞在SHR 模型組中相比正常組顯著升高(均P＜0.05)。以上結(jié)果提示病理狀態(tài)下的機體會影響杜仲中PDG、GA、PG、PCA 和 CA 在體內(nèi)消除的快慢以及吸收的速度和程度。

在組織蓄積實驗中,結(jié)果顯示,杜仲提取物中的7 種活性成分主要分布在胃、腸、心、肝、肺。 相較于其它4 種成分,CA、NCA、CCA 在各個器官中的含量整體很低,推測3 種成分消除較快,無累積現(xiàn)象。CCA 的組織含量在SHR 模型組中與正常組相比無明顯差異。 PCA 在 SHR 體內(nèi)肝、肺、胃、腦、睪丸中的含量均高于正常組,提示自發(fā)性高血壓病理狀態(tài)會增加其體內(nèi)蓄積；GA 在SHR 模型體內(nèi)腎、肌肉、睪丸中的含量均小于正常組,而在胃中的含量顯著高于正常組,同時其在正常組中24 h 腎中的含量仍然很高,推測GA 在腎中可能發(fā)生累積,而SHR 并無此特征；PG 在SHR 模型體內(nèi)的心、脾、肺、胃和肌肉中含量均大于正常組,而在腸和睪丸內(nèi)含量小于正常組；與腸內(nèi)含量相反,PDG 在SHR 模型體內(nèi)胃中含量明顯大于正常組；在兩個組的腎和腦組織中,CA 的含量存在差異；NCA 在SHR 模型體內(nèi)腎、腸、睪丸含量與正常組相比存在差異。 PCA、GA、PG、PDG 在SHR 模型體內(nèi)胃中的含量明顯大于正常組,說明疾病狀態(tài)對這幾種成分在胃中的分布有影響。 本實驗的研究結(jié)果表明杜仲提取物中的原兒茶酸、京尼平苷酸、松脂醇二葡萄糖苷、新綠原酸和綠原酸5 種降壓活性成分在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)和蓄積情況會受到自發(fā)性高血壓病理狀態(tài)的影響,這將為指導(dǎo)杜仲臨床長期合理用藥提供一定的參考依據(jù)。