基于數(shù)據(jù)挖掘和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討中醫(yī)藥治療乳腺癌的用藥規(guī)律及作用機(jī)制

謝婷 李杰 胡金輝 楊爭(zhēng)

〔摘要〕 目的 探討中醫(yī)藥防治乳腺癌的用藥規(guī)律及作用機(jī)制。方法 以《腫瘤良方大全》 《腫瘤方劑大辭典》 《中醫(yī)腫瘤學(xué)》 《乳腺癌與乳腺增生》 《藥典臨床用藥中藥成方制劑》文獻(xiàn)為數(shù)據(jù)來(lái)源，運(yùn)用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)（V2.5）挖掘中藥治療乳腺癌的用藥規(guī)律及核心處方，并利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法分析其核心處方的潛在作用機(jī)制。結(jié)果 最終納入297首中藥方劑，挖掘出10組核心藥物配伍及5首新處方，高頻藥物有茯苓、黃芪、柴胡、白術(shù)、甘草、白芍、夏枯草、當(dāng)歸、郁金、白花蛇舌草等，藥物歸經(jīng)以肝經(jīng)和脾經(jīng)為主，性味以甘溫居多，以“柴胡-郁金-夏枯草-炒枳殼-橘核”為首的核心處方主要通過(guò)調(diào)控Rap1、Hippo、MAPK、Toll樣受體等信號(hào)通路抑制腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和遷移，發(fā)揮抗腫瘤作用。結(jié)論 乳腺癌的中醫(yī)藥治療以調(diào)節(jié)肝脾為主，辨其標(biāo)本虛實(shí)，重用甘溫以補(bǔ)虛，解毒散結(jié)以治標(biāo)。其核心處方通過(guò)多通路、多成分、多靶點(diǎn)來(lái)調(diào)控乳腺癌的發(fā)生發(fā)展。

〔關(guān)鍵詞〕 乳腺癌;數(shù)據(jù)挖掘;中醫(yī)傳承輔助平臺(tái);網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);用藥規(guī)律;作用機(jī)制

〔中圖分類號(hào)〕R273 ? ? ? 〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A ? ? ? ?〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2022.01.027

〔Abstract〕 Objective To explore the drug rule and potential mechanism of Chinese medicine in the prevention and treatment of breast cancer （BC）. Methods The literature of Tumor Prescriptions， Tumor Prescriptions Dictionary， Traditional Chinese Medicine Oncology， Breast Cancer and Breast Hyperplasia and Prescription Preparation of Traditional Chinese Medicine for Clinical Use in Pharmacopoeia were used as data sources， the traditional Chinese medicine inheritance assistance platform （V2.5） was used to explore the medication rules and core prescriptions of traditional Chinese medicine in BC treatment， and the potential mechanism of the core prescriptions was analyzed by network pharmacology method. Results A total of 297 prescriptions were screened out， involving 10 core drug combinations and 5 new prescriptions. The high frequency drugs included Fuling （Poria）， Huangqi （Astragali Radix）， Chaihu （Bupleuri Radix）， Baizhu （Atractylodis Macrocephalae Rhizoma）， Gancao （Glycyrrhizae Radix Et Rhizoma）， Baishao （Paeoniae Radix Alba）， Xiakucao （Prunellae Spica）， Danggui （Angelicae Sinensis Radix）， Yujin （Curcumae Radix）， Baihuasheshecao （Hedyotis Diffusa）， etc. The main channels of drugs were liver meridian and spleen meridian， and their drug property and taste were sweet and warm. The core prescriptions led by "Chaihu （Bupleuri Radix）-Yujin （Curcumae Radix）-Xiakucao （Prunellae Spica）-Chaozhiqiao （Aurantii Fructus）-Juhe （Citri Reticulatae Semen）" mainly inhibit the proliferation， invasion and migration of tumor cells by regulating Rap1， Hippo， MAPK， Toll-like receptor and other signaling pathways， thus playing an anti-tumor role. Conclusion The treatment of BC with traditional Chinese medicine is mainly based on regulating liver and kidney， distinguishing the deficiency and excess of the root cause and symptoms， using sweet and warm to to supplement the deficiency， detoxifying and dispersing the knot to treat symptoms. Its core prescription regulates the occurrence and development of BC through multi-pathway， multi-component and multi-target.

〔Keywords〕 breast cancer; data mining; traditional Chinese medicine inheritance assistance platform; network pharmacology; medication rule; mechanism of action

乳腺癌（breast cancer， BC）是發(fā)生在乳腺導(dǎo)管上皮或乳腺小葉的惡性腫瘤，是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤[1]，發(fā)病率占女性惡性腫瘤的第1位[2]，近十幾年來(lái)，我國(guó)BC的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)，每年約有三十余萬(wàn)女性被診斷BC[3]。BC的西醫(yī)治療手段主要有手術(shù)治療、放化療、內(nèi)分泌治療、靶向生物治療，隨著這些治療方法的規(guī)范，BC的病死率在逐步下降[4]。西醫(yī)對(duì)癥治療BC雖然降低了患者病死率，但治療結(jié)束后常存在復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移，且治療過(guò)程中存在一系列的不良反應(yīng)，患者常難以耐受，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量及治療的依從性。研究顯示，中醫(yī)藥治療在疾病的癌前期預(yù)防、急性期的增效減毒、慢性期的鞏固維持上發(fā)揮重要的作用，它可以改善患者的體質(zhì)，提高患者的生活質(zhì)量，對(duì)患者手術(shù)、放化療具有增效減毒的效果，可預(yù)防腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，有效延長(zhǎng)患者的生存周期[5]。

1 資料與方法

1.1 ?資料來(lái)源

檢索《腫瘤良方大全》《腫瘤方劑大辭典》《中醫(yī)腫瘤學(xué)》《乳腺癌與乳腺增生》《藥典臨床用藥中藥成方制劑》[6-10]治療BC的方劑。

1.2 ?納入標(biāo)準(zhǔn)[11]

（1）主治、功效明確，用于治療BC的中藥方劑;（2）方劑組成完整，有明確的藥物組成，用量信息明確;（3）方劑用法為內(nèi)服。

1.3 ?排除標(biāo)準(zhǔn)[11]

（1）組成重復(fù)的方劑;（2）方劑組成不完整（有方無(wú)藥、缺少用量信息、藥物組成不明確等）;（3）方劑中有不明確的藥物者;（4）食療方。

1.4 ?中藥名稱規(guī)范化處理

中藥名稱參照全國(guó)中醫(yī)藥行業(yè)高等教育“十三五”規(guī)劃教材《中藥學(xué)》[12]和《中華人民共和國(guó)藥典》（2020年版）[13]對(duì)方劑中出現(xiàn)的中藥名稱進(jìn)行規(guī)范化處理;同一種藥物不同部位視為不同中藥，如蓮子和蓮子心，視作2種藥;同一種藥物的不同炮制品，功效差異較大者，統(tǒng)計(jì)時(shí)按不同藥物進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

1.5 ?數(shù)據(jù)庫(kù)的建立與數(shù)據(jù)分析

1.5.1 ?數(shù)據(jù)庫(kù)的建立 ?將符合標(biāo)準(zhǔn)的方劑進(jìn)行中藥名稱規(guī)范后，錄入“中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)（V2.5）”中的方劑管理模塊，建立數(shù)據(jù)庫(kù)，采取一人錄入，雙人審核的制度，對(duì)錄入的數(shù)據(jù)進(jìn)行逐個(gè)核對(duì)，以確保數(shù)據(jù)挖掘的準(zhǔn)確性。

1.5.2 ?數(shù)據(jù)分析 ?采用頻次統(tǒng)計(jì)、關(guān)聯(lián)規(guī)則、熵聚類算法等數(shù)據(jù)挖掘方法，通過(guò)“中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)（V2.5）”，對(duì)藥物的使用頻次、性味、歸經(jīng)及組方規(guī)律進(jìn)行聚類分析，得到潛在的核心藥物組合，并在此基礎(chǔ)上挖掘出新處方。

1.6 ?基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析核心新處方治療BC的作用機(jī)制

1.6.1 ?核心藥物活性成分篩選及靶點(diǎn)預(yù)測(cè) ?（1）利用TCMSP[14]數(shù)據(jù)庫(kù)，以口服生物利用度（oral bioavailability， OB）≥30%、藥物類藥性（drug-like properties， DL）≥0.18為條件[15]，篩選核心新處方藥物中較高活性的化合物;（2）通過(guò)PubChem[16]數(shù)據(jù)庫(kù)收集各有效成分的SDF結(jié)構(gòu)式;（3）通過(guò)SwissTargetPrediction[17]數(shù)據(jù)庫(kù)，將有效成分導(dǎo)入數(shù)據(jù)庫(kù)，獲取核心處方藥物的潛在靶點(diǎn)。

1.6.2 ?疾病靶點(diǎn)庫(kù)建立 ?利用GeneCards[18]數(shù)據(jù)庫(kù)，以“breast cancer”作為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，獲得數(shù)據(jù)庫(kù)中信度較高（score≥30）的BC疾病相關(guān)靶點(diǎn)，建立疾病靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫(kù)。

1.6.3 ?共同靶點(diǎn)篩選及蛋白相互作用（protein-protein interaction， PPI）網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 ?將上述獲得的藥物靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)進(jìn)行相互映射，運(yùn)用Cytoscape（3.7.2）軟件構(gòu)建“核心藥物-有效成分-BC疾病”靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，進(jìn)行可視化分析。將“藥物-疾病”共同靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING[19]數(shù)據(jù)庫(kù)，獲取靶點(diǎn)PPI信息并導(dǎo)入Cytoscape（3.7.2）軟件，繪制網(wǎng)絡(luò)。

1.6.4 ?GO及KEGG通路富集分析 ?應(yīng)用WebGestalt[20]數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)中涉及的關(guān)鍵基因進(jìn)行GO分析和KEGG通路富集分析，篩選出差異顯著的生物過(guò)程（biological process， BP）、細(xì)胞組分（cellular component， CC）、分子功能（molecular function， MF）及KEGG通路，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行可視化呈現(xiàn)。

2 結(jié)果

2.1 ?用藥頻次統(tǒng)計(jì)

共有297首方劑符合篩選條件，涉及382味中藥，用藥頻次≥35的中藥有26味，見(jiàn)表1。排在前10位的分別是：茯苓、黃芪、柴胡、白術(shù)、甘草、白芍、夏枯草、當(dāng)歸、郁金、白花蛇舌草。其中，茯苓使用頻次最高，在297首處方中，出現(xiàn)97次。

2.2 ?藥物性味歸經(jīng)分析

對(duì)治療BC的382味藥物的性味歸經(jīng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，見(jiàn)表2。在四氣中，藥物以溫性藥物為主，為1931次，占40.49%，其次為平性藥（1530次）和寒性藥（1099次），分別占32.08%和23.04%;在五味中，以甘味藥物最多，為3188次，占42.86%，其次為苦味藥（2014次）和辛味藥（1650次），分別占27.08%和22.18%;在歸經(jīng)中，藥物主要入肝、脾、肺經(jīng)，占比分別為16.55%、14.45%、13.53%。

2.3 ?組方規(guī)律分析

2.3.1 ?基于關(guān)聯(lián)規(guī)則的組方規(guī)律分析 ?基于關(guān)聯(lián)規(guī)則對(duì)藥物的常用組合進(jìn)行頻數(shù)統(tǒng)計(jì)，根據(jù)對(duì)不同參數(shù)提取數(shù)據(jù)結(jié)果的預(yù)讀，當(dāng)設(shè)置支持度個(gè)數(shù)為40，設(shè)置置信度為0.9時(shí)，頻次>40次的藥物組合有共有25對(duì)，主要集中在茯苓、黃芪、柴胡、白術(shù)、甘草、白芍、夏枯草、當(dāng)歸、郁金等藥物之間，見(jiàn)表3。在分析藥物組合的關(guān)聯(lián)規(guī)則時(shí)，設(shè)置置信度>0.930，得到15條關(guān)聯(lián)規(guī)則。見(jiàn)表4。

2.3.2 ?基于“熵聚類”組方規(guī)律分析 ?根據(jù)收集的處方數(shù)量，基于復(fù)雜系統(tǒng)熵層次聚類方法，通過(guò)對(duì)不同參數(shù)提取數(shù)據(jù)結(jié)果的預(yù)讀，設(shè)置懲罰度為2，設(shè)置相關(guān)度為6，進(jìn)行聚類分析，得到潛在的核心藥物組合，見(jiàn)表5。按照相關(guān)度與懲罰度約束，在核心藥物組合的基礎(chǔ)上，演化出5首潛在新方，見(jiàn)表6。將新方采用網(wǎng)絡(luò)化展示，見(jiàn)圖1。

2.4 ?基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的作用機(jī)制研究

2.4.1 ?藥物活性成分 ?在獲得的核心藥物組合及新方組合中，柴胡、郁金、夏枯草、炒枳殼4味藥在用藥頻次統(tǒng)計(jì)中出現(xiàn)頻次最高，因此，將此4味藥作為核心藥物配伍進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討。通過(guò)TCMSP共收集柴胡-郁金-夏枯草-炒枳殼配伍組化合物648個(gè)，其中柴胡349個(gè)、郁金222個(gè)、夏枯草60個(gè)、炒枳殼17個(gè)。篩選出符合條件的活性化合物35個(gè)，其中柴胡17個(gè)、郁金15個(gè)、夏枯草11個(gè)、炒枳殼5個(gè)，將其作為候選化合物，結(jié)果見(jiàn)表7。

2.4.2 ?藥物作用靶點(diǎn) ?剔除無(wú)化學(xué)結(jié)構(gòu)及無(wú)靶點(diǎn)化合物（MOL004598、MOL004609、MOL004628、MOL004702、MOL004718、MOL006772、MOL004241、

MOL004260、MOL004263、MOL004309、MOL004316），得到配伍組候選化合物共1997個(gè)靶點(diǎn)，其中柴胡706個(gè)、郁金344個(gè)、夏枯草701個(gè)、炒枳殼246個(gè)。通過(guò)GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)，以“breast cancer”為關(guān)鍵詞，提取數(shù)據(jù)庫(kù)中信度較高（score≥30）的相關(guān)基因靶點(diǎn)，收集并篩選到BC靶點(diǎn)357個(gè)基因靶點(diǎn)。取交集后獲得配伍組候選化合物與BC的共同靶點(diǎn)共57個(gè)，韋恩圖見(jiàn)圖2。

2.4.3 ?“藥物-疾病”共同靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò) ?共同靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)見(jiàn)圖3。根據(jù)Degree值設(shè)定節(jié)點(diǎn)大小。Degree值越大，節(jié)點(diǎn)越大。該網(wǎng)絡(luò)圖中共有57個(gè)靶點(diǎn)，包含57個(gè)節(jié)點(diǎn)、717條邊，表明配伍組可能通過(guò)多個(gè)靶點(diǎn)在防治BC中發(fā)揮作用。

2.4.4 ?GO和KEGG富集分析 ?共富集320個(gè)BP，結(jié)合FDR、ratio與P值結(jié)果權(quán)重分析，并繪制火山圖（圖4A），主要富集于促進(jìn)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、上皮細(xì)胞增殖、抑制有絲分裂細(xì)胞周期、肽基絲氨酸修飾、DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子活性與膠原代謝過(guò)程的調(diào)節(jié)等。

共富集3個(gè)CC，結(jié)合FDR、ratio與P值結(jié)果權(quán)重分析，并繪制火山圖（圖4B），主要富集于膜區(qū)、受體復(fù)合物、轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物、轉(zhuǎn)移含磷基團(tuán)等。

共富集43個(gè)MF，結(jié)合FDR、ratio與P值結(jié)果權(quán)重分析，并繪制火山圖（圖4C），主要富集于蛋白酪氨酸激酶活性、磷脂酰肌醇二磷酸激酶活性、磷酸酶結(jié)合、蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶活性、蛋白C端結(jié)合、輔因子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性等。

KEGG共富集94個(gè)信號(hào)通路，結(jié)合FDR、ratio與P值結(jié)果權(quán)重分析，并繪制火山圖（圖4D），主要富集于Rap1信號(hào)通路、Hippo信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路等。

3 討論

中醫(yī)學(xué)里雖無(wú)“BC”這一病名，但根據(jù)其臨床癥狀，可將BC歸屬于“乳巖”“乳石癰”等范疇，《說(shuō)文解字》中亦提到，“癌”是由“巖”字化生而來(lái)。中醫(yī)學(xué)對(duì)BC這一疾病的認(rèn)識(shí)始于晉·葛洪《肘后備急方》[11]，至明清時(shí)期才建立起較成熟的理論體系?？偨Y(jié)歷代的中醫(yī)文獻(xiàn)，醫(yī)家多認(rèn)為正氣虧虛是BC發(fā)病的內(nèi)在基礎(chǔ)，肝氣郁滯、陽(yáng)氣虧虛、痰瘀毒聚是BC的主要病因病機(jī)，總的治療原則為扶正祛邪，再依具體情況采用疏肝解郁、清熱解毒、活血化瘀、化痰散結(jié)等治法。

3.1 ?用藥規(guī)律及思路探討

《素問(wèn)遺篇·刺法論》言：“正氣存內(nèi)，邪不可干”，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為正氣虧虛是BC發(fā)病的內(nèi)在基礎(chǔ)，情志內(nèi)傷是BC發(fā)病的重要因素，肝氣郁滯貫穿該疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。正氣虛損，肝失疏泄，氣機(jī)失常，脾腎虧虛，先后天失養(yǎng)，內(nèi)生痰濁、血瘀蘊(yùn)結(jié)成毒于乳房，日久形成乳巖?！督饏T要略·卷上·藏府經(jīng)絡(luò)先后病脈證一》言：“上工治未病……見(jiàn)肝之病，知肝傳脾，當(dāng)先實(shí)脾”。張錫純?cè)凇夺t(yī)學(xué)衷中參西錄》中指出“欲治肝者，原當(dāng)升脾降胃，培養(yǎng)中宮”。本研究中，歸經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析表明，排名前6位依次為肝、脾、肺、胃、心、腎經(jīng)。高頻使用的藥物有茯苓、黃芪、柴胡、白術(shù)、甘草、白芍、當(dāng)歸、郁金等，柴胡、白芍、郁金疏肝行氣，茯苓、黃芪、白術(shù)益氣健脾，當(dāng)歸活血養(yǎng)血。肝藏血而主疏泄，肝氣條達(dá)則氣血流通，心情舒暢。脾主血主運(yùn)化為氣血生化之源，脾氣健運(yùn)，可化生氣血養(yǎng)五臟。脾的運(yùn)化有賴于肝的疏泄，脾氣健旺則生血有源，肝血充足，則肝有所藏，肝得所養(yǎng)，則能正常疏泄。二者相輔相成，使人體陰陽(yáng)并調(diào)，乳絡(luò)通暢。

3.2 ?作用機(jī)制研究

中醫(yī)藥可通過(guò)多成分、多途徑、多靶點(diǎn)整體調(diào)節(jié)的方式治療BC，具有副作用小、機(jī)體耐受好等優(yōu)勢(shì)[21]。本研究基于中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)對(duì)收集到的中醫(yī)藥治療BC的方劑進(jìn)行分析，獲得10組核心藥物組合及5首新方組合。在5首新處方中，新方3橘核、炒枳殼、夏枯草、柴胡、郁金5味藥物組合配伍在用藥頻次統(tǒng)計(jì)中出現(xiàn)的頻次最高，且該核心藥物組整體以疏肝解郁為主，肝郁是BC病變的基礎(chǔ)，肝氣郁結(jié)貫穿BC發(fā)生發(fā)展的整個(gè)病程，故選取該配伍組來(lái)探索其治療BC的作用機(jī)制。在篩選橘核的有效化學(xué)成分時(shí)，因不滿足“口服生物利用度（OB）≥30%、藥物類藥性（DL）≥0.18”[14]這一條件被剔除，因此，將柴胡、郁金、夏枯草、炒枳殼4味中藥作為研究對(duì)象進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)作用機(jī)制的探討。柴胡性味苦、辛，具有免疫調(diào)節(jié)、抗抑郁、抗腫瘤等藥理作用[22]，柴胡皂苷D是柴胡的主要活性成分，對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有廣泛的抑制作用，其主要通過(guò)阻滯腫瘤細(xì)胞周期，抑制腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和遷移，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等多種途徑發(fā)揮抗腫瘤作用[23]。郁金性味辛、苦、寒，其有效成分δ-欖香烯不僅能夠針對(duì)多種癌癥標(biāo)志物發(fā)揮抗腫瘤作用，還能通過(guò)多種機(jī)制起到抑制腫瘤轉(zhuǎn)移、提高機(jī)體免疫力等作用[24]。夏枯草性味苦、辛、寒，其抗腫瘤主要活性成分三萜類化合物能減少腫瘤組織內(nèi)血管生成，可通過(guò)雌激素受體、細(xì)胞特異性周期蛋白、表皮生長(zhǎng)因子受體等靶點(diǎn)及相關(guān)通路抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移[25-26]。炒枳殼性味苦、辛、酸，其成分川陳皮素對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有抑制其增殖、遷移和侵襲的作用[27]，并且能增強(qiáng)抗癌藥物抗腫瘤效果[28]。

對(duì)于此4味藥物作為中藥配伍組共同使用的作用機(jī)制尚不明確，因此，本研究繼續(xù)運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)手段，通過(guò)KEGG通路富集分析，得知該4味藥物作為核心藥物組合治療BC可能主要通過(guò)Rap1信號(hào)通路、Hippo信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路等。腫瘤的發(fā)生是一個(gè)多基因參與、多步驟發(fā)生的過(guò)程?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，BC的發(fā)生與患者體內(nèi)信號(hào)通路的異常密切相關(guān)，調(diào)控信號(hào)通路是控制腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要作用基礎(chǔ)[29]。Hippo信號(hào)通路是一條由一系列蛋白激酶和轉(zhuǎn)錄因子組成的激酶鏈[30]，它直接或間接調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移和侵襲相關(guān)靶基因的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[31]。在許多類型的腫瘤中，Hippo通路往往失調(diào)，并與腫瘤的惡性進(jìn)展密切相關(guān)，被認(rèn)為是惡性腫瘤的潛在治療靶點(diǎn)[32]。MAPK是細(xì)胞內(nèi)廣泛存在的絲/蘇氨酸蛋白激酶，它通過(guò)亞族中激酶的活化或失活調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的生物反應(yīng)，參與調(diào)控細(xì)胞的增殖、凋亡、自噬、炎癥反應(yīng)等相關(guān)基因及蛋白的表達(dá)[33]。Toll樣受體是參與非特異性免疫的一類重要蛋白質(zhì)分子，是先天免疫系統(tǒng)的重要組成部分，它與炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)密切相關(guān)，可營(yíng)造炎癥微環(huán)境促進(jìn)腫瘤形成[34]，參與腫瘤的不同發(fā)展階段[35]。Rap1屬于Ras家族的小分子量GTPase，包括Rap1a、Rap1b兩種亞型，它可通過(guò)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑被激活，在惡性表型的許多方面發(fā)揮重要作用[36-37]。因此，該4味藥物治療BC可能是通過(guò)調(diào)控Rap1信號(hào)通路、Hippo信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路等共同發(fā)揮作用。

4 結(jié)論

本研究基于中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)（V2.5），對(duì)《腫瘤良方大全》《腫瘤方劑大辭典》《中醫(yī)腫瘤學(xué)》等文獻(xiàn)中的方劑進(jìn)行探索、分析，初步歸納總結(jié)中醫(yī)藥治療BC的遣方用藥規(guī)律，對(duì)BC病-方-藥之間的內(nèi)在聯(lián)系進(jìn)行了有益探索，基于核心處方運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析處方可能的作用機(jī)制。BC的中醫(yī)藥治療應(yīng)從肝脾腎三臟調(diào)節(jié)，辨其標(biāo)本虛實(shí)，重用甘溫以補(bǔ)虛，解毒散結(jié)以治標(biāo)。其核心處方對(duì)BC的作用機(jī)制主要通過(guò)調(diào)控多通路、多成分、多靶點(diǎn)來(lái)實(shí)現(xiàn)。但因處方數(shù)量及數(shù)據(jù)分析軟件的局限性，研究難免有失偏頗，對(duì)于研究結(jié)果仍需配合進(jìn)一步的臨床實(shí)踐以及藥效驗(yàn)證，以期為中醫(yī)藥治療BC提供依據(jù)和方法。

參考文獻(xiàn)

[1] SIEGEL R L， MILLER K D， FUCHS H E， et al. Cancer statistics， 2021[J]. CA： A Cancer Journal for Clinicians， 2021， 71（1）： 7-33.

[2] FERLAY J， COLOMBET M， SOERJOMATARAM I， et al. Cancer statistics for the year 2020： An overview[J]. International Journal of Cancer， 2021，22（9）： e391-e399.

[3] JIANG X Y， TANG H J， CHEN T H. Epidemiology of gynecologic cancers in China[J]. Journal of Gynecologic Oncology， 2018， 29（1）： 1-7.

[4] 中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范（2021年版）[J].中國(guó)癌癥雜志，2021，31（8）：770-856.

[5] 陳秋葉，盧雯平.盧雯平基于孫桂芝學(xué)術(shù)思想治療乳腺癌思路探討[J].天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2021，40（1）：27-30.

[6] 劉 ?華，曾柏榮，何清湖.腫瘤良方大全[M].山西：山西科學(xué)技術(shù)出版社，2006.

[7] 趙建成，謝繼增，楊建宇.腫瘤方劑大辭典[Z].北京：中醫(yī)古籍出版社，2009.

[8] 周岱翰.中醫(yī)腫瘤學(xué)[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2011.

[9] 劉鵬熙，劉曉雁.乳腺癌與乳腺增生[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2012.

[10] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典臨床用藥須知-中藥飲片卷：2015年版分輯名：中藥飲片卷[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2017.

[11] 董 ?青，董雪燕，李 ?忠，等.基于中醫(yī)古籍探索乳腺癌認(rèn)知源流[J].北京中醫(yī)藥，2019，38（4）：355-359.

[12] 高學(xué)敏.中藥學(xué)[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2017.

[13] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2020.

[14] RU J L， LI P， WANG J N， et al. TCMSP： a database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines[J]. Journal of Cheminformatics， 2014， 6： 13.

[15] TIAN S， LI Y Y， WANG J M， et al. ADME evaluation in drug discovery. 9. prediction of oral bioavailability in humans based on molecular properties and structural fingerprints[J]. Molecular Pharmaceutics， 2011， 8（3）： 841-851.

[16] KIM S， CHEN J， CHENG T J， et al. PubChem 2019 update： Improved access to chemical data[J]. Nucleic Acids Research， 2019， 47（D1）： 1102-1109.

[17] GFELLER D， MICHIELIN O， ZOETE V. Shaping the interaction landscape of bioactive molecules[J]. Bioinformatics， 2013， 29（23）： 3073-3079.

[18] FISHILEVICH S， NUDEL R， RAPPAPORT N， et al. GeneHancer： genome-wide integration of enhancers and target genes in GeneCards[J]. The Journal of Biological Databases and Curation， 2017， 1（1）：1-17.

[19] SZKLARCZYK D， GABLE A L， LYON D， et al. STRING v11： Protein-protein association networks with increased coverage， supporting functional discovery in genome-wide experimental datasets[J]. Nucleic Acids Research， 2019， 47（D1）： D607-D613.

[20] LIAO Y X， WANG J， JAEHNIG E J， et al. WebGestalt 2019： Gene set analysis toolkit with revamped UIs and APIs[J]. Nucleic Acids Research， 2019， 47（W1）： 199-205.

[21] 雷巧靈，侯旭燦，賈聰敏，等.基于實(shí)體語(yǔ)法系統(tǒng)研究中藥治療乳腺癌的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[J].世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2019，21（4）：587-595.

[22] 顏美玲，楊 ?柳，侯阿嬌，等.柴胡化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息，2018，35（5）：103-109.

[23] 程海霞，段清珍.柴胡皂苷D抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].山西中醫(yī)，2021，37（2）：57-60.

[24] 王喬宇，趙志剛.欖香烯抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].藥學(xué)進(jìn)展，2020，44（7）：546-551.

[25] 李亞梅，彭壯，徐佳，等.夏枯草抗乳腺癌成分-靶點(diǎn)-通路的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，39（8）：1021-1027.

[26] 林 ?艷，閆慶梓，李亞梅，等.夏枯草抗乳腺癌最佳組分篩選及其作用機(jī)制研究[J].中草藥，2019，50（21）：5298-5306.

[27] 韋金紅，韋金雙，吳煒邦，等.川陳皮素抗腫瘤機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2019，39（11）：1211-1216.

[28] 馬于然.川陳皮素增強(qiáng)抗癌藥物抗腫瘤效果及機(jī)理研究[D].江門：五邑大學(xué)，2020.

[29] 王鵬波，代云云，董涵，等.中醫(yī)藥干預(yù)乳腺癌治療的研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2021，27（7）：235-243.

[30] 劉金武，張 ?慧，馬寧寧，等.Hippo信號(hào)通路與相關(guān)疾病的研究進(jìn)展[J].蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2020，46（1）：58-62.

[31] LI H L， LI Q Y， JIN M J， et al. A review： Hippo signaling pathway promotes tumor invasion and metastasis by regulating target gene expression[J]. Journal of Cancer Research and Clinical Oncology， 2021， 147（6）： 1569-1585.

[32] SONG J， GAO Q L， WU B W， et al. Discovery of tertiary amide derivatives incorporating benzothiazole moiety as anti-gastric cancer agents in vitro via inhibiting tubulin polymerization and activating the Hippo signaling pathway[J]. European Journal of Medicinal Chemistry， 2020， 203： 112618.

[33] 柴冬亞，袁佳琪，周軼平.MAPK信號(hào)通路影響腫瘤多藥耐藥的研究進(jìn)展[J].中國(guó)新藥雜志，2019，28（8）：948-953.

[34] 石 ?喆，任 ?珊，戴文斌.TLRs/NF-κB信號(hào)通路與乳腺癌發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2021，18（17）：179-184.

[35] MISHRA V， PATHAK C. Human Toll-Like Receptor 4 （hTLR4）： Structural and functional dynamics in cancer[J]. International Journal of Biological Macromolecules， 2019， 122： 425-451.

[36] JAKIEWICZ A， PAJAK B， ORZECHOWSKI A. The many faces of Rap1 GTPase[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2018， 19（10）： 2848.

[37] PARRI M， CHIARUGI P. Rac and Rho GTPases in cancer cell motility control[J]. Cell Communication and Signaling， 2010， 8： 23.