Menkes病1例家系報道并中國臨床表型和基因型文獻(xiàn)復(fù)習(xí)

潘瑞英

（中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九二四醫(yī)院兒科，廣西 桂林 541002）

Menkes病是一種X-連鎖隱性遺傳病，由ATP7A基因突變導(dǎo)致銅轉(zhuǎn)運(yùn)障礙所引起的多系統(tǒng)疾病。典型的Menkes病臨床特征為毛發(fā)卷曲、稀疏，癲癇，神經(jīng)退行性變和結(jié)締組織異常，通常3歲前死亡[1-3]。隨著國內(nèi)對本病認(rèn)識的提高和基因檢測技術(shù)的快速發(fā)展，病例報告數(shù)增多，本研究報道1例Menkes病患兒的臨床表型和基因型，并對國內(nèi)報道的文獻(xiàn)進(jìn)行復(fù)習(xí)，總結(jié)我國Menkes病的臨床表型和基因型，特別是基因檢測方法的選擇，以提高我國基層醫(yī)院對該病的診斷能力，避免漏診，同時通過加強(qiáng)遺傳咨詢，產(chǎn)前診斷，提高優(yōu)生優(yōu)育。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 患兒，男，1歲8個月，主因間斷抽搐3個月余，咳嗽1個月，再發(fā)抽搐1 d于2019年3月6日入本院?；純合档?胎第5產(chǎn)，其母因胚胎停育引產(chǎn)1次，產(chǎn)檢發(fā)現(xiàn)胎兒畸形引產(chǎn)1次，自行要求引產(chǎn)2次，患兒3個姐姐分別15、14、6歲，均體健，其一兄生長發(fā)育落后，重度營養(yǎng)不良，11個月大時因先天性斜疝并嵌頓未及時手術(shù)死亡。該患兒系足月順產(chǎn)，出生體質(zhì)量2.95 kg，出生后喂養(yǎng)困難，生長發(fā)育落后，現(xiàn)仍不能抬頭，不能坐、爬、翻身、走等，生后滿1歲時因先天性巨結(jié)腸、腸梗阻、肺炎、腦積水、運(yùn)動發(fā)育遲緩至廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院，行結(jié)腸造瘺手術(shù)及對癥治療，好轉(zhuǎn)出院。于1歲5個月時因重癥肺炎、呼吸衰竭、橫結(jié)腸造瘺術(shù)后、生長發(fā)育遲緩再次至廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院治療，期間出現(xiàn)頻發(fā)抽搐，予對癥處理好轉(zhuǎn)出院。住院期間外送武漢康圣達(dá)醫(yī)學(xué)檢驗行全外顯子基因檢測，出院時結(jié)果尚未回報。本次因發(fā)熱咳嗽及再發(fā)抽搐入本院。入院查體：體質(zhì)量8 kg，經(jīng)皮血氧90%，精神反應(yīng)差，抬頭不穩(wěn)，皮膚白，高腭弓，頭發(fā)稀疏、卷曲，短而粗硬（見圖1），呼吸急促，可見吸氣性三凹征，雙肺滿布濕啰音，四肢肌張力高，姿勢異常，雙上肢背伸，雙手外旋，拇指內(nèi)收，雙下肢伸直，雙足尖足。

圖1 患兒頭發(fā)表型Figure1 Hair phenotype of the Menkeschild

1.2 一般檢查 腦電圖、頭顱MRI、血清銅、血漿銅藍(lán)蛋白、血尿遺傳代謝疾病篩查、血尿生化檢查、染色體核型分析、MLPA（多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)）。

1.3 ATP7A基因檢測 采集患兒及家系成員外周血，應(yīng)用EDTA全血（乙二胺四乙酸抗凝血）行安捷倫外顯子芯片捕獲+高通量測序。并對發(fā)現(xiàn)的ATP7A基因突變位點(diǎn)用Sanger測序法驗證（武漢康圣達(dá)醫(yī)學(xué)檢驗所）。

1.4 文獻(xiàn)復(fù)習(xí) 在萬方數(shù)據(jù)庫中檢索關(guān)鍵詞為“Menkes”，檢索時間為建庫至2019年3月31日。檢索文獻(xiàn)共28篇，綜述2篇[4-5]，Menkes病影像學(xué)病例報告3篇[6-8]，Menkes病護(hù)理報道2篇[9-10]以上病例均包含在各醫(yī)院的臨床病例報道中，不重復(fù)統(tǒng)計。其中病例報道21篇中，同一醫(yī)院同一時間，證實為相同患兒的不重復(fù)統(tǒng)計。文獻(xiàn)中女性患兒尸解診斷1例，未行基因?qū)W檢測，未計入[11]。綜上，復(fù)習(xí)文獻(xiàn)[12-26]診斷Menkes患兒共40例。

2 結(jié)果

2.1 臨床特點(diǎn) 患兒男性，足月出生，體質(zhì)量適于胎齡兒，生后發(fā)育落后，喂養(yǎng)困難，特殊外貌（膚色白皙、高腭弓、毛發(fā)卷曲稀疏短粗硬），癲癇發(fā)作，合并先天性巨結(jié)腸腸道畸形。

2.2 一般檢查結(jié)果 既往廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢測：血清銅6μmol/L（正常值12.6～29.9μmol/L），血漿銅藍(lán)蛋白80 mg/L（正常值180～450 mg/L）；腦電圖：散在尖波、棘慢綜合波；頭顱MRI：腦積水；血串聯(lián)質(zhì)譜和尿氣相色譜分析未見異常；入院前桂林醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院：染色體核型分析為46，XY；MLPA未見染色體微重復(fù)或微缺失。本次入院胸片：雙肺炎癥，血氨88.5μmol/L，血?dú)夥治鎏崾镜脱跹Y及高乳酸血癥，乳酸波動于2.8～5.2 mmol/L，肝功能、腎功能、心肌酶、凝血功能無明顯異常。

2.3 基因檢測結(jié)果ATP7A基因外顯子11位點(diǎn)發(fā)生c.2455G＞T，無義突變，染色體位置chrx-77270207，其突變來自于其母親，其父無突變，患兒大姐、三姐為雜合突變，其二姐無突變；一代測序驗證圖，見圖2。

圖2 患兒家系一代測序結(jié)果Figure2 First-generation sequencing results of the Menkeschild'sfamily

2.4 患兒家系圖譜 患兒家系圖譜，見圖3。

圖3 患兒家系圖譜Figure3 Family map of the Menkes

2.5 治療結(jié)果 丙戊酸鈉控制癲癇，持續(xù)氣道正壓通氣（CPAP）呼吸支持，頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉控制感染及呼吸道管理，住院9 d，抽搐獲得控制，肺炎明顯好轉(zhuǎn)，家屬要求自動出院。

2.6 文獻(xiàn)復(fù)習(xí)臨床表型 40例患兒全部為男性，運(yùn)動發(fā)育落后100%，頭發(fā)卷曲稀疏100%，其次高發(fā)臨床表型為皮膚白皙和驚厥發(fā)作，均為92.50%（37/40），另3例患兒單純因運(yùn)動發(fā)育落后就診，就診時尚未出現(xiàn)驚厥。驚厥發(fā)生年齡3 d～7個月，平均（3.25±1.43）個月?；純杭埩Ρ憩F(xiàn)不一，但主要為肌張力降低62.5%（25/40），肌張力增高7.50%（3/40），肌張力正常30.00%（12/40）。隨訪到16例具體死亡年齡為50 d～4歲，平均（15.0±12.1）個月。其他伴隨異常多為喂養(yǎng)困難，高腭弓，皮膚松弛，面頰虛胖，伴發(fā)其他畸形為先天性斜疝，漏斗胸，膀胱憩室，聽力異常等。輔助檢查：所有驚厥患兒腦電圖均提示典型癲癇波形，頭顱MRI非特異性改變，表現(xiàn)為腦白質(zhì)發(fā)育不良、腦白質(zhì)髓鞘化延遲、腦萎縮、胼胝體變薄、腦積水、硬膜下積液等，部分行MRA提示腦血管迂曲變形。檢驗：全部病例均血清銅降低和或銅藍(lán)蛋白降低。文獻(xiàn)檢索臨床表型，見表1。

表1 Menkes病臨床表型Table1 Clinical phenotypes of Menkes disease

2.7 文獻(xiàn)復(fù)習(xí)基因型及基因檢測方法文獻(xiàn)復(fù)習(xí)40例患兒行基因檢測共25例，具體基因型及基因檢測方法，見表2。

表2 Menkes病基因型及基因檢測方法Table 2 Menkes disease genotype and gene detection method

3 討論

1962年，Menkes等[27]首次描述5例Menkes病男嬰。SMITH人類先天性畸形圖譜[28]指出，該病常見臨床表型，①生長發(fā)育落后；②中樞神經(jīng)系統(tǒng)：大腦退行性變，1～2個月時出現(xiàn)嚴(yán)重的進(jìn)行性神經(jīng)缺陷伴肌張力增高，癲癇發(fā)作，顱內(nèi)出血，喂養(yǎng)困難；③面部：缺乏表情，面頰虛胖；④頭發(fā)：稀疏，短而粗硬，著色淺，放大鏡顯示毛發(fā)卷曲和部分?jǐn)嗔眩虎萜つw：偶爾變厚，相對較干，出生時著色不均；⑥骨骼病變：干骺端變寬，肋骨和股骨明顯，易折斷；⑦眼睛：近視，斜眼；齒齦增厚和乳牙出牙延遲；胃息肉伴胃腸出血，幽門狹窄，食管裂孔疝；膀胱憩室等。通常該病嬰兒早期即出現(xiàn)進(jìn)行性惡化，3年內(nèi)死亡。結(jié)合本例患兒及復(fù)習(xí)國內(nèi)病例報道，其臨床表型表現(xiàn)為生長發(fā)育落后、驚厥發(fā)作、頭發(fā)卷曲稀疏、皮膚白、肌張力減低或肌張力增高，最常見的面部畸形為高腭弓，其他并發(fā)畸形包括先天性斜疝、腎盂擴(kuò)張、膀胱憩室、巨結(jié)腸等，尚無幽門狹窄、食管裂孔疝的報道，有視網(wǎng)膜發(fā)育不良的報道，無近視報道，皮膚的臨床表型除顏色白皙外，變厚干燥著色不均等均未見報道。輔助檢查特征性指標(biāo)，血銅、銅藍(lán)蛋白降低。基因型：本病為X-連鎖隱性遺傳病，致病基因為ATP7A（GenBank NM_000052）突變，該基因定位于Xq13.3，長度為140×103包含23個外顯子。該突變導(dǎo)致編碼銅轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶活性降低甚至喪失，導(dǎo)致機(jī)體銅離子缺乏，繼而導(dǎo)致各種銅依賴酶功能障礙。目前已知300多種ATP7A基因突變，突變類型包括大片段缺失、錯義突變、無義突變、剪接位點(diǎn)突變等。國內(nèi)報道[12，14-16，19-20，22-24]基因型涵蓋上述所有突變類型，未發(fā)現(xiàn)明顯的熱點(diǎn)突變。突變來自母親攜帶者占64%（16/25），其他為新生突變?；驒z測方法國內(nèi)文獻(xiàn)[12，14-16，19-20，22，24]報道多采用PCR直接測序，全外顯子二代測序，或癲癇panel的二代測序。臨床表型高度懷疑本病但上述檢測陰性情況下，加做MLPA，該技術(shù)結(jié)合探針雜交和PCR技術(shù)，針對待測DNA靶序列進(jìn)行定性和半定量的分析方法，可用于檢測大片段缺失和重復(fù)。但該方法不適合檢測未知的點(diǎn)突變類型。直接PCR測序+MLPA，或全外顯子二代測序+MLPA共同應(yīng)用可提高致病性突變的檢出率?；驒z測的目的除明確診斷外，在遺傳咨詢和優(yōu)生優(yōu)育方面發(fā)揮重要作用。用于攜帶者母親再次懷孕的產(chǎn)前診斷，及子女中女性攜帶者婚育時的遺傳咨詢。

綜上所述，Menkes病是一種X連鎖的隱性遺傳病，致病突變來自攜帶者母親，或新發(fā)突變。臨床上針對嬰兒期起病的癲癇發(fā)作，伴明顯的神經(jīng)運(yùn)動發(fā)育落后，及典型的毛發(fā)改變，需警惕該病發(fā)生的可能。完善血清銅和血清銅藍(lán)蛋白的檢測及結(jié)合特殊MRA影像學(xué)檢查可臨床診斷，基因二代測序技術(shù)加MLPA技術(shù)完成基因診斷。該病目前無有效的治療方法，預(yù)后極其不良，組胺酸銅治療仍處于試驗階段，國內(nèi)僅報道1例患兒自6個月大時定期皮下注射組胺銅，患兒僅血銅基本正常，但仍存在智力發(fā)育落后和頻發(fā)癲癇發(fā)作[15]?；蛟\斷的目的不僅是先證患兒的明確診斷，最重要的是Menkes病家庭可通過基因診斷獲益。