十批肉桂中桂皮醛的含量測(cè)定和分析

◎ 錢曉兵，謝 聰，吳巨賢，蘇梓樂(lè)，梁海清

（1.廣州酒家集團(tuán)利口福（梅州）食品有限公司，廣東 梅州 514779；2.廣東科貿(mào)職業(yè)學(xué)院，廣東 廣州 510430；3.廣東醫(yī)科大學(xué)，廣東 東莞 523808；4.廣東省新興中藥學(xué)校，廣東 云浮 527499）

肉桂，又名玉桂，為樟科植物肉桂（Cinnamomum cassiaPresl）的干燥樹(shù)皮，多于秋季剝?nèi)。幐?。曾正渝等[1]調(diào)查發(fā)現(xiàn)，肉桂的產(chǎn)區(qū)主要有中國(guó)、斯里蘭卡、印尼、馬達(dá)加斯加和越南等地，中國(guó)不僅是肉桂的主要產(chǎn)地之一，生產(chǎn)總量占世界的38.1%，同時(shí)也是肉桂的主要出口國(guó)。由此可見(jiàn)，肉桂在國(guó)際間的需求量很大，是經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高的自然資源。肉桂為我國(guó)廣東和廣西兩地的重要經(jīng)濟(jì)作物，其作為香料、飲片、揮發(fā)油及其他相關(guān)制品已逐步產(chǎn)業(yè)化，成為當(dāng)?shù)刂匾慕?jīng)濟(jì)支柱。肉桂常被用作香料、烹飪材料及藥材，肉桂粉在西方國(guó)家通常用來(lái)烤制面包、點(diǎn)心或腌制肉類食品，在中國(guó)也作為烹飪時(shí)的香料使用。同時(shí)，中國(guó)衛(wèi)生部門發(fā)布的《關(guān)于進(jìn)一步規(guī)范保健食品原料管理的通知》中指出，肉桂既是食品又是藥品，具有藥食同源的特性[2]。

肉桂香氣濃郁，味甜、辣，以皮厚、油性大、香氣濃者為佳，生用，能舒筋活血、祛寒止痛，常用于胸悶、嘔吐、腹寒、嗆咳、跌打瘀腫和風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛等[3-4]。肉桂的指標(biāo)性成分是桂皮醛，具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱、抗驚厥等多種藥理活性。宋宗輝等[5]調(diào)研發(fā)現(xiàn)，桂皮醛能夠抑菌、抗肥胖和抑制糖尿病等，對(duì)體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)也有保護(hù)作用。

目前桂皮醛的測(cè)定方法主要有揮發(fā)油測(cè)定法和高效液相色譜法。本文依據(jù)2020年版《中華人民共和國(guó)藥典》中載明的方法[6]，應(yīng)用高效液相色譜儀，以肉桂的指標(biāo)性成分桂皮醛含量為指標(biāo)，對(duì)源自廣東省云浮市郁南縣10 個(gè)不同鎮(zhèn)村的10 批次肉桂進(jìn)行含量測(cè)定和質(zhì)量分析比較，并結(jié)合文獻(xiàn)分析其含量差異產(chǎn)生的原因，以期能為肉桂的生產(chǎn)企業(yè)選擇質(zhì)量更優(yōu)的肉桂提供參考依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器與設(shè)備

LC-2010A HT 型高效液相色譜儀（泵、UV 檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器等均為儀器自帶，日本島津）；色譜工作站（Shimadzu LC solution，日本島津）；Inertsil ODS-3 C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm，日本島津）；BSA224S 型電子分析天平（萬(wàn)分之一，德國(guó)賽多利斯）。

1.2 材料與試劑

10 批次肉桂分別采集于郁南縣建城鎮(zhèn)兩頭村、寶珠鎮(zhèn)灣角村、南江口鎮(zhèn)南渡村、通門鎮(zhèn)沖北村、通門鎮(zhèn)百賢村委會(huì)瓦坪垌村、建城鎮(zhèn)車窖村、通門鎮(zhèn)沖梅嶺咀頭村、通門鎮(zhèn)沖梅楓木枰村、建城鎮(zhèn)天馬山村和通門鎮(zhèn)沖梅高廠界村，由廣東省中藥研究所鄭海博士鑒定，均為樟科植物Cinnamomum cassiaPresl 的干燥樹(shù)皮。

桂皮醛對(duì)照品（含量98.8%，批號(hào)BZPO307，Bomebio 公司）；甲醇（色譜純，天津科密歐）；乙腈（色譜純，天津大茂）；水（實(shí)驗(yàn)室自制超純水）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的制備

精密稱定桂皮醛對(duì)照品20 mg，加甲醇適量溶解，轉(zhuǎn)移至100 mL 容量瓶中，繼續(xù)加甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻，得濃度為200 μg·mL-1的桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。準(zhǔn)確移取上述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL 和5 mL 分別置于5 個(gè)10 mL 容量瓶中，加甲醇稀釋并定容，即得濃度為20 μg·mL-1、40 μg·mL-1、60 μg·mL-1、80 μg·mL-1和100 μg·mL-1的桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.3.2 供試品溶液的制備

肉桂樣品研磨成粉，過(guò)3 號(hào)篩網(wǎng)備用。精確稱取粉末0.5 g 于250 mL 錐形瓶中，加入25 mL 甲醇，稱定重量，超聲處理10 min（功率350 W，頻率35 kHz），放置過(guò)夜。同法超聲處理一次，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，過(guò)濾后備用。準(zhǔn)確量取1 mL濾液，置于25 mL容量瓶中，加甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

1.3.3 色譜條件

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠（4.6 mm×250 mm，5 μm）為填充劑；以乙腈-水（68 ∶32）為流動(dòng)相，流速為1 mL·min-1。檢測(cè)波長(zhǎng)：290 nm；柱溫箱溫度：35 ℃；檢測(cè)時(shí)間：40 min。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)照品及供試品測(cè)定

取對(duì)照品溶液、供試品溶液，按實(shí)驗(yàn)色譜條件進(jìn)行測(cè)定，分別進(jìn)樣20 μL，得到色譜圖（圖1、圖2），桂皮醛保留時(shí)間約為24.018 min，理論板數(shù)按桂皮醛峰計(jì)算為10 736.231，分離度為14.301，數(shù)據(jù)處理為外標(biāo)峰面積法。

圖1 桂皮醛對(duì)照品色譜圖

圖2 肉桂樣品色譜圖

2.2 線性關(guān)系考察

取1.3.1 項(xiàng)下所述濃度為20 μg·mL-1、40 μg·mL-1、60 μg·mL-1、80 μg·mL-1和100 μg·mL-1的桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)系列溶液各20 μL，按1.3.3 項(xiàng)下所述的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積，以桂皮醛濃度（μg·mL-1）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程y=85 315x+37 292，R=0.999 6，表明在20 ～100 μg·mL-1，桂皮醛濃度與峰面積線性關(guān)系良好。

2.3 精密度試驗(yàn)

取1.3.1 項(xiàng)下濃度為100 μg·mL-1的對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6 次，每次進(jìn)樣量均為20 μL，記錄峰面積，計(jì)算6 次進(jìn)樣的峰面積的RSD 為0.96%，表明儀器的精密度良好。

2.4 重復(fù)性試驗(yàn)

制備同一樣品供試品溶液6 份，按1.3.3 項(xiàng)下所述的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以峰面積進(jìn)行計(jì)算，得到供試品溶液中桂皮醛的濃度，計(jì)算桂皮醛的含量。平均含量為1.29%，RSD 為5.56%，結(jié)果表明該方法重復(fù)性好。

2.5 加樣回收率試驗(yàn)

精確稱取6 份產(chǎn)地為郁南縣建城鎮(zhèn)車窖村的樣品，每份0.25 g，加入桂皮醛對(duì)照品溶液，按1.3.2 項(xiàng)下所述的方法進(jìn)行供試品溶液的配制操作，按1.3.3 項(xiàng)下所述的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算桂皮醛含量，并根據(jù)加入量計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 肉桂樣品中桂皮醛加樣回收試驗(yàn)結(jié)果表

2.6 樣品含量測(cè)定

按1.3.2 項(xiàng)下所述的方法對(duì)10 個(gè)批次肉桂樣品進(jìn)行處理，得10 份供試品溶液。分別準(zhǔn)確吸取供試品溶液各20 μL，按1.3.3 項(xiàng)下所述的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)峰面積采用外標(biāo)法計(jì)算桂皮醛含量，結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明，10 個(gè)產(chǎn)地采集的肉桂中桂皮醛的含量均符合2020 版《中華人民共和國(guó)藥典》的要求，但各地所產(chǎn)肉桂中桂皮醛的含量有較大差別。郁南縣通門鎮(zhèn)沖梅嶺咀頭村肉桂中桂皮醛含量最高（8.52%），郁南縣建城鎮(zhèn)車窖村的肉桂中桂皮醛含量最低（1.62%）。

表2 10 個(gè)批次肉桂中桂皮醛含量測(cè)定結(jié)果表

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)各地所采集的肉桂中桂皮醛的含量有較大差異。黃際薇等[7]研究發(fā)現(xiàn)不同樹(shù)齡的肉桂揮發(fā)油成分大致相同，但含量各異，部分化學(xué)成分及其含量隨樹(shù)齡的波動(dòng)較大。陳佳菁等[8]研究發(fā)現(xiàn)肉桂樹(shù)皮中揮發(fā)油的含量隨著樹(shù)齡增長(zhǎng)而升高，主要成分桂皮醛在5 ～7年達(dá)到峰值后隨著樹(shù)齡增長(zhǎng)而減少。張?bào)谢薜萚2]研究發(fā)現(xiàn)不同規(guī)格的肉桂貯存3 ～14 個(gè)月，其揮發(fā)油的特征成分α-古巴烯與反式肉桂醛在貯存過(guò)程中具有一定的相互轉(zhuǎn)化關(guān)系。因此，筆者推測(cè)肉桂樣品中桂皮醛的含量差異與肉桂生長(zhǎng)時(shí)間、規(guī)格及其貯存時(shí)間具有一定的關(guān)聯(lián)性，具體關(guān)聯(lián)情況，有待后續(xù)進(jìn)一步開(kāi)展研究。

4 結(jié)論

10 批次肉桂的桂皮醛含量均符合《中華人民共和國(guó)藥典》的要求，但各地所產(chǎn)肉桂中桂皮醛的含量有較大差異，其中最高的是通門鎮(zhèn)沖梅嶺咀頭村（桂皮醛含量為8.52%），建城鎮(zhèn)車窖村最低（桂皮醛含量為1.62%）?？赡苁侨夤鸬纳L(zhǎng)時(shí)間、規(guī)格及其貯存時(shí)間等因素導(dǎo)致上述差異。本研究為相關(guān)生產(chǎn)企業(yè)選擇質(zhì)量更優(yōu)的肉桂提供參考依據(jù)，企業(yè)需要注意優(yōu)化產(chǎn)品的規(guī)格和儲(chǔ)存時(shí)間，以便能達(dá)到經(jīng)濟(jì)利益的最大化。