許心婷,段群棚,何 穎,何文娜,郭 旋,趙 碩,蔣家霞,陳婷婷,陳忠偉,張 寧
(1.廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所,廣西獸醫(yī)生物技術重點實驗室,廣西南寧 530001;2.廣西大學動物科學技術學院,廣西南寧 530005;3.廣西農墾永新畜牧集團金光有限公司,廣西南寧 530022;4.廣西農墾永新畜牧集團新興有限公司,廣西柳州 545000;5.廣西桂墾牧業(yè)有限公司,廣西南寧 530001)
隨著我國豬場規(guī)?;某掷m(xù)發(fā)展,豬病的預防和控制成為養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重中之重。常見的豬病主要分為病毒性疫病、細菌性疫病和寄生蟲性疫病,其中對養(yǎng)豬業(yè)影響最大的是病毒性疫病,主要包括豬瘟(CSF)、豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)、口蹄疫(FMD)、豬圓環(huán)病毒?。≒CVD)和偽狂犬?。≒R)。CSF 是由豬瘟病毒(CSFV)引起的急性、熱性和高接觸性傳染病[1]。PRRS 的特征是母豬出現流產、產死胎等繁殖障礙癥狀,斷奶仔豬出現呼吸道癥狀,其病原是豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)[2]。FMD 由口蹄疫病毒(FMDV)引起,被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為須通報動物疫病,我國將其列為一類動物疫病,要求實施強制免疫,其主要危害偶蹄動物,引起感染動物口舌黏膜、蹄叉皮膚等部位形成或發(fā)生水皰,嚴重者可死亡[3]。PCVD 的主要致病原是豬圓環(huán)病毒2 型(PCV2),可引起斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎與腎病綜合癥(PDNS)等疾病[4]。PR 是由偽狂犬病病毒(PRV)引起的一種高度接觸性傳染病,引起妊娠母豬流產以及產死胎和木乃伊胎等癥狀,我國將其列為二類動物疫病[5]。
本研究利用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)方法,對2015 年3 月至2021 年5 月廣西部分豬場送檢的24 263 份血清樣品進行CSFV、PRRSV、FMDV、PCV2、PRV-gB 和PRV-gE 抗體檢測,以了解廣西地區(qū)這5 種疫病的免疫狀況以及PRV 野毒感染情況,為廣西豬場疫病防控提供參考。
1.1.1 血清樣品 本次檢測的血清樣品均為主動送檢樣品,經豬前腔靜脈或耳緣靜脈無菌采集。2015 年3 月—2021 年5 月,廣西14 個地級市1 012 個豬場先后自主送檢血清樣品24 263 份。自主送檢豬場規(guī)模大小不一,母豬存欄量為50~8 000 頭,不同豬場送檢的樣品數量不一,且送檢項目由豬場根據豬只免疫情況確定,同一豬場送檢的項目不完全相同(表1)。
表1 2015—2021 年血清樣品送檢情況統計
1.1.2 主要試劑 CSFV 間接ELISA 抗體檢測試劑盒、PRRSV 抗體檢測試劑盒、PRV-gB 抗體檢測試劑盒和PRV-gE 抗體檢測試劑盒,均購自美國愛德士(IDEXX)公司;PCV2 抗體檢測試劑盒,購自武漢科前動物生物制品有限公司;O 型FMDV 抗體檢測試劑盒,購自韓國金諾JBT 公司。
1.2.1 血清樣品制備 將無菌采集的非抗凝血液樣本5 mL,室溫靜置2~4 h 后,3 000 r/min 離心3~5 min,取上清置于滅菌離心管中,置-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2.2 抗體檢測方法 檢測操作步驟及結果判定均按照各抗體檢測試劑盒說明書進行。
1.2.3 數據處理與分析 用Excel 軟件對2015—2021 年5 種病原的抗體檢測結果按不同年份、季節(jié)、地區(qū)和生長階段進行統計分析。春季為3—5月,夏季為6—8 月,秋季為9—11 月,冬季為12月—次年2 月;豬只生長階段劃分為6 個,即哺乳仔豬(1~4 周齡)、保育豬(4~8 周齡)、育肥豬(9 周齡及以上)、種公豬、后備母豬及生產母豬。應用SPSS 19.0 統計學軟件,對不同年份和不同季節(jié)的抗體陽性率進行卡方檢驗,統計分析其差異性,P<0.05 表示差異顯著,P≥0.05 表示差異不顯著。
由表2 可知,2015—2021 年廣西豬場CSFV、PRRSV、FMDV、PCV2、PRV-gB 和PRV-gE 抗體的場總陽性率分別為99.19%、96.09%、99.48%、99.71%、100%和49.87%,個體陽性率均在70%以上。
2.1.1 CSFV 個體陽性率介于76.67%~85.22%,其中2019—2021 年均保持在85%左右,場陽性率連續(xù)7 年保持在97%以上。
2.1.2 PRRSV 個體總陽性率介于70.37%~82.15%,平均為76.51%,僅2020 年超過80%,各年場陽性率均在91%以上。
2.1.3 FMDV 個體陽性率除2021 年(77.27%)外,其他年份均在80%以上;場陽性率除2016 年(95.83%)外,其他年份均達到100%。
2.1.4 PCV2 個體總抗體陽性率2015 年最低(70.26%),其余年份均在86%以上,平均為89.43%,多數年份的場陽性率為100%。
2.1.5 PRV PRV-gB 抗體個體陽性率除2019 年為88.71%外,其余年份均在90%以上,場陽性率連續(xù)7 年為100%;PRV-gE 抗體陽性率基本呈下降趨勢,場陽性率由2015 年的61.4%,下降至2021年的21.05%,個體陽性率由2016 年的30.35%下降至2021 年的4.96%,差異均顯著(P<0.05)。
2.2.1 CSFV 由表3 可知,四季的場陽性率分別為99.60%、99.52%、98.62%、98.62%,差異不顯著;個體陽性率分別為83.04%、82.79%、79.02%、73.99%,春夏季間和秋冬季間差異不顯著,但春夏兩季與秋冬兩季之間差異顯著。
2.2.2 PRRSV 春、夏、秋、冬四季的個體陽性率分別為80.08%、76.11%、73.29%、74.47%,其中春季個體抗體陽性率顯著高于其他季節(jié),不同季節(jié)間的場陽性率差異不顯著。
2.2.3 FMDV 春、夏、冬3 個季節(jié)的場陽性率均為100%,秋季為97.78%;4 個季節(jié)的個體陽性率分別為88.06%、82.95%、81.48%、84.16%,春季顯著高于其他季節(jié),而其他3個季節(jié)間無顯著差異。
2.2.4 PCV2 春、夏、秋3 個季節(jié)的場陽性率均為100%,冬季為98.57%,四季間的場陽性率無顯著差異;夏季的個體陽性率為92.04%,顯著高于其他3 個季節(jié),而其他3 個季節(jié)間無顯著差異。
2.2.5 PRV 春、夏、秋、冬四季的PRV-gB 抗體場陽性率均為100%,個體陽性率分別為95.98%、95.38%、96.52%、90.07%,其中冬季個體陽性率最低,與其他3 個季節(jié)差異顯著。夏季的PRV-gE抗體場陽性率為59.05%,顯著高于秋冬兩季,而與春季差異不顯著;冬季個體陽性率為15.50%,顯著低于其他季節(jié),而其他3 個季節(jié)間無顯著差異。
2.3.1 CSFV 由表4 可知,14 個地級市送檢的樣品中,除賀州市(68.56%)外,其他市的個體陽性率均達到70%以上,其中百色市最高,達到91.53%;除玉林市(99.07%)、南寧市(98.51%)、北海市(92.86%)外,其余各市的場陽性率均為100%。
表4 不同地區(qū)豬場主要病毒抗體檢測結果 %
2.3.2 PRRSV 欽州、來賓的個體陽性率較低,分別為43.72%、48.84%;玉林、賀州、梧州、百色較高,均在80%以上;其他市的個體陽性率介于68.57%~78.46%。14 個地級市的場陽性率均在87.50%以上,其中貴港、河池和梧州場陽性率達到100%。
2.3.3 FMDV 14 個地級市中,百色市未檢測FMDV 抗體。其他13 個市中,北海(66.25%)、防城港(68.84%)、來賓(58.72%)個體抗體陽性率未達到70%,其余均在77.18%以上,其中南寧、賀州超過了90%。場陽性率除南寧市為98.72%外,其余均為100%。
2.3.4 PCV2 14 個地級市的個體陽性率均在81.92%以上,其中南寧、玉林、北海、崇左、河池、賀州、來賓超過了90%;場陽性率除防城港為93.75%外,其余均為100%。
2.3.5 PRV 14 個地級市的PRV gB 抗體個體陽性率均在84.85%以上,其中12 個市均在92.75%以上,場陽性率均為100%。14 個地級市均檢出PRV-gE 抗體陽性,其中欽州、河池、防城港陽性率較低,個體陽性率和場陽性率分別介于3.91%~7.47%和14.29%~28.57%,而玉林、貴港、百色較高,個體陽性率和場陽性率分別介于31.59%~41.35%和62.50%~66.15%。
由表5 可知:在不同生長階段的豬群中,保育豬CSFV 抗體個體陽性率偏低(60.10%),其余均在70%以上;PRRSV 抗體個體陽性率介于66.11%~88.36%,其中后備母豬、哺乳仔豬、保育豬未超過70%;保育豬和育肥豬的FMDV 抗體個體陽性率較低,分別為46.27%和69.71%,其余階段均達80%以上;PCV2 抗體的個體陽性率均超過了70%,其中保育豬和育肥豬略低,分別為76.76%和79.78%,其他階段均在86%以上;PRV-gB 抗體個體陽性率均超過了70%,其中公豬、經產母豬、哺乳仔豬、保育豬均在94%以上;不同生長階段豬群均存在PRV-gE 抗體陽性,其中后備母豬最低(9.51%)、哺乳仔豬最高(31.99%)。
表5 不同生長階段豬群抗體個體陽性率統計結果 %
2015—2021 年CSFV 抗體場陽性率均達到95%以上,個體陽性率均在70%以上,可見廣西14 個市送檢豬場的CSF 免疫效果較為理想。4 個季節(jié)中,春夏兩季CSFV 抗體場陽性率和個體陽性率高于秋冬兩季,這可能和秋冬兩季天氣多變有關,此時應加強飼養(yǎng)管理,提前安排補免,降低CSF發(fā)生風險。從不同地區(qū)來看,賀州的CSFV 抗體個體陽性率較低,僅為68.56%,因此該地豬場應引起重視,提高CSF 免疫水平。在不同生長階段豬群中,除保育豬外,其余生長階段豬群CSFV 抗體陽性率均在70%以上,其中公豬群、后備母豬群和經產母豬群的抗體陽性率均在85%以上,保護力較高。研究[6]表明,豬群CSFV 抗體平均合格率達到85%以上才能有效預防CSF 發(fā)生。因此,養(yǎng)殖戶還需堅持對CSF 進行免疫,使抗體陽性率保持85%以上,以達到保護豬群的目的。
2015—2021 年PRRSV 抗體場總陽性率為96.09%,個體總陽性率為76.51%,不同年份的PRRSV 抗體個體陽性率均在70%以上,整體免疫效果較好。但柳州、來賓、欽州的個體陽性率較低,這些地區(qū)需要加強PRRS 免疫與防控。育肥豬群的免疫效果較為理想,而后備母豬、哺乳仔豬、保育豬未達到70%,提示養(yǎng)殖戶需關注不同生長階段豬群的免疫水平,合理調整免疫計劃。PRRSV 不同基因型疫苗毒株間的交叉保護力較弱,且變異和重組速度較快,可導致疫苗免疫效果下降[7-9]。因此,應當明確當地或本場流行的優(yōu)勢毒株,有針對性地選擇疫苗,同時加強管理,合理調整免疫程序,提高免疫效果[10]。
2015—2021 年共檢測來自191 個場的6 117份血清樣品,發(fā)現除2021 年個體陽性率為77.27%外,其余年份均在80%以上,免疫效果較好。春、夏、秋3 個季節(jié)的個體陽性率依次遞減,冬季有所回升。這可能與秋冬季節(jié)養(yǎng)殖戶為了應對天氣變化給豬只免疫力帶來影響,適時在冬季到來之前進行補免有關。柳州和賀州的免疫效果較為理想,場陽性率均為100%,個體陽性率在90%以上。而北海、防城港和來賓的場陽性率雖然也達到100%,但個體陽性率未達到70%,說明存在漏免或免疫不合格現象,應加強管理,及時開展免疫。保育豬和育肥豬的個體陽性率低于國家最低標準(70%),建議優(yōu)化免疫程序,提高免疫合格率,以降低口蹄疫發(fā)生的概率。
2015—2021 年PCV2 抗體場總陽性率為99.71%,個體總陽性率除2015 年為70.26%外,其余年份均在85%以上。14 個地市送檢豬場的場陽性率均達到90%以上,個體陽性率都在80%以上,與賀會利等[11]的研究結果基本一致。不同生長階段的豬群中,PCV2 抗體陽性率最低的是保育豬,為76.76%,亦超過了國家最低標準(70%)??傮w來看,送檢豬場的PCV2 免疫情況較為理想。
2015—2021 年PRV-gB 抗體陽性率總體保持在一個較高水平,連續(xù)7年個體合格率在85%以上,場合格率一直保持在100%。育肥豬和后備母豬的個體合格率雖然低于其他生長階段豬群,但也高于70%的國家最低標準。總體來看,廣西送檢豬場的PRV 免疫效果較為理想,但仍需跟蹤監(jiān)視育肥豬和后備母豬群體免疫效果,抗體水平較低時及時補免。
2015—2021 年共對來自780 個豬場的18 821份進行PRV-gE 抗體檢測,結果發(fā)現場總陽性率為49.87%,個體總陽性率為20.58%,并且不同年份、不同地市、不同生長階段豬群均檢測出PRV-gE 抗體,提示PRV 野毒感染較為普遍。2018—2021年PRV-gE 抗體陽性率呈現逐年下降趨勢,相較于袁淑萍等[12]報道的2017—2019 年河南省PRVgE 抗體陽性率52.53%、曹明珠等[13]報道的2018年山東省PRV-gE 抗體陽性率61.74%、雷宇等[14]報道的2019 年上半年福建省PRV-gE 抗體陽性率30.73%,廣西送檢豬場的血清樣品PRV-gE 抗體陽性率偏低。這可能與2019 年非洲豬瘟疫情導致廣西生豬存欄量銳減,特別是中小規(guī)模豬場為了應對非洲豬瘟疫情大量淘汰已經感染PRV 野毒豬群有關。此外,非洲豬瘟疫情發(fā)生后養(yǎng)殖戶普遍提高防范意識,加強生物安全管理。PRV 野毒可通過垂直傳播造成哺乳仔豬、保育豬帶毒,且母豬在豬場飼養(yǎng)的時間較長,一經感染,可長期帶毒排毒,造成持續(xù)感染[15]。因此,建議豬場應加強引種前檢測,優(yōu)化免疫程序,完善日常飼養(yǎng)管理,及時淘汰PRV-gE 抗體陽性豬,以達到凈化該病的目的[13]。
檢測結果表明,廣西各地的CSF、FMD、PCVD、PRRS 和PR 等5 種疫病的免疫效果總體較為理想,但PRRS 的免疫合格率還需繼續(xù)提高,此外豬群中也存在一定的PRV 野毒感染,且不同生長階段豬群以及不同季節(jié)的免疫水平有一定差異。因此,應對上述5 種疫病制定科學的免疫程序,并持續(xù)進行免疫和監(jiān)測,及時淘汰PRV 野毒感染豬,以降低上述5 種疫病的發(fā)生風險。